目的探讨未成熟树突状细胞(iDC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响. 方法用小剂量粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)体外诱导骨髓前体细胞,获得的iDC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后皮下接种同基因大鼠,3周后通过体外试验观察脾细胞对AChR的增殖反应,同时用AChR和完全弗氏佐剂(CFA)免疫大鼠,观察免疫7周后MG相关指标的改变. 结果小剂量GM-CSF诱导所获得的iDC与成熟DC(mDC)相比,其表面MHCⅡ和共刺激分子CD80、CD86的表达低,摄取 dextran-FITC的能力强但刺激同种T细胞增殖的能力弱.接种iDC、mDC、AChR负载的mDC的大鼠和对照组一样,体外脾细胞对AChR的刺激均强烈增殖,用AChR和CFA免疫后,产生明显的MG症状,重复电刺激出现明显衰减,血清AChRAb滴度明显增高,神经肌肉接头呈现典型的MG样改变;而接种AChR负载的iDC的大鼠脾细胞对AChR的刺激呈现明显的增殖抑制但对卵清蛋白的刺激仍强烈增殖,MG相关指标均未见明显改变. 结论骨髓前体细胞经小剂量GM-CSF诱导产生了iDC,AChR负载的iDC可诱导EAMG耐受.
作者：李罗清；孙圣刚；曹学兵；王云甫 刊期： 2005年第04期
IL-24既能抑制肿瘤细胞生长和血管形成并诱导肿瘤细胞凋亡,又能诱导免疫细胞分泌IL-6、TNF-α、IFN-γ等多种细胞因子.在对乳腺癌、肠癌、肺癌及胶质瘤等肿瘤基因治疗中有显著的抗肿瘤效果.目前有关建立IL-24基因表达系统,开展rhIL-24蛋白生物学特性研究及产品研制,国内外鲜见报道.本文为本项研究的起步.
作者：陈雄艳；盛伟华；谢宇锋；缪竞诚；白艳艳；杨吉成 刊期： 2005年第04期
应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对临床分离的199株肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)进行基因分型,旨在为该菌医院感染的分子流行病学分析提供科学依据.
作者：叶明亮；肖鹏云；吕波；侯晓琦；公衍文 刊期： 2005年第04期
沙门菌是人和动物的重要病原菌,沙门菌历来受到世界各国重视.1999年夏天从南昌市农贸市场活杀眼镜蛇肠内容物分离到1株沙门菌,编号为S9948.
作者：甘小琳；何晓青 刊期： 2005年第04期
格林-巴利综合征(Guillain-Barré syndrome, GBS)是一种常见的周围神经病.其发生机制尚未阐明,较多资料显示GBS病人血清中存在多种神经节苷脂抗体,并发现轴索型GBS与空肠弯曲菌感染及抗神经节苷脂三者间存在密切关系[1],故空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni, CJ)感染介导的自身体液免疫反应在轴索型GBS发病中的作用已引起广泛关注.
作者：束晓梅；蔡方成；张晓萍 刊期： 2005年第04期
目的研究铜绿假单胞菌遗传性耐药(gyrA基因突变和MexAB-OprM主动外排)在生物被膜形成过程中对药物抗性的作用. 方法通过PCR技术鉴定gyrA基因突变株和MexAB-OprM主动外排株,利用三亲杂交的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转到铜绿假单胞菌药物敏感株中,测定gyrA基因突变株、MexAB-OprM主动外排株以及带有绿色荧光蛋白的铜绿假单胞菌在特氟隆上产生生物被膜耐药的规律. 结果筛选出gyrA基因突变株和MexAB-OprM主动外排株.通过三亲杂交成功构建了带有pGFPuv质粒的铜绿假单胞菌.将突变株和敏感株培养在低杀菌浓度(MBC)的环丙沙星溶液中形成生物被膜使菌株的存活率均在50%以上. 结论比较遗传性耐药和生物被膜耐药的作用表明gyrA基因突变和主动外排在生物被膜耐药形成前期发挥主要作用,当生物被膜完全形成之后,铜绿假单胞菌的耐药性有可能是由生物被膜介导的.
作者：谢轶；杨维青；贾文祥；程曦；曾蔚；杜艳；李学如；张再容 刊期： 2005年第04期
目的对肝癌石蜡组织标本病理切片中发现的细菌进行分离鉴定. 方法 38例肝癌石蜡组织标本经聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16S rRNA,阳性标本病理切片后行石炭酸-碱性品红染色观察幽门螺杆菌(H.pylori),应用激光捕获显微切割技术(LCM)分离光镜下观察到的细菌,分离的细菌经PCR扩增螺杆菌16S rRNA,PCR产物进行测序及同源比较,阳性者再扩增H.pylori的特异基因[相对分子质量(Mr)为26×103蛋白,H.pylori种特异抗原]和相关功能基因(cagA, vacA). 结果15例肝癌石蜡组织标本中检测到螺杆菌16S rRNA,选取观察到细菌数量较多的6例用于LCM分离.分离的6例细菌样本均扩增出螺杆菌16S rRNA,经测序与H.pylori有99%～100%的同源性.4例Mr为26×103蛋白基因阳性,1例扩增出cagA基因,未扩增出vacA基因. 结论肝癌石蜡组织中经PCR检测到的H.pylori就是病理观察到的细菌.
作者：田雪飞；范学工；黄燕；张艳；代洪；应若素 刊期： 2005年第04期
目的探讨产单核细胞李斯特菌(Lm)的actA基因3'末端核苷酸序列作为其遗传谱系分析的可能性,及中国与美国的Lm分离株遗传进化的关系. 方法采用特异性引物扩增40株分离自食品、污水及临床患者的菌株actA基因3'末端597bp的核苷酸序列,所获得的DNA序列用于Lm遗传谱系的建立并将其分为不同的actA基因型;比较中国Lm分离株与美国分离株actA基因型与遗传谱系的差异. 结果 40株Lm中国分离株可分为两个遗传谱系(谱系Ⅰ和谱系Ⅱ),其中谱系Ⅰ包括14株,谱系Ⅱ包括26株.26株谱系Ⅱ的菌株又可被分为两个亚群(ⅡA和ⅡB).与15株已发表的美国分离株序列比较发现中国分离株与美国分离株的谱系相一致,在40株中国分离株中有14个actA基因型,其中有2个与美国分离株的actA基因型相同. 结论 actA基因3'末端核苷酸序列适合于Lm的谱系分析,且中国分离株与美国分离株具有较大的相似性,Lm的克隆组群可能在全球范围内存在.
作者：周晓辉；焦新安 刊期： 2005年第04期
含HIV-1 Tat基因的重组表达质粒通过基因转染方法分别转染JJhan细胞(T淋巴细胞系)、HHV-6感染的JJhan细胞、BCBL-1细胞(HHV-8阳性、EBV阴性细胞系)和HHV-6感染的BCBL-1细胞,再将转染前后的JJhan细胞及HHV-6感染的JJhan细胞分别与BCBL-1细胞用Transwell共培养系统进行共培养,通过荧光实时定量PCR检测HHV-8次要衣壳蛋白编码基因ORF26 mRNA转录,以评价胞内、外HIV-1 Tat单独作用或与HHV-6组合对HHV-8增殖周期复制的影响.
作者：曾怡；卢春 刊期： 2005年第04期
目的了解高效抗逆转录病毒治疗后中国HIV/AIDS患者淋巴细胞活化及CCR5、CXCR4表达的变化,探讨HIV感染者对于抗病毒治疗的免疫应答. 方法 10例HIV/AIDS患者给予高效抗逆转录病毒治疗(HAART),用流式细胞仪检测治疗前和治疗第3、6个月T淋巴细胞活化(HLA-DR、CD38表达)及第二受体CCR5、CXCR4表达情况,比较HIV/AIDS患者治疗前后淋巴细胞活化、第二受体表达的变化. 结果治疗前,10例HIV/AIDS患者CD4+、CD8+ T淋巴细胞活化水平均明显高于健康对照,CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达明显高于健康对照,CXCR4的表达明显低于健康对照(P<0.05);HAART治疗后,患者淋巴细胞活化水平随治疗时间明显下降(P<0.05),CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达水平显著降低(P<0.01),CXCR4的表达升高;治疗6个月时,CD38/CD4、HLA-DRCD38/CD4、CCR5/CD8、CXCR4/CD8表达水平恢复至健康人水平;HIV/AIDS淋巴细胞活化水平及第二受体CCR5的表达降低与HAART治疗后CD4+ T淋巴细胞数量的升高具有显著的相关性. 结论HAART能够降低中国HIV/AIDS患者淋巴细胞活化水平,使第二受体表达水平趋于正常,促进免疫功能的恢复.
作者：张子宁；尚红；姜拥军；王亚男；韩晓旭；张民；刘静；刁莹莹；代娣；耿文清 刊期： 2005年第04期
目的了解IL-13和CD86在哮喘发病中的作用及anti-CD86 McAb治疗哮喘的机理. 方法随机选择门诊哮喘急性发作期患儿30例,正常健康儿童30例作为健康对照组.分别用rhIL-13、TNF-α和rhIL-13+TNF-α干预9HTE人气道上皮细胞株和哮喘患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC),用直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测9HTE人气道上皮细胞株表达CD86的百分率、PBMC中CD14+细胞表达CD86的平均荧光强度(MFI)及脂多糖(LPS)刺激后PBMC中CD19+CD86+双阳性细胞百分率. 结果 (1)分别用TNF-α、rhIL-13和TNF-α+rhIL-13干预9HTE细胞株后CD86的表达,三组之间表达的百分率差异无统计学意义;rhIL-13+anti-CD86 McAb干预9HTE细胞株后,9HTE细胞表达CD86水平较其他组降低,差异有统计学意义.(2)哮喘组中的空白组、IL-13组、TNF-α组、TNF-α+IL-13组及anti-CD86组的CD14+CD86+的平均荧光强度和CD19+CD86+百分率均较相应的对照组高,差异有统计学意义.(3)TNF-α+IL-13干预后,CD14+CD86+的平均荧光强度和CD19+CD86+百分率较对应的空白组、IL-13组和TNF-α组明显增高,差异有统计学意义;(4)anti-CD86 McAb干预后,CD14+CD86+的平均荧光强度和CD19+CD86+百分率较对应的其他组明显减低,差异有统计学意义. 结论 IL-13可诱导9HTE细胞株、PBMC中的CD14+细胞和CD19+细胞表达CD86;anti-CD86 McAb可阻断9HTE细胞株、PBMC中的CD14+细胞和CD19+细胞表达CD86.提示IL-13和CD86在哮喘发病中起重要作用,anti-CD86 McAb治疗哮喘具有一定的可行性.
作者：杨洁；朱晓萍；王莉佳；符州；杨锡强 刊期： 2005年第04期
目的研究免疫学指标在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome, SARS)患者病程中的变化趋势及轻/重症患者各指标的差异. 方法收集1291例SARS患者的临床资料,建立病历数据库,记录轻症及重症患者发病1～5周各周的白细胞(WBC)计数,淋巴细胞计数,CD3+、CD4+及CD8+ T淋巴细胞绝对值,C3、C4、血沉(ESR)及C反应蛋白(CRP)等数据,研究各免疫学及炎性指标在轻/重症SARS患者中的不同及意义. 结果 SARS患者的淋巴细胞数、CD8+ T细胞绝对值在发病初期即达到低值,随病程的进展缓慢回升,CRP、C4在发病初期即维持较高水平,随时间的进展缓慢下降,重症患者淋巴细胞水平及CD8+ T细胞绝对值明显低于轻症患者(P<0.01),而CRP、C4水平明显高于轻症患者(P<0.01). 结论淋巴细胞,CD8+ T细胞绝对值及CRP、C4等免疫炎性指标均可作为评价病情轻重及变化的基本指标用于指导临床诊断及治疗.
作者：程永静；黄慈波；谢高强；王钱；刘爱华；赖蓓；陈颖娟；韩德民 刊期： 2005年第04期
扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)是心脏扩大伴收缩功能障碍的原因不明性心肌疾病.除遗传易感因素及嗜心肌病毒感染外,心肌组织的自身免疫反应在发病中起重要作用.
作者：刘巍；李为民；高成；张瑞红；王政；王秀容；李冬梅 刊期： 2005年第04期
按张之献主编的<血液病诊断及疗效标准>(第2版)确诊的50例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿为观测对象,其中男24例,女26例,年龄3个月～12岁,中位年龄3.8岁;50例正常对照为健康儿童,排除ITP及其它自身免疫性疾病,其中男27例,女23例,年龄0.5岁～11岁,中位年龄4.2岁.
作者：刘仿；田长斌；赵丹；肖红；杨小猛；伍昌林 刊期： 2005年第04期
目的比较丙基硫氧嘧啶(PTU)相关性小血管炎和原发性小血管炎抗髓过氧化物酶(MPO)抗体亲和力的大小及其与临床表现的关系. 方法以纯化的人MPO为抗原,采用抗原抑制性酶联免疫吸附法对我院确诊的13例PTU相关性小血管炎和19例原发性显微镜下多血管炎(MPA)的患者血清中抗MPO抗体的亲和力进行检测,分析其与临床表现的关系,并对两组抗体的亲和力大小进行比较.亲和常数(aK)的值以使血清抗MPO抗体百分结合率下降50%所需的抑制抗原的摩尔浓度的倒数表示. 结果 PTU组不同患者血清抗MPO抗体百分结合率下降50%所需的抑制抗原量差异较大,从<0.1μg/ml到>50μg/ml不等.亲和常数的范围为<0.28×107mol/L到>140×107mol/L,其中位数为0.75×107mol/L.血清中抗-MPO抗体的亲和常数与伯明翰小血管炎活动性评分(BVAS)呈正相关(r＝0.583, P＝0.037),与抗体滴度、受累器官数、血红蛋白(Hb)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血肌酐(Scr)浓度均没有相关性(P>0.05).MPA组不同患者血清抗MPO抗体百分结合率下降50%所需的抑制抗原量差异较PTU组小,从<0.1μg/ml到1.56μg/ml不等,亲和常数的范围为8.97×107mol/L到大于140×107mol/L,其中位数为56.0×107mol/L.血清中抗-MPO抗体的亲和常数与血沉呈正相关(r＝0.55, P＝0.042),与抗体滴度、受累器官数、血红蛋白、C反应蛋白、血肌酐浓度、BVAS均没有相关性.PTU组和MPA组抗体亲和常数的差异有统计学意义(P＝0.000). 结论原发性MPA和PTU相关性小血管炎病情的活动性与血清中抗MPO抗体亲和力的高低可能相关, MPA组平均的抗体亲和力明显高于PTU组,提示抗体的亲和力可能与疾病的活动相关.
作者：叶华；高莹；于峰；郭晓蕙；赵明辉 刊期： 2005年第04期
目的对大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和黏膜佐剂活性分析. 方法应用PCR技术从产肠毒素大肠杆菌基因组中扩增出不耐热肠毒素B基因,将此构建于原核表达载体pET-11C,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,然后采用D(+)-immobilized galactose亲和层析柱对重组蛋白进行纯化.以纯化后重组LTB为佐剂,与幽门螺杆菌重组尿素酶B亚单位蛋白(rUreB)共同口服和滴鼻免疫BALB/c小鼠,分析重组LTB的黏膜佐剂活性. 结果 PCR扩增出390bp LTB基因,与GenBank公布的核苷酸序列的相似性为99.5%.重组LTB蛋白的表达率为6%,以胞周质分泌形式表达,经亲和层析后蛋白纯度大于95%.该重组蛋白保持了与神经节苷脂GM1结合的生物学活性和良好的免疫原性及免疫反应性.动物试验表明,重组LTB与rUreB抗原共同口服和滴鼻免疫小鼠后的特异性血清IgG及鼻腔、气管、胃黏膜和小肠黏膜sIgA水平显著高于单独rUreB抗原免疫组(P<0.05). 结论所获得的重组LTB具有较好的黏膜佐剂活性,为其在黏膜疫苗中的应用奠定基础.
作者：吴超；冯强；曾韦锟；郭桐生；高志刚；邹全明 刊期： 2005年第04期
目的构建SARS病毒spike基因片段真核表达质粒DNA疫苗;检测spike基因片段的免疫原性;筛选SARS病毒疫苗构建的理想靶抗原. 方法采用RT-PCR从SARS冠状病毒北京01(BJ01)株cDNA获取了spike基因cDNA的全长D12、编码N末端氨基酸的cDNA片段D14和编码C末端氨基酸的cDNA片段D23;构建重组真核表达质粒pcDNA3/D12、pcDNA3/D14、pcDNA3/D23;用3种重组质粒和pcDNA3空质粒载体(对照)DNA皮下注射免疫Wistar大鼠;ELISA检测免疫后大鼠血清S蛋白特异性抗体IgG的产生;同位素51Cr实验检测特异性CTL应答;ELISPOT检测单细胞水平IFN-γ分泌. 结果 pcDNA3/D23疫苗免疫组大鼠血清有S蛋白阳性抗体IgG产生、抗体滴度>1000;脾淋巴细胞可诱导特异的CTL应答和IFN-γ分泌,pcDNA3/D23疫苗组与其它组之间统计分析P<0.05. 结论SARS冠状病毒S蛋白的C末端具有较强的免疫原性,是疫苗构建的理想候选靶抗原,本研究结果为SARS病毒的疫苗研究提供了资料.
作者：李疆；覃海德；刘鹏；张经纬；冯炳健；冯启胜；陈丽珍；潘志刚；黄丽惜；张如华；余杏娟；曾益新 刊期： 2005年第04期
人巨细胞病毒(HCMV)主要被膜磷蛋白pp65(phosphoprotein 65)及糖蛋白gB(glycoprotein B)在病毒感染及诱发机体免疫反应中起重要作用,近年来有不少学者对HCMV pp65和gB这两种抗原进行动物和临床试验研究,虽取得了一定效果,但仍存在免疫原性弱、免疫范围局限等缺点.本研究利用分子生物学方法将HCMV两种保护性免疫原性基因pp65和gB构建在一起,制备HCMV核酸疫苗,并研究其在小鼠体内的免疫活性.
作者：马道新；于修平；张晓梅；周亚滨；李勇；贾继辉；赵蔚明 刊期： 2005年第04期
我国是戊型肝炎主要流行区之一,人群感染率达17.2%,且呈上升趋势.由于缺乏有效的病毒体外长期培养系统,阻碍了戊型肝炎病毒(HEV)疫苗的研制和诊断试剂的开发.用基因工程手段表达HEV主要结构蛋白已成为研究的热点.本文报道用原核表达系统表达含HEV主要抗原表位的ORF2和ORF3的嵌合蛋白,并对其免疫原性进行研究.
作者：洪艳；陈勇；杨连华；王怡婷；经络；胡华军 刊期： 2005年第04期
将铝佐剂改造为纳米颗粒,以常规铝佐剂为对照,物理吸附HBsAg和狂犬病毒,探讨改良后的纳米氢氧化铝作为疫苗佐剂的免疫效果.
作者：何萍；吕凤林；陈月；李元朝；何凤慈 刊期： 2005年第04期
目的利用恒河猴评价实验性SARS冠状病毒灭活疫苗免疫原性与安全性. 方法动物免疫分3组,分别为肌肉注射0.5μg、5μg、50μg疫苗组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,同时设超大剂量(5000μg)观察疫苗安全性,并于初次免疫后7d再次免疫,监测免疫前后动物体液免疫、黏膜免疫及血清细胞因子变化,观察临床症状及生化指标. 结果 0.5μg和5μg剂量组可诱导部分免疫应答,50μg剂量组则能诱导针对SARS-CoV的特异性免疫应答,且各免疫组动物均未出现不良反应. 结论SARS-CoV灭活疫苗在恒河猴体内能有效诱导针对SARS-CoV感染的体液和黏膜免疫应答并且安全性较好.
作者：钟琼；杨占秋；周俊；王薇；侯炜；朱润庆；唐志娇；王勇；鲜巧阳 刊期： 2005年第04期
作者： 刊期： 2005年第04期
作者： 刊期： 2005年第04期
分别从榄香烯复合瘤苗及卡介苗中提取纯化HSP70,并以榄香烯复合瘤作为阳性对照,通过测定免疫小鼠全脾细胞的细胞增殖周期、细胞表型、细胞毒活性,研究两者在免疫效应及机制上的不同之处.
作者：高志红；郭连英；沈杰；施广霞；钱振超 刊期： 2005年第04期
目的研究噬菌体展示TM-TNF-α模拟肽的体内杀瘤效应及机制. 方法大量制备所需的噬菌体展示肽,比较不同展示肽对小鼠的肝癌细胞H22的体外杀瘤效应,挑取杀瘤效应好的展示肽并选择其合适的滴度进行体内实验.小鼠接种H22细胞3d后,于肿瘤接种部位皮下注射噬菌体展示肽,观察肿瘤的生长情况. 结果噬菌体展示TM-TNF-α模拟肽在体内能明显抑制肿瘤的生长(P<0.01).且抑瘤率与展示肽之间呈剂量依赖关系.HE染色发现展示肽治疗组肿瘤组织中有大量淋巴细胞浸润,而sTNF-α治疗组除淋巴细胞浸润还可见中性粒细胞、浆细胞浸润. 结论直接注射噬菌体展示TM-TNF-α模拟肽可在体内有效杀瘤,其杀瘤机制可能不同于分泌型TNF-α.
作者：熊霞辉；喻明霞；石文芳；李清芬；林莉；冯玮；徐勇；李卓娅 刊期： 2005年第04期
目的观察记忆性CTL的抑瘤作用是否需要抗原特异性TH细胞的辅助. 方法表达OVA T 细胞表位SIINFEKL特异性TCR的T细胞转输RAG-/-小鼠,经相应T细胞表位多肽刺激后产生记忆性CTL,将此记忆性CTL转输已产生特异性和非特异性TH细胞的C57BL/6小鼠体内并接种肿瘤细胞EG7. 结果经T细胞表位多肽免疫后,SIINFEKL特异性TCR T细胞成功在RAG-/-小鼠体内增殖并分化为记忆性CTL;抗原特异性TH细胞可辅助产生较多效应性CTL但并没有完全的肿瘤抑制作用;记忆性CTL的完全抑瘤活性需要抗原特异性TH细胞的辅助. 结论机体对肿瘤的长期完全杀伤作用不但需要肿瘤特异性抗原诱导产生的记忆性CTL,而且需要特异性TH细胞的辅助,肿瘤疫苗的设计必须包括特异性的CTL表位多肽和辅助性TH细胞多肽.
作者：高丰光；Germain J.P.Fernando；刘文军 刊期： 2005年第04期
目的探讨不同剂量尤其是低剂量的γ干扰素(IFN-γ)体内表达对小鼠H22肝癌发生发展的影响. 方法利用小鼠H22肝癌体内发生和进展的模型,以不同剂量IFN-γ表达质粒(mIFNG)进行长期和短期直接肌肉转染,检测H22肝癌的发生率及生长速率;半定量RT-PCR、ELISA及实时定量PCR检测IFN-γ的表达情况;肌肉转染表达IFN-γ阻断剂,检测其对IFN-γ作用的影响. 结果注射低剂量(10μg)的mIFNG质粒局部持续表达IFN-γ可明显促进小鼠H22肝癌的发生和发展,然而短暂的表达则没有这种促进作用.IFN-γ拮抗剂则可对抗低剂量表达IFN-γ对肿瘤的促进作用.另一方面,注射高剂量(100μg)的mIFNG质粒局部持续表达IFN-γ则能够介导明显的抗肿瘤效应. 结论IFN-γ对小鼠H22肝癌具有双重作用,也可能是联系慢性炎症与肿瘤发生发展之间的一个十分重要的衔接者.
作者：贺宇飞；张桂梅；张慧；陈洪涛；冯作化 刊期： 2005年第04期
