目的 探讨TLR4、PI3K和NF-kB在气道上皮细胞诱导的哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)迁移中的作用.方法 细胞消化法培养原代哮喘ASMCs,TNF-α刺激上皮细胞系RTE细胞收集细胞培养上清液,ELISA检测上清液中IL-8和RANTES的含量,以TLR4抗体、渥曼青霉素(Wortmannin)、二硫代氨基吡咯烷(PDTC)作为工具药,改良Boyden趋化小室检测其在上皮细胞诱导的哮喘ASMCs跨膜迁移中的作用.结果 各TNF-α组RTE培养上清液中IL-8和RANTE水平均显著增高(P＜0.01),20 ng/ml组较其他组显著增高(P＜0.01).各哮喘组ASMCs的跨膜迁移数较正常组均显著增加(P＜0.01),各处理组哮喘ASMCs的跨膜迁移数亦较哮喘组明显增加(P＜0.01),TNF-α+TLR4抗体组、TNF-α +Wortmannin组和TNF-α+Wortmannin+PDTC组哮喘ASMCs跨膜迁移数较TNF-α组明显减少(P＜0.01)；TNF-α+Wortmannin +PDTC组ASMCs跨膜迁移数亦低于Wortmannin组(P＜0.05).结论 TLR4/PI3K信号相关分子参与哮喘气道上皮细胞诱导的ASMCs跨膜迁移,可能是哮喘气道重塑的机制之一.
作者：莫碧文；苏海英；韦江红；黄剑伟；王昌明；曾锦荣；徐青；林云 刊期： 2011年第11期
目的 探讨单纯疱疹病毒进入介导子(herpes virus entry mediator,HVEM)基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC)能否防治肌凝蛋白诱导的小鼠心肌炎模型,并分析其机制.方法 以肌凝蛋白加弗氏佐剂免疫小鼠制备实验性自身免疫性心肌炎(EAM)动物模型,通过小鼠尾静脉输注肌凝蛋白冲击的HVEM基因修饰的DC,观察其对心肌炎的免疫保护作用,并探讨其可能机制.结果 HVEM基因修饰的DC能够抑制自身免疫应答造成的小鼠心肌损伤,其机制主要是通过分泌IL-10,并诱导产IL-10调节性T细胞(Tr1)抑制自身反应性T细胞的活化.结论 HVEM基因修饰的DC能抑制EAM的发生,并且HVEM介导的信号网络可能在不同的细胞中产生不同的作用.
作者：蔡刚；汪怀周；吴蓓颖；林佳菲；沈茜 刊期： 2011年第11期
目的 探讨血小板活化因子乙酰水解酶( PAF-AH)基因Ala379Val、Val279Phe位点多态性与脓毒症易感性及预后的关系.方法 采用PCR-RFLP技术,分析66例不同程度的脓毒症患者及68名健康对照者PAF-AH基因Ala379Val、Val279Phe位点的多态性,对含有等位基因多态性的片段进行DNA测序分析,SPSS13.0软件进行统计学分析.结果 全部样本经PCR-RFLP分析后,在PAF-AH基因Ala379Val位点3种基因型中,脓毒症组66例中仅1例纯合子Val/Val型,19例杂合子Val/Ala型,46例纯合子Ala/Ala型；对照组68例中2例Val/Val型,22例Val/Ala型,44例Ala/Ala型.Ala379Val基因型及等位基因频率分布在脓毒症组和对照组之间、存活组和死亡组之间尚无统计学意义(P＞0.05).在PAF-AH基因Val279Phe位点3种基因型中,脓毒症组66例中全部为纯合子Val/Val型,对照组68例中仅1例纯合子Phe/Phe型,其余全部为纯合子Val/Val型,未发现杂合子Val/Phe型.Val279Phe基因型及等位基因频率分布在对照组和脓毒症组之间、存活组和死亡组之间尚无统计学意义(P＞0.05).结论 PAF-AH基因Ala379Val、Val279Phe位点多态性存在蛋白质一级结构差异的较大可能,与脓毒症易感性、预后可能不相关.
作者：王巍巍；宋诗铎；王玉宝；祁伟 刊期： 2011年第11期
目的 探讨人群HLA-DRB1*12基因及相应位点下IL-4及IFN-γ对乙肝疫苗免疫应答的影响.方法 选取74名对乙肝疫苗无、弱应答的广西籍健康大学生及条件相近的64名中、强应答者,采用PCR-SSP技术检测受试者的HLA-DRB1* 12等位基因,采用ELISA法检测血清中IFN-γ水平及IL-4因子水平.结果 (1)无、弱应答组的HLA-DRB1*12等位基因表达频率为10.8％,低于中、强应答组的32.8％ (P=0.002)；(2)无、弱应答组的IFN-γ平均表达水平为(7.21±7.92) ng/ml,显著低于中、强应答组(16.36±11.00) ng/ml( P=0.000)；(3)无、弱应答组中的IL-4平均表达水平为(3.18±4.45) ng/ml,显著低于中、强应答组(7.76±5.71) ng/ml(P=0.000)；(4) HLA-DRB1* 12阳性组IFN-γ平均表达水平为(13.18±11.24) ng/ml,阴性组平均表达水平为(11.00±10.29) ng/ml,两组间差异无统计学意义(P=0.349)；(5) HLA-DRB1*12阳性组IL-4平均表达水平为(5.947±4.530)ng/ml,阴性组平均表达水平为(5.132±5.800) ng/ml,两组间差异无统计学意义(P=0.423).结论 HLA-DRB1*12基因可能是促进广西人群乙肝疫苗免疫应答的相关基因；细胞因子IFN-γ及IL-4的表达水平可能影响机体乙肝疫苗的免疫效果.
作者：梁惠萍；吴继周；吴健林；韦颖华；万裴琦；吴霜；龚星光；孟艳丽；罗双艳；虞艳琦 刊期： 2011年第11期
中国不但是世界卫生组织确定的22个结核病高负担国家之一,更是耐药结核分枝杆菌报道的热点地区[1].2010年3月全国第五次结核病流行病学抽样调查结果表明,我国西部地区传染性肺结核患病率分别为中部和东部地区的1.7和2.4倍.四川地处中国西南部,少数民族众多,人口流动大,医疗卫生条件尚不完善,这些都给耐药结核菌传播扩散带来便利.链霉素(SM)一直是治疗结核的主要药物.由于长时间甚至作为单一治疗药物使用,其耐药性逐年增加,世界范围内新发与复发链霉素耐受性分别为10.9％和20.1％[2].链霉素主要作用于核糖体30S亚基从而抑制细菌蛋白质合成,编码核糖体S12亚基的rpsL及16S rRNA rrs基因的530、912区域DNA序列改变与链霉素耐药性直接相关[3].
作者：张聪聪；赵于丁；汤科；孙宏虎；罗强；罗涛；孙群 刊期： 2011年第11期
目的 研究碳青霉烯耐药摩根摩根菌的分子流行病学及其耐药机制.方法 2010年10月-2011年2月从杭州市中医院分离到7株碳青霉烯不敏感的摩根摩根菌.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株之间的同源性；琼脂稀释法测定抗生素对细菌的低抑菌浓度(MIC)；接合试验、质粒图谱分析、特异性PCR扩增和序列分析等研究细菌对碳青霉烯耐药的分子机制.结果 分离自急诊监护病房的6株摩根摩根菌PFGE条带完全相同或相差1～3个条带；分离自重症监护病房的1株摩根摩根菌与其他6株PFGE条带差异明显.7株摩根摩根菌的耐药模式基本相同.亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC值差异较大,分别为8μg/ml(耐药)、1μg/ml(敏感)和0.25～0.50μg/ml(敏感或中介耐药).7株摩根摩根菌对青霉素类、氨曲南和环丙沙星耐药,对头孢菌素类耐药或敏感,对阿米卡星敏感.接合试验使大肠埃希菌EC600对碳青霉烯类抗生素由敏感变为耐药,对其他β-内酰胺类抗生素也均耐药.摩根摩根菌及转移接合子均含有一个约为60kb的质粒.PCR扩增及测序表明摩根摩根菌及转移接合子均产KPC-2型碳青霉烯酶,且携带qnrS1基因.结论 首次在摩根摩根菌中检测到KPC-2型碳青霉烯酶,KPC-2是引起摩根摩根菌对碳青霉烯类不敏感的主要原因.
作者：杨玮；蔡加昌；胡燕燕；周宏伟；张嵘；陈功祥 刊期： 2011年第11期
目的 检测冠状动脉粥样硬化斑块中的5种特异性牙周致病菌.方法 收集101例行冠状动脉搭桥手术患者的动脉粥样硬化斑块标本,采用Chelex-100法提取冠状动脉粥样硬化斑块中的DNA,并通过PCR分别检测动脉粥样硬化斑块中的牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)、福赛斯坦纳菌(Tannerella forsythensis,Tf)5种牙周特异性致病菌.结果 101例患者动脉粥样硬化斑块中牙龈卟啉单胞菌(Pg)的检出率为31％,福赛斯坦纳菌(Tf)为42％,中间普氏菌(Pi)为26％,具核梭杆菌(Fn)为21％,伴放线放线杆菌(Aa)为23％.这几种细菌的PCR产物通过测序,结果与GenBank数据库中的序列进行比对同源性达99％～100％.结论 牙周致病菌在冠心病的发生、发展中可能发挥着一定作用,考虑慢性牙周炎与冠心病之间有一定的相关性.
作者：侯秀丽；梁平；张源明；木拉提；艾斯卡尔；艾克拜尔；闰跃斌 刊期： 2011年第11期
为深入了解一组分离自浙江省杭州地区和湖州地区耐药肺炎克雷伯菌之氨基糖苷类药物耐药的遗传学背景,我们同时检测了47株耐药肺炎克雷伯菌的15种氨基糖苷类修饰酶和6种16S rRNA甲基化酶基因.现报道如下.
作者：朱健铭；姜如金；吴康乐；马兆龙 刊期： 2011年第11期
目的 观察siRNA干扰质粒转入铜绿假单胞菌后,MexB蛋白表达量的变化.方法 针对mexB基因设计合成特异性siRNA分子,与pGPU6/GFP/Neo载体连接,构建pGPU6/GFP/NeosiRNA重组质粒.构建重组表达质粒pET22b+/mexB,并转化大肠杆菌BL21( DE3) plysS,诱导表达MexB蛋白,蛋白纯化后免疫家兔制备多克隆抗体.siRNA质粒分别电转化铜绿假单胞菌野生株、临床耐药株及mexB基因高表达株,运用Western blot观察转化8、12、24h后MexB蛋白表达量的变化.结果 成功构建pGPU6/GFP/Neo-siRNA重组质粒.成功表达铜绿假单胞菌外排泵蛋白MexB,并制备多克隆兔抗.siRNA质粒对铜绿假单胞菌野生株、临床耐药株及mexB基因高表达株的mexB基因均具有良好的沉默效果,而且沉默效果存在时间差异性.结论 siRNA质粒转化3株铜绿假单胞菌后,在8h及12 h时均可观察到MexB蛋白表达量明显减少,而在24 h时MexB蛋白表达量无改变.
作者：宋莹；邢铭友；许东；龚凤云；夏超；王丽丽；谢旭华；申爱霞；占伟丽；宋建新 刊期： 2011年第11期
耐甲氧西林金黄葡萄球菌( methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对多种抗生素耐药.铜绿假单胞菌对大肠杆菌等革兰阴性细菌有抑制作用,但对MRSA是否有抑制活性,国内尚未见报告.我们利用临床分离的铜绿假单胞菌对32株MRSA进行了体外抗菌活性观察,采用交叉划线接种方法进行铜绿假单胞菌对MRSA的体外抗菌活性的测定.将铜绿假单胞菌菌悬液于M-H琼脂平板的中央呈一直线划线接种,35℃培养24 h后,用无菌的玻片轻轻刮去生长的菌落,将平皿倒置,平皿盖内放一直径为5 cm的浸氯仿的滤纸片(用于杀死残存的铜绿假单胞菌),35℃放置15 min,打开平皿取出氯仿滤纸片,待平皿内氯仿挥发完毕后,分别将32株指示菌MRSA于原铜绿假单胞菌生长带垂直交叉划线接种,35℃培养.24h观察结果.
作者：秦金喜；李仲兴；杨永昌；袁欣；柏秀菊；石忻罗 刊期： 2011年第11期
目的 比较不同表达系统来源的乙型肝炎(乙肝)表面抗原(HBsAg)免疫小鼠诱导早期脾淋巴细胞抗原特异性细胞免疫应答的特点,探讨影响乙肝疫苗保护效果的因素.方法 3种HBsAg(汉逊酵母、CHO细胞和血源)分别皮下接种不同组小鼠(BALB/c,H-2d),每只3μg,于免疫后4d分离脾单个核细胞(MNC),经细胞分选仪(MACs)分选后,获得纯度高于90％的CD4+和CD8+T细胞,应用ELISPOT测定MNC、CD4+和CD8+T细胞体外刺激后所产生的细胞因子IFN-γ、IL-2斑点数( SFC).结果 细胞分选后,汉逊抗原诱导CD8+T细胞分泌IFN-γ的水平和CD4+T细胞分泌IL-2水平均显著高于CHO抗原组(8/10、2/10,P=0.035;6/10、0/10,P=0.005).汉逊抗原组与血源抗原组CD8+T细胞经体外刺激诱导IFN-y全部阳转(10/10),但分泌水平上汉逊抗原组显著高于血源抗原组(t=2.479,P=0.035)；汉逊抗原组诱导CD4+T细胞IFN-γ阳转率及分泌水平均显著高于血源抗原组(10/10、4/10,P=0.005；t=3.967,P=0.003).结论 乙肝抗原免疫小鼠4d即可诱导细胞免疫应答,且汉逊酵母抗原早期诱导抗原特异性IFN-γ、IL-2的能力显著高于CHO和血源抗原,与其临床考核母婴传播阻断HBV保护率显著优于CHO和血源乙肝疫苗相一致,为及时接种乙肝疫苗的必要性和高危新生儿选择接种乙肝疫苗的类型提供依据.
作者：胡忠玉；何鹏；方鑫；邱少辉；李河民；梁争论 刊期： 2011年第11期
目的 了解江苏地区婴幼儿腹泻患者中诺如病毒的感染情况,明确该地区诺如病毒的主要基因型别和流行病学特征.方法 收集2010年江苏省苏州市婴幼儿医院及南京市婴幼儿医院疑似病毒性腹泻粪便标本498例,采用荧光定量PCR方法检测粪便中诺如病毒RNA及其基因组别,并对部分阳性标本测序以明确基因型.结果 498份粪便标本中,GⅠ组诺如病毒阳性标本为2例,阳性率为0.4％,GⅡ组诺如病毒为190例,阳性率为38％,对本地区部分诺如病毒阳性标本进行测序,2份GⅠ标本中,一株为GⅠ1型,另一株为GⅠ3型；测序的23份GⅡ标本中21株为GⅡ4型,2株为GⅡ3型.结论 诺如病毒是本省婴幼儿病毒性腹泻的重要病原体,以诺如病毒GⅡ4型为主,同时也存在其他型别的感染流行.
作者：付建光；吴斌；嵇红；李亮；祁贤；秦圆方；王慎骄；邓斐；李志锋；汤奋扬；祖荣强；鲍昌俊 刊期： 2011年第11期
目的 分析合并结核( tuberculosis,TB)感染及其他因素对广西地区HIV感染者病毒复制的影响.方法 2010年4月至2010年9月间在广西招募到未接受抗病毒治疗、CD4+T细胞数＜350个/μl的HIV/TB感染者61例,单纯HIV感染者34例.收集人口学、流行病学、临床信息,测定HIV病毒载量.结果 HIV/TB双重感染者与单纯HIV感染者血浆病毒载量差异无统计学意义[ (5.05±0.93) lg拷贝/ml vs (5.06±0.76) lg拷贝/ml,P=0.94].二元logistic回归分析显示,CRF01_AE亚型较其他亚型HIV感染者血浆病毒复制水平高,OR=8.07 (95％CI 1.07～61.20,P=0.04).年龄、感染途径、CD4+T细胞数,是否合并结核分枝杆菌(MTB)感染及TB临床类型对病毒复制水平的影响均不明显.结论 广西地区CD4+T细胞数较低的HIV感染者中,合并结核感染对病毒复制影响不明显；CRF01_AE亚型HIV-1病毒复制水平较高,在监测和治疗过程中需加强关注.
作者：韩晓旭；安明晖；徐俊杰；成诗明；周林；赖钰基；刘飞鹰；张慧；赵彬；杨志军；尚红 刊期： 2011年第11期
目的 探讨IL-27对原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血CD4+T细胞的增殖分化作用及其相关免疫学机制.方法 收集PBC患者、慢性乙肝患者(choronic hepatitis B,CHB)、健康体检者(health controls,HCs)外周血,磁珠分离CD4+T细胞.IL-27体外作用后,CCK-8测定细胞增殖情况,ELISA法检测细胞因子,定量PCR分析T-bet和GATA3基因表达情况,免疫印迹测定p-STAT-1和p-STAT-3的表达.结果 IL-27作用后,PBC组、CHB组和HCs组CD4+T细胞增殖能力均显著增强,PBC组CD4+T细胞增殖能力强于CHB和HCs组,差异有统计学意义(P＜0.001),同时PBC组细胞培养液中IL-2和IFN-γ在IL-27作用后较CHB和正常对照组均显著增高(P＜0.001),IL-10表达无明显变化.未经IL-27诱导情况下,PBC组T-bet表达高于CHB组(P=0.007),IL-27诱导后PBC组CD4+T淋巴细胞T-bet基因表达显著增加,同时对GATA3具有抑制作用,作用前后差异有统计学意义(P＜0.001),CHB组作用前后无显著变化(P=0.3).免疫印迹测定p-STAT-1、p-STAT-3发现,正常情况下各研究组均不表达p-STAT-1、p-STAT-3,IL-27作用后,表达明显升高,其中PBC组升高尤为明显.结论 IL-27可以诱导PBC患者CD4+T细胞增殖,并通过活化p-STAT-1、p-STAT-3信号通路,诱导CD4+T细胞向Th1分化,同时分泌相关细胞因子,可能在PBC早期免疫炎症反应过程中具有重要作用.
作者：蒋廷旺；韩志君；熊怀民；盛建华；张红星；龚燕萍；仲人前 刊期： 2011年第11期
目的 探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)在儿童川崎病(Kawasaki disease,KD)中的数量变化及其可能机制.方法 急性期川崎病患儿20例,采用流式细胞术检测外周血CD4+CXCR5+ICOS+T细胞(Tfh)的比例,采用real-time PCR检测转录调节因子Bcl-6、Blimp-1 mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测血浆中IL-4和IL-21浓度；20例同龄健康儿童作为对照组.结果 (1)急性期KD患儿Tfh细胞比例明显高于正常对照组[(2.6±0.6)％vs(1.8±0.7)％,P＜0.05]；(2)Tfh细胞转录因子Bcl-6 mRNA表达较正常对照组明显增高(P＜0.05),其拮抗因子Blimp-1 mRNA表达降低(P＜0.05)；(3)血浆IL-21和IL-4蛋白浓度明显高于正常对照组(P＜0.05).结论 Tfh细胞过度活化可能参与了KD免疫发病机制,Bcl-6/Blimp-1表达失衡,IL-4和IL-21细胞因子微环境改变可能与Tfh细胞异常活化有关.
作者：孔凡贞；李成荣；李秋；王国兵；杨军 刊期： 2011年第11期
全基因组关联分析( genomewide association studies,GWAS)是应用人类基因组中数以百万计的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)为标记进行病例-对照关联分析,以期确定疾病相关基因、易感区域或疾病的标记物,从而探究复杂疾病遗传机制的方法[1].该研究建立在常见疾病具有常见变异的假设基础上,其基本思想是在一定规模的实验组和对照组中比较全基因组范围内所有SNP位点的等位基因或者基因型频率在某种疾病中出现的差异.若某SNP位点的等位基因或基因型在患病人群中出现的频率明显高于或低于对照组,则认为该位点与疾病间存在关联性,进而根据该位点在基因组中的位置和连锁不平衡关系推测可能的疾病易感基因.
作者：潘阳；王露楠 刊期： 2011年第11期
白细胞介素1( interleukin-1,IL-1)家族是第一个被发现、成员不断被更新的细胞因子家族.到目前为止,IL-1家族有11个成员被发现,分别是IL-1a( IL-1 F1)、IL-1β( IL-1 F2)、IL-1Ra( IL-1F3)、IL-18(IL-1F4)、IL-1F5～10和IL-33( IL-1F11)[1-2].其中,IL-33是近被发现并受到强烈关注的细胞因子.对于它的发现及其生物学作用经历了一个由基础到临床研究逐步过渡的过程.Tominaga等[3 ]于1989年鉴定出了IL-33特异性受体ST2,证明了ST2是Toll样/IL-1受体(IL-1R)超家族的一个成员,随后发现了ST2的4个亚型.
作者：张恒；张纪元；吕飒；崔治中；王福生 刊期： 2011年第11期
目的 建立针对6种虫媒病毒的蛋白芯片检测方法,用以检测流行性乙型脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、登革病毒(1～4型)、西尼罗病毒、西部马脑炎病毒和东部马脑炎病毒的特异性抗体.方法 将病毒特异性抗原作为捕获抗原点样制备蛋白芯片,利用双抗夹心ELISA原理检测血清中的病毒特异性抗体.首先利用免疫兔血清进行特异性诊断抗原的筛选,并对抗体芯片检测条件进行优化,然后采用56份临床疑似的阳性血清标本及阴性对照标本对该方法进行验证,并与常规ELISA方法进行比对.结果 共筛选出11个特异性较好的重组诊断抗原.抗原点样浓度在0.125 ～0.900mg/ml时可获得良好的检测效果,血清检测范围为1:100～1:1000.对26份临床疑似的蜱传脑炎病毒血清标本,22份登革病毒血清标本及8份流行性乙型脑炎病毒临床血清标本的检测结果为:共检测出蜱传脑炎病毒IgG阳性血清标本20份,阳性检出率为76.9％,IgM阳性血清标本17份,阳性检出率65.3％,与ELISA检测符合率分别为96.1％和84.6％.乙型脑炎病毒IgG阳性血清4份,阳性检出率50.0％,IgM阳性血清5份,阳性检测率62.0％,与ELISA检测符合率分别为87.5％和100％.登革病毒IgG阳性血清标本13份,阳性检出率63.6％,IgM阳性血清标本14份,阳性检测率68.1％,与ELISA检测符合率分别为86.3％和90.1％,结果经一致性Kappa检验后,与ELISA检测结果一致性良好.阴性对照血清结果显示检测特异性为100％.结论 本研究建立的虫媒病毒抗体芯片检测方法具有较高的特异性和可靠性,可用于6种虫媒病毒抗体的临床检测.
作者：林方；康晓平；李裕昌；朱晓磊；范丽；魏婧靖；杨银辉；祝庆余 刊期： 2011年第11期
目的 纯化抗沙眼衣原体pORF5单克隆抗体2H4并鉴定其免疫学特性.方法 大量培养pORF5单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株并收集培养上清,采用G蛋白免疫亲和层析法纯化2H4单克隆抗体；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定2H4效价及抗体亚类；Western blot鉴定其特异性；免疫荧光试验(IFA)检测2H4单克隆抗体的衣原体种属特异性.结果 纯化后2H4抗体的纯度高达93％；效价为1:1024,免疫球蛋白类型为IgG2a;2H4抗体不仅能特异性识别pORF5融合蛋白,而且能特异性识别Ct血清型A、D、L2、鼠农原体(MoPn)、鹦鹉热嗜农原体(6BC)质粒所编码的内源性pORF5蛋白,但不识别衣原体其他质粒蛋白和肺炎嗜衣原体(Cpn).结论 获得了高纯度的能特异识别pORF5质粒蛋白的单克隆抗体,为进一步研究pORF5蛋白结构和功能以及沙眼衣原体诊断试剂盒的研制奠定了良好的基础.
作者：李忠玉；吴移谋；黄秋林；粟盛梅；周洲；陈超群；周辉；钟光明 刊期： 2011年第11期
目的 建立肠道病毒71型(EV71)抗原的ELISA检测方法.用于EV71的抗原定量、TCID50试验及EV71免疫原性与免疫保护性的关系分析.方法 以高亲和力的EV71中和单抗K8G2和Y8H2-HRP构建检测EV71抗原的双抗体夹心ELISA方法.比较本方法与显微镜观察法检测的EV71 TCID50.分析EV71抗原的特异比活与免疫血清中和抗体水平的关系.结果 本试剂定量检测抗原的线性范围为0.125 ～4.0 U/ml,R2 =0.9911,试剂不与EV71之外的受试物反应,试剂的回收率为0.89 ～ 1.16,变异系数小于15％,37℃9 d的热回收率大于85％.本法与显微镜观察法检测的EV71 TCID50的相关系数r=0.990.21株EV71抗原的特异比活与免疫血清中和抗体水平的相关系数r=0.930.结论 构建了EV71抗原ELISA检测试剂,可用于EV71的抗原含量检测、TCID50分析,为特异比活与免疫血清中和性关系研究提供了一些有价值的信息.
作者：韩金乐；贾继宗；李川；杨亮；何德磊；李娟；由鹏飞；叶祥忠；李益民 刊期： 2011年第11期
