目的:探讨在腹部超声引导下定位胚胎移植对体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)妊娠结局的影响.方法:回顾性研究本生殖中心接受首次IVF-ET,包括卵母细胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗的新鲜胚胎移植232个周期.232个周期按超声下气液滴距宫底距离占宫深比例的不同分为4组,A组(≤1/5)46例、B组(1/53/5)48例,分析不同的胚胎移植位置对IVF结局的影响.结果:各组间患者的一般情况如平均年龄、不育年限、平均获卵数、优质胚胎数、移植胚胎数及子宫内膜厚度等均无统计学差异,B、C组的胚胎种植率(25.00%、22.86%)高于A、D组(16.67%、14.58%),差异无统计学意义;B、C组的临床妊娠率(44.12%、42.86%)明显高于A、D组(21.74%、22.92%),差异有统计学意义(P<0.05);各组间异位妊娠率无统计学差异.结论:超声引导下置胚胎距宫底的位置占宫深的比例在1/5~3/5之间,可获得较高的临床妊娠率.
作者:刘西茹 刊期: 2011年第03期
目的:比较输尿管镜碎石术,输尿管镜联合拦石网碎石术及经皮肾镜碎石术治疗输尿管上段结石的疗效,探讨输尿管镜联合拦石网碎石术的临床价值.方法:分析236例输尿管上段结石微创治疗的临床资料,其中79例采用硬性输尿管镜碎石术(Ureteroscopic lithotripsy,URL)治疗,88例采用硬性输尿管镜联合拦石网碎石术(URL+拦石网)治疗,69例采用经皮肾镜碎石术(Pemutaneous nephrolithotomy,PCNL)进行治疗.结果:URL+拦石网组一次性碎石成功率97.7%(86/88)与URL组83.5%(66/79)比较差异有统计学意义(P<0.05),与PCNL组98.5%(68/69)比较差异无统计学意义(P>0.05);URL+拦石网组并发症发生率6.8%(6/88)与URL组6.3%(5/79)比较差异无统计学意义(P>0.05),与PCNL组7.2%(5/69)比较差异无统计学意义(P>0.05);URL+拦石网组手术时间(38.53±11.96)min与URL组(36.47±10.87)min比较差异无统计学意义(P>0.05),与PCNL组(40.17±10.96)min比较差异无统计学意义(P>0.05);URL+拦石网组住院时间(3.58±1.96)d与URL组(3.49±1.79)d比较差异无统计学意义(P>0.05),与PCNL组(8.62±1.84)d比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:输尿管镜联合使用拦石网可明显提高输尿管上段结石的碎石成功率,与经皮肾镜碎石取石术比较同样安全有效.
作者:陈刚;唐伟;尹志康;何云峰;吴小候 刊期: 2011年第03期
目的:观察心悦胶囊治疗冠心病心功能不全气虚血瘀型的临床疗效及安全性.方法:将2007年5月~2009年10月106例冠心病心功能不全气虚血瘀型患者随机分为治疗组54例与对照组52例,均以西医常规治疗,治疗组加用中药心悦胶囊;2组均以4周为1个疗程,1个疗程后判定2组心功能疗效.结果:①治疗组临床总有效率98.15%,对照组88.46%;②心脏彩色多普勒超声心动图,射血分数(Ejection fraction,EF):治疗组治疗前36.11%,治疗后51.12%,P<0.05,对照组治疗前36.41%,治疗后42.31%,P<0.05;心脏舒张末期容积(End diastolic volume,EDV):治疗组治疗前154.90,治疗后128.30,P<0.05,对照组治疗前153.10,治疗后137.51,P<0.05;心脏收缩末期容积(End systolic volume,ESV)治疗组治疗前98.70,治疗后71.31,P<0.05,对照组治疗前97.81,治疗后81.71,P<0.05.③治疗组患者治疗后6 min步行距离改善更显著.结论:在西医对症处理基础上加用心悦胶囊治疗冠心病心功能不全疗效满意.并且用药过程中未见不良反应.
作者:韩轶;陈继红;李鹏;王晓峰 刊期: 2011年第03期
目的:通过对华法林预防肿瘤患者中心静脉导管(Central venous catheters,CVCs)相关血栓的随机对照试验和(或)临床对照试验文献进行Meta分析,系统评价华法林预防肿瘤患者CVCs相关血栓的有效性和安全性,为临床肿瘤患者CVCs相关血栓的预防提供理论依据.方法:检索MEDLINE、OVID、EBSCO、EMBASE、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI),同时辅以引文检索和手工检索,获取基本数据.对符合纳入标准的随机对照试验和(或)临床对照试验文献进行方法学质量评价和数据资料提取,采用RevMan5.0.25统计软件进行Meta分析.结果:共纳入7篇随机对照试验和临床对照试验文献,其中有关华法林和安慰剂比较的有6篇文献(共计1 522例肿瘤患者),有关华法林和肝素比较的有1篇文献(包括45例肿瘤患者).系统评价结果显示:1.华法林和安慰剂比较,两组CVCs相关血栓发生率差异具有统计学意义(RR=0.68,95%CI[0.52,0.89];P=0.004);2组出血发生率和死亡率差异都无统计学意义,出血发生率(RR=2.12,95%CI[0.82,5.48];P=0.12),死亡率(RR=1.01,95%CI[0.58,1.74];P=0.98).2.华法林与肝素相比,两组CVCs相关血栓发生率、出血发生率、死亡率差异均没有统计学意义,CVCs相关血栓发生率(RR=0.58,95%CI[0.19,1.79];P=0.35),出血发生率(RR=0.29,95%CI[0.01,6.841;P=0.45),死亡率(RR=0.58,95%CI[0.19,1.79];P=0.35).结论:华法林和安慰剂比较,预防肿瘤患者CVCs相关血栓有一定的有效性和安全性,华法林能有效降低肿瘤患者CVCs相关血栓的发生率,并且不增加出血发生率和死亡率;华法林和肝素相比,在预防肿瘤患者CVCs相关血栓有效性和安全性方面作用相当.但是由于相关研究较少,尚需更多设计严格的大样本的随机对照试验以进一步增加证据的强度.
作者:王松;赵文燕;丁晓华;李胜玲 刊期: 2011年第03期
目的:探讨常规化放疗后用中药维持治疗广泛期小细胞肺癌能否提高生存率.方法:88例未经手术治疗的广泛期小细胞肺癌病例随机分为化放疗组(对照组)和化放疗后+中药维持治疗组(研究组),每组分别为44例.对照组与研究组的化放疗方案均相同,研究组于化放疗治疗结束后加服中药喜丹汤治疗.结果:对照组与研究组中位生存期分别为7.6个月、11.1个月,两组1年生存率为18.2%和38.6%(χ2=4.53,P<0.05),2年生存率为4.5%和18.1%(χ2=4.06,P<0.05),3年生存率为2.3%和13.6%(χ2=3.88,P<0.05),5年生存率为2.3%和6.8%(χ2=1.05,P>0.05).结论:常规化放疗后加用中药维持治疗能提高广泛期小细胞肺癌患者的生存率,延长其生存期.
作者:冉文华;黄朝森;王恩元;任必勇;黄小平;莫运波;张军 刊期: 2011年第03期
目的:探讨双Endobuaon钢板解剖重建喙锁韧带治疗Neer Ⅱ型锁骨远端骨折的手术方法,并评价其疗效.方法:采用双Endobutton钢板解剖重建斜方韧带及锥形韧带、缝线环扎或拉力螺钉固定骨折端治疗Neer Ⅱ型锁骨远端骨折12例,观察骨折愈合时间,并应用ASES评分和Constant-Murley评分评估肩关节功能.结果:随访时间4~12个月,2例患者随访过程中发现骨折复位部分丢失,再移位均小于5 mm,骨折平均愈合时间9.2周.终末随访时平均ASES评分(91.5±3.2)分,其中平均VAS疼痛评分(1.5 ±0.3)分,平均上举(145.0±5.40)°,外旋平均(36.2±4.1)°;平均Constant-Murley评分为(92.8±3.8)分.结论:解剖重建锥形韧带和斜方韧带治疗Neer Ⅱ型锁骨远端骨折更有利于骨折端的稳定;手术不干扰肩锁关节及肩峰下结构,可避免锁骨钩钢板的相关并发症,术后肩关节功能良好;双Endobutton钢板分散了袢环对锁骨和喙突的切割应力,有效避免锁骨、喙突骨折等并发症.
作者:吴术红;刘毅 刊期: 2011年第03期
目的:建立尼泊尔正常(牙合)成人软组织侧貌的X线头影测量正常值范围,探讨其软组织侧貌的性别特征及种族差异.方法:在重庆医科大学尼泊尔留学生中挑选正常牙合成人70人.拍摄X线头颅侧位片,应用Winceph8.0进行描图分析,对Holdaway软组织头影测量的11项指标进行测量,用SPSS13.0统计软件对测量数据进行统计学处理.结果:得出尼泊尔正常(牙合)成人Holdaway软组织分析法各项正常值.多数测量项目测量值都在Holdaway正常值标准内.男女间比较部分测量值有显著性差异.与中国人比较大部分测量值有显著性差异,尼泊尔人鼻尖高度较中国人高,面下三分之一较中国人平直.结论:尼泊尔人的软组织侧貌特征介于白种人与中国人之间.
作者:杨秀梅;邓锋;王华桥;黄倩倩;Malla 刊期: 2011年第03期
目的:观察红霉素配合皮肤护理治疗面部激素依赖性皮炎的疗效.方法:30例面部激素依赖性皮炎患者均为常规治疗方法效果差或治疗后复发者,口服红霉素肠溶胶囊0.5 bid,急性期加面部冷敷,后期加舒敏修复霜,1~1.5个月后减半服用红霉素,总疗程为3个月;3个月后评价临床疗效.结果:有效率为85.71%.结论:红霉素配合皮肤护理治疗面部激素依赖性皮炎具有较好疗效.
作者:殷建彬;李惠;杨传凤 刊期: 2011年第03期
目的:研究入缝匠肌和股直肌的肌内神经分支分布、肌梭密度和测定神经入肌点,为临床外科提供肌形态学资料.方法:大体解剖法观察20具尸体缝匠肌和股直肌的形态学特点,并以髂前上棘为标志定位缝匠肌和股直肌神经入肌点;H·E染色法研究5具尸体缝匠肌和股直肌肌梭分布;Sihler's肌内神经染色法探讨10具尸体缝匠肌和股直肌肌内神经分支分布.结果:缝匠肌是由长肌束平行排列构成的带状肌,股直肌是由短肌束构成的羽肌;缝匠肌和股直肌的平均肌梭密度分别为:38.04个/g和19.38个/g;缝匠肌有2支一级神经分别支配肌上部和中下部,股直肌有2支一级神经分别支配肌外上部和内下部;缝匠肌神经人肌点平面距髂前上棘直线距离为(9.75±1.30)cm,股直肌外上部和内下部神经入肌点分别为(10.23±0.97)cm和(14.48±1.12)cm.结论:缝匠肌是带状肌,股直肌是羽肌;缝匠肌和股直肌均有2支一级神经支配;缝匠肌肌内神经分支少,吻合少,区域性分布较明显;缝匠肌和股直肌的神经入肌点均集中在股前上部第2区内.
作者:张洪武;薛黔;杨宇平 刊期: 2011年第03期
目的:观察氯胺酮对儿童颌面外科短小手术七氟烷麻醉后苏醒期躁动(Emergency agitation,EA)的抑制作用.方法:择期口腔颌面部手术患儿35例美国麻醉医师协会(American society of auesthesiologists,ASA)Ⅰ级2~5岁,体重15~26 kg,随机分为2组,氯胺酮组(K组,n=20)和对照组(C组,n=15),2组患儿麻醉方法相同,8%七氟烷吸入诱导后罗库溴铵0.6mg/kg静脉注射后经鼻气管插管,术中机械通气2%~3%七氟烷吸入维持,K组术毕前10 min静脉推注氯胺酮0.5 mg/kg,C组生理盐水,2组均于术毕停用七氟烷,待患儿苏醒后采用儿童麻醉苏醒期躁动评分(Pediatric anesthesia emergence delirium,PAED)量表评估并记录EA发生率,不良反应和监护室停留时间.结果:2组儿童一般资料无统计学意义,K组儿童术后EA发生率明显少于C组(P<0.01),但术后不良反应及监护室停留时间无差异.结论:氯胺酮能有效减少儿童经七氟烷麻醉口腔颌面部手术术后苏醒期EA发生率.
作者:陈思路;罗玉琳;郁葱;张青 刊期: 2011年第03期
目的:探讨急诊胃镜在上消化道非静脉曲张性出血诊断治疗中的应用价值.方法:回顾性分析61例上消化道非静脉曲张性出血患者胃镜下治疗效果.结果:61例患者中一次性止血成功55例(90.16%),5例经2次胃镜下止血成功(8.19%).1例死亡(1.6%).出血主要原因依次为消化性溃疡,急性糜烂出血性胃炎,贲门及胃恶性肿瘤,Dieulafoy病.结论:胃镜是诊断治疗上消化道出血的首选方法.
作者:艾合买提·热甫海提;玛依拉·阿不都克力木 刊期: 2011年第03期
目的:探讨血清胱抑素C(Cystatin C,Cyst C)检测在儿童肾功能损害分期诊断中的作用.方法:79例肾脏病患儿和20例非肾病对照组患儿均入院24 h内行Cyst C、SCr检测.根据Schwartz公式计算肾小球滤过率(Glomerular filtration rate,GFR),并进行肾功能分期.采用ROC曲线及曲线下方的面积评价诊断作用.结果:Cyst C和SCr水平随CKD分期的增高,水平依次增高(P<0.05),而GFR则依次下降(P<0.05),而对照组和CKD1期组未见有统计意义的差异(P>0.05).Cyst C、SCr和GFR三者之间两两都存在相关关系.Cyst C和SCr对CKD各期的诊断均有价值,并且Cyst C要优于SCr.而Cyst C对CKD 2期诊断的AUC值大.Cyst C对CKD 2期、CKD 3期、CKD4~5期相应诊断界值为1.0、1.5和2.6mg/L.结论:Cyst C对儿童肾功能损害有很好的分期作用;Cyst C对儿童肾功能损害分期作用优于SCr;Cyst C对儿童肾功能损害的早期分期应用效果更好.
作者:聂文荣 刊期: 2011年第03期
目的:探讨原发于鼻腔-鼻窦的T/NK淋巴瘤的临床特点.方法:对16例患者的临床资料进行回顾性分析.结果:鼻腔和鼻窦的T/NK淋巴瘤症状不典型,包括鼻塞、鼻出血、局部肿胀及发热等,临床误诊率高;高分期及高侵袭性淋巴瘤预后差.结论:鼻腔鼻窦的T/NK淋巴瘤临床症状不典型,应提高对该病的认识,防止误诊;预后有赖于病理分型和临床分期.
作者:向银洲;余林;魏莲枝;贵平;彭平 刊期: 2011年第03期
目的:评价戊酸雌二醇(Estradiol valerate,E2V)用于术后防止宫腔粘连复发的效果.方法:宫腔镜下行宫腔粘连分离术和放置宫内避孕环后的患者,15例不用E2V,15例用E2V(9 mg/d)2月,15例用E2V(9 mg/d)3月.所有病例定期随诊,治疗结束后取出宫内避孕环,同时再行宫腔镜检查.结果:完成治疗后,用E2V 3月组子宫内膜厚度厚,不用E2V组薄.宫腔形态及月经恢复正常率,用E2V 3月组达93.3%,用E2V2月组达73.3%,而不用E2V组46.7%.结论:宫腔镜下宫腔粘连分离术后,同时口服E2V是防止宫腔粘连复发的有效方法.
作者:林奕;李莉;雷丽;郝丽娟;雷莉;孙文洁 刊期: 2011年第03期
目的:评定无抽搐电休克治疗对严重抑郁患者认知功能产生的影响.为I临床无抽搐电休克治疗提供理论依据.方法:符合中国精神障碍分类与诊断标准第3版的抑郁症标准,汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)17项总分≥24分的严重抑郁症患者进行了至少6次双侧电极无抽搐电休克治疗,分别于治疗前、第1次治疗后、第6-8次治疗后进行汉密尔顿抑郁量表(HAMD)及韦氏记忆量表(Wechsler memory scale,WMS)评定.结果:无抽搐电休克治疗严重抑郁症后临床症状明显好转(P<0.01),但对记忆有一定的影响,这种影响于患者接受第6次至第8次治疗时逐渐恢复.结论:无抽搐电休克治疗对严重抑郁症患者临床症状有明显的改善,且对患者记忆的影响是可逆的.
作者:楼丹丹;况利;甘窈 刊期: 2011年第03期
目的:探讨微创经皮肾镜取石术(Minimally invasive percutaneous nephrolithotomy,MPCNL)治疗输尿管上段结石的安全性和有效性.方法:对56例输尿管上段结石病例行微创经皮肾镜碎石术,术后作腹部平片,观察是否有结石残留.结果:在56例病例中,有53例手术成功,手术成功率为94.6%.成功的53例平均手术时间(59.8±20.1)min,住院时间6~9d,结石清除率为100%.所有病例均未输血或出现其它严重并发症.结论:微创经皮肾镜治疗输尿管上段结石安全有效,对于肾积水较重、离肾盂近的输尿管上段结石可作为首选.
作者:杨雪松;曾德朗;龚志勇;鲁栋梁;王继忠 刊期: 2011年第03期
目的:通过与亚甲蓝(Methylene blue,MB)示踪法比较,探讨超声造影检测乳腺癌前哨淋巴结(Sentinel lymph node,SLN)的前景.方法:建立兔VX2乳腺癌模型24只,皮下注射Sono Vue,超声造影显像SLN,观察其造影增强情况;再经皮下注射MB示踪;行腋窝淋巴结清扫术切除SLN并行AE1/AE3免疫组化染色.结果:24只瘤兔超声造影检出回声均匀性增强的SLN 12个,回声不均匀性增强和部分充盈缺损的SLN 22个;MB示踪法检出SLN 32个;术中腋窝淋巴结清扫SLN 38个.以手术切除为标准,超声造影的检出率(89.47%)与MB示踪法检出率(84.21%)比较无显著差异(P>0.05);以免疫组化结果为标准,超声造影的敏感性(95.24%)与MB示踪法敏感性(91.30%)比较无显著差异(P>0.05),但其特异性(84.62%)和准确性(91.18%)均明显高于MB示踪法特异性(26.67%)和准确性(65.79%)(P<0.05).结论:经皮下注射超声造影剂显像乳腺癌SLN有较高的检出率、特异性、准确性和敏感性,与MB示踪法比较有一定优势,有望成为检测SLN的常用方法.
作者:丁炎;夏纪筑;丁雅明;贺雪梅;白晋 刊期: 2011年第03期
目的:了解不同致龋力的变异链球菌临床分离株(593号高致龋力临床株和18号低致龋力临床株)在生物膜状态不同时间段合成胞外多糖的能力差异.方法:①在聚苯乙烯塑料片上分别形成3、12、20 h变异链球菌生物膜标本,用异硫氰酸荧光素标记的伴刀豆球蛋白A对其中的胞外多糖进行染色,激光共聚焦扫描显微镜观察.②采用静置法培养形成粘附生长的细菌,蒽酮法测定3~24 h其合成胞外多糖的量.结果:①胞外多糖与染料结合后发出绿色荧光,各时间段593号临床株绿色荧光的分布较18号临床株更致密和广泛.②3~20 h 593号临床株合成水溶性葡聚糖能力强于18号临床株(P<0.05);3~16 h 593号临床株合成水不溶性葡聚糖能力强于18号临床株(P<0.05);其他时间点二者合成胞外多糖的能力无显著性差异(P>0.05).结论:在生物膜形成过程中两菌株合成胞外多糖量随时间延长而增加,593号临床株在生物膜形成早期3~16 h更强的合成胞外多糖能力(含水溶性和水不溶性葡聚糖),可能是其具高致龋力的原因之一.
作者:黄晓晶;江山;蔡志宇;闫福华;钟声 刊期: 2011年第03期
目的:观察缺氧及缺氧复氧状态下大鼠肾小管上皮细胞中肝再生增强因子(Augmenter of liver regeneration,ALR)的表达变化,以及对细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kincses,MAPK)信号通路的影响,探讨ALR对肾脏保护的作用机理.方法:将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分组,在三气培养箱中缺氧不同的时间(2、4、8、12、18、24 h),复氧(12、24h),Westernblot法检测细胞ALR的蛋白表达,RT-PCR法检测细胞ALR mRNA的表达.缺氧不同的时间(0、15、30、60 min),并在缺氧15 min的细胞中设立对照组,rALR干预组(20、100 μg的rALR)及抑制剂干预组,Western blot检测细胞p38MAPK蛋白的表达.结果:(1)正常培养NRK52E细胞中有ALRmRNA表达,缺氧4h后,ALR mRNA表达较正常对照显著增加(n=7,P<0.01).(2)缺氧培养细胞12 h,细胞中ALR蛋白表达量显著高于正常对照组,于18 h达高峰(n=7,P<0.01).(3)缺氧4h,复氧12、24 h,ALR mRNA及蛋白表达较正常对照组明显增加.(4)缺氧15 min时p38MAPK蛋白表达强,低剂量rALR(20μg)能够显著抑制p38MAPK通路的激活,而高剂量rALR(100 μg)的抑制作用减弱.结论:缺氧及缺氧复氧均能诱导大鼠肾小管上皮细胞表达ALR增加,其中缺氧复氧能较早激活ALR表达,低浓度的外源性rALR减弱p38MAPK通路的表达,提示ALR对缺氧再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞有保护作用.
作者:周娟;张玲;刘杞;廖晓辉;张臣丽 刊期: 2011年第03期
目的:探讨中药益生注射液对大鼠移植心慢性失功(Chronic graft failure,CGF)加快模型的保护作用,为临床应用提供部分实验依据.方法:采用雌性封闭群SD大鼠40只,随机分2组,对照组的离体心脏用4℃生理盐水保存3h后,行心脏移植,术后不给任何药物处理,实验组的离体心脏则用含益生注射液的4℃生理盐水保存3 h后,行心脏移植,术后每天腹腔注射益生注射液,剂量为8mg/(kg·d),连续9 d.分别采集受体术前和术后1、3、5、7、9d血液,检测丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)含量变化.另外,在移植术后12周,取2组移植心脏的组织学标本进行比较分析.结果:对照组和实验组心脏移植术后血浆MDA含量显著升高,而SOD活性却显著降低,术后第1天下降明显.对照组与实验组相比,术前2组血浆的MDA含量和SOD活性相似;术后第1天,对照组血浆MDA含量升高,并明显高于实验组45.27±6.48与32.78±6.61,P<0.05,而SOD活性下降,并明显低于实验组529.77±46.31与663.33±45.92,P<0.05;此后,2组的血浆MDA含量和SOD活性逐渐恢复到正常,但对照组恢复较慢,术后第9天才接近正常,实验组恢复较快,术后第5天已恢复正常.对2组移植心脏的组织学标本进行比较,移植后12周,实验组与对照组相比,移植心慢性排斥程度明显减轻(2.20±0.40与3.6±0.48,F=100.41,P<0.0001).心肌间质纤维化程度也减轻(1.00±0.32与1.60±0.48,F=21.63,P<0.000 1).结论:在缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,I/R)诱导的CGF加快模型中,益生注射液对移植心的I/R损伤有保护作用,并能减轻其慢性失功的进程.
作者:李明;严律南 刊期: 2011年第03期
目的:构建人工锌指蛋白(Putative zinc finger protein,ZFP)基因的真核表达载体,验证其在真核细胞内的表达情况,为进一步构建人工转录因子(Artificial transcription domain factor,ATF)所需的DNA结合结构域寻找合适的ZFP.方法:合成ZFP的全基因核酸序列并载入pEGFP-N1真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-N1/ZFP及pEGFP-N1/ZFP-Flag,通过菌液PCR、酶切和测序来鉴定重组质粒的正确性.脂质体Lipofectamine 2000将重组质粒转染于COS-7细胞中,使用RT-PCR、荧光显微镜、Western blot方法鉴定ZFP在该细胞中的表达.结果:成功构建了pEGFP-N1/ZFP及pEGFP-N1/ZFP-Flag重组质粒,并且在COS-7细胞中进行了ZFP的表达.结论:通过生物信息学工具获取的ZFP氨基酸序列,经过密码子优化得到的基因序列能够在真核细胞内成功表达.
作者:李鑫;吴忠均;陈聪 刊期: 2011年第03期
目的:研究转录因子FOXO3a对急性粒细胞白血病HL60细胞株增殖、凋亡的影响及可能的分子机制.方法:将FOXO3a表达质粒pcDNA3.1-FOXO3a及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染HL60细胞,用G418筛选出FOXO3a稳定表达细胞株.台盼蓝拒染法和MTT法检测HL60细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测基因Bim和bcl-2的表达.结果:筛选到稳定表达FOXO3a基因的细胞株HL60/FOXO3a细胞,与空载体转染组(HL60/empty)及未处理对照组(HL60/untreated)细胞相比,转染组FOXO3a明显抑制HL60细胞生长与增殖,导致G,期阻滞,细胞凋亡明显增加.RT-PCR及Western blot显示FOXO3a明显上调Bim基因的mRNA和蛋白表达,而抑制bcl-2基因mRNA和蛋白的表达.结论:FOXO3a转录因子能抑制HL60细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,其机制可能是通过对凋亡相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的.
作者:陈佳琳;张丽平;孙成铭;姚声涛;朱元方;赵宇 刊期: 2011年第03期
目的:研究苹果对实验性肝纤维化大鼠的辅助逆转作用,并探讨其对肝纤维化的影响机制.方法:雄性SD大鼠42只分为正常组、CCl4肝纤维化模型组、自然恢复组、丹芍化纤治疗组、丹芍化纤+苹果试验组.除正常组以外,其余大鼠均采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合因素刺激制备大鼠肝纤维化模型共8周.确认造模成功后再将剩余模型组大鼠随机分为丹芍化纤+苹果试验组、丹芍化纤治疗组及自然恢复组,共观察8周.结果:丹芍化纤+苹果试验组与模型组、自然恢复组及丹芍化纤治疗组比较:肝脏指数、血清ALT及AST显著下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01);RT-PCR中核因子相关因子2(NF-E2-relatedfactor 2,Nrf-2)mRNA及血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)mRNA在丹芍化纤+苹果试验组中的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组升高(P<0.05),丹芍化纤+苹果试验组中肝组织TGF-β 1的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组降低(P<0.05)、而MMP-2在丹芍化纤+苹果试验组中的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组升高(P<0.05);GSH有所升高,MDA有所降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:苹果在实验性肝纤维化大鼠的逆转过程中起到了有效的辅助作用,辅助逆转的机制可能与其上调Nrf-2表达,从而增强HO-1表达,增强其抗氧化功能,抑制脂质过氧化作用在丹芍化纤胶囊的治疗基础上进一步抑制了TGF-β1的表达;从而促进细胞外基质的降解,这可能是苹果辅助逆转肝纤维化的机制之一.
作者:祝娟娟;程明亮;穆茂 刊期: 2011年第03期
目的:观察辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时细胞内Ca2+浓度、Ca2+调节蛋白(Calbindin-D28K,D28K)和Ca2+激活蛋白(calpain)基因变化,以探讨K562细胞凋亡机制.方法:常规培养细胞24h,20 μmol/L辛伐他汀处理K562细胞48 h;流式细胞技术检测细胞凋亡率和Ca2+浓度,PCR技术检测D28K和calpain基因.结果:20 μmol/L辛伐他汀作用K562细胞24、48、72 h凋亡率改变分别为(6.10±0.35)%、(14.15±0.42)%、(30.70±0.65)%,随药物作用时间延长细胞凋亡率增加;辛伐他汀作用K562细胞12、24、48、72 h,游离钙荧光强度变化为52.93±2.85、19.63±1.56、13.81±1.05、7.84±0.98,各处理组荧光强度与对照组相比升高(P<0.05);与相同时间对照组比较,calpain和D28K基因分别在辛伐他汀作用K562细胞24 h和48 h后上调(P<0.05).结论:辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时细胞内Ca2+浓度显著升高,细胞内Ca2+浓度调节蛋白D28K和calpain基因上调,这些改变可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的机制之一.
作者:曾娅莉;黄文芳;刘华;杨永长;邓建军;刘俭 刊期: 2011年第03期
目的:探讨畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测42例皮肤鳞状细胞癌、30例基底细胞癌和20例正常皮肤组织中PCDGF和VEGF蛋白的表达情况.结果:与正常皮肤相比,PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中表达明显升高(P<0.01),皮肤鳞状细胞癌中PCDGF和VEGF蛋白表达强度又明显高于基底细胞癌(P<0.01).PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达水平与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与肿瘤的大小、病理分级无关(P>0.05).PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达呈正相关(rs=0.765,P<0.01).结论:PCDGF蛋白和VEGF蛋白的异常表达在表皮恶性肿瘤的发生和发展中发挥重要作用,并与皮肤鳞状细胞癌的侵袭性生长潜能密切相关.
作者:黄琨;黄闯;单葵;陈瑾;赵恒光;李惠 刊期: 2011年第03期
目的:研究肝癌顺铂耐药细胞HepG2/cDDP中人肝再生增强因子(Human augmenter of liver regeneration,hALR)对细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP450)表达的影响,观察ALR是否通过作用CYP450与肝癌细胞耐药的形成有关.方法:建立体外肝癌顺铂耐药细胞系,MTT检测耐药指数;将构建好的人肝再生增强因子siRNA表达质粒psiALR-A及其阴性对照质粒psiALR-B采用脂质体转染的方法分别转染至HepG2/cDDP细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,计算转染效率.根据转染不同的质粒,将HepG2/cDDP细胞分为3组:转染组(转染psiALR-A),对照组(转染psiALR-B),空白组(未转染重组质粒).免疫细胞化学法、免疫印迹法、实时荧光定量PCR法检测转染细胞中hALR和CYP450的表达,化学发光法检测各组细胞中CYP3A4的活性,MTT比色法检测各组细胞对顺铂敏感性的变化.结果:耐药模型成功建立,耐药指数为6.26;成功转染质粒psiALR-A和psiALR-B;转染组细胞中hALR表达明显减少,CYP450的表达明显增加,活性升高,而对照组和空白组细胞中hALR和CYP450表达没有明显的变化.MTT结果显示转染组细胞对顺铂的敏感性降低,对照组和空白组细胞对顺铂的敏感性没有明显变化.结论:阻断人肝再生增强因子的表达后,HepG2/cDDP细胞CYP450表达明显增加,活性增强,对顺铂的敏感性下降,ALR可能通过作用CYP450在肝癌细胞耐药的发生发展中起着重要作用.
作者:徐永红;孙航;郭晖;钱克莉;张臣丽;刘杞 刊期: 2011年第03期
目的:探讨糖皮质激素治疗对儿童重症肌无力(Myasthenia gravis,MG)Th1/Treg细胞转录因子表达及相关细胞因子的影响.方法:应用RT-PCR技术检测52例MG患儿和20例健康对照者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)T-bet和FOXP3 mRNA的表达情况,应用ELISA法检测相关细胞因子干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)、白细胞介素-6(Interhukin-6,IL-6)及转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的浓度变化情况.结果:与健康对照组比较,患儿T-bet mRNA的表达显著增高(P<0.05),而激素治疗前组与治疗后组比较无显著性差异.激素治疗前组FOXP3mRNA的表达显著高于健康对照组(P<0.05),激素治疗后组与健康对照组比较,差异无统计学意义,激素治疗前后组无显著性差异.T-bet mRNA与FOXP3 mRNA的表达比值,激素治疗前组显著高于健康对照组(P<0.05).激素治疗后组与健康对照组及治疗前组比较,IFN-γ的浓度显著升高(P<0.05),而健康对照组与治疗前组比较无显著性差异.3组之间,IL-6和TGF-β1的浓度无显著性差异.结论:T-bet mRNA和FOXP3 mRNA在MG患儿中表达异常,表明Th1和Treg细胞参与了MG的发病,经激素治疗后免疫功能有所恢复;本组患儿IL-6和TGF-β1的浓度无明显异常,提示这些患儿免疫功能紊乱程度较轻,未达到显著差异水平;而在一定情况下,IFN-γ在治疗后其水平升高可能对机体发挥着一定的保护作用.
作者:黄志新;黄志 刊期: 2011年第03期
目的:探讨靶向Livin的RNA干扰对食管癌凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的影响.方法:采用慢病毒载体转染Livin高表达的食管癌Eca-109细胞株,从而有效地进行靶向Livin的RNA干扰.分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中Livin、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达情况.结果:与空白对照组和阴性组相比,实验组中Livin的mRNA及其蛋白的表达都明显降低(P<0.01),而Caspase-3和Caspase-9的mRNA及其蛋白的表达都明显增加(P<0.01).结论:针对Livin的RNA干扰可有效降低Livin高表达的食管癌Eca-109细胞株中Livin mRNA和蛋白水平.同时,与细胞凋亡相关的信号分子Caspase-3和Caspase-9 mRNA和蛋白水平均明显升高.
作者:陈力;李凡;任国胜 刊期: 2011年第03期
目的:扩增丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)P7蛋白基因,克隆到多个原核表达系统,观察P7蛋白在体外表达的情况,获取具有生物学活性的HCV P7重组蛋白.方法:设计扩增全长HCVP7基因片段的特异引物,以H/FL质粒DNA(含HCV 1acDNA全长序列)为模板,通过PCR扩增全长HCVP7基因,定向克隆到pQE30、pGEX 4T-2、pET32a(+)3种不同类型的原核表达载体中.将重组后包含HCVP7基因的原核表达载体转化表达型大肠杆菌BL21(DE3)pLysS或SG13009(PREP4),并做异丙基硫化-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactoside,IPrG)诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定HCV P7蛋白原核表达的情况.结论:获得可溶性的重组蛋白GST-HCV P7和Trx-HCV P7,为进一步研究P7蛋白的生物学功能奠定基础.
作者:陈可;胡接力;胡源;张文露;王增产;汤华;黄爱龙;蔡雪飞 刊期: 2011年第03期
目的:探讨富含半胱氨酸的酸性蛋白(Secreted protein acidic and richin cysteine,SPARC)与子宫颈鳞状细胞癌(Squamous cervical carcinoma,SCC)的发展及浸润的关系.方法:采用免疫组化sP法检测18例正常子宫颈上皮(Normal cervical epithelium,NCE)、41例子宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasm,CIN)及72例组织中SPARC的表达,并分别检测CD34的表达.结果:从NCE到CIN到SCC组,SPARC的表达水平显著升高.在CIN组SPARC的表达随病变程度加重而升高;而SCC组中其与国际妇产科联盟(FIGO)分期、盆腔淋巴转移、浸润深度及脉管浸润有关,与组织学分级及年龄无关.从NCE到CIN到SCC组,CD34表达的微血管密度(Micmvessel density,MVD)值显著升高,且与SPARC有相关性.结论:SPARC可能在SCC的发展及转移过程中其重要作用,可能成为判断宫颈病变生物学行为的一个重要指标.
作者:邓婷;周勤 刊期: 2011年第03期
目的:通过对没食子酸(Gallic acid,GA)在体外清除自由基能力的评价,为其抗氧化应用提供实验依据.方法:采用分光光度比色法,分别测定药物对2,2-联苯-1-苦基肼(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、过氧化氢和羟自由基的清除作用,以及对脂质过氧化的抑制作用,采用Griess法测定药物对一氧化氮的清除作用.并与公认的自由基清除剂维生素C(Vitamin C,Vc)同时实验进行比较.结果:GA在所选浓度范围内(5~50 μg/ml)对DPPH自由基就有明显的清除作用,清除率为(20.65±2.67)%~(87.98±4.12)%,明显高于Vc的清除作用,并呈一定的浓度依赖关系;对一氧化氮的清除率在所选浓度范围内50-400 μg/ml达到(10.45±3.45)%~(40.43±2.76)%,其清除能力很强,只是略低于Vc;对羟自由基的清除率在所选浓度范围内(50±400 μg/ml)为(47.32±3.26)%~(67.25±2.99)%,其清除作用明显并且高于Vc.而对过氧化氢清除作用并不明显.不同浓度的GA 50-400 μg/ml对脂质过氧化有抑制作用,抑制率为(48.65±5.21)%~(80.03±5.64)%,其抑制效应远远高于Vc.结论:GA在体外对不同自由基具有较强的清除能力,这可能是其在体内起到抗氧化作用的重要因素之一.
作者:谢晓艳;刘洪涛;张吉;李秀英;李文明;于超 刊期: 2011年第03期
目的:对稳定转染有携带入β1、β2或β3肾上腺素受体基因质粒的CHO-K1细胞(β1-CHO、β2-CHO和β3-CHO细胞)进行鉴定,以为将这几种细胞用于β3肾上腺素受体激动剂的筛选奠定基础.方法:采用免疫细胞化学、免疫荧光、western blott 和放射性配体结合法对3种细胞进行鉴定.结果:β1-CHO、β2-CHO和β3-CHO 3种细胞经免疫细胞化学检测,细胞内均出现明显的棕黄色免疫阳性反应;经免疫荧光检测,3种细胞内均有明显的荧光;3种细胞提取的蛋白质经Western blot检测均出现预期的受体蛋白条带,且均可与不同浓度的放射性核素标记配体125I-cyanopindolol呈饱和结合.结论:β1-CHO、β2-CHO和β3-CHO细胞分别稳定表达有β1、β2或β3肾上腺素受体蛋白,可以用于特异性β3肾上腺素受体激动剂的筛选.
作者:曾凡新;董志;傅洁民;邓杰;刘晓海;杨佳丹 刊期: 2011年第03期
目的:建立细胞内外酒石酸长春瑞滨含量浓度的高效液相色谱测定方法.方法:色谱柱,Lichrospher C18(4.6mm × 250mm,5 μm);流动相:磷酸盐缓冲液(0.05 mol/ml的磷酸二氢钾,pH 3.5):乙腈=70:30(v/v);柱温为30℃;检测波长269 nm;流速为1 ml/min;进样体积为10 μl.结果:酒石酸长春瑞滨在0.5~25 μg/ml范围内线性关系良好,细胞外液的平均提取回收率为84.6%,平均加样回收率为100.3%,日内、日间RSD≤4.84%;细胞内液平均提取回收率为88.2%,平均加样回收率为98.3%,日内、日间RSD≤4.69%;低检测限0.1 μg/ml.结论:本法简单、快速、选择性好,适合酒石酸长春瑞滨含量的测定.
作者:颜波;韩文莉;辜鹏程;尚京川 刊期: 2011年第03期
目的:以杆状病毒为载体,在昆虫细胞sf9中表达GⅡ-4型野生株诺如病毒(Norovimses,NOV)GZ121的衣壳蛋白ORF2,并验证其与组织血型抗原(Histoblood group antigen,HBGAs)受体的结合活性.方法:双酶切质粒PMD18-T-GZ121 ORF2酶切,连接人线性化载体PFastBacTM1,获得重组转座载体pFastBac-GZ121 ORF2,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统获得重组杆状病毒,将其转染昆虫sf9细胞进行蛋白表达,用蔗糖超离方法纯化以及免疫印迹、透射电镜等方法鉴定表达产物,用EIA法检测NOV-VLP与HBGAs的结合特性.结果:成功表达了分子量约为58 kD的NoV衣壳蛋白,大小约30 nm与预期相符,NOV-VLP与A、B、O型均能结合,与非分泌型唾液不结合,结合方式与rVA387相一致.结论:我国优势流行株GⅡ4型NoV病毒样颗粒(Vires-like particles,VLP)的表达成功及NoV-VLP和HBGAs受体结合模型的建立,为我国NoV疫苗的开发和防治药物的研究奠定了基础.
作者:张绪富;戴迎春;宋灿磊;周迎春 刊期: 2011年第03期
目的:通过对比分析健康者与非酒精性脂肪性肝病(Non-Mcohohc fatty liver disease,NAFLD)患者血清转氨酶的变化与丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)、氧化型谷胱甘肽(Oxidized glutathione,GSSG)以及糖脂代谢相关指标的关系,探讨血清脂质过氧化指标对NAFLD患者血清转氨酶升高程度的预测价值.方法:NAFLD患者89例及作为对照的正常健康体检者30例,清晨空腹分别收集血清进行丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)、谷酰转肽酶(Gamma-glutamyl transpeptidase,GGT)水平检测以及血糖、血脂、身高、体重、腰围、臀围等测定,同时检测GSH、GSSG及MDA水平进行分析.结果:NAFLD患者血清中GSSG及MDA含量比对照组明显升高,而GSH比正常对照显著降低.多元线性回归分析结果表明MDA、GSSG、GSH及GSH/GSSG对NAFLD患者血清转氨酶ALT、AST影响具有显著意义(β值分别为0.324、0.961、-0.365、0.592以及0.400、0.951、-0.396,0.7).对GGT影响显著的因素是GSSG和MDA(β值分别为0.812、0.628),GSH及GSH/GSSG对GGT的影响没有显著性.结论:NAFLD患者血清脂质过氧化指标的水平与血清转氨酶水平密切相关.在肝细胞损伤过程中,血清MDA、GSSG及GSH/GSSG水平异常早于血清转氨酶,能够作为反映NAFLD患者肝细胞受损的敏感的血清学指标.
作者:宁波;韩昕晶;沈薇 刊期: 2011年第03期
突发性耳聋为耳鼻咽喉科常见病、多发病.由于该病起病突然,病情凶险,治疗效果受多种因素的影响[1],诸如年龄、耳聋程度、发病至治疗时间、患者对治疗的配合程度等均明显影响治疗效果,稍有延误即可能导致患耳功能永久丧失.
作者:王晓侠;嵇宪生;陈菁华;李蕾 刊期: 2011年第03期
临床上脑血管痉挛(Cerebral vascular spasm,CVS)比较多见,但重度局限性CVS尚未见报道.现将此例报道如下.1 临床资料患者,女,33岁,因间断头晕眼花1月,门诊TCD提示左侧大脑中动脉狭窄于2008年9月10 Et入院.既往身体健康,无血管危险因素.
作者:马冉冉;李光勤;王进平;米秀娟 刊期: 2011年第03期
目的:通过分析重庆市不同性别、不同地区和不同年龄层次人群的血常规数据,了解成人居民贫血的分布特点.方法:2009月1月1日~2009年10月31日在全市范围内采用整群分层抽样的方法随机纳入2万人,年龄在19~60岁.按年龄分组分为:18~29岁组、30~39岁组、40~49岁组和50~59岁组;按性别分组分为:男性组和女性组;按居住地分为主城区组和非主城区组.对所有调查对象贫血状况的评估.结果:女性贫血率明显高于男性贫血率(F=20000,P<0.01),18~60岁不同年龄组的人群贫血率有明显差异(F=130.087,P<0.01),以39~49岁组贫血率高.主城区与非主城区人群贫血率除18~29岁组有差异(F=28.209,P<0.01),其它年龄段组差异不大,没有统计学意义.结论:性别和年龄对重庆成人居民贫血率的高低有明显的影响.总体是女性贫血率高于男性贫血率.18~60岁各年龄组贫血率差异较大,以39~49岁组为明显.
作者:张元贤;唐兰;王小林;罗蓉;谢微波 刊期: 2011年第03期