目的评价国产利福昔明治疗细菌感染性腹泻的疗效和安全性.方法采用多中心、随机、单盲对照试验,以国产环丙沙星作对照,研究利福昔明治疗细菌感染性腹泻的效果.利福昔明第一日每次0.4g,一日三次.第二日起每日0.4g,一日二次;环丙沙星第一日每次0.25g,一日三次,第二日起每次0.25g,一日二次.疗程均为3～7d.治疗前、后查血、尿、大便常规,肝、肾功能和血生化,心电图用于安全性评价.结果利福昔明组100例,环丙沙星组105例,其临床有效率和临床痊愈率分别为100%和93.00%,98.09%和92.38%,两组临床有效率和痊愈率无统计学差异.205例中有137例治疗前分离到病原菌,细菌阳性率66.83%(137/205).细菌清除率分别为100%,97.10%.两组不良反应发生率分别为10.48%和5.36%(6/112),经统计学处理无显著性差异.结论利福昔明片治疗细菌感染性腹泻,临床疗效肯定,不良反应少,可在细菌感染性腹泻治疗中应用.
作者：周智；凌宁；黄长武；张大志；任红；王立；古赛；陈东风；江南；吴加玉；谭光星 刊期： 2004年第05期
目的了解我院危重监护病房(简称ICU)铜绿假单胞菌的耐药性.建立一种快速、准确、可靠、重复性好的基因分型方法来研究ICU铜绿假单胞菌的分子流行病学.方法采用全自动鉴定仪(Walkaway-40DADE Microscan Inc)鉴定铜绿假单胞菌,并根据半定量微量肉汤系统测定7种常用抗生素对细菌的低抑菌浓度,确定其耐药情况.用脉冲场凝胶电泳(简称PFGE)对限制性酶切片段分离.通过对每一株菌染色体DNA指纹图谱的比较分析其克隆构成,了解其流行状况.结果24株菌对7种抗生素的耐药性由高到低依次为:环丙沙星(87.5%),庆大霉素(75%),亚胺培南(66.7%),头孢曲松(66.7%),哌拉西林(29.2%),头孢他啶(20.8%),阿米卡星(12.5%).8株菌经PFGE分析初步证实其中4株菌具有明显相关性.结论铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率高,多重耐药情况严重.PFGE具有分辨力高、重复性好的特点,是研究ICU铜绿假单胞菌分子流行病学较好的基因分型方法.
作者：康梅；韩琳琳；陈慧莉；简军；过孝静；吕晓菊 刊期： 2004年第05期
目的整合子(integrons)介导的细菌耐药特性已成为研究细菌耐药机制的热点,在研究了来自正常人携带沙门氏菌中整合子的分布和特性的基础上,进一步探讨整合子的基因定位.方法从已鉴定的整合子阳性菌株出发,分别提取其质粒和染色体DNA,进行质粒的接合转移试验.对染色体DNA进行限制性酶切,以第一类整合酶基因intI1(DIG标记)为探针,进行Southern杂交.结果4株整合酶阳性菌株不存在含有第一类整合子的接合性质粒,确定4株整合子阳性菌株的整合酶基因intI1基因位于染色体上.结论本文发现的整合子阳性菌株对耐药基因的捕获是通过染色体DNA介导的.
作者：张宏梅；石磊；李琳 刊期： 2004年第05期
目的研究家蝇抗菌肽的抗菌活性及抗菌机制.方法用损伤感染的方法诱导家蝇幼虫表达抗菌肽,通过Sephadex过滤层析和HLPC技术纯化提取,用平板法和稀释法作抗菌活性试验,并用电子扫描技术研究抗菌肽的抗菌机制.结果家蝇抗菌肽对铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)均有明显的抗菌活性.大肠埃希氏菌与50μg/ml的纯化抗菌肽溶液一起37℃孵育60min后,大肠埃希氏菌不能存活.经电镜扫描观察发现,细菌的细胞膜出现破损和穿孔现象.结论家蝇抗菌肽具有明显的广谱抗菌活性,对阴性杆菌和阳性球菌均有杀伤作用.抗菌肽的抗菌机制是通过破坏细菌的细胞膜而杀伤细菌的.
作者：周义文；尹一兵；涂植光；陈辉；张雪梅；孟江平；朱旦 刊期： 2004年第05期
目的了解浙江省产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阴沟肠杆菌的基因型分型.方法根据Gen-Bank颁布的序列,设计TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、OXA-2和OXA-10的通用引物,对53株表型筛选为产ESBLs的阴沟肠杆菌进行PCR检测,并克隆测序.表型与基因型不符的菌株用改良的三维试验法进行检测.结果结果显示53株阴沟肠杆菌中34株扩增到SHV型、CTX-M-1组、CTX-M-9组ESBLs基因型,常见的基因型是CTX-M型,共有29株,占54.72%.CTX-M-1组以CTX-M-14多见(20株),其次为CTX-M-13(3株)和CTX-M-24(3株).CTX-M-9组均为CTX-M-22(5株).SHV PCR扩增阳性有6株,均为SHV-12.有16株TEM PCR扩增阳性,序列分析证实均为TEM-1型广谱酶,未发现TEM型ESBLs.有2株细菌同时产两种以上ESBLs.结论浙江省阴沟肠杆菌中ESBLs基因型主要是CTX-M型.
作者：周志慧；顾群颖；李兰娟；俞云松 刊期： 2004年第05期
格尔德霉素(GA)是一种抗生素,它的作用靶点是热休克蛋白Hsp90 N末端的ATP/ADP结合位点.在我们对抗病毒的抗生素筛选中,发现格尔德霉素显著抗单纯疱疹病毒1型(HSV一1).体外在Vero细胞内GA显著抑制HSv-1的复制,IC50为0,093μmol/L,GA对Vero细胞的毒性CC50为350μmol/L,治疗指数可达3763.HSV-1腹腔(ip)感染1h后腹腔(ip)注射GA(0.093～0.37mg/kg)可以将存活率增加到67%～100%,皮下(sc)给药(0.37mg/kg)的存活率为43.8%,都明显高于生理盐水对照组(ipP＜0.001.scP＜0.05).GA对小白鼠的急性LD50为15.5mg/kg(ip).格尔德霉素不影响病毒的吸附、穿人.由于GA在体内外都能抑制单纯疱疹病毒1型,GA可以成为新的抗单纯疱疹病毒感染的药物.
作者：李玉环；陶佩珍；于莲；曲有乐；刘玉珍；蒋建东 刊期： 2004年第05期
从安普霉素产生菌S.tenebrarius H6总DNA中已克隆得到8.2kb的安普霉素抗性基因连锁片段.对距离抗性基因下游4.5kb的SacI-Sau3AI片段进行测序分析,发现了一个新的891bp开放阅读框架.推测其编码为296个氨基酸的蛋白质.经BLASTX程序分析,没有发现与之同源的基因,是一个新基因,该基因命名为aprG.构建基因阻断穿梭载体pSPU58,经接合转移导入S.tenebrariusH6,筛选单交换阻断变株,并用Southern blot验证阻断变株的aprG已经被破坏.经发酵分析,阻断变株不再合成安普霉素,表明aprG与安普霉素生物合成直接相关.
作者：王新路；夏焕章；程杉；张小波 刊期： 2004年第05期
目的评价体外试验敏感的头孢他啶对大鼠产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯氏菌肺炎的体内治疗效果.方法选取临床分离的产ESBLs的肺炎克雷伯氏菌2株,体外试验对头孢噻肟耐药,对哌拉西林/三唑巴坦敏感,对头孢他啶分别为:第1组敏感;第2组耐药,建立2组大鼠肺炎模型.每组随机分为5个亚组,分别注射生理盐水及上述三种抗生素,治疗96h后评价治疗效果.结果第1组:哌拉西林/三唑巴坦亚组、头孢他啶亚组死亡率、肺组织匀浆活菌计数(lgCFU/g)(10.79士2.80、11.14±3.1 8),明显低于头孢噻肟、对照亚组(15.97±5.52、15.70士5.57)(P＜0.05).第2组:哌拉西林/三唑巴坦亚组死亡率、肺组织匀浆活菌计数(10.38-±2.42)明显低于对照、头孢噻肟亚组(14.16士5.58、15.32±4.91)(P＜0.05).头孢他啶亚组死亡率、肺组织匀浆活菌计数(11.53士2.75)与对照、头孢噻肟亚组无显著性差异(P＞0.05).结论体外试验敏感的头孢他啶治疗大鼠产ESBLs的肺炎克雷伯氏菌肺炎,可以降低死亡率、减少肺组织匀浆活菌计数,与哌拉西林/三唑巴坦作用相当.
作者：王炜芳；刘又宁 刊期： 2004年第05期
目的从人单个核白细胞和子宫颈及子宫内膜粘液酸溶性提取物中分离纯化新的抗菌肽.方法电泳凝胶琼脂糖弥散法分析rlL-2刺激培养的人单个核白细胞和子宫颈及子宫内膜粘液酸溶性提取物抗菌组分,用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳初步分离并制备电泳纯的各抗菌组分,反相高压液相色谱技术进一步纯化,琼脂糖弥散法分析其抗菌活性,Tricine-SDS-PAGE鉴定其纯度和分子量,用Edman降解法进行氨基酸序列测定.结果从刺激培养的人单个核白细胞分别纯化出HLP-2/23、HLP-3/21两个抗菌肽分子,分子量分别是7.84和16.86ku;从子宫颈粘液及子宫内膜粘液分别分离纯化出HCP-1/21、HUP1/38两个抗菌肽分子,分子量分别为1 3.89和5.95ku.测定HLP-3/21分子的前10位N端氨基酸序列为PKRKAEGDAK.结论人体抗菌肽分子存在多样性,HLP-2/23、HLP-3/21、HCP-1/21和HUP1/38可能为新的抗菌肽分子.
作者：黄宁；张舒；杨华蓉；王莉莉；张旗；冯云；吴琦；王伯瑶 刊期： 2004年第05期
目的评价左氧氟沙星目前的耐药情况,并与其他药物做比较,为临床合理选药提供客观依据.方法收集近3年临床分离的细菌,包括459株革兰氏阳性球菌及767株肠道外的革兰氏阴性杆菌及1554株肠道致病菌.致病菌对抗生素的敏感性测定均采用NCCLS推荐的K-B法,应用WHONET5软件进行药敏统计和分析.数据统计学处理采用Stata软件.结果左氧氟沙星对各种细菌的耐药率:①对苯唑西林耐药葡萄球菌耐药率为44.5%,与CPLX、CLDM相当,低于PCG、EM、ST;②对苯唑西林敏感葡萄球菌2.6%,与糖肽类及头孢菌素类无差别,而低于PCG、EM、ST及CPLX;③对肠球菌30.0%,高于VM、TEC,与AMPC无差别,低于PCG、EM及CPLX;④对链球菌10.9%,仅高于VM,与AMPC、CTX、TEC无差别,低于PCG、EM、CLDM、ST;⑤对阴性菌的大肠埃希氏菌47.0%,高于IMP、CMZ、AMK、CPE、三代头孢菌素,AZ及CEZ,与CPLX、GM相当,低于AMPC、PIPC;⑥对肺炎克雷伯氏菌10.4%,高于IMP、CAZ、CPE、AMK,而低于AMPC,与其它抗生素无差别;⑦对气单胞菌无耐药,低于CPZ/SB、AMPC、PIPC、CEZ、CMZ、IMP及CTX,与其它抗生素无差别;⑧对不动杆菌属7.3%,低于AZ、AMPC、CEZ、CMZ,与其它抗生素无差别;⑨对ESBL阳性菌58.3%,高于IMP、CPE、CAZ、AMK、CMZ、CPZ/SB,与三代头孢菌素、AZ、CPLX等相当;低于AMPC.对弗氏志贺氏菌高于三代头孢菌素,对索氏志贺氏菌、弧菌属与沙门氏菌与三代头孢、其他氟喹诺酮类药物及FOM无差别,低于AMPC及ST.结论临床分离的苯唑西林敏感葡萄球菌、肠球菌及链球菌、肺炎克雷伯氏菌、气单胞菌、不动杆菌属及各种肠道致病菌均可考虑选用LVLX经验治疗.
作者：曲芬；崔恩博；鲍春梅；徐军；何江英；毛远丽 刊期： 2004年第05期
目的研究临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯氏菌的耐药表型及其同源性.方法利用E试验测定菌株的MIC,脉冲场电泳(PFGE)技术进行基因分型.结果大部分菌株属于多重耐药株,但均对亚胺培南敏感,PFGE分型可分为26型.结论该院存在多克隆株的小型传播,PFGE是一种可靠的基因分型方法.
作者：姚芬；陈淑贞；蔡应木；钱元恕 刊期： 2004年第05期
谷胱苷肽-S-转移酶-π(GST-π)的活性在某些类型的癌症患者中有显著的升高并且在癌症细胞对抗癌药物抗药性的形成过程中起着重要的作用.抑制过量表达的GST-π酶的活性将有助于克服肿瘤细胞的耐药性,因此,GST-π被认为是一个潜在的药物作用的靶位点.为了筛选新的抗癌药物的增敏剂,我们建立了一个GST-π酶抑制剂的高通量筛选模型,该模型以CDNB和GSH为底物,在96-孔板上通过对340nm处吸光度的变化来检测样品对GST-π酶的抑制活性.经过初筛和复筛,从4800个微生物发酵提取物中筛选到10个阳性样品,阳性率为0.2%.
作者：李韶菁；张嫡群；董悦生；张华；郑智慧；路新华；任培君；刘梅；石英 刊期： 2004年第05期
目的调查我院重症监护病房(ICU)引起呼吸道感染的致病菌菌群分布及其耐药情况.方法将2000年5月～2003年9月我院重症监护病房送检的呼吸道标本中接种于血培养基和巧克力培养基,分离出的致病菌用VITEK AMS-60鉴定,药敏用K-B法.结果共分离出494株致病细菌,其中革兰氏阴性杆菌307株占62.1%,革兰氏阳性球菌187株占37.9%.革兰氏阴性杆菌中铜绿假单胞菌122株,肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌52株,鲍氏不动杆菌44株,嗜麦芽寡养单胞菌27株,阴沟肠杆菌23株.革兰氏阳性球菌187株,其中金黄色葡萄球菌115株,凝固酶阴性葡萄球菌52株,粪肠球菌14株.药敏试验结果提示各主要致病革兰氏阴性杆菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶敏感性较高;各主要致病革兰氏阳性球菌对万古霉素、替考拉宁、氯霉素的敏感性较高.结论铜绿假单胞菌是引起我院重症监护病房病人呼吸道感染的主要致病革兰氏阴性杆菌,金黄色葡萄球菌为主要致病革兰氏阳性球菌.各主要致病菌均耐药严重且呈多重耐药,提示合理运用抗生素,对提高临床治疗效果,有效控制病人的感染尤为关键.
作者：崔颖鹏；陈冬梅；巩林静；郭振林；建美；曾燕 刊期： 2004年第05期
根据普那霉素的生物合成途径对普那霉素产生菌始旋链霉菌进行推理选育,原始出发菌株Streptomyces pristinaespiralis ATCC25486经过12次单菌落分离,其间经历5次UV诱变并分别筛选0.1%AAr突变株、0.3%AAr突变株、0.1%VHr突变株、200u/ml KTMr突变株、0.1%DOGr突变株,获得了突变株5.p,ristinaespiralis 12-55,其生产能力较原始出发菌株S.pristinaespiralis ATCC25486提高了100倍,达到3000u/ml.传代试验表明普那霉素高产突变株S.pristinaespiralis 12-55的高产性能遗传特性稳定.
作者：金志华；吴亚铭；金一平；岑沛霖 刊期： 2004年第05期
柱切换HPLC法同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸浓度.血浆样品加头孢羟氨苄为内标,用乙腈沉淀蛋白及二氯甲烷反洗,水相进样后经在线净化,由流动相洗脱切入C1e分析柱进行分离测定.阿莫西林和克拉维酸线性范围分别为o.5～16和o.25～5μg/ml,净化回收率分别为92.8%～95.2%和77.3%～80.8%,方法回收率分别为94.0%～96.1%和88.9%～97.6%,日内RSD分别为0.63%～1.61%和1.45%～2.94%,日间RSD 2.30%～5.31%和5.02%～7.37%.本法准确可靠,已应用于阿莫西林克拉维酸钾分散片人体药动学研究.
作者：黄英；邹远高；梁茂植；秦永平；余勤 刊期： 2004年第05期
目的应用复合聚合酶链反应(复合PCR)-膜芯片技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素(SM)的耐药性.方法设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和rrs的寡核苷酸探针制作膜芯片,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的rpsL和rrs基因复合PCR产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较.结果52株结核分枝杆菌临床分离株中,9株敏感株rpsL和rrs基因的SSCP图谱、膜芯片杂交结果与标准株完全相同;43株耐SM菌株中,33株存在rpsL基因43位密码子AAG→AGG突变,5株有rrs基因513位A→C突变,1株有rrs基因513位A→T突变,突变率为90.7%.结论膜芯片技术检测结核分枝杆菌耐SM基因型灵敏度高、特异性强、简便、快速,可用于临床耐药性检测.
作者：梁建琴；吴雪琼；曹立雪；李洪敏；张俊仙 刊期： 2004年第05期
由于抗生素存在一定的毒副作用及病原菌不断产生的耐药问题,研发新型抗菌药物十分必要,从基因水平利用新方法寻找新型抗菌药物是目前的研究热点.对于这种方法,靶位的寻找十分重要,肽脱甲酰基酶(PDF)在原核生物蛋白质合成过程中具有十分重要的作用,普遍存在于大多数病原体中,而不存在于人体细胞中,易于在体内外检测,是一个较理想的靶位.本文对其功能、生化特性及其抑制剂的研发进行综述.
作者：幺山山；曾明；金少鸿 刊期： 2004年第05期
目的调查医院细菌耐药状况,为临床选择用药提供依据.方法分别对人选病例的感染部位、细菌分布和耐药性进行回顾性调查.结果主要导致感染的细菌依次为大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌;易感染的部位依次为呼吸系统、泌尿系统;易感染人群为老年人、患严重基础疾病者.革兰氏阴性菌占74.4%,革兰氏阳性菌占25.6%.结论阿米卡星、亚胺培南、多粘菌素、头孢唑林、阿奇霉素和万古霉素有较高的敏感率.
作者：张华金；王焕勤；苑广盈 刊期： 2004年第05期
