目的从污染海域筛选非临床氯霉素耐药株,研究耐药基因定位及耐药机制多样性.方法TCBS和EMB选择平板筛选,结合16S rDNA序列分析鉴定耐药株.MIC测定、基因组DNA-RAPD分型和质粒消除评估多样性.结果评估187株氯霉素耐药株的MIC值分布、属种分布、耐药基因定位及耐药机制.发现80株耐药MIC 25～128μg/ml是CLSI/NCCLS(1995年)定义临床标准(MIC 12.5μg/ml)的2～10倍,分布在弧菌科和肠杆菌科主要属种;58株MIC＞25μg/ml基因组DNA-RAPD分型与菌落表型分组结果吻合,显示多样性丰富.采用多轮高温(～43℃)和高浓度(～1%)SDS双重处理和交替培养,77株MIC＞25μg/ml分离株的质粒消除效率为28.6%;55株不能消除耐药表型,暗示染色体编码耐药基因;22株可消除氯霉素耐药表型,其中16株完全消除,暗示质粒独立编码耐药基因,6株部分消除,暗示质粒和染色体分别编码耐药基因.结论来自污染海域环境的非临床氯霉素耐药株可作为新模型,提供耐药基因定位及耐药机制多样性的新视野.
作者：孟繁梅；汪凯；潘子强；尹德胜；艾云灿 刊期： 2006年第07期
目的研究金霉素对SD大鼠生产和免疫性能及肠道微生物区系的影响.方法选用普通级21d SD大鼠30只,随机分为金霉素组和对照组,金霉素组按每100g体重29mg每天灌服水溶性金霉素,对照组每天灌服生理盐水,灌服体积均相同.饲养期28d,分别在试验的0、d7、d14、d28对大鼠各个称重并计算耗料量确定每周的平均日增重(ADG)及料肉比(F/G).试验结束从两组各随机取四只大鼠,测定空肠和盲肠内容物中乳酸菌及双歧杆菌的数量,其余大鼠经腹股动脉取血、处死并摘取胸腺和脾脏,计算免疫器官指数,测定血清中IL2、IL6、TNF-α、IgG、血清尿素氮(BUN)、总甘油三酯(TG)和总蛋白(TP)的含量.结果两组大鼠空肠和盲肠中乳酸菌及双歧杆菌数量的差异均不显著(P＞0.05),但金霉素使乳酸菌及双歧杆菌的数量均有下降的趋势.在整个生长期金霉素对大鼠的ADG、F/G、免疫器官指数及血清IL2、IL6、TNF、IgG、BUN、TG和TP的含量与对照组相比差异均不显著(P＞0.05).结论金霉素对SD大鼠生产和免疫性能及肠道微生物区系无显著影响.
作者：康萍；刘建高；印遇龙；张友明；黄瑞林 刊期： 2006年第07期
目的评价苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点在判断凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)甲氧西林耐药性中的准确性.方法苯唑西林(1μg)和头孢西丁(30μg)纸片扩散法测定149株临床分离的CNS对甲氧西林的耐药性,量取两种纸片的抑菌环直径.对苯唑西林组分别以≤14mm、≤15mm、≤16mm、≤17mm(CLSI/NCCLS 2004标准)为耐药折点,对头孢西丁组分别以≤21mm、22mm、≤23mm、≤24mm(CLSI/NCCLS 2004年标准)为耐药折点,与mecA基因检测结果比较,评价两种纸片扩散法在各折点对耐甲氧西林CNS判断的敏感性和特异性.结果与mecA基因检测结果比较,苯唑西林纸片扩散法在不同的耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为52.3%、75.0%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为66.7%、79.0%、90.1%、97.5%,特异性分别为100%、100%、100%、94.4%;头孢西丁纸片扩散法在不同耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为45.5%、70.1%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为83.6%、91.8%、97.3%、100%,特异性都为100%.结论苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林CNS的现行耐药折点标准在判断表皮葡萄球菌和非表皮葡萄球菌CNS的甲氧西林耐药性中都有很高的敏感性和特异性,适用于CNS对甲氧西林耐药性的判断.对于非表皮葡萄球菌CNS,头孢西丁纸片扩散法较苯唑西林纸片扩散法结果更可靠.
作者：刘庆中；王赛芳；周铁丽；李超 刊期： 2006年第07期
目的探讨革兰阴性菌败血症临床特点和致病菌耐药性的变化,指导临床诊断和合理用药.方法回顾性分析了我院1999年3月至2004年6月诊断为革兰阴性菌败血症的所有病例.结果革兰阴性菌败血症主要分布于感染科、血液科和ICU;前三种菌分别为大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌.革兰阴性菌出现多重耐药且耐药水平增高.结论感染科、血液科和ICU是革兰阴性菌败血症的高发科室;革兰阴性菌出现多重耐药且耐药水平增高,应重视革兰阴性菌败血症的防治,开展常规产酶菌的检测,指导抗生素合理应用.
作者：陈迎晓；李庆兴；王邦松；郑明华 刊期： 2006年第07期
目的了解临床分离的铜绿假单胞菌中β-内酰胺类抗生素耐药相关基因的存在状况.方法自临床分离20株铜绿假单胞菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因(blaTEM、blaSHV、blaOXA.10、blaPER、blaVEB、blaGES、blaCARB、blaIMP、blaVIM、blaDHA、blaMOX、blaFOX和oprD2).结果20株中blaTEM阳性20株(100%)、blaGES阳性20株(100%),5株oprD2基因缺失(25%),其余基因均阴性.结论临床分离的铜绿假单胞菌blaTEM及blaGES基因携带率高.从铜绿假单胞菌中检出blaGES基因为国内首次报道.
作者：付建荣；刘群；张艳红；刘金伟；刘静；李建 刊期： 2006年第07期
目的研究酮康唑胶囊的人体相对生物利用度和生物等效性.方法健康志愿者20名,随机双交叉单剂量口服酮康唑胶囊的试验制剂和参比制剂,剂量分别为400mg,剂间间隔为2周.分别于服药后24h内多点抽取静脉血,用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆中酮康唑的浓度.用DAS程序计算相对生物利用度并评价两种制剂生物等效性.结果单剂量口服试验和参比制剂后酮康唑的cmax分别为(13.69±1.03)mg/L和(13.20±1.34)mg/L,tmax分别为(1.50±0.23)h和(1.50±0.23)h,AUC(0-24)分别为(101.39±16.26)mg·h/L和(94.52±17.43)mg·h/L,AUC(0-inf)分别为(105.73±17.85)mg·h/L和(97.67±18.01)mg·h/L;cmax的90%可信区间为100.93%～107.00%,AUC(0-24)的90%可信区间为101.19%～114.27%,AUC(0-inf)的90%可信区间为101.45%～115.78%.结论试验制剂与参比制剂的人体相对生物利用度为(108.7%±16.0)%,试验制剂与参比制剂具有生物学等效性.
作者：黄成坷；邱相君；徐鹏；胡国新；代宗顺 刊期： 2006年第07期
目的静脉注射不同剂量的去甲万古霉素,了解其在耐青霉素肺炎链球菌引起的兔脑膜炎模型中的脑脊液透过率;比较不同剂量药物的杀菌效果;同时研究去甲万古霉素与磷霉素联合用药在体内、体外是否具有协同作用.方法脑膜炎模型的建立参照Dacey和Sande的方法并做了改进;抗生素浓度的测定采用微生物效价测定法;体外联合药敏实验采用棋盘设定微量肉汤稀释法.以8h内的平均杀菌率评估体内联合用药.结果在兔脑膜炎模型中,去甲万古霉素的脑脊液透过率为19.6%;40mg/kg去甲万古霉素单次静脉注射(0h)平均杀菌率为(-0.93±0.26)△lgCFU/(ml·h);20mg/kg去甲万古霉素两次静脉注射(0,4h)平均杀菌率为(-0.57±0.45)△lgCFU/(ml·h).体外联合药敏实验表明磷霉素与去甲万古霉素联合应用表现为相加作用占25%,无关作用占75%,无协同或拮抗作用.体内三种不同剂量的磷霉素与去甲万古霉素联合应用,三组的平均杀菌率分别为(-0.45±0.21)△lgCFU/(ml·h)、(-0.46±0.25)△lgCFU/(ml·h)、(-0.42±0.28)△lgCFU/(ml·h),三者之间无明显差别.结论在耐青霉素肺炎链球菌致脑膜炎的兔模型中,去甲万古霉素的脑脊液透过率与万古霉素相似,但同等剂量条件下,去甲万古霉素的杀菌效果明显好于万古霉素.磷霉素不适于单独治疗耐青霉素肺炎链球菌所致脑膜炎,体外及体内实验证实磷霉素与去甲万古霉素联合应用分别表现为无关作用和拮抗作用.
作者：段宪武；张杰；马越；李景云；裴迎华 刊期： 2006年第07期
群体感应(quorum-sensing,QS)系统是细菌依赖于群体密度的信号交流机制,细菌依靠该机制对外界环境变化作出协调统一的应答.目前对铜绿假单胞菌的QS系统已有较深入的研究,该菌的QS系统由两种相互作用的酰化高丝氨酸内酯(AHL)及非-AHL分子调节系统组成,在转录或转录后水平上对细菌的群体行为作出调节.针对QS系统的抗生素将为治疗细菌生物膜感染带来广阔前景.
作者：杨华；余加林 刊期： 2006年第07期
头孢曲松钠属于第三代半合成头孢菌素类抗生素,在抗菌药物中占有非常重要的地位.本文着重介绍头孢曲松钠的发展现状、制备工艺及各种操作条件对产品质量的影响情况,并对今后的发展前景作了展望.
作者：张春桃；王静康；王永莉 刊期： 2006年第07期
目的通过观察磷霉素对腹泻病原菌的敏感性及临床疗效,寻找一种方便且有效的抗感染性腹泻的药物.方法检测腹泻患者培养阳性的病原菌2792株,用KB法药敏试验后,比较磷霉素与其他抗生素对腹泻病原菌的敏感率,并观察磷霉素临床治疗急性腹泻40例的效果.结果磷霉素对腹泻病原菌的敏感率达96.9%,显著高于广谱青霉素类、喹诺酮类和氨基糖苷类(P＜0.001),与第三代头孢菌素相当(P＞0.05).2000年到2004年的5年间,磷霉素的耐药率无升高(P＞0.05).磷霉素治疗腹泻的治愈率达到100%,细菌转阴平均时间为3d.结论磷霉素对腹泻病原菌有较好的敏感性和临床治疗效果,用药方便,即可以口服,也可静脉用药或序贯治疗,提示磷霉素可作为治疗腹泻的选用药物.
作者：鲍春梅；曲芬；崔恩博；郭桐生 刊期： 2006年第07期
目的明确重症监护病房(ICU)获得性感染的细菌病原学及耐药性,指导临床经验性使用抗菌药物.方法对我院2004年1月～12月ICU患者医院获得性感染细菌及其对抗细菌药物的耐药性进行回顾性调查.结果ICU获得性感染病原菌多为耐药菌,其中革兰阴性菌86.5%,占13.5%;革兰阴性菌中以铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、乙酸钙不动杆菌及肠杆菌为主;革兰阳性菌主要以葡萄球菌属为主.大多数革兰阴性菌仍对亚胺培南/西司他丁及美罗培南保持较高的敏感率,其次为β-内酰胺酶抑制剂,革兰阳性球菌仅对万古霉素敏感.结论依据细菌病原学及抗菌药物敏感性结果,选择抗菌药物,减少新的耐药株的出现.
作者：梁名吉 刊期： 2006年第07期
目的检测氟喹诺酮类药物对肠球菌的突变选择窗,判断左氧氟沙星和加替沙星的防突变浓度(MPC)是否有临床意义.方法在血琼脂平板接种≥1010CFU/ml肠球菌,35℃,5%CO2,72h后观察是否有细菌生长.记录没有细菌生长的高稀释倍数.结果约70%肠球菌的MPC小于其高血药浓度,加替沙星抑制肠球菌生长的能力强于左氧氟沙星.
作者：康梅；陈知行；俞汝佳；陶传敏；吕晓菊 刊期： 2006年第07期
目的制备抗金霉素(CTC)的单克隆抗体(mAb).方法采用甲醛作为连接基,将CTC与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,以ELISA法对杂交瘤细胞的稳定性和mAb的特性进行鉴定.结果获得1株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞1H4-C4-C10,间接ELISA方法测定,细胞上清抗体效价为1:1000,腹水效价为1:5 ×105,为IgG1,与四环素交叉反应率为44.4%,与土霉素的交叉反应为8.2%.体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定.结论成功制备了针对CTC的mAb,为进一步研制检测CTC的ELISA试剂盒奠定了基础.
作者：孟丽丽；齐孟文；冯才伟；王琳 刊期： 2006年第07期
稀有放线菌属于革兰阳性细菌,具有重要的应用价值.目前对绝大多数稀有放线菌还没有合适的遗传操作系统.本文报道利用脉冲电泳技术和碱变性方法,对土壤中新分离的约200株稀有放线菌的遗传物质进行了检测.结果显示,除约20个菌株的染色体可能为环型结构外,其余染色体为线型结构.在检测到的染色体外遗传因子中,包括在诺卡菌属菌株中检测到1个线型质粒、4个环型质粒和1个噬菌体,此外,在链孢囊菌属中首次检测到1个质粒.这些遗传因子的发现,为发展稀有放线菌类群的遗传操作体系提供了基础.
作者：田永强；褚以文；赵国屏；覃重军 刊期： 2006年第07期
头孢菌素C是工业上制备半合成β-内酰胺类抗生素的重要原料.头孢菌素C生物合成途径中的后一步是将脱乙酰头孢菌素C在乙酰转移酶的作用下形成头孢菌素C,编码催化这一步骤的乙酰转移酶的基因是cefG.由于cefG在染色体上具有内含子,通过RT-PCR的方法从头孢菌素产生菌顶头孢霉总RNA中获得了约1.1kb的cefG基因,将cefG基因克隆到大肠埃希菌质粒pET28a进行表达,SDS-PAGE电泳显示有明显的条带,体外活性测试表明表达产物能将脱乙酰头孢菌素C转化成头孢菌素C.
作者：陈丹；袁宁；胡又佳；朱春宝；赵文杰；朱宝泉 刊期： 2006年第07期
对红霉素发酵培养基进行了优化,选用A粉和B粉代替原工艺中的淀粉及部分葡萄糖和豆饼粉.采用正交试验设计方法,确定佳发酵培养基配方,并考察了中间补料方案.经10吨发酵罐连续8批验证,平均发酵效价提高6.11%,产品质量全部合格,原材料消耗成本可降低20%以上.
作者：张金国；刘翔 刊期： 2006年第07期
通过测定头孢菌素C发酵液的粘度,研究非牛顿体系的流变特性,根据体系的凯松流体模型确定本构方程.
作者：鲍建芝；李杰；张晓艳；陈尧；曹云峰；卢华；安志强；董荣梅 刊期： 2006年第07期
将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆至质粒载体pMK4中,构建成表达载体pMK4-LV,并将表达载体pMK4-LV转化青霉素生产菌株--产黄青霉的原生质体,获得转化子.经发酵实验表明,vgb的表达可以使产黄青霉的生物量提高9.76%,青霉素的产量提高9.68%.
作者：李兵；李术娜；周艳芬；赵晓瑜；朱宝成 刊期： 2006年第07期
目的研究抗病毒药物西多福韦合成方法.方法以胞嘧啶为起始原料,经六步反应合成西多福韦.结果目标化合物总收率23.1%,结构经1H-NMR和MS确证,HPLC纯度在99%以上.结论用本法合成西多福韦,原料易得,操作简便,易于工业化生产.
作者：易红；李卓荣 刊期： 2006年第07期
考察大孔树脂对红霉素发酵液的脱色作用,详细研究了工艺条件对树脂脱色能力的影响.实验结果表明,在室温下,以1BV/h的流速进行吸附时,D293树脂对红霉素发酵液具有良好的脱色效果,处理量为10BV时,脱色率为68%;并对树脂再生条件作了研究.
作者：宋应华；朱家文；陈葵 刊期： 2006年第07期
目的建立一种适宜基层地区的快速分析多种喹诺酮类药物的HPLC法.方法色谱柱Alltech Alltima C18(150mm×4.6mm,5μm);柱温为室温;流动相:柠檬酸(0.2mol/L):(甲醇:乙腈=3:1)(84:16);流速1.0ml/min;检测波长275nm;进样量10μl.结果帕珠沙星、洛美沙星、左氧氟沙星的线性范围分别为0.08～0.40mg/ml、0.04～0.20mg/ml和0.04～0.20mg/ml;平均回收率分别为99.3%、98.6%、101.1%;低检测限分别为33.0、8.2和9.6ng.结论本方法快速简便,准确度可靠,可作为快速检验帕珠沙星、洛美沙星、左氧氟沙星制剂含量的方法.
作者：王野；刘峥；刘峰 刊期： 2006年第07期
目的建立血清中甲磺酸帕珠沙星浓度的反相高效液相色谱分析方法.方法取待测血清,加入内标甲醇溶液适量,加入甲醇沉淀蛋白,离心后取上清液进样测定.结果将帕珠沙星峰面积(A)和内标诺氟沙星峰面积的比值(Y)对浓度(C)进行回归,得回归方程.线性范围为10～50000 ng/ml(r=0.9996,n=10).低、中、高三种浓度的绝对回收率均大于80%,相对回收率在96%～104%,日内、日间RSD分别小于3.2%和3.7%.结论本法具有灵敏、准确、测定成本低、操作简便等优点,适用于临床药动学及常规血药浓度监测.
作者：蒋心惠；范琦；张丹；袁佩 刊期： 2006年第07期
目的建立注射用氟氯西林钠氨苄西林钠含量的HPLC测定方法.方法使用C1s柱,以磷酸二氢钾(0.1mol/L):十二烷基硫酸钠(0.012mol/L):甲醇:乙腈(280:300:200:220)(用磷酸调pH值至2.8)为流动相,检测波长为225nm.结果氟氯西林钠与氨苄西林钠的线性范围均为0.03～0.60mg/ml,r均为0.9999.氟氯西林平均加样回收率为99.9%,RSD为0.6%(n=9);氨苄西林钠平均加样回收率为99.9%,RSD为1.2%(n=9).结论该方法简便、准确、灵敏度高,同时对产品中的有关物质能进行准确控制.
作者：邢亮彬；张菁；高燕霞 刊期： 2006年第07期
