随着抗生素的开发与使用,细菌在对多种抗生素的适应过程中逐渐发展出对抗生素耐药的反应机制.TolC是药物排出转运体系的外膜成分,与AcrAB一起形成主要的药物排出泵,有关其表达量与耐药间的关系目前尚不清楚.试验将tolC克隆到pET-32a载体上进行诱导表达,镍柱纯化,免疫新西兰大白兔,获得1∶4000的抗血清.Western blotting分析表明,TolC的表达量在耐四环素的大肠埃希菌K-12中比对照组提高50%.细菌TolC高表达试验发现,其MIC从100μg/ml提高到200μg/ml.结果说明TolC的表达量与四环素耐药性直接相关,提示细菌可以通过调节外膜蛋白的表达实现对抗生素的耐受.
作者：张丹凤；黄传钟；王三英 刊期： 2007年第11期
目的 调查卡泊芬净治疗肺部真菌感染患者的疗效及安全性.方法 通过回顾性分析,了解卡泊芬净治疗呼吸科重症监护病房(RICU)中肺部真菌感染患者的疗效和不良反应.结果 18例疗效评价病例中,临床有效率为38.9%(7/18).10例侵袭性肺曲霉病患者中,5例临床有效.9例卡泊芬净疗程大于10d者中,7例治疗有效;9例疗程小于7d的患者均治疗无效.2例首选卡泊芬净患者治疗都有效;14例将卡泊芬净作为挽救治疗者中,仅3例临床有效,其中2例为侵袭性肺曲霉病.所有纳入安全性评价的12例患者均未出现临床和实验室的不良反应.结论 卡泊芬净是治疗侵袭性肺曲霉病的安全有效药物,其作为一线抗真菌药物对患者的预后及生存率似乎更有益.
作者：卓超；黎毅敏；钟南山 刊期： 2007年第11期
目的 探讨人感染高致病性禽流感继发多耐药铜绿假单胞菌(MDRP)肺部感染的治疗方法.方法 2006年6月,对1例高致病性H5N1亚型禽流感并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)青年男性患者进行机械通气治疗,随后出现MDRP的肺部感染;病原学药敏结果显示,该株MDRP仅对多黏菌素B和E等少量抗菌药物敏感;遂予以多黏菌素B每日40～100 mg分2次肌肉或静脉注射,并多黏菌素E每日30～50万u分3～4次雾化吸入,使用剂量根据痰菌半定量检测结果进行调整.结果 多黏菌素B全身用药累积疗程33d,累积剂量1760mg;多黏菌素E雾化吸入累积疗程36d,累积剂量1485万u;患者肺部感染得到有效控制;多黏菌素治疗MDRP有效且不良反应较轻,其治疗终点的判断需根据临床和实验室资料进行全面评估.结论 多黏菌素能有效治疗禽流感患者继发MDRP的感染.
作者：周伯平；陆坚；丘晨；吴诗品；宋卫东；杨大国；付应云；高雪；刘雪燕；刘水腾；陆普选；单万水；黎毅敏；袁国勇；钟南山 刊期： 2007年第11期
目的 了解临床分离的54株大肠埃希菌对氨基糖类苷类抗生素的耐药谱及产ESBLs情况,分析氨基糖苷类修饰酶AAC(3)-Ⅱ的检出率及该酶的一些特征.方法 采用MIC法测定临床分离的54株大肠埃希菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱,用NCCLS推荐的酶抑制剂增强纸片扩散法检测产ESBLs菌株,并通过聚合酶链反应、克隆测序和测定重组菌耐药谱对aac(3)-Ⅱ基因进行研究.结果 54株大肠埃希菌对阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为14.8%、77.8%、59.3%、66.7%、68.5%、61.1%、22.2%;共检测出产ESBLs菌株34株,占63.0%;aac(3)-Ⅱ基因在54株大肠埃希菌中检出率为88.5%;质粒转化菌产ESBLs且同时检出aac(3)-Ⅱ基因.重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-Ⅱ对庆大霉素和卡那霉素有耐药性,对其余5种氨基糖苷类抗生素没有表现出耐药性.结论 大肠埃希菌对庆大霉素的耐药率高,对阿米卡星的耐药率低;耐氨基糖苷类抗生素的大肠埃希菌与其产ESBLs有相关性;重组菌BL21(DE3)/pET26:aac(3)-Ⅱ仅对庆大霉素和卡那霉素产生耐药.
作者：陈云波；王震；查长森；邹立林；季敬章；彭颖；吕建新 刊期： 2007年第11期
目的 观察10-23脱氧核酶对细菌TEM-1酶基因表达的抑制作用.方法 PCR扩增TEM-1酶全编码基因,将其连接入pBK-CMV载体中,并在大肠埃希菌JM109中表达.设计并合成针对blaTEM-1的10-23脱氧核酶、反义寡核苷酸,采用氯化钙法将其分别导入表达blaTEM-1的大肠埃希菌中,观察细菌导入脱氧核酶后,在含氨苄西林(100μg/ml)培养基中的生长活力及β-内酰胺酶活性的变化.结果 10-23脱氧核酶导入表达blaTEM-1的大肠埃希菌后,在含氨苄西林(100μg/ml)的培养基中大肠埃希菌的生长活力明显低于反义寡核苷酸和空白对照组,导入脱氧核酶的大肠埃希菌β-内酰胺酶活性也明显低于反义寡核苷酸和空白对照组.结论 10-23脱氧核酶能特异性地抑制细菌blaTEM-1酶基因表达.
作者：刘刚；凌保东；谢勇恩；林丽；赵廷坤；雷军 刊期： 2007年第11期
抗生素的大量使用和滥用所造成的细菌广泛的耐药性迫使科研人员要加速寻找结构新颖的抗生素.抗生素作用靶点的发掘对药物发现非常重要,本文综述了近几年来国际上运用基因组学、基因芯片等现代生物信息学技术,利用细菌体内的各种酶反应与理化特性,发掘抗生素传统作用新靶点如脂肪酸合成酶、非传统作用新靶点如双信号转导调控系统、群体感应器等的研究进展,这对新抗生素的发现具有一定的指导意义.
作者：谢练武；李翔；欧阳永长；姜淑梅；秦岭 刊期： 2007年第11期
在合成培养基中分别添加缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)与亮氨酸(Leu)考察其对必特螺旋霉素生物合成的影响,证明Val、Ile及Leu对必特螺旋霉素多组分的合成有着不同的调节作用.实验结果表明在36h分别添加0.5g/L的上述三种氨基酸,发酵液pH和铵离子浓度存在着显著差异,而Val脱氢酶活性都增加了2～3倍.添加Val使菌体在60h之前糖耗速率加快,达到1.0g/(L·h),胞内丙酮酸积累,丙酮酸羧化酶活性增加20%～95%,柠檬酸合成酶活性降低41%,发酵液中丙酸和丁酸出现先增加后降低的现象,终效价比对照高出45.3%,而总异戊酰组分则降低了23%,其他酰化组分降低了39.6%;添加Ile以后菌体糖耗速率降至对照的30%～40%,柠檬酸合成酶活性降低了47%,发酵液中的乙酸、丙酸、丁酸都出现大量积累的现象.终效价为对照的85%,而丙酰螺旋霉素Ⅲ、乙酰螺旋霉素以及异丁酰螺旋霉素组分含量分别增加126%、50%、296%.添加Leu对初级代谢影响不大,异戊酸在胞外积累,随后被重新吸收利用,终异戊酰基螺旋霉素Ⅱ和异戊酰基螺旋霉素Ⅲ组分分别提高了41%和50%.同时总异戊酰基螺旋霉素相对含量也比对照提高了41.9%,效价和对照基本一致.
作者：李桢林；江维；王永红；郝玉有；储炬；庄英萍；张嗣良 刊期： 2007年第11期
探讨泡沫分离技术有效应用于生物分离过程,指出被分离的生物表面活性物质在体系中的性能研究的重要性.本文以硫酸多黏菌素E水溶液为体系,研究硫酸多黏菌素E浓度、杂蛋白、无机离子、pH值和温度对硫酸多黏菌素E溶液表面张力和泡沫性能的影响,为硫酸多黏菌素E实现泡沫分离提供依据.
作者：孟杰；刘桂敏；赵艳丽；卢珂；吴兆亮 刊期： 2007年第11期
差示扫描量热法(DSC)、傅立叶转换红外光谱(FT-IR)和X-射线粉末衍射(XRPD)研究表明实验室精制得到的头孢曲松钠晶体属单斜晶系,P21/c空间群.在Cerius2工作站SGI IRIX上应用能量小化法确定了头孢曲松钠的晶体结构;基于BFDH、AE模型预测了头孢曲松钠晶体的晶习,其中AE模型预测的晶习与实际生长晶习相近,呈薄片状.实验定性考察了生长环境对头孢曲松钠晶习的影响.
作者：张春桃；王静康；王永莉；陈巍 刊期： 2007年第11期
目的 研究家蝇抗菌肽的分子结构和抗菌谱,寻找广谱高效天然抗菌肽.方法 家蝇被损伤感染诱导免疫后制成组织匀浆,用蛋白质纯化技术分离纯化抗菌肽,测定抗菌活性及抗菌谱,纳升电喷雾飞行时间质谱测定氨基酸序列.结果 家蝇组织提取液经蛋白质纯化,得到一纯化的抗菌活性成份,纳升电喷雾飞行时间质谱测序,得到两个肽段的氨基酸序列:肽段1.QPNLYYNK和肽段2.PNNVYYTK.通过NCBInr蛋白质数据库检索,未发现有与之序列相匹配的蛋白质.该抗菌肽对11种临床标本分离菌株铜绿色假单胞菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、普通变形菌、异形柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、福氏痢疾杆菌、表葡菌、耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和白念珠菌的MIC分别为:3.89、2.22、4.44、6.67、3.33、6.67、5.0、6.67、4.44、4.44和13.33 μmol/L.结论 本文得到的抗菌肽是一个新型抗菌肽,有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有一定的抑制作用.
作者：周义文；申萍；涂植光；尹一兵；陈辉；孟江萍；王小中；陈如山；卢亮；陈正庚 刊期： 2007年第11期
eryA基因直接控制着红霉素母环6-脱氧-红霉内酯B的合成,在红霉素生物合成过程中具有重要作用.本文克隆了eryA基因的启动子PeryA,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,构建了大肠埃希菌-糖多孢红霉菌穿梭型质粒.PEG介导原生质体转化法将穿梭型质粒分别转入糖多孢红霉菌A226与变铅青链霉菌JT46,荧光显微镜检测发现,此启动子在两菌株中都具有功能.随后,以变铅青链霉菌JT46为宿主,对PeryA启动子区域进行了深入研究,结果发现该启动子的-35区并不是必需的,仅有-10区、长度为41bp的该启动子在链霉菌中仍具有功能.定点突变证明-10区对于该启动子是必不可少的.因此,41bp的该启动子片段可作为链霉菌的有效启动子,这是迄今为止所发现的短的启动子之一,可用于构建新的链霉菌表达载体.
作者：吴杭；张部昌；查向东；孔小卫；马清钧 刊期： 2007年第11期
在筛选新抗真菌抗生素过程中,从福建邵武森林土壤样品中分离得到一株对酵母样真菌有较强抗菌作用的小单孢菌FIM 99-663.经分类鉴定为碳样小单孢菌Micromonospora carbonacea FIM 99-663.该菌株发酵次级代谢产物含三个抗真菌活性组份,主成份为Fw99-663C组份,经提取、纯化,理化性质、光谱学分析发现它与新抑锈病素(neorustmicin)同质.
作者：连云阳；谢阳；魏天恩；程振泰；程元荣 刊期： 2007年第11期
以生物可降解乙交酯和丙交酯的无规共聚物(PLGA)为载体,将硫酸庆大霉素分散在PLGA的有机溶液中,采用复乳溶剂挥发法制备了药物缓释微球.研究搅拌速度、PLGA浓度、乳化剂浓度和硫酸庆大霉素溶液体积对微球粒径的影响,观察微球的表面形貌,测定微球粒径、粒径分布和包封率,评价载药微球的体外释放行为.结果表明,采用甲基纤维素为乳化剂制备的微球形态完整,中粒径为(130±30)μm,微球中硫酸庆大霉素的包封率均在36%以上,平均42%,高达56%.硫酸庆大霉素/PLGA微球具有显著的药物缓释作用,体外释放30d的累积释药率达80%以上.
作者：谭红香；叶建东 刊期： 2007年第11期
目的 建立测定氨苄西林钠新方法.方法 在氢氧化钠介质中,高碘酸钾氧化鲁米诺产生化学发光,氨苄西林钠显著增强该体系的发光,据此建立了一种简单、快速测定氨苄西林钠的流动注射化学发光新方法.结果 在优化的试验条件下,线性范围为0.01～10 μg/ml,检出限(3δ)为3.0ng/ml,对1μg/ml氨苄西林钠进行了11次平行测定,其相对标准偏差为1.4%.结论 将本法用于粉针剂中氨苄西林钠的测定,结果令人满意.
作者：石文兵 刊期： 2007年第11期
