目的 了解新生儿医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌分离株的耐药状况及β-内酰胺酶编码基因TEM、SHV、OXA、PER、GES、VEB、CTX 型存在状况.方法 将我院2004年7月新生儿病房感染的14株肺炎克雷伯菌用全自动微生物鉴定和药敏分析配套卡进行抗生索敏感性检测和 ESBLs检测,并采用聚合酶链反应及序列分析方法分析菌株内的超广谱β-内酰胺酶基因型.结果 14 株产ESBLs的肺炎克雷伯菌药敏结果一致,氨苄西林、头孢曲松、头孢唑林、头孢他啶均耐药对阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦也耐药,对亚胺培南敏感.均检出blaCTX-MM和blaTEM基因,未检出blaSHV、blaOXA、blaPER、blaGES和blaVEB基因.对blaTEM和blaCTX-M基因扩增产物测序,经BLAST程序分析基因为TEM-1和CTX-M-3型.结论 本院感染流行的ESBLs肺炎克雷伯菌耐第三代头孢菌素和耐酶抑制剂,基因类型为TEM-1和CTX-M-3.新生儿属于ESBLs的高危人群,新生儿病房产超广谱β-内酰胺酶菌感染应引起各方关注.
作者：郑亚芬；周惠娜；承晓京；魏梓文 刊期： 2007年第04期
目的 研究TEM-116型ESBL天然酶与重组酶的动力学特性,并比较它们的差异.方法 采用紫外分光光度法检测酶促抗生素水解反应,以Lee-Wilson改良双倒数方程数据处理法进行数据处理,测定天然酶与重组酶的Km、Vmax及kcat.观察温度和pH对酶促反应的影响.结果 以Lee-Wilson改良双倒数方程数据处理法进行数据处理方便而准确地测定了天然酶与重组酶的Km与Vmax并计算出kcat.温度和pH对天然酶与重组酶酶促反应效应相似.天然酶与重组酶优先的底物均为头孢哌酮,其次是头孢氨苄;对氨苄西林、阿莫西林、青霉素和哌拉西林有高的催化效率.结论 天然酶与重组酶的动力学参数无显著差异.
作者：曾贤铭；陈秀枢；王震；吕建新；楼永良；孙长贵；陆永绥 刊期： 2007年第04期
目的 建立二重实时聚合酶链反应(duplex real-time PCR) 快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).方法 采用二重SYBR Green实时PCR快速检测MRSA的决定基因mecA和金葡菌的种特异性基因nuc,经熔解曲线分析鉴定产物.结果 所有MRSA菌株的熔解曲线均呈现mecA、nuc基因特异性的峰,甲氧西林敏感的金葡菌仅有nuc峰,耐甲氧西林的表葡菌仅有mecA峰,甲氧西林敏感的表葡菌与其他菌种的菌株无特异峰出现;当MRSA菌浓度达102cfu/ml时就可检出.在131株金葡菌中,30.53%(40/131)耐药;二重实时PCR扩增mecA基因29.01%(38/131)阳性,nuc基因100%阳性.单引物与二重实时PCR两者阳性扩增符合率为100%.结论 对mecA、nuc基因进行二重实时PCR能准确、快速地鉴定耐甲氧西林的金葡菌和凝固酶阴性的葡萄球菌.
作者：王艳；叶冬青；李家斌；张胜权 刊期： 2007年第04期
目的 研究氨溴索对环丙沙星透过铜绿假单胞菌生物膜的影响.方法 孔径为0.22μm的医用微孔滤膜建立铜绿假单胞菌生物膜的体外模型;用高效液相色谱(HPLC)方法测定环丙沙星透过生物膜的量,并测定在2和0.75mg/ml氨溴索作用后环丙沙星透过细菌生物膜的量.结果 经过7d的连续培养后,铜绿假单胞菌可在微孔滤膜上形成均匀致密的生物膜.环丙沙星可缓慢透过细菌生物膜,8h左右达到平衡;2和0.75mg/ml氨溴索作用后可以明显增加环丙沙星8h内透过生物膜的量.结论 以医用微孔滤膜为载体可建立铜绿假单胞菌生物被膜体外模型;氨溴索可以显著地促进环丙沙星对细菌生物膜的透过.
作者：杨华；余加林；刘官信；陈波曼 刊期： 2007年第04期
目的 总结我院2002年1月至2005年6月送检的2300份成年人脑脊液的培养及药敏情况,供临床诊断和治疗参考.方法 采用美国DADE公司的Microsean Walkaway 40全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏测定.结果 在2300份脑脊液标本中,检出阳性数180份(7.83%),其中细菌144株(革兰阳性菌98株,革兰阴性菌46株),真菌26株,结核分枝杆菌10株.链球菌和肠球菌对青霉素敏感,万古霉素对革兰阳性球菌均有较高的抗菌活性;革兰阴性菌对常用药物头孢噻肟和头孢曲松的敏感性较差,碳青霉烯类、氨曲南对革兰阴性菌有较好的抗菌活性;部分脑膜炎由结核杆菌及真菌所致.结论 本组脑膜炎以院内感染为主,提示临床医生应根据脑膜炎患者的特点,个体化用药,合理使用抗生素.
作者：母丽媛；吕晓菊；马晓波；陈慧莉；陈文昭；过孝静；康梅 刊期： 2007年第04期
目的 研究鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制.方法 对临床分离的3株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌,采用KB纸片扩散法(CLSI/NCCLS 2004年标准)进行药敏试验,三维试验检测ESBLs和AmpC酶,PCR方法检测TEM、SHV、PER、VEB、AmpC、IMP、VIM、OXA-23和OXA-24等9种耐药基因型,PCR阳性产物进行基因测序.结果 在GenBank基因库中比对分析.结果 3株鲍曼不动杆菌为多重耐药菌株,三维试验均产生ESBLs,1株产生AmpC酶,耐药基因型检测3株TEM阳性,2株PER阳性,2株AmpC酶阳性及SHV、VEB和IMP、VIM、OXA-24型等均为阴性;3株OXA-23型均阳性;另外27株对亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌IMP、VIM、OXA-23和OXA-24型检测结果均阴性.结论 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带TEM、PER、非诱导AmpC酶、OXA-23型碳青霉烯酶基因,产生OXA-23型碳青霉烯酶是主要耐药机制.
作者：方平；潘晓龙；周东升；吴祥林 刊期： 2007年第04期
目的 研究酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药表型与基因型.方法 采用琼脂平板稀释法测定97株酿脓链球菌对红霉素、克林霉素、麦迪霉素、阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的敏感性;用双纸片法检测酿脓链球菌耐药表型;用PCR方法检测耐大环内酯的酿脓链球菌携带的耐药基因.结果 97株酿脓链球菌中82株表现为对大环内酯类抗菌药物不敏感,其中42株表现为cMLS型耐药,37株为iMLS型耐药,3株细菌为主动外排M型耐药;82株对大环内酯不敏感的酿脓链球菌中77株检测到耐药基因,其中12株具有ermB基因,25株具有ermTR基因,2株具有mefA基因,21株同时具有ermB/ermTR基因,5株同时具有ermB/mefA基因,3株同时具有ermTR/mefA基因,9株同时具有ermB/ermTR/mefA基因,5株未能检测到三种耐药基因.结论 酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药率较高,耐药表型以cMLS和iMLS为主,耐药基因以ermB和ermTR多见.
作者：肖永红；刘健；王哲；李耘 刊期： 2007年第04期
目的 分析和调查我院2005年1月～12月临床分离34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药特点以及耐消毒剂相关基因携带状况.方法 应用 BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和17种药物敏感试验,头孢哌酮/舒巴坦采用KB法.用PCR方法检测季胺类(如苯扎溴铵)、双胍类(如氯己定)耐药相关基因qacE△l-sull.结果 亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星100%敏感外,对哌拉西林、哌拉西林/三唑巴坦敏感率为48%～54%,对第三代及第四代头孢菌素、氨曲南和哇诺酮类等抗菌活性差,敏感率为3%～29%,对美罗培南敏感率为29%,对氨苄西林/舒巴坦、氯霉素、四环索、复方磺胺甲一(口恶)唑全部耐药.34株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌有14株qacE△l-sull基因阳性,携带率为41.2%.结论 本组亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星敏感外,对其它常用抗生素耐药严重,且耐消毒剂相关基因阳性携带率较高.应引起临床微生物和消毒界的重视.
作者：颜英俊；糜祖煌；刘华；杨洋；张凯；杨明清；黄文方 刊期： 2007年第04期
目的 检测我院近年来临床分离的金葡菌耐消毒剂的qacA基因水平,为动态监测细菌耐药性的变化趋势、有效控制细菌耐药性的传播提供对策.方法 收集我科临床分离的金葡菌共252株,并经本实验室重新鉴定确认.参照美国CLSI/NCCLS标准,用6μg/ml苯唑西林和4%NaCl平板,筛选出耐苯唑西林金葡菌和对苯唑西林敏感的金葡菌.应用PCR基因扩增试验检测金葡菌中耐消毒剂的qacA基因水平.随机抽取一株MRSA阳性株进行基因测序,作qacA基因验证.作qacA基因阳性株的MIC检测,了解阳性株是否有耐药性的表达.结果 共检测金葡菌252株,其中MRSA 84株 (带有qacA基因4株),MSSA 168株(带有qacA基因1株).MRSA阳性菌株对消毒剂的MIC值明显高于MSSA菌株.结论 携带含有耐消毒剂基因qacA的金葡菌未在我院流行.
作者：王华丽；盛家琦；黄文祥 刊期： 2007年第04期
目的 了解克雷伯菌的耐药性及产AmpC菌株同时产ESBLs药敏的变化.方法 采用Vitek 60型和Vitek 32型、纸片扩散法(KB法)测定42株产AmpC酶同时产ESBLs克雷伯菌的药敏结果,并与24株产AmpC酶但不产ESBLs克雷伯菌和138株不产AmpC酶但产ESBLs的克雷伯菌药敏结果对比分析;采用PCR分析产AmpC酶但不产ESBLs肺炎克雷伯菌的AmpC基因型.结果 产AmpC不管是否产ESBLs的克雷伯菌对亚胺培南敏感,对其他抗生素均有不同程度的耐药;单纯产ESBLs时,第四代头孢菌素如头孢吡肟对其活性较好,但产AmpC酶同时产ESBLs时,令头孢吡肟几乎失去活性.肺炎克雷伯菌产AmpC酶但不产ESBLs的20株菌中7株检出blaDHA基因,占35%,1株检出blaMIR基因,占5%.另外同时产AmpC酶和ESBLs的20株肺炎克雷伯菌中100%检出blaTEM基因,90%检出blaCTX-M-1基因,100%检出btaSHV基因,85%检出blaDHA基因,15%检出blaMIR基因,90%检出不同的氨基糖苷类修饰酶基因.结论 克雷伯菌产AmpC酶和同时产ESBLs的耐药性比单纯产AmpC酶的耐药性更高、更显著;肺炎克雷伯菌产AmpC酶的主要基因型为DHA,对同时存在2～6种不同类型耐药基因的克雷伯菌,碳青霉烯类药物亚胺培南的体外活性好.
作者：王冬国；周铁丽 刊期： 2007年第04期
目的 了解近年来我院重症监护病房(ICU)患者铜绿假单胞菌(PA)感染的临床特点及耐药趋势,分析引起ICU铜绿假单胞菌感染的原因,指导临床正确面对PA感染,合理使用抗生素.方法 做细菌培养及鉴定,并以纸片法(KB法)测定7年来333株PA对17种抗菌药的耐药率.结果 共分离鉴定铜绿假单胞菌333株,其中源于呼吸道的260株,占78.1%,居首位;老年性重症患者是PA易感人群;七年来,PA对多种抗生素的耐药率均不同程度增长.结论 铜绿假单胞菌已成为医院感染尤其是ICU感染的主要致病菌,在抗生素治疗过程中极易变异而形成多重耐药,ICU病人机体免疫力低下,是PA的易感人群及重要防治对象;PA的耐药谱较广,临床应慎重选择抗生素;ICU病房应加强消毒隔离措施.阻隔各种可能的传播媒介,避免PA的交叉感染.
作者：刘春林；徐红云；李红；邓德耀 刊期： 2007年第04期
位于细菌细胞膜上的多药外排泵可将多种结构无关药物排出.本文综述了细菌主要外排泵包括初级和次级转运系统的分子生物学特征及外排蛋白结构与药物识别和转运上的关系;同时总结了对外排蛋白进行结构与功能关系研究的主要的方法,包括定点诱变、螺旋空间排列和结晶等.
作者：贾蓓；黄文祥；黄爱龙 刊期： 2007年第04期
细菌对抗菌药物的耐药性机制是生物医药研究的重要领域.2006年抗菌药物耐药机制研究在多方面有重要的发现,如对细菌药物主动外排泵的药物转运结构机制的深入了解及发现新的药物泵或新的泵调控表达机制,发现了喹诺酮类药物修饰酶、质粒介导的喹诺酮耐药性在世界范围内的出现,对金葡菌耐药机制的进一步认识与发现新型抗多重耐药革兰阳性球菌的platensimycin,鲍曼不动杆菌基因多重耐药岛的发现,新型β-内酰胺酶的继续出现以及超广谱β-内酰胺酶开始从食用动物或宠物分离的细菌中证实.本文还讨论了2006年中国细菌耐药机制研究的一些重要结果.这些研究成果继续提示细菌对不同抗菌药物的多种耐药保护机制及细菌本身基因结构的多样性与可移动性使其能进化产生新的耐药机制以适应抗菌药物的作用.严谨合理地应用抗菌药物以大限度地减少细菌耐药性发生及传播和延长抗菌药物的疗效周期是人类所面临的长期挑战.
作者：李显志；凌保东 刊期： 2007年第04期
细菌耐药性,尤其是多重耐药性(multi-drug resistance,MDR)已经成为非常严重的医疗问题,而多种类型细菌外排泵(efflux pumps)的存在是细菌多重耐药的重要机制,因此寻找有应用前景的外排泵抑制剂(efflux pump inhibitors,EPI)是十分必要且迫切的.目前已经发现外排泵抑制剂的作用机制分为;(1)干扰外排泵组装;(2)阻断外排泵能量来源;(3)阻碍底物通过外排通道;(4)机制未知.本文按照作用机制对已经发现的细菌多重耐药外排泵抑制剂的特点进行分述.
作者：刘忆霜；肖春玲 刊期： 2007年第04期
