含2-脱氧链霉胺类(2-DOS)氨基糖苷抗生素是临床常用抗生素.近几年对2-脱氧链霉胺类抗生素的分子水平研究取得重大进展,得到了2-DOS合成中的关键酶基因,以及丁酰苷菌素、妥布霉素、卡那霉素、庆大霉素等部分生物合成基因簇克隆.本文对2-脱氧链霉胺类抗生素生物合成基因研究进展进行了综述.
作者：余永红；夏焕章 刊期： 2008年第03期
采用基因插入失活的方法,将1.5kb安普霉素抗性基因插入1.8kb aveF基因内部SalI位点,构建重组质粒pPC-5,并转化除虫链霉菌D2-14,获得基因工程菌株AV-F1.经HPLC分析,发现该菌株主要产生两个组分,分别为5-酮avermectin 1a和5-酮avermectin 2a,还产生一个小组分为acermectin B1a.5-酮avermectin基因工程菌株的构建成功,为化学合成新的avermectin衍生物提供了可利用的原料来源.
作者：马颖谡；何建勇；张怡轩 刊期： 2008年第03期
本文针对必特螺旋霉素发酵主要组分异戊酰基螺旋霉素以及异戊酰基螺旋霉素Ⅲ的提高,在摇瓶培养基试验中,通过一次性添加与分批添加终浓度为15.4mmol/L的亮氨酸,发现分批添加亮氨酸可以维持效价基本不变,而总异戊酰基螺旋霉素与异戊酰基螺旋霉素Ⅲ分别由对照的31.1%和12.0%提高至46.9%和19.5%.通过分析发酵过程的有机酸以及氨基酸的变化规律,讨论了亮氨酸提高必特螺旋霉素主要组分的作用机理,同时在15L发酵罐中对分批添加亮氨酸添加效果进行了验证试验,结果表明,发酵液必特螺旋霉素组分中总异戊酰基螺旋霉素和异戊酰基螺旋霉素Ⅲ在96h分别提高至59.91%和21.45%.
作者：李桢林；江维；王永红；郝玉有；储炬；庄英萍；张嗣良 刊期： 2008年第03期
目的 从海洋沉积物中分离新型聚酮合酶(PKS)基因簇,并解析其基因结构,为研究PKS的组合生物合成提供新组件.方法 采集中国东海沉积物样本,并提取宏基因组DNA,以其为模板,通过简并PCR扩增新型PKS片段,用地高辛标记正确的扩增片段作为探针,然后从本研究中构建的海洋沉积物样本Fosmid宏基因组文库中筛选完整基因簇,测序、结构分析.结果 (1)所分离得到的海洋沉积物宏基因组DNA可直接作为PCR模板,简并PCR扩增得到26个新型KS编码片段,并成功提交GenBank;(2)所得DNA构建成滴度约5×108cfu/ml的Fosmid文库,插入片段平均长度约为40kb;(3)将其中的一个KS片段(GenBank登录号DQ942531)用地高辛标记并筛选部分文库,得到4个克隆,测序得到7981bp的序列(GenBank登录号EF568935),结构分析发现含典型的I型PKS组件,如酮缩酶(KS)、酰基转移酶(AT)、酰基载体蛋白(ACP)等.结论 简并引物扩增、宏基因组文库筛选、测序、结构分析,在本研究中被证明是有效的分离新PKS基因簇的途径;通过系统进化树分析得出26条新KS片段属于I型KS片断和杂合PKS/NRPS基因簇,主要来自放线菌门、δ变形菌门、蓝藻门和β变形菌门的微生物.
作者：焦豫良；王梁华；董晓毅；宗英；高云；任娜；郭爱芸；张兴群；焦炳华 刊期： 2008年第03期
目的 研究新型聚酮合酶(PKS)基因簇EF568935(Gen Bank登录号)中酰基转移酶(AT)EF080951(GenBank登录号)底物特异性,为PKS的功能研究及组合生物合成研究提供新组件.方法 从酰基转移酶AT-EF080951结构域两端的连接肽区设计引物,通过PCR克隆其结构域基因at-EF080951;连接入原核表达载体pMAL-c2X,与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达;直链淀粉树脂柱亲和层析纯化MBP-AT-EF08095l;融合蛋白用Xa因子切除MBP,得到AT-EF080951单体;以MBP、小牛血清白蛋白(BSA)为对照蛋白,用紫外分光光度法测定MBP-AT-EF080951与AT-EF080951对底物的结合能力,计算结合常数(Ka,μmol/L),分析其结合底物的特异性.结果 (1)MBP-AT-EF080951与底物的结合常数为:甲基丙二酰辅酶A,0.0049±0.001;丙二酰辅酶A,0.0049±0.003;乙酰辅酶A,0.107±0.002;辅酶A,0.005±0.003.(2)AT-EF080951与底物的结合常数为:甲基丙二酰辅酶A,0.005±0.002;丙二酰辅酶A,0.0041±0.002;乙酰辅酶A,0.120±0.001;辅酶A,0.0042±0.003.结论 MBP-AT-EF080951和AT-EF080951都特异性结合乙酰辅酶A,AT-EF080951可能是乙酰转移酶.
作者：焦豫良；王梁华；董晓毅；宗英；高云；任娜；郭爱芸；张兴群；焦炳华 刊期： 2008年第03期
从江西省井冈山土壤样中分离得到的真菌SIIA06-05-201从形态特征、培养特性等方面进行了分类研究,经鉴定该菌株属于梭链孢属真菌中的一株菌株(Fusidium sp.).该菌株经深层发酵产生具有抗葡萄球菌活性的次级代谢产物FA-3.FA-3经UV、IR、MS、1H-NMR和13C-NMR分析测定,其结构与文献报道的梭链孢属(Fusidium coccineum)真菌产生的抗感染化合物夫西地酸(fusidicacid)结构一致.
作者：杜天飞；江世平；王明蓉；代云见；夏永；李军 刊期： 2008年第03期
目的 通过分析耐亚胺培南的铜绿假单胞菌的整合子所携带的耐药基因的种类及特点,探讨其耐药机制,为指导临床用药,预防院内感染和流行病学调查、新药的研发提供参考.方法 根据美国国家临床标准化研究所(CLSI/NCCLS)2004年标准,应用纸片扩散法(KB)进行药敏试验,采用多重PCR方法对临床分离的23株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌进行整合酶(IntI)检测,并分析整合酶阳性菌株的耐药基因盒.结果 药敏试验显示23株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌全部为泛耐株,5株为Ⅰ类整合酶阳性,其中3株为缺失型,无耐药基因盒,其余2株耐药基因为blaVIM4和blaPSE-1;14株为Ⅱ类整合酶阳性,其耐药基因盒均为dfr1-sat1-aadA1;3株Ⅰ、Ⅱ类整合酶均为阳性;7株不含Ⅰ、Ⅱ类整合酶.结论 耐亚胺培南的铜绿假单胞菌大多都具备Ⅰ、Ⅱ类整合酶基因和基因盒.这是造成它们成为泛耐株的重要耐药机制.
作者：肖增璜；石磊；彭毅；徐海波；邱春嫦；叶仲毅 刊期： 2008年第03期
目的 采用meta分析法对现已发表的利奈唑胺和万古霉素治疗MRSA的文献进行综合分析,判断利奈唑胺是否可以替代万古霉素治疗MRSA.方法 全面收集有关利奈唑胺与万古霉素治疗MRSA的研究资料,共入选7篇完全随机对照研究文献,3420例受试病例随机分为利奈唑胺组和万古霉素组,可供分析病例888例,利用RewMan软件对临床治愈率和微生物清除率进行固定效应模型和随机效应模型的meta分析,漏斗图分析发表性偏倚.结果 异质性检验采用x2检验,临床治愈率比较,x2=9.35,P=0.1,大于0.05;微生物清除率比较,x2=18.39,P=0.005,P<0.05.合并效应量的估计:临床治愈率OR合并=2.48(1.68～3.64,Z=4.60,P<0.00001);细菌清除率OR合并=2.68(1.29～5.57Z=2.63,P=0.008).结论 在治疗MRSA所致的感染中,不论是临床治愈率还是细菌清除率,利奈唑胺均优于万古霉素.
作者：肖玲；朱静 刊期： 2008年第03期
目的 调查中国部分地区临床分离铜绿假单胞菌β-内酰胺酶(β-lactamases, BLAs)基因型分布.方法 收集北京、浙江、江苏及湖北等地区5家医院临床分离的165株铜绿假单胞菌,PCR及测序方法检测10种BLAs.结果 165株铜绿假单胞菌114株检出BLAs的基因,总检出率为69.10%,其中TEM、CARB、OXA、PER、VIM、IMP、GES、DHA型的检出率分别为41.21%、15.15%、13.94%、6.67%、5.45%、4.85%、4.85%和3.03%,未检出SHV型和VEB型BLAs的基因.19株(16.81%)同时产两种BLAs的基因,12株(10.62%)同时产3种BLAs的基因.各地区BLAs的基因型有较大差别.结论 中国部分地区铜绿假单胞菌携带BLAs的基因型主要是TEM型,部分菌株同时产两种及两种以上BLAs的基因;各地区BLAs的基因型有较大差别.
作者：王青新；糜祖煌；黄支密；钱小毛；常东；李智山 刊期： 2008年第03期
目的 评价夫西地酸对临床分离葡萄球菌的体外抗菌作用及影响因素.方法 以琼脂二倍稀释法测定抗菌药物低抑菌浓度,棋盘法测定联合抗菌作用并以杀菌曲线测定夫西地酸杀菌特征.结果 对临床分离的359株葡萄球菌MIC测定结果显示夫西地酸对苯唑西林耐药葡萄球菌MIC50及MIC90值分别为0.25～1及1～8mg/L;对苯唑西林敏感葡萄球菌MIC50及MIC90值分别为0.25～0.5及0.5～1mg/L;抗菌活性与万古霉素、替考拉宁相似或稍强,93.16%的葡萄球菌对夫西地酸敏感,耐药菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌;未发现万古霉素耐药葡萄球菌,但3.62%细菌对替考拉宁耐药.夫西地酸与亚胺培南、帕尼培南和美罗培南3种碳青霉烯类抗生素联用具有协同或相加作用,其中协同作用分别为87.5%、70.83%和43.75%,无拮抗作用;糖肽类药物与碳青霉烯类药物联用以协同与相加效果为主.夫西地酸对苯唑西林耐药和敏感葡萄球菌杀菌作用迅速,但杀菌作用在较高浓度时并没有进一步提高杀菌速度,提示该产品可能属于非浓度依赖性抗菌药物.结论 夫西地酸对各种葡萄球菌,包括耐苯唑西林葡萄球菌,具有良好抗菌作用,其抗菌作用可能属于非浓度依赖性;夫西地酸与碳青酶烯类抗生素联用具有明显协同抗菌效果.
作者：肖永红；王琪；张明；杨维维 刊期： 2008年第03期
目的 探讨不同结构氟喹诺酮及不同药敏测定方法对嗜麦芽寡养单胞菌敏感性的影响,以指导临床合理选择抗菌药物.方法 采用标准琼脂二倍稀释法测定5种氟喹诺酮对92株嗜麦芽寡养单胞菌临床分离株及20株实验室环丙沙星耐药株的低抑菌浓度(MIC);采用Kirby Bauer纸片扩散法测定环丙沙星对92株嗜麦芽寡养单胞菌的敏感性.结果 莫西沙星、加替沙星、左氧氟沙星、洛美沙星和环丙沙星对临床分离株的敏感率分别为94.6%、90.2%、87.0%、66.3%和32.6%;莫西沙星、加替沙星、左氧氟沙星和洛美沙星对实验室耐药株的敏感率分别为75%、60%、60%和25%.与琼脂法比较,纸片法测定的环丙沙星敏感率增加、耐药率降低,均有统计学差异(P<0.01,n=92).结论 不同结构的氟喹诺酮对嗜麦芽寡养单胞菌的敏感性不同,环丙沙星敏感性不能代替所有氟喹诺酮的敏感性;纸片法测定的敏感性不能代替琼脂法测定的敏感性.
作者：陈愉；王倩；褚云卓；赵立；李胜歧 刊期： 2008年第03期
目的 以心率功率谱为指标探讨红霉素(erythromycin,EM)对心脏自主神经系统活性的影响.方法 32只SD成年大鼠随机分为生理盐水组和红霉素25、50及100mg/kg共四组,利用心率变异性(heart rate variability,HRV)分析方法观察静脉注射红霉素前、后SD大鼠HRV各参数的变化.结果 生理盐水组、红霉素25mg/kg组注射前、后各参数值无显著性变化.红霉素100mg/kg组注射红霉素后平均心动周期(Mhp)、超低频功率(APU)、高频功率(APH)、总功率谱(TPV)、超低频功率/高频功率(RUN)、相对分散度(Hrd),分维数(Hfd)明显升高;混沌度(Hcc)、平均心率(Mhr)明显降低,变化幅度随剂量增大而增加,峰值提前.不同剂量组间有显著性差异.结论 静脉注射大剂量红霉素心脏自主神经系统稳定性下降,交感与副交感间平衡失调.
作者：肖刚；邓丽君；李静；陆杰 刊期： 2008年第03期
目的 评价国产甲磺酸帕珠沙星注射液治疗急性呼吸道和泌尿道感染的临床疗效与安全性.方法 采用随机对照试验设计,以左氧氟沙星注射液为阳性对照药,甲磺酸帕珠沙星组500mg,左氧氟沙星组300mg,为Q12h静脉滴注一次,qid,疗程均为7～1Od,病情偏重者疗程可延长至14d.结果 本研究共纳入240例,其中甲磺酸帕珠沙星组和左氧氟沙星组分别为127例和113例.结果 显示,甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液与盐酸左氧氟沙星注射液的临床痊愈率分别为68.60%与66.67%(PPS分析集);临床有效率分别为96.69%与95.37%(PPS分析集).对呼吸道感染和泌尿道感染均有良好的疗效,两组比较无统计学差异,表明两药疗效相当.两组的细菌阴转率分别为93.42%与89.66%,细菌清除率分别93.42%与89.83%,两组比较无统计学差异(P>O.05).安全性评价结果显示,两组的临床不良反应发生率分别为14.96%与14.16%,均以局部刺激及消化道反应为主,但大多轻微.勿需特殊处理.结论 甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液治疗急性呼吸道和泌尿道细菌性感染疗效确切,不良反应少,安全性较好.是一安全有效的抗菌药物,适于中、重度细菌感染及不能口服给药患者使用.
作者：郑莉；徐楠；蔡永宁；冯萍；刘跃建；王伟；韩雪芳 刊期： 2008年第03期
