目的 研究质粒介导的喹诺酮类耐药机制(PMQR)在肺炎克雷伯菌临床分离株上的分布情况,并对阳性菌株上染色体介导的喹诺酮类耐药机制进行分析.方法 细菌的鉴定和药敏采用Vitek-2 compact系统;采用PCR法检测质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、aac-(6')-Ib-cr和qepA的分布情况.对包含PMQR的细菌,采用E-试验测定环丙沙星的MIC大小,同时扩增测序分析染色体基因gyrA、gyrB、parC、parE的突变情况.结果 临床分离的67株肺炎克雷伯菌中,qnrS、qnrB、aac-(6')-Ib-cr、qepA的检出率分别为14.93%、2.99%、2.99%和16.42%.8株细菌同时包含qnr和qepA基因,其中2株qnr、qepA和aac-(6')-Ib-cr同时阳性.PMQR阳性菌株对环丙沙星的MIC值不定(0.032～≥64μg/mL),其中8株(占61.54%)对环丙沙星高水平耐药(≥64μg/mL).比对结果显示,环丙沙星MIC≤0.5μg/mL的3株细菌几乎未见染色体的氨基酸序列改变;而环丙沙星MIC≥8μg/mL的菌株全部存在gyrA和parC编码氨基酸序列改变,且突变主要集中在gyrA 83位、87位和parC 80位上.所有PMQR阳性的肺炎克雷伯菌的gyrB和parE均未发现任何氨基酸序列突变.结论 临床分离的肺炎克雷伯菌上检测到qnr、aac-(6')-Ib-cr、qepA的分布与共存.PMQR阳性菌株对环丙沙星的MIC值不定,但染色体机制仍是肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗生素耐药的主要机制,突变主要见于gyrA的83位、87位及parC的80位上.
作者：马晓波；林粼；张加勤；赵元勋；郑港森；郑燕青；房丽丽；宋秀宇；吴维生 刊期： 2011年第08期
目的 探讨艾滋病合并肺孢子菌肺炎(PCP)的临床诊治.方法 对10例艾滋病合并PCP的临床资料进行回顾性分析.结果 首发症状均有发热,8例伴咳嗽,7例伴气促,2例可闻及双肺湿罗音.外周血CD4<'+>T淋巴细胞(41.57±37.35)×10<'6>/L,PO<,2>(86.0±33.3)mmHg,LDH(412.1±166.9)U/L,血清白蛋白(29.57±3.74)g/L.胸部螺旋CT表现为不同程度两肺磨玻璃样改变,并可同时合并其他多种特征性影像学改变.3例找到肺孢子菌包囊.4例使用SMZco单药治疗,6例为SMZco+卡泊芬净联合治疗,严重氧合障碍4例,加用糖皮质激素,后7例好转,2例死亡,1例自动出院.结论 艾滋病合并PCP常有典型的临床、实验室指标与胸部影像学表现,部分能找到肺孢子菌包囊,尽早明确诊断并予SMZco或SMZco+卡泊芬净联合治疗,严重氧合障碍者予糖皮质激素治疗,大部分可临床缓解.
作者：陈晔锋；周建英 刊期： 2011年第08期
目的 本研究采用临床分离鉴定的ST239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立小鼠肺炎模型,对小鼠的临床症状、肺载菌量与组织病理学变化进行时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠的治疗效果.方法 取35只小鼠随机分成MRSA感染组、药物组和对照组,通过滴鼻方式分别滴入50μL细菌(前两组)与PBS(对照组);感染一天后对药物组用同样的方式滴入万古霉素,CT检测肺部的变化,并对肺载菌量和组织病理学变化进行观察.结果 与对照组比较,CT和细菌计数等结果表明MRSA感染组和药物组的肺组织有明显的炎症反应,载菌量较高;与感染组相比,药物组小鼠肺部的载菌量明显降低,气管和肺部的组织病理学症状明显减轻.结论 本实验结果表明小鼠MRSA肺炎模型成功建立,并可用于药物疗效的比较评估.该模型的建立,将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机理、治疗方法等,提供可靠的小动物模型.
作者：王星；周文江；沈艳；刘芳；杨华；高谦；王德成 刊期： 2011年第08期
目的 建立表皮葡萄球菌(S.epidermidis)生物被膜(biofilm,BF)体外模型,探讨氨溴索对表皮葡萄球菌成熟BF结构的破坏作用和对膜内菌的杀火作用.方法 落平板法培养表皮葡萄球菌RP62A 24h,得到成熟BF,不同浓度氨溴索作用24h后,用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察BF的形态结构;激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)结合BF图像结构分析软件(image structure analyer,ISA)对BF结构参数进行分析,利用四唑盐(XTT)减低法检测氨溴索对BF内细菌的杀火作用.结果 氨溴索处理以后,电镜观察可见1.875mg/mL氨溴索处理组BF结构被破坏,仅见少量散在细菌.ISA软件定量分析显示:1.875mg/mL氨溴索处理组和对照组的BF厚度分别为(27.95±5.93)μm和(9.76±1.29)μm,t=7.955,P<0.05;平均扩散距离(average diffusion distance,ADD)分别为2.173±0.219和1.625±0.092,t=5.640,P<0.05;结构熵(textual entropy,TE)分别为7.706±0.610和5.488±0.747,t=5.633,P<0.05;区域孔率(areal porosity,AP)分别为0.772±0.036和0.889±0.063,t=4.322,P<0.05.XTT减低法显示氨溴索的浓度为1.875、3.7和7.5mg/mL时,A<,450>的值分别为1.288±0.251、0.548±0.170和0.156±0.05,与对照组相比P<0.05,均有统计学意义.结论 氨溴索可破坏表皮葡萄球菌BF的形态结构,随着氨溴索浓度的增加,杀灭BF内细菌的能力增加.
作者：郜向娜；余加林；吴玉华；朱秀菊；刘维勤 刊期： 2011年第08期
目的 研究克拉霉素(CLA)抑制气道黏液高分泌的细胞内分子机制.方法 运用中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)刺激人类支气管上皮细胞株HBE16构建气道黏液高分泌模型,予以CLA和信号末端调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂U0126进行干预,采用RT-PCR检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平,ELISA法检测细胞上清液中MUC5AC蛋白含量,Westernblotting检测细胞内磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)、磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化c-Jun N端激酶(p.ⅢK)、磷酸化P38(p-P38)的含量.结果 克拉霉素和U0126均能降低气道黏液高分泌模型中MUC5AC基因转录和蛋白表达水平,并且使p-ERK表达水平下降,但对p-EGFR、p-JNK、p-P38的表达无明显作用.结论 克拉霉素能抑制细胞内信号通路分子ERK1/2磷酸化水平,从而减少了气道上皮细胞产生MUC5AC,由此发挥抑制气道黏液高分泌的作用.
作者：罗琳；尤列.皮尔曼；维克多.科罗索夫；周向东 刊期： 2011年第08期
目的 了解女性生殖道细菌感染常见病原菌及其对抗菌药物的耐药性.方法 用纸片扩散法对1990-2009年北京协和医院女性生殖道细菌感染分离的3840株病原菌进行抗菌药物耐药监测,按CLSI2009年版标准判读药敏结果,采用WHONET5.4软件进行数据分析.结果 20年来北京协和医院女性生殖道细菌感染以大肠埃希菌检出率高(25%),其次为凝固酶阴性葡萄球菌(17%),粪肠球菌(14%),无乳链球菌(10%)和金黄色葡萄球菌(7%).产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)的大肠埃希菌检出率为24%.产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均100%敏感,对阿米卡星、哌拉西林/三唑巴坦、头孢西丁的敏感率均>80%.肠杆菌科中的不同菌种对碳青霉烯类抗菌药物均100%敏感,对阿米卡星的敏感率均较高(86.4%～98%).凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感率均为100%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)对β-内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)低.粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁、青霉素、氨苄西林、呋喃妥因和磷霉素的耐药率均低于10%,未发现万古霉素和替考拉宁耐药的肠球菌.无乳链球菌对青霉素、古霉素和头孢吡肟也保持很高活性.结论 女性生殖道细菌感染常见的病原菌是大肠埃希菌,应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物.
作者：张小江；谢秀丽；孙宏莉；杨启文；徐英春；陈民钧 刊期： 2011年第08期
药物共晶是活性药物成分通过非共价键和共晶形成物结合在一个晶格中形成的.它是一种新的药物固体型态,可以改善药物的理化性质,比如改善溶解度、增加稳定性、提高生物利用度等,是目前药物研发的一个新的热点.本文主要介绍了药物共晶在药物研发中的应用及其设计、制备以及分析方法.
作者：弋东旭；洪鸣凰；徐军；赵文杰；任国宾 刊期： 2011年第08期
通过核磁共振法对硫酸依替米星进行定性和定量分析.利用一维及二维核磁共振谱(DEPT、COSY、HSQC、HMBC),对<'1>H-NMR谱和<'13>C-NMR谱信号进行完整归属.在此基础上,采用氢核磁共振定量法,以对苯二酚为内标,测得硫酸依替米星中依替米星的含量为59.19%,RSD为0.24%,方法准确可靠,简便快速.
作者：于小波；相秉仁；王国华；宋喆；沈文斌 刊期： 2011年第08期
目的 采用喷雾干燥法制备罗红霉素肠溶掩味微球,得到佳掩味工艺.并对微球性质进行考察.方法 以包封率为评价指标,对喷雾干燥工艺参数进行正交优化设计,并考察Eudragit L100用量、微球芯材比对微球性能的影响,同时对掩味效果进行考察.结果 优工艺条件为进风温度145℃;进料速度10mL/min;喷雾压力0.3MPa;药物与Eudragit L100材料的质量比1:4;制得的微球外形良好,包封率可达96.38%;药物掩味效果良好;药物在人工肠液中缓慢释放,药物1h释放量不超过30%,24h不低于99%.结论 所得制备工艺可行,实验条件制得的微球球形圆整,包封率较高,掩味效果良好,有很好的缓释特征.
作者：于泮力；王洪光；王超 刊期： 2011年第08期
目的 建立荧光光度法测定实际样品中铜离子的含量.方法 基于铜离子对阿莫西林的荧光有显著的熄灭作用,建立了荧光法快速测定铜离子含量的新方法.结果 铜离子与阿莫西林发生配合反应,配合物的组成比为1:2,将该方法用于水样中铜离子的测定,铜离子浓度的线性范围为1.00×10<'-6>～5.00×10<'-2>mol/L,检出限为1.87×10.7mol/L.样品回收率为94.0%～106.5%.结论 该方法简便、快速、准确.
作者：龙立平；谌委菊；肖谷清；钟桐生 刊期： 2011年第08期
目的 寻找对他克莫司产生菌有影响的抗生素便于进行优良菌种选育.方法 他克莫司产生菌弗氏链霉菌类群FCZ0311经自然分离得到浅红色、桃红色和灰白色3种主要类犁的菌落.研究了几种不同化学类型抗生素对3种不同类型菌株的生长、菌落形态、培养特征及其它们对他克莫司生物合成的影响.结果 应用链霉素处理浅红型和桃红型菌株,获得了效价较出发菌株提高30%的3株突变株.结论 链霉素处理能够提高浅红型和桃红型菌株的效价,为他克莫司菌种选育提供了一个新的途径.
作者：郑军荣；卓锦明；郑卫；程元荣 刊期： 2011年第08期
目的 研究植物内生真菌SEF15927对截短侧耳素的转化作用.方法 利用液体培养生长细胞对截短侧耳素进行生物转化.发酵液经乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析分离获得一个羟化产物.运用质谱和核磁共振光谱鉴定结构.结果 转化产物为2-羟基截短侧耳素.结论 植物内生真菌SEF15927为一具有高转化率的截短侧耳素羟化菌株,
作者：李端华；陈祈磊；邹昆；徐欣；王辂；李直；郭义东；褚以文 刊期： 2011年第08期
目的 筛选出那西肽高产菌株.方法 以活跃链霉菌CB040517作为出发菌株,通过紫外-氧化锂诱变处理,并结合前体复合氨基酸抗性筛选,选育那西肽高产菌.结果 通过致死率和正突变率的考察,确定紫外佳诱变剂量为100s.在分离培养基上层加入氯化锂和底层加入复合氨基酸进行正突变株的定向筛选,选育得到那西肽高产菌株UV-19-A12,其摇瓶效价达904.00μg/mL,比出发菌株提高72.5%,经过五代斜面传代试验考察,该菌株遗传性状稳定.结论 紫外诱变和氨基酸抗性筛选可以获得那西肽高产菌株.
作者：秦艳飞；薛正莲；项驷文；李恒奎；王洲 刊期： 2011年第08期
目的 研究白木香内生真菌Phaeoacremonium rubrigenum发酵液的化学成分.方法 采用多种柱色谱技术对发酵液中的化学成分进行分离鉴定,根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构.并用杯碟法和滤纸片琼脂扩散法测定抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)活性.结果 分离鉴定了9个化合物,分别为对羟基苯甲醛(1)、对羟基苯乙酸(2)、对羟基苯乙醇(3)、3,4-二羟基苯甲酸(4)、对甲基苯酚(5)、氮-(6-羟己基)-乙酰胺(6)、5-羟甲基糠醛(7)、(3β,5α,6β,22E)-麦角甾-7,22-二烯-3,5,6-三醇(8)和胸腺嘧啶脱氧核苷(9).结论 首次发现化合物2～7具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性.
作者：魏景；戴好富；郁蕾；王辉；梅文莉 刊期： 2011年第08期
目的 了解海洋放线菌Y12-26的次级代谢产物中对稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)等植物病原真菌具有较好的拮抗活性的具体化合物.方法 以P.oryzae指示菌进行活性跟踪,对其代谢物进行分离提取,通过有机溶剂萃取、硅胶柱层析、TLC和HPLC制备等方法分离得到活性化合物,并通过UV、MS、NMR等方法进行结构鉴定.结果 从海洋放线菌Y12-26发酵物中分离得到了3个大环内酯类活性化合物Y12-26-A2a、A3a和A3b,确定Y12-26-A2a分子式为C<,35>H<,56>O<,8>,与bafilomycin D结构相同;Y12-26-A3a分子式为C<,35>H<,58>O<,9>,与bafilomycin A1结构相同;Y12-26-A3b为新结构化合物,分子式为C<,35>H<,58>O<,8>,命名为bafilomycin K.结论 化合物Y12-26-A2a、A3a和A3b对P.oryzae的MIC分别为125、16和31μg/mL.
作者：魏刚；苏超；张道敬；宗志友；斯聪聪；陶黎明 刊期： 2011年第08期
目的 研究海洋链霉菌SIIA-A02191产生的抗菌成分.方法 用有机溶剂萃取发酵液,采用减压快速层析和制备HPLC分离纯化活性化合物,根据化合物的理化性质、紫外光谱、红外光谱、质谱、一维和二维核磁共振谱的测定数据,解析并确证化合物的结构.结果 化合物1为xantholipin的溴代类似物,命名为bromoxantholipin,具有抗MRSA等革兰阳性细菌的强活性,MIC值范围为0.06～0.25μg/mL.结论 化合物1为一新的多环口山酮类抗生素.
作者：陈祈磊；赵子翰；王辂；褚以文 刊期： 2011年第08期
红霉素碱粗品经大孔吸附树脂SP825二级阶跃洗脱层析法分离纯化红霉素A.研究了红霉素A、C组分的固定床吸附、洗脱过程,包括穿透曲线、洗脱曲线的测定及洗脱条件的选择等.结果 表明,红霉素A组分在竞争吸附过程中对红霉素C组分具有一定优势,采用乙酸乙酯洗脱对红霉素A组分的选择性和洗脱率均较好.为了进一步提高分离效率,进行了柱层析实验,考察了红霉素上柱量和第一阶段洗脱方式等对红霉素A、C组分分离效果的影响.优化的红霉素上柱量为树脂饱和吸附量的40%左右,依次对层析柱以2%乙酸乙酯水溶液进行第一阶段洗脱5BV以及纯乙酸乙酯进行第二阶段洗脱,所得终产品中红霉素A组分含量可达95.8%,总收率可达96.1%.此工艺过程简单、高效、经济、无污染.
作者：朱晟；朱家文；陈葵；孙瑛；杨生武 刊期： 2011年第08期
目的 发现新的抗菌药物.方法 本文对小诺霉素的C1-NH<,2>进行芳香化修饰,得到4个新衍生物[即:1-N-(4-甲基苄基)小诺霉素,1-N-(4-甲氧基苄基)小诺霉素,1-N-(2-呋喃基亚甲基)小诺霉素,1-N-(2-噻吩基亚甲基)小诺霉素].所有衍生物的结构经元素分析、IR、MS、<'1>H-NMR和<'13>C-NMR所确证,并进行了体外活性及急性毒性测试.结果 新衍生物活性不及小诺霉素,1-N-(2-呋喃基亚甲基)小诺霉素的急性毒性低于小诺霉素.结论 对以后相关工作具有启示作用和一定的参考价值.
作者：陈林；游莉；刘家健 刊期： 2011年第08期
