目的 研究根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,uP)三联疗法对生育期女性阴道正常微生态菌群的影响.方法 通过对15例HP阳性患者进行根除HP三联治疗,对比治疗前后阴道正常微生态菌群的变化情况,检测指标包括清洁度、念珠菌、滴虫、阴道酸碱度、菌群密集度、菌群多样性、优势菌、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、过氧化氢(H2O2)浓度.结果 治疗结束后研究对象中7例(7/15)发生阴道微生态失调(P<0.05),其中5例出现大量真菌孢子及菌丝,2例球菌数量增加(1例伴白细胞增加,1例伴过氧化氢阳性);8例阴道微生态正常(8/15).结论 根除HP三联疗法对阴道正常微生态菌群产生负面影响,在进行HP的治疗中应予重视,治疗前后应采取预防或治疗措施.
作者:齐新颖;李睿;陈卫刚;王英红;张玉;吴雨皋;李园园;高丽敏;许广鑫 刊期: 2013年第12期
目的 探讨脂质体包裹的靶向耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因mecA的硫代寡聚脱氧核苷酸(PS-ODN010)能否有效逆转MRSA对p-内酰胺类抗生素的耐药性.方法 以mecA mRNA为靶点设计合成PS-ODN010;薄膜分散法制备新型的包裹PS-ODN/PEI纳米微粒脂质体并进行质量评估;体外实验测定细菌生长曲线、菌落数(CFU)等;实时定量PCR法检测PS-ODN010对mecA表达的影响.结果 实验结果显示脂质体的包封率为75.9%±3.91%;脂质体包裹的PS-ODN010能浓度依赖性的抑制mecA表达;给予脂质体包裹的PS-ODN010后,苯唑西林明显抑制MRSA的生长(P<0.01),MRSA的菌落数明显低于对照组(P<0.01),苯唑西林等5种β-内酰胺类抗生素对MRSA的MIC显著降低.结论 脂质体包裹的抗mecA的PS-ODN010能够选择性抑制MRSA的mecA表达,有效逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性.
作者:祝强强;杨福泰;周诗萌;王宁;贾敏;马雪;孟静茹 刊期: 2013年第12期
目的 构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台.方法 构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组质粒菌株BL21-lexA,用IPTG诱导BL21-lexA过表达lexA,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定LexA蛋白,用荧光定量PCR测定SOS应答基因recA和umuC表达变化;然后用恩诺沙星梯度平板测定恩诺沙星对BL21-unmodified(空质粒菌株)和BL21-lexA的抑菌活性和抗药性突变率.结果 重组质粒菌株BL21-lexA在IPTG诱导下过表达LexA,抑制recA和umuC表达,提高了大肠埃希菌对恩诺沙星的敏感性,降低了抗药性突变率.结论 通过IPTG诱导BL21-lexA过表达LexA蛋白,能构建稳定的SOS应答抑制模型,用于筛选SOS抑制剂,提高恩诺沙星杀菌力和降低抗药性突变.
作者:牛卫卫;白华;王进文;颜世敢;齐静;骆延波;李璐璐;贾纪美;李靖冉 刊期: 2013年第12期
目的 分析替加环素与头孢哌酮/舒巴坦联用,对耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌(IRAB)体外抗菌活性.方法 收集本院分离的鲍曼不动杆菌共65株,采用琼脂稀释法检测上述细菌对替加环素的低抑菌浓度(MIC);将不同浓度替加环素与头孢哌酮/舒巴坦用棋盘法设计,用琼脂稀释法测定不同浓度组合的抗菌药对菌株的MIC,并计算部分抑菌浓度指数(FICI); PCR扩增碳青霉烯酶基因.结果 IRAB对替加环素的MIC50值为2mg/L,耐药率为21%.头孢哌酮/舒巴坦同替加环素联用后,FICI均为0.5~4.0.IRAB有84%(32/38)菌株携带blaOXA-23基因,亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌(ISAB)均未检测到blaOXA-23基因.结论 替加环素对携带bldOXA-23基因的鲍曼不动杆菌具有较强体外抗菌活性;替加环素与头孢哌酮/舒巴坦联用后,表现为无相关作用.
作者:龚燕飞;曾强;刘湘林;张祖萍;陈中湘;彭华 刊期: 2013年第12期
目的 探讨黄连碱体外抗炎作用及其机制.方法 采用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型,用黄连碱对其进行干预,实验结束后,Western Blot技术检测RAW264.7巨噬细胞p-ERK1/2、IκBα和iNOS蛋白的表达.结果 与LPS组比较,黄连碱可显著下调LPS所致炎性RAW264.7巨噬细胞中p-ERK1/2和iNOS蛋白表达(P<0.05);显著升高IκBα蛋白的表达(P<0.05).结论 黄连碱抗炎作用机制与其下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞ERK1/2蛋白磷酸化水平,减少IκB-α蛋白磷酸化降解和抑制iNOS蛋白表达等环节有关.
作者:潘晓丽;向晖;谢运飞;熊永爱 刊期: 2013年第12期
抗菌肽(AMPs)是生物体内合成的一种具有抗菌活性的多肽类物质,对多种病原体乃至耐药性菌株具有明显的杀伤作用.但由于其易降解,活性不稳定等缺陷受阻于临床应用.随着抗菌肽数据库的发展,并在降低AMPs毒性、提高AMPs抑菌活性、增强AMPs稳定性及生物利用度、克服AMPs体内转运难题的原则指导下,对众多抗菌肽进行分子优化设计,旨在解决目前抗菌肽合成及活性的瓶颈,相信在不久的将来抗菌肽将成为临床上重要抗菌武器.
作者:朱钧萍;申婧;郭中敏;陆家海 刊期: 2013年第12期
西他沙星为日本第一制药三共株式会社创研的新型氟喹诺酮类药,已在日本上市,商品名Gracevit.研究显示,该品种抗菌谱广,对革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧菌及非典型病原菌具有良好体内、外活性,药动学性质优良,口服吸收迅速,组织渗透性强,无肝脏潴留,对人体主要肝药酶无抑制.治疗剂量下,西他沙星对受治各科感染病例的临床疗效不劣于左氧氟沙星、托氟沙星等现主流药,常见不良反应为轻、中度消化道反应和实验室检测异常,停药后恢复.
作者:李雪;游雪甫;杨信怡 刊期: 2013年第12期
主动外排系统在铜绿假单胞菌耐药形成过程中起到重要作用,近年来对其的研究也愈来愈多.截止到目前为止,在铜绿假单胞菌中总共发现了13种外排泵,其中12种属于耐药节结细胞分化(resistance nodulation cell division,RND)家族的外排泵,另外1种属于多药和毒物化合物外排家族(multidrug and toxic compound extrusion family,MATE).本文就铜绿假单胞菌13种外排泵的底物谱、调控机制以及相关的基础研究进展进行综述.
作者:魏光;叶英;沈继录 刊期: 2013年第12期
目的 针对现行药典HPLC系统的不足之处,分别采用优化后的反相HPLC系统和新建立的MEKC系统检测头孢噻吩钠的杂质谱.方法 合成杂质A并采用ESI-MS、IR、1H-NMR和13C-NMR等对其进行结构确认;通过优化反相HPLC系统流动相的pH值和缓冲液浓度改善分离;建立MEKC系统和正相HPLC系统检测头孢噻吩钠的杂质谱.结果 证实现行药典方法存在对头孢噻吩钠杂质A的误认和有关物质之间分离较差等缺陷;采用新建立的MEKC系统,发现头孢噻吩钠的市售品和对照品中均存在一个反相HPLC系统难以分离且含量高可达1.5%的未知杂质.结论 新建立的MEKC系统可对头孢噻吩钠的杂质进行更为有效而全面的检测.
作者:刘浩;贾志强 刊期: 2013年第12期
目的 以头孢他啶为例,研究表面活性剂对土壤中抗生素的解吸作用.方法 用HPLC检测方法,以解吸率为指标,考察表面活性剂的类型、浓度以及土壤的酸碱度对土壤中残留头孢他啶的解吸作用.结果 带负电荷SDS浓度为6cmc时,解吸时间为2h,效果较好,SDS对不同酸碱度的土壤中的头孢他啶都有很好的解吸作用.结论 表面活性剂对土壤中残留头孢他啶有很好的解吸作用,将其用于土壤中残留抗生素的解吸是一种既有效又简单的方法,起到保护生态环境的作用.
作者:周武杰;刘金彦;胡亚运 刊期: 2013年第12期
目的 建立注射用1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸注射用溶剂中L-赖氨酸的含量测定方法.方法 采用C18(250rm×4.6rm,5um)色谱柱,以乙腈-甲醇-0.1%三氟醋酸溶液(2:1:97)为流动相,柱温为室温,流速为1.0mL/min,以蒸发光散射检测器检测,漂移管温度:105℃,空气做为载气,流速为3.0L/min.结果 在0.2066~2.0660μg范围内,色谱峰面积对数与对照品浓度的对数呈良好的线性关系(r=0.9997,n=5);平均回收率为99.78%(RSD=0.71%,n=9).结论 该法简便、可靠、专属性强、重现性好,可做为注射用1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸注射用溶剂中L-赖氨酸含量测定的有效方法.
作者:李蔷薇;李直;王欣荣;何正有;姚洁;李强;李维 刊期: 2013年第12期
目的 开发一种新的去甲基金霉素提取工艺.方法 采用树脂动态吸附解吸的方法,从发酵液滤液中分离去甲基金霉素,HPLC检测结果.结果 大孔吸附树脂HZ816的动态吸附量为61925 μg/mL,使用70%乙醇100mL/h的流速,可有效解吸树脂柱上吸附的去甲基金霉素,解吸收率达85.72%.结论 大孔吸附树脂HZ816可以用来从发酵液中分离纯化去甲基金霉素,该方法简单、易行,为该产品的工业生产应用提供基础.
作者:孔鹏;张炜;冷凤;谢新宇;马若飞;李福棣 刊期: 2013年第12期
目的 优化分离获得的一株土壤稀有放线菌发酵培养基,获得该有效成分的大孔树脂分离条件.方法 分别利用单因素试验和均匀试验设计法,对发酵培养基构成成分和佳用量进行优化;分别利用抑菌圈法和液相色谱法对发酵液中有效成分含量进行测定,考察大孔树脂的吸附及解吸附参数.结果 经优化后的佳培养基配方为葡萄糖1.8%、蛋白胨0.5%、豆粕0.3%、酵母膏1.0%、CaCO30.25%,此时发酵液中有效成分活性强;D-101型大孔吸附树脂对发酵液中有效成分的吸附能力强,佳吸附时间为120min,采用70%的丙酮水溶液即可对有效成分形成有效解吸附,佳解吸附时间为120min.结论 通过一次吸附与解吸附分离使发酵液中有效成分得到了有效分离.
作者:黄永春;刘红梅;陈志永;赵鹏;张伟 刊期: 2013年第12期
目的 合成抗生素替加环素并改进其合成工艺.方法 以米诺环素为起始原料,经过对其9位进行硝化,还原得到9-氨基米诺环素盐酸盐,再与叔丁基甘氨酰氯盐酸盐缩合制得替加环素.结果 所得产物经过LC-MS谱,核磁共振谱等确证了结构.结论 改进后的工艺路线短,杂质数量少,C-4差向异构体含量小,成本低,污染小,适合大规模生产.
作者:翁明君;曾令国;李勤耕 刊期: 2013年第12期
目的 探究药用植物蛇足石杉、曼地亚红豆杉和南方红豆杉内生真菌的多样性,以及从中筛选产生物碱的内生真菌.方法 用传统的表面灭菌和组织剪切法处理植物样品,通过加有抗细菌抗生素的真菌培养基分离和富集植物内生真菌.根据内生真菌的表型特征和ITS序列,对其进行分类和多样性分析,并用Neighbour-Joining的方法构建系统进化树.利用Dragendorff试验检测各内生真菌的发酵液,筛选具有产生物碱潜力的菌株.结果 从3种植物中共分离到764株内生真菌,挑选出具有代表性表型特征的菌株83株,对ITS序列进行比对和多样性分析表明,这些菌株分布于子囊菌门(Ascomycota)的3个纲、18个属.后,采用Dragendorff试验从这83株真菌中筛选出青霉菌属(Penicillium)B14菌株具有产生物碱的潜力.讨论 三种药用植物含有丰富多样的内生真菌分布.采用Dragendorff试验检测发酵液中的生物碱,该方法快速简便,能有效提高筛选速率,可应用于产生物碱微生物的高通量筛选.
作者:杨迎迎;熊智强;王勇 刊期: 2013年第12期