目的 了解肝病患者不动杆菌的流行特征及耐药状况,为临床合理选用抗菌药物、有效控制医院感染提供依据.方法 对2007-2011年间从我院分离自肝病患者的216株不动杆菌的流行状况及药敏结果进行分析,回顾治疗效果,提出临床治疗选择.结果 5年间不动杆菌感染逐渐增加,以鲍曼不动杆菌多(79.17%);科室分布以重症监护病房(ICU)为主(54.17%);分离标本包括痰液(62.5%),血液(13.9%)和腹水(12%);该菌对多黏菌素B(3.6%)和米诺环素(15.66%)耐药率较低,对其他抗生素的耐药率分别为:头孢曲松71.30%、头孢哌酮78.24%、头孢哌酮/舒巴坦55.69%、替卡西林73.61%、左氧氟沙星57.0%、美罗培南51.5%、复方磺胺甲噁唑68.98%,多重耐药的比率高达66.74%.复合抗生素组和碳青霉烯类组治疗的有效率分别为60.4%和62.0%.结论 不动杆菌在肝病患者的分离呈逐年递升的趋势,耐药及多重耐药率较高,复合抗生素组和碳青霉烯类组可作为临床治疗的选择.
作者:崔恩博;鲍春梅;张鞠玲;王欢;陈素明;张成龙;贾天野;曲芬 刊期: 2014年第12期
目的 了解2013年上海市嘉定区瑞金医院北院临床分离病原菌分布及细菌耐药状况,为临床诊治提供依据.方法 临床分离菌株的鉴定采用VITEK2 Compact或API鉴定板条,药物敏感性试验采用VITEK2 Compact或纸片扩散法(K-B法),用WHONET 5.6软件进行数据统计分析.结果 2013年我院共分离出病原菌770株,其中221株(28.7%)来自门诊患者,549株(71.3%)来自住院患者,革兰阴性杆菌523株,占67.9%,革兰阳性球菌247株,占32.1%.排名前5位的病原菌为:大肠埃希菌(190株)、肺炎克雷伯菌(97株)、铜绿假单胞菌(80株)、表皮葡萄球菌(35株),金黄色葡萄球菌(32株).药物敏感性试验统计表明:革兰阴性杆菌中,非发酵革兰阴性杆菌整体耐药率较高,其中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为22.6%和48.1%.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌发现6例.未发现对万古霉素、替加环素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌.结论 我院临床分离病原菌以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药情况较为严重,耐药菌主要分布在重症监护病房等科室,符合国内细菌耐药情况,并具有地区的特点.对临床分离菌株的耐药性监测,有利于控制院内感染.
作者:乔丹;周敏;朱咏臻;王天凯;瞿晨芸;樊绮诗 刊期: 2014年第12期
目的 了解水产品中金黄色葡萄球菌的耐药性及耐药基因的携带情况.方法 利用Vitek2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对48株金葡菌分离株进行药敏试验,同时利用PCR方法检测耐药基因的携带情况.结果 金葡菌分离菌株对青霉素G、红霉素和四环素的耐药率分别为41.7%、35.4%和30.4%,对克林霉素、复方磺胺甲噁唑、苯唑西林、喹奴普汀/达福普汀、万古霉素、利福平、环丙沙星和庆大霉素的耐药率分别为20.8%、20.8%、8.3%、6.25%、6.25%、4.17%、4.17%和2.1%,同时得到16种耐药谱,多重耐药率达到47.9%.进一步调查金葡菌分离株耐药基因的携带情况,发现47.9%的金葡菌分离株携带有耐药基因,其中一重耐药检出率16.6%,两重及两重以上耐药检出率31.3%.结论 水产品中金黄色葡萄球菌的耐药性和耐药基因之间存在一定的关系,具有红霉素抗性的金葡菌中ermB基因的携带率较高,具有四环素抗性的金葡菌中tetK基因的携带率较高,而具有万古霉素和庆大霉素的抗性的金葡菌分离株中vanA和aapD基因的携带率较高.
作者:周向阳;江玲丽;相兴伟;邵宏宏;周秀锦;施进;万婧;刘颖 刊期: 2014年第12期
免疫磁珠分离技术(Immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)是利用磁珠上包被的特异性抗体与抗原发生亲和反应,从复杂的样品组份中分离目标抗原.再利用磁珠的磁响应性,实现对目标抗原的富集.该技术灵敏度高、特异性强、分离富集速度快、适用范围广.再结合新的快速检测技术,使食源性致病菌的检测时间从传统的几天缩短到几小时,在食源性致病菌检测中得到广泛的应用.本文从免疫磁珠分离技术的原理,食源性致病菌免疫磁珠的类型,免疫磁珠分离技术在食源性致病菌检测中应用的进展几个方面进行综述.
作者:刘细霞;涂俊铭 刊期: 2014年第12期
目的 比较研究了阿奇霉素泡囊(AMNS)和阿奇霉素(AM)在昆明小鼠体内的组织分布.方法 采用HPLC法测定不同时间点各组织中药物浓度,评价2种制剂的组织分布特征.结果 AM在各组织中的萃取回收率为80.64%~91.28%,方法回收率为97.00%~99.64%,日内、日间RSD符合方法学要求.组织分布结果表明,AMNS主要分布在肺组织中,其次是肝和脾、肾、心,血浆中分布少.结论 AMNS改变了药物在体内的组织分布,使药物特定分布于肺组织.
作者:钟萌;杨林;张永红;万坤;张敉;张景勍 刊期: 2014年第12期
目的 建立高效凝胶色谱法(HPGPC)测定头孢呋辛赖氨酸中聚合物含量的方法,采用柱切换技术联合RP-HPLC法互补研究头孢呋辛赖氨酸的有关物质.方法 HPGPC法的色谱柱为Tsk-gel G2000 SWxl(300mm×7.8mm,5μm,日本TOSOH),以0.005mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)-乙腈(92∶8)为流动相,流速为0.6mL/min,柱温为25℃,检测波长为274nm.RP-HPLC方法参考中国药典2010年版二部收载的头孢呋辛钠有关物质的测定方法.结果 本文建立的HPGPC法专属性、线性、日内和日间精密度均良好,柱切换技术的应用有助于指认样品中的聚合物杂质和小分子杂质的混合物.结论 本文建立的方法快速、准确、重现性好,可与RP-HPLC法联合,利用两个色谱系统的互补性,对头孢呋辛赖氨酸的有关物质进行研究.
作者:谭洪泉;薛晶;李强;李进;陈启立;胡昌勤 刊期: 2014年第12期
目的 根据《中国药典》(2010年版)收入的C群流脑多糖测定的唾液酸法,结合发酵工艺过程监测的需要,建立C群脑膜炎球菌发酵液中C群流脑多糖定量测定的方法.方法 发酵液经离心(12000r/min,10min)除去菌体,上清液用1.5μL10%十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀多糖.多糖用1mol/L CaC12溶液溶解后进行显色、有机相萃取.有机相于波长580nm测定光吸收值,从标准曲线得到唾液酸的浓度并计算出发酵液中C群流脑多糖的浓度.结果 试验表明此法用于发酵液中C群流脑多糖含量的测定稳定性好,回收率在85%~115%,能够很好反映C群脑膜炎球菌发酵过程中C群流脑多糖的产量变化.结论 本法准确性高,重复性好,结果可靠,可用于发酵液中C群流脑多糖的定量分析.
作者:王公孝;王斌;王学林;夏永;熊慧玲 刊期: 2014年第12期
目的 研究注射用阿奇霉素制剂中具有刺激性气味的未知杂质成分.方法 运用气相色谱-质谱联用技术,结合质谱数据检索对其挥发性未知杂质进行结构鉴定.结果 根据阿奇霉素酸性环境下裂解规律,对数据检索结果验证,共鉴定出2个挥发性杂质成分:3-甲基呋喃和2-乙烯基-3-甲基呋喃;其中3-甲基呋喃通过对照品定位确定,2-乙烯基-3-甲基呋喃因无对照品而暂未定量研究.结论 本文采用的气相和气质色谱条件,都能方便、快捷的检测到注射用酸性阿奇霉素制剂中含有的挥发性杂质成分,尤其对含挥发性杂质成分较高的硫酸和盐酸成盐的阿奇霉素制剂,因此本研究为酸性阿奇霉素制剂的质量控制提供了重要依据.
作者:刘照振;李文东;王俊秋 刊期: 2014年第12期
优化注射用阿莫西林钠/舒巴坦钠含量的检测方法.采用C18色谱柱,以0.03mol/L磷酸二氢钠溶液(用1mol/L磷酸溶液调节pH值至3.4±0.05)-甲醇(97∶3)为流动相,检测波长225nm,流速为1mL/min,进样量为20μL,柱温30℃.两主成分在0.10~3.0 mg/mL范围内线性关系良好,回收率分别为100.0%和100.0%,RSD%分别为0.51%和0.57%.该方法的专属性强,耐受性良好.
作者:叶海鸿;谭胜连;傅红燕;文青;蔡国伟 刊期: 2014年第12期
目的 优化人工抗原合成条件及免疫程序,制备亲和力高、特异性强及检测限低的多克隆抗体,并建立适用中华绒螯蟹中恩诺沙星残留检测的免疫学分析方法.方法 采用优化的碳二亚胺法合成免疫原(cBSA-ENR)、N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法合成包被抗原(cOVA-ENR)及免疫方式等技术,制备恩诺沙星多克隆抗体并用方阵ELISA及间接竞争ELISA对其滴度、亲和力及特异性进行分析,进而应用于中华绒螯蟹加标样品回收率和精密度的检测.结果 恩诺沙星多抗的工作浓度为1∶80000,IC50为8.68ng/mL,有效检测范围为0.4~125ng/mL,与环丙沙星等竞争物的交叉反应率均小于0.5%;分别在中华绒螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺样品中添加10、30和90ng/g (ng/mL)3个浓度水平的恩诺沙星,平均回收率分别为72.23%~85.45%、68.66%~74.12%和50.17%~56.30%,相对标准偏差分别为7.64%~12.26%、12.41%~22.23%和28.28%~35.40%.结论 通过优化制备技术获得恩诺沙星多克隆抗体,并建立的免疫分析方法能够满足中华绒螯蟹等水产品中恩诺沙星残留检测的基本要求.
作者:徐逍;吴康;杨彩根;侍苗苗;宋学宏 刊期: 2014年第12期
目的 阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌.方法 以安普霉素生物合成基因apr为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒pXJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tobZ,获得工程菌TX308.采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化.结果 TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素.TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素.结论 磷酸变位酶基因apr是安普霉素生物合成的关键基因,敲除后能有效阻断安普霉素的合成,工程菌TX308大量积累妥布霉素,不再合成安普霉素和氨甲酰妥布霉素,具有重要的产业化价值.
作者:肖剑萍;温淑平;洪文荣 刊期: 2014年第12期
目的 提高吸水链霉菌FC904-33发酵合成雷帕霉素水平.方法 应用统计学方法设计培养基,首先利用Plackett-burman设计法分析出培养基中影响雷帕霉素发酵水平的四个主要因素:玉米淀粉、葡萄糖、黄豆饼粉和蛋白胨;其次以Box-behnken设计法及响应面分析法.结果 确定了主要因素的佳浓度:玉米淀粉37.25g/L,葡萄糖5.97g/L,黄豆饼粉29.54g/L,蛋白胨4.56g/L.结论 采用统计学优化后培养基进行雷帕霉素发酵,发酵水平较原培养基提高了27%,达到预期效果.
作者:陈晓明;金东伟;余辉;黄捷;程元荣 刊期: 2014年第12期
目的 通过优化发酵培养基,提高肺囊康定的B0组分(PB0)产量.方法 采用响应面分析法,根据中心组合设计原理及Design Expert 7.0软件分析,基于正交试验结果,对PB0发酵培养基中影响产量的四个主要因子进行配方优化,利用Numerical Optimization功能预测大响应值并进行验证试验及发酵罐放大试验.结果 获得优发酵配方,摇瓶PB0产量较对照提高了35%,20M3发酵罐PB0产量较对照提高了38%.结论 通过响应面分析法优化出发酵培养基,可使PB0的产量大幅提高,并成功地用于工业化生产.
作者:朱春燕;曹艳茹;黄运昌;龙燕;王富强;朱辉;田敏 刊期: 2014年第12期
目的 从菌株Actinoplanes teichomyceticus sp.FIM-1112发酵液中快速提取纯化替考拉宁,并建立替考拉宁5个单组份A2-1、A2-2、A2-3、A2-4和A2-5的快速制备方法.方法 采用碱化、HP-20大孔树脂柱分离、沉淀、脱色、冷却沉淀等技术,快速提取纯化替考拉宁;结合制备液相色谱分离技术[制备柱Welch Column XB-C18(250mm×21.2mm i.d.,5μm),流动相A为3.2g/LNaH2PO4-乙腈(900∶100);流动相B为2.75g/L NaH2PO4-乙腈(300∶700),流速为10.0mL/min,检测波长为254nm]分离制备替考拉宁5个单组份.结果 A2组份的收率提高至76%,HPLC结果显示各组份的含量均符合欧洲药典标准,且各组份纯度分别为94.90%(A2-1),96.86%(A2-2),84.75%(A2-3),80.16%(A2-4)和78.59%(A2-5).结论 该提取纯化方法经过优化,简单、快速、易于操作,且首次采用制备色谱分离技术对其5个组份进行分离,可用于替考拉宁单组份的分离制备.
作者:陈丽;罗婷;江宁宇;彭飞;连云阳 刊期: 2014年第12期
目的 双利奈唑胺(1)的合成与分析.方法 以利奈唑胺中间体叠氮化合物(2)为原料,经钯碳催化氢化和随后的吡啶催化的乙酰化制得双利奈唑胺(1).结果 1的结构经1H-NMR和ESI-MS确认,并对其进行了HPLC分析.结论 合成得到了目标化合物1,可为利奈唑胺的杂质研究提供可靠数据.
作者:刘啸;王瑛瑛;罗刚;陈宇瑛 刊期: 2014年第12期
目的 建立一个时间短且有效的大鼠骨髓抑制毒性实验模型,以缩短噁唑烷酮类抗菌药骨髓抑制毒性评价周期、减少化合物的用量、降低新型噁唑烷酮类抗菌药的开发成本.方法 通过研究噁唑烷酮类抗菌药利奈唑胺和在研MRX-Ⅰ对大鼠用药1和2周后的骨髓抑制毒性,比较其骨髓抑制毒性敏感指标网织红细胞以及血小板数值与实验周期的关系,并与文献及临床数据进行比对.结果 利奈唑胺给药组和MRX-Ⅰ给药组其大鼠1周和2周的网织红细胞以及血小板数据以及剂量趋势高度一致;且数据显示MRX-Ⅰ比较利奈唑胺更安全.利奈唑胺和MRX-Ⅰ的实验结果也与文献报道及临床数据一致.结论 可以通过1周大鼠毒性实验模型进行预测噁唑烷酮类抗菌药2周左右、甚至更长期的潜在骨髓抑制毒性趋势,为该类抗菌药骨髓抑制毒性的快速筛选提供了依据.
作者:王海林;黄艳琴;刘世聪;许云华;王雯;袁征宇;朱焕章 刊期: 2014年第12期
目的 在中药中筛选并研究铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)群体感应系统抑制物(quorum-sensing inhibitor,QSI).方法 利用铜绿假单胞菌QS系统相关基因lasI、lasR、rhlI和rhlR的启动子与报道子荧光素酶(Luciferase)基因IuxCDABE的融合子为筛选系统,通过检测化学发光反应不同中药对群体感应系统基因表达的影响,并检测中药对铜绿假单胞菌毒性相关表型的影响.结果 研究结果表明中药半枝莲的水提物在不影响铜绿假单胞菌生长的条件下,可抑制PA中QS系统基因lasI、lasR、rhlI和rhlR的表达,并可抑制铜绿假单胞菌的运动性.结论 中药半枝莲对铜绿假单胞菌群体感应系统有抑制作用,结果有助于新型抗生素的研究.
作者:肖骏;沈立新;赵琳;武玉婷;段康民;郭俏 刊期: 2014年第12期