目的:探讨人早孕期滋养细胞分泌的CXCL16对蜕膜γδT细胞增殖的影响.方法:收集正常非孕妇女、正常早孕妇女及自然流产妇女的外周血及蜕膜组织各10例,体外分离外周血单核淋巴细胞及蜕膜免疫细胞,使用流式细胞仪检测γδT细胞的比例;采用磁珠分选技术纯化得到的人早孕蜕膜γδT细胞,流式细胞术检测其胞内细胞因子的表达;建立人早孕蜕膜γδT细胞与滋养细胞的共培养体系,流式细胞仪检测γδT细胞中Ki67的表达.结果:正常早孕妇女外周血及蜕膜局部γδT细胞比例明显高于非孕妇女及自然流产妇女,且正常早孕组和自然流产组蜕膜局部γδT细胞比例均高于外周血.人早孕蜕膜γδT细胞内的细胞因子表达依次为IL- 10>TGF-β1>TNF-α≥IFN-γ.人早孕滋养细胞或者人重组的CXCL16 (rhCXCL16)均能促进γδT细胞的增殖,而在共培养体系中加入CXCL16的中和性抗体后则抵消了此效应.结论:早孕妇女体内γδT细胞数量增多可能与正常妊娠的维持有关,母-胎界面的滋养细胞通过分泌CXCL16促进蜕膜γδT细胞的增殖,蜕膜γδT细胞可能通过分泌IL-10及TGF-β1等细胞因子有利于正常妊娠的维持.
作者:范登轩;王莹;李大金;金莉萍 刊期: 2012年第02期
目的:探讨如何在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中更有效地运用拮抗剂方案.方法:回顾性分析319个使用拮抗剂方案进行IVF-ET无输卵管积液、无内膜息肉及无子宫解剖结构异常的新鲜移植周期.根据拮抗剂治疗前使用短效激动剂(n=125,A组)、口服避孕药(达英-35)(n=113,B组)和未处理组(n=81,C组)分组,比较各组患者的年龄、促性腺激素(Gn)使用天数和剂量、注射hCG日LH和E2水平、获卵数、优质胚胎率、临床妊娠率等.同时以261个促性腺激素激动剂长方案移植周期为对照组(D组)作进一步对比.结果:C组年龄(32.9±4.8岁)较其它组年龄明显偏大,P<0.05;A和B组Gn使用剂量大于C组,其中A组明显增多(P<0.01);A和B组hCG注射日LH水平均较C组明显低,其中A组LH值低(P<0.01);A组获卵数多(P<0.05);B组子宫内膜薄(P<0.01).3组的受精率、优质胚胎率均无统计学差异(P>0.05).A组、B组和C组临床妊娠率分别为:32.8%、17.7%和37.0%,B组临床妊娠率显著低于A、C组(P<0.01).C组、D组间临床妊娠率比较无统计学差异(37.0% vs 40.2%,P>0.05);C组Gn使用的时间和剂量均比D组明显减少(P<0.05).结论:在IVF-ET中GnRH拮抗剂治疗前使用达必佳预处理未能提高妊娠率,使用过达因-35避孕的患者妊娠率明显下降,而未使用任何药物的患者接受GnRH拮抗剂超促排卵方案,能获得比较好的临床结局.
作者:黄品秀;李蓉;付敏;王娟娟 刊期: 2012年第02期
卵巢功能差患者的生育问题一直是辅助生殖领域中的难题.临床中卵巢功能差患者添加脱氢表雄酮(DHEA)可能通过类固醇合成底物、雄激素配体、降低胚胎非整倍体率和改善卵巢微环境等机制改善其临床结局,为卵巢功能差患者治疗提供新思路.
作者:赵红翠;朱亮 刊期: 2012年第02期
干细胞是具有自我更新和分化潜能特性的一类细胞.性腺作为将遗传物质传递给子代的唯一组织,有体细胞和生殖细胞两种细胞类型.继往的研究发现,在卵巢中存在有间充质干细胞,卵泡膜干细胞、生殖干细胞以及具有干细胞特性的黄素化颗粒细胞.本文对卵巢中可能存在的这些干细胞及其促进卵母细胞的生成、发育、受损卵巢的修复以及维持卵泡结构等功能作一综述.
作者:刘然;冯定庆;凌斌 刊期: 2012年第02期
目的:比较左炔诺孕酮口崩片和市售口服片的人体药代动力学及相对生物利用度.方法:20名健康女性志愿者随机双交叉单剂量服用左炔诺孕酮口崩片和市售口服片,剂量均为0.75 mg,分别于服药前和服药后72 h内不同时间点抽取静脉血,清洗期为2周,以放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)法测定血清中左炔诺孕酮的浓度,并利用SAS软件计算口崩片与市售口服片的药代动力学和相对生物利用度.结果:采用RIA测定左炔诺孕酮的低检测限为10 pg/ml,低、中、高(300 pg/ml、2 000 pg/ml、6 000 pg/ml)3种浓度左炔诺孕酮标准质控血清的日内精密度分别为12.4%、9.3%、3.1%(n=5),日间精密度分别为4.3%、11.7%、5.7%(n=5).口崩片和市售口服片的主要药代动力学参数分别为:tmax1.6±0.2 h、tmx1.7±0.3 h;Cmax6.2±0.8 ng/ml、Cmax 6.5±1.0 ng/ml; AUC0~72h 85.5±24.4h·ng/ml、AUC0~72h 90.8±27.1 h· ng/ml; AUC0-inf96.8±27.9h.ng/ml、AUC0-inf 101.2±30.8h.ng/ml; t1/2 25.3±3.5h、t1/24.2±3.1h.口崩片的AUC0~72h、AUC0-inf和Cmax的90%置信区间分别为市售口服片相应参数的87.72%~101.87%、89.01%~103.73%和89.80%~101.75%.口崩片tmax与市售口服片相比无显著差异(P>0.05).口崩片的相对生物利用度为96.1±18.3%.结论:建立的分析方法准确灵敏,可用于左炔诺孕酮血药浓度的测定;左炔诺孕酮口崩片与市售口服片的生物利用度无显著性差异,2种制剂具有生物等效性.
作者:郭湘洁;李钊;桂幼伦;朱忠义;赵宪平;李雪宁;曹霖;朱焰 刊期: 2012年第02期
目的:研究小鼠CDC25B蛋白S149位点对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响及S149位点与S321位点的关系.方法:构建pBSK-CDC25B-S 149A和pBSK-CDC25B-S149A/S321A突变体,体外转录成mRNA;采用小鼠超排卵技术取G1期受精卵,显微注射CDC25B-WT-mRNA和突变CDC25B-S149A-mRNA、CDC25B-S 149A/S321A-mRNA,观察其对受精卵发育、M期促进因子(MPF)活性及CDC2-pTyr 15磷酸化状态的影响.结果:CDC25B-S149A-mRNA注射组受精卵卵裂率明显高于CDC25B-WT-mRNA注射组,MPF活性提前1h达到高峰;而联合突变体CDC25B-S149A/S321A-mRNA注射组卵裂率又显著高于CDC25B-S149A-mRNA注射组.结论:在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,蛋白激酶A(PKA)对小鼠CDC25B蛋白S149位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式,并且S149位点与S321位点可能具有协同作用.
作者:刘超;肖建英;孙小涵;徐晓燕;于秉治 刊期: 2012年第02期
目的:探讨皮瓣重建兔阴囊生精细胞的凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达的关系.方法:将12只育龄期健康雄性新西兰大白兔随机分成实验组和对照组,每组6只.采用温度计埋藏法测量实验组皮瓣重建前阴囊内睾丸表面温度,手术切除实验组动物阴囊,建立皮瓣重建阴囊动物模型,对照组不作处理.动物模型建立后第8周末,实验组动物测量睾丸表面温度后行睾丸活检:对照组直接进行睾丸活检.采用原位末端标记(TUNEL)法检测睾丸生精细胞凋亡指数,免疫组织化学法结合图象分析仪检测睾丸生精细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达.结果:实验组模型建立前睾丸表面温度为36.0±0.3℃,模型建立后第8周末睾丸表面温度为38.1±0.6℃(P<0.05).模型建立后第8周末实验组睾丸生精小管中生精细胞的凋亡指数(AI)为71.85±2.69%,对照组AI为7.73±4.95%(P<0.05).手术使Bax表达显著升高(P<0.05),Bcl-2表达显著降低(P<0.05);凋亡细胞主要为初级精母细胞和圆形精子细胞.结论:皮瓣重建兔阴囊后睾丸局部温度升高,诱导睾丸生精细胞凋亡增加;生精细胞凋亡增加与Bcl-2基因表达降低、Bax基因表达升高密切相关.细胞内Bcl-2/Bax比值是影响生精细胞凋亡的重要因素之一.
作者:崔红旺;王达利;孙广峰;魏在荣 刊期: 2012年第02期
目的:探讨mmu-miR- 141在早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜组织中的表达及作用.方法:荧光定量PCR(FQ- PCR)及原位杂交检测早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜mmu-miR- 141的表达;MTT和流式细胞术检测孕第4日(d 4)子宫内膜基质细胞被mmu-miR- 141抑制剂作用72h后其细胞活力和细胞凋亡情况.结果:mmu-miR-141在小鼠胚胎着床后(d6)子宫内膜组织中的表达明显低于着床前(d 4)(P<0.05),且表达于基质细胞;其表达下调能使基质细胞增殖活力下降(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.01).结论:mmu-miR- 141通过调控子宫内膜基质细胞的增殖或凋亡,在早孕小鼠胚胎着床前、后的子宫内膜组织中发挥重要的作用.
作者:郑安舜;杨德辉;何俊琳;陈雪梅;丁裕斌;王应雄;刘学庆 刊期: 2012年第02期
目的:探讨人子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞中雌、孕激素对Pbx2蛋白表达的影响.方法:采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)连接法检测人增生期、分泌中期和蜕膜期子宫内膜中Pbx2的表达和分布;体外培养人子宫内膜基质细胞和高分化子宫内膜癌细胞Ishikawa,分别加入雌激素、孕激素、雌、孕激素联合刺激48 h,并以不加雌、孕激素的基质细胞核和Ishikawa细胞为对照组,采用免疫组织化学、免疫印迹法测定各种条件下Ishikawa细胞中Pbx2蛋白的表达.结果:①在人各期子宫内膜组织中,Pbx2表达于腺上皮细胞和基质细胞的细胞核中;Pbx2在分泌中期和蜕膜期基质细胞中的表达显著高于增生期,但在腺上皮细胞中增生期组织的表达高于分泌中期和蜕膜期,差异均具有统计学意义(P<0.05).②Western blotting结果显示,在孕激素和雌、孕激素联合处理Ishikawa细胞组中,Pbx2的表达显著低于对照组(P<0.05),雌激素处理后Pbx2的表达与其他各组间的表达无显著性差异(P>0.05),在人子宫内膜基质细胞(ESC)中,Pbx2的表达在雌、孕激素处理各组间比较均无统计学差异(P>0.05).结论:在人子宫内膜腺上皮Ishikawa细胞中孕激素对Pbx2的表达具有下调作用,在人子宫内膜基质细胞中,Pbx2的调控可能是非雌、孕激素依赖性的.
作者:胡琳莉;钱坤;李海霞;孙莹璞;朱桂金 刊期: 2012年第02期
目的:探讨机械刺激子宫内膜对临床结局的影响及机制.方法:选取行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)且其自然月经周期卵泡晚期超声提示子宫内膜形态不良的不育患者63例,随机分为研究组(n=30)和对照组(n=33).研究组在胚胎移植前1~2周对子宫内膜行机械刺激,对照组未行机械刺激为,统计分析IVF-ET的临床结局.结果:Gn用量、hCG注射日P/E2值、平均获卵数、受精率及移植优质胚胎数组间无统计学差异(P>0.05);研究组子宫内膜形态及子宫内膜和内膜下血流均较对照组有明显改善(P<0.01);研究组的胚胎种植率及临床妊娠率明显高于对照组(P<0.01),早期流产率明显降低(P<0.01).结论:机械刺激子宫内膜可能是通过改善子宫内膜形态及子宫内膜和内膜下血流,从而提高胚胎种植率及临床妊娠率,降低早期流产率.
作者:罗国群;邓伟芬;马文敏 刊期: 2012年第02期
目的:探讨血管生长因子受体3(vascular endothelial growth factor 3,VEGFR3)在ART妊娠胎盘组织中的差异表达及其安全性研究中的意义.方法:收集11例自然妊娠(对照组)和10例ART妊娠(ART组)的单胎足月妊娠选择性剖宫产分娩的胎盘组织,分析比较组间的临床资料;并应用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR技术,观察VEGFR3在胎盘组织的细胞定位,比较VEGFR3在ART和对照组胎盘组织中的差异表达.结果:VEGFR3在胎盘组织中定位于胎盘绒毛合体滋养层细胞胞质.与对照组相比,VEGFR3细胞定位一致,ART妊娠的胎盘组织中VEGFR3 mRNA表达水平有上升趋势,但无统计学差异(P>0.05).结论:ART妊娠的胎盘组织中VEGFR3细胞定位和表达水平未见明显变化.
作者:汤丽莎;张园;赵海君;骆秀翠;高莉;崔毓桂;刘嘉茵 刊期: 2012年第02期
目的:探索我国农村已婚育龄妇女生殖道感染(RTI)的影响因素.方法:在我国8个省调查农村已婚育龄妇女RTI发生水平及相关影响因素,用多水平Logistic回归模型进行数据分析.结果:31.1%的农村已婚育龄妇女过去1年出现RTI症状,以外阴瘙痒和阴道异味分泌物常见.多水平Logistic回归模型结果表明,经济条件差、使用茅厕、盆浴、大龄、文化程度低、务农、绝育或使用宫内节育器、人工流产、烟酒习惯等与RTI高发有关.随机系数模型显示,不同村之间,职业、人工流产、避孕方法及烟酒习惯对RTI感染的影响存在显著差异(P<0.01).结论:家庭和个人因素是农村育龄妇女RTI感染的影响因素,部分因素在村间的影响程度不同.RTI干预应因地制宜.
作者:张妍;徐倩倩;车焱;蔡建华;胡云;商颖;周维谨 刊期: 2012年第02期