目的探讨椎基底动脉供血不足(VBI)与血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(insertion/deletion, I/D)和血管紧张素Ⅱ的1型受体(AT1R)基因A1166-C多态性的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分别检测120例VBI患者和146名正常人对照的ACE I/D基因及AT1R A1166-C突变位点基因型.结果 VBI患者中ACE I/D基因的基因型频率、等位基因频率与正常对照组比较,差异具有显著意义(P<0.05);VBI患者中AT1R基因型频率、等位基因频率与正常对照组比较,差异具有显著意义(P<0.05).两组ACE和AT1R联合基因分析:Ⅱ-AA基因型频率VBI组与正常对照组比较,差异具有非常显著意义(P<0.01),DD-AA基因型频率 VBI组与正常对照组比较,差异具有显著意义(P<0.05),其余联合基因型分析均P>0.05,尚不能认为差异具有统计学意义.结论 ACE基因中D等位基因及AT1R基因A1166点突变基因型C可能对VBI的发生有重要意义;在VBI的发生中,ACE基因及AT1R基因多态性Ⅱ-AA联合基因型对VBI的发生可能存在负协同作用,而DD-AA则可能对VBI的发生存在正协同作用.
作者：李宏芬；沈志霞；刘子洪；元小东；吴寿岭 刊期： 2003年第10期
目的探讨从美洲蟑螂cDNA表达文库中获得的变应原基因对过敏性疾病的治疗价值.方法用生物素-链霉亲合素系统,使用蟑螂过敏病人血清IgG4, 对已构建的美洲蟑螂cDNA表达文库进行免疫学筛选,并对阳性克隆进行序列测定及同源性分析.结果从美洲蟑螂cDNA文库筛选出3个阳性克隆,同源性分析显示,3号克隆核苷酸序列及推导的氨基酸序列与美洲蟑螂主要变应原Cr PI高度同源,一致性达99%,1、2号克隆与已知变应原无显著同源性(score<200),提示其为新的蟑螂变应原基因,其中1号为编码核糖体蛋白S12, 2号为编码Rab11蛋白.结论 3号为克隆编码美洲蟑螂主要变应原Cr PI,另外2个克隆为新的蟑螂变应原基因,对这些基因的进一步亚克隆表达,将有助于重组变应原对过敏性疾病的诊断及治疗.
作者：周珍文；刘志刚；陈玲；吴晓蔓；郑小玲 刊期： 2003年第10期
目的利用毛细管电泳--激光诱导荧光检测系统(CE-LIF)和分子信标杂交理论,建立一种新的聚合酶链反应(PCR)产物分析方法,以应用于野生型基因的临床筛查.方法 PCR扩增30例胃癌组织DNA的p73基因第3外显子、p53基因第5外显子和p16基因第2外显子,所得PCR产物与分子信标杂交,利用CE-LIF检测杂交产物,检出野生型基因.对照方法为单链构象多态性(SSCP)分析.结果 CE-LIF分子信标法与SSCP分析相比较,测得p73第3外显子野生型百分率分别为100%和100%;测得p53第5外显子野生型百分率分别为60.0%和63.3%(P=0.99);测得p16第2外显子野生型百分率分别为20.0%和20.0%.结论利用分子信标与CE-LIF联合检测野生型基因,是一种良好的筛选方法,高效快速、简便、成本低,适宜应用于临床.
作者：姜晓峰；陈佳宁；吕富桢；王金辉；梁红艳 刊期： 2003年第10期
目的建立一种实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞因子表达相对定量方法.方法以肿瘤坏死因子α(TNFα)为待测基因,以葡萄糖3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为内参照进行检测.当靶基因和内参照基因片段克隆入载体后,进行纯化和定量及系列稀释,建立标准曲线,确定实时RT-PCR的扩增效率;同时优化反应条件,使扩增效率接近100%.然后,检测14份待检标本的TNFα和GAPDH的循环阈值(Ct).结果该法检测的低拷贝数为103,线性范围为103～109拷贝,批内变异系数(CV)和批间CV分别为1%和8%.采用2-ΔΔCt法进行数据分析后,处理组TNFα的相对表达量比对照组高8.6～9.8倍,平均为9.2倍.结论新建立的方法敏感,重复性好,数据处理简便、可靠,适用于检测任何基因的相对表达.
作者：张燕；沈茜 刊期： 2003年第10期
目的建立一种人白细胞抗原(HLA)基因分型方法.方法用序列特异性引物和荧光染料SYBR GreenⅠ聚合酶链式反应(PCR)方法,对1份已知HLA-DRB1*12的标本和12份未知型别的临床标本进行HLA-DRB1*12位点检测和分型.结果 12份标本的扩增产物经熔解曲线分析,有3份标本为DRB1*12,产物用离心柱纯化后,直接进行DNA测序,结果证实为DRB1*12阳性.结论 SYBR GreenⅠPCR 操作简便,结果准确,可成为一种HLA基因分型的新方法.
作者：李军燕；李金明 刊期： 2003年第10期
目的探讨流式细胞术在精子染色质结构分析( SCSA)方法对实验结果的影响.方法利用吖啶橙的异染性和流式细胞术检测精子染色质DNA对原位酸诱导变性的敏感性.结果存放精子的方法不同(4℃保存、稀释冻存、原浆冻存)对COMPαt、αt、SDαt值均影响较大,稀释后液氮保存法的人为损伤低.冻存精液融化后立即检测以及测量流速＜300个精子/s对结果无影响.该法的批内、批间变异系数分别为7.28%和8.92%.511名健康男性的COMPαt 平均值及标准偏差为(8.7±11.0)%.由于分析资料呈右偏态分布,COMPαt的参考值范围是＜26.8%.COMPαt与精液常规分析中的d级精子率、平均移动角度、精子密度中度正相关,与a级精子率、精子存活率分别呈中度负相关.结论流式细胞术对精子染色质结构分析能快速分析精子DNA损伤,为评估精子亚临床损伤、男性生育力和预测体外受精胚胎移植的成功率提供了一个新方法.
作者：张宁；张黎；鲁海鸥；汤洁；王喜良 刊期： 2003年第10期
目的探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者FLT3基因及内部串联重复(ITD)突变及临床意义.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增71例ANLL患者FLT3/ITD基因突变.结果 71例ANLL患者中有65例(91.5%)FLT3基因检测阳性,其中有17例出现FLT3/ITD基因突变,71例ANLL患者FLT3/ITD基因突变阳性率为23.9%.FLT3/ITD基因突变阳性ANLL患者外周血白细胞计数及骨髓白血病细胞比例显著高于FLT3/ITD基因突变阴性ANLL患者(P<0.01和P<0.05).FLT3/ITD基因突变阳性ANLL CR后1年内复发率显著高于FLT3/ITD基因突变阴性组(P<0.05). 结论 FLT3/ITD基因突变可作为部分ANLL患者微小残留病检测的新的基因标记;FLT3/ITD基因突变阳性ANLL常伴外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例及明显增高的复发率,FLT3/ITD基因突变阳性ANLL预后较差.
作者：徐兵；张燕；田红；周淑芸 刊期： 2003年第10期
目的探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)和可溶性E-选择素(sE-selectin)水平的变化在判断干扰素-α 2b(IFN-α 2b)疗效中的意义. 方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测32例CHC患者治疗前后血清sICAM-1和sE-selectin水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)荧光定量技术测定血清HCV-RNA水平. 结果 CHC患者治疗前血清sICAM-1△和sE-selectin▲水平均显著高于正常对照组(P<0.01),且均与丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平正相关(△r=0.891 4,▲r=0.794 6);IFN-α 2b治疗有效者治疗前血清HCV-RNA水平明显低于无效者(P<0.01);治疗3个月和6个月后,有效者的sICAM-1和sE-selectin水平都明显下降(P<0.01),无效者则差异不明显.结论血清sICAM-1、sE-selectin水平可用于CHC患者炎症活动的监测,并可作为预测IFN-α 2b治疗疗效的新指标.
作者：滕菁；陈文豪；徐文宏；洪延山 刊期： 2003年第10期
目的建立中国人原发无精与少精症Y染色体无精症因子(AZF)区域微缺失临床基因诊断的方法并进行初步评价.方法在完成中国人原发无精与少精症Y染色体无精症因子区域微缺失分子流行病学研究的基础上,采用盲法和多重聚合酶链反应-琼脂糖电泳检测技术,利用挑选的AZFa、AZFb、AZFc 3个区域共8个序列标签位点(STS),对100例原发无精与80例少精症患者的精液进行微缺失分析.两组患者中各有27例和16例在事先分子流行病的研究中已确认存在AZF微缺失.结果在原发无精症患者中检出STS位点缺失27例,原发少精患者中检出AZF区STS位点缺失16例, 所有试验前被确认的AZF微缺失均被检出,未发现假阳性与假阴性结果,检测的灵敏度与特异性均为100%.结论本研究所确定的AZF区域8个STS位点缺失与中国人原发无精和严重少精密切相关,利用上述STS位点与试验设计的多重聚合酶链反应技术进行微缺失分析,可以准确、方便、快速地完成中国人原发无精与少精症AZF区域微缺失的基因诊断,适于在临床实验室中推广应用.
作者：杨元；张思仲；彭黎明；丁显平；林立；王军 刊期： 2003年第10期
目的通过对同一临床实验室不同生化分析系统进行方法对比和预期偏差评估,探讨不同生化分析系统之间检测结果是否具有可比性或检测结果的偏差是否在允许的范围内.方法按照EP9-A文件的要求,以美国强生Vitros- 750生化分析仪为对比方法,日立7600生化分析仪为试验方法,用患者血清对丙氨酸氨基转移酶、总蛋白、总胆红素等14个生化项目进行检测,计算相关系数和直线回归方程,对两分析系统之间的预期偏差进行评估.结果在所检测的14个项目中,总胆红素和直接胆红素两系统测定结果的预期偏差不能被接受;其余项目测定结果的预期偏差可以接受.结论当实验室内同一检测项目存在两套以上分析系统时,应对其进行方法对比和偏差评估,才能保证检测结果的准确稳定.
作者：孙虹；台虹；赵崇吉；郭恒云；蒋宏君；牛华；王建琼；王凡；孙鹥 刊期： 2003年第10期
本研究根据细菌16S rRNA基因的特点[1],设计了一套保守的通用引物,并针对每种细菌各设计了两条特异性探针,建立了膜芯片技术平行检测病原菌DNA的方法.
作者：刘毅；韩金祥；黄海南；梁浩；黄海燕 刊期： 2003年第10期
为了解本地区葡萄球菌药敏变迁情况,我们检测了4年来从临床标本分离的485株葡萄球菌对糖肽类等常用抗菌药物的敏感性.
作者：史伟峰；王玉月；姚玉华；何彩珍；沈丽 刊期： 2003年第10期
由于急性髓细胞白血病伴骨髓三系病态造血(TMDS)有其独特的生物学和临床特征,已引起越来越多的学者重视和研究[1].我院共收治225例初发的急性髓细胞性白血病(AML),其中30例伴三系病态造血(AML/TMDS).我们对其实验室诊断的特征和临床疗效及预后进行了分析.
作者：童向民；金洁；宋菊贞；陈志妹 刊期： 2003年第10期
本研究在对依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)研究中发现,依R菌在有R条件下生长旺盛,在无R条件下的普通L-J培养基中出现细菌L型样改变[1].为此,对其进行了动态研究.
作者：钟敏；胡忠义；王易伟；钟明；方启雪；王洪海 刊期： 2003年第10期
耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)因其对β内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等药物的多重耐药而成为危害严重的医院感染病原菌之一,不适当的治疗常常造成病情的延误以及病原菌在病房内的流行,这就需要临床微生物室快速准确地检测出MRS.应用聚合酶链反应(PCR)直接检测mecA耐药基因,具有高度的特异性和灵敏度且报告时间较快[1].以往报道的PCR方法都要求先提取细菌染色体DNA做模板,我们在实验中发现不进行标本的预处理,直接以菌液进行PCR扩增,亦可得到满意结果.
作者：陈维贤；张莉萍；叶耀红；李兴禄 刊期： 2003年第10期
冠心病是临床上较为常见的一种疾病,它是由于动脉粥样硬化所引起的一种心血管病,其发病率和死亡率很高[1].传统认为,冠心病的形成与脂类(脂蛋白)代谢异常有着密切的关系,然而,有30%～40%的冠心病的形成与脂质和脂蛋白无关[2].Schwerther等通过流行病学调查,认为低浓度的胆红素是冠状动脉性疾病的独立危险因素.为探讨胆红素与冠心病之间的关系,我们对109例冠心病患者的血清胆红素浓度进行了检测.
作者：杜菊兰；万汝根 刊期： 2003年第10期
男性不育,是一种病因比较复杂的临床综合征,其病因很多,有的病因已清楚,但仍有不少病因不明确.为从分子水平上了解特发性男性不育症(特发性少精、弱精、畸精子症)的分子机理,我们应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)结合FITC-Annexin V/PI荧光染色定量检测正常生育与特发性不育症患者精子凋亡的情况,同时建立一种从分子水平评估精子功能和男性生育力的新方法.
作者：周增娣；马丽；葛争鸣；赵明俊；王光荣 刊期： 2003年第10期
血小板活化是止血和血栓形成的主要原因[1],在血栓性疾病中,检测血小板活化值,是对反映血栓形成的诊断、预防、治疗监测的重要手段[2].用流式细胞术(FCM)能全面评估血小板的功能[3],但由于血小板非常容易活化,标本的处理所产生的活化假象,使我们很难获得准确、可信赖的血小板活化值[4];这些检测血小板功能的方法[5]常常是有争议的,通常是由于方法学本身的原因造成人为血小板活化,影响临床诊断价值,这就要求建立一种灵敏、精确、简便可用于临床常规检测血小板功能的方法显得尤为重要[6].
作者：祝建军；邵平扬；王宇军；郑优真；杨柳；丁美华 刊期： 2003年第10期
类风湿性关节炎(RA)是一种常见的高发病及高致残性系统性自身免疫性疾病,全世界发病率约1%[1].近几十年来有关RA的发病机制、试验诊断指标及其治疗研究一直备受关注.RA的病理改变以关节滑膜慢性炎症性增生、关节软骨和骨质进行性不可逆性破坏为特征.而早期诊断、早期治疗是阻止病情发展和减少致残率的关键.由于缺乏敏感、特异的早期实验室检查指标,现行的诊断主要依靠临床症状及X线检查,当患者被确诊时,往往已出现不可逆性关节损伤.因而临床上迫切需要有助于RA早期诊断,而且能够预示病情进展、观察疗效的无创性实验室指标.
作者：范列英 刊期： 2003年第10期
在大肠埃希菌中有些菌株能引起小儿和成人腹泻的称为致泻大肠埃希菌(DDEC).根据致泻大肠埃希菌的致病特点,目前公认的至少有6类:肠致病性大肠埃希菌(EPEC);肠出血性大肠埃希菌(EHEC);肠产毒素大肠埃希菌(ETEC);肠集聚性大肠埃希菌(EAggEC);肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC);产志贺样毒素大肠埃希菌(SLTEC)等[1].在国内腹泻病原学研究中,还不断有新的致泻大肠埃希菌被发现,如高毒力岛大肠埃希菌(HPIEC)等[2].毒力岛也称致病岛(PAI)是近年来在医学细菌学领域中出现的一个新名词,各种病原菌的毒力因子都有一个原核基因组的特殊编码区,这个区域命名为毒力岛.PAI初是在对人致病性大肠埃希菌中发现的,与细菌的致病性密切相关[3].PAI的产生是通过水平基因转移,从一种病原菌转移到另一种细菌中,细菌的遗传物质亦从这种细菌基因组转移到另一种细菌,并构建新的基因岛(genomic island)或PAI.细菌在短期内发生质与量的飞跃,产生许多新的变种,这种演变是细菌进化的关键.基因岛的功能是直接或间接地增强了细菌的适应性,使细菌和生存宿主之间相互影响,有助于细菌生态学的适应性和致病性,推进了细菌的演变[4].
作者：朱庆义 刊期： 2003年第10期
作者：王露楠 刊期： 2003年第10期
真菌感染逐年增多,且以呼吸道,尤其是以肺部为主.其临床表现缺乏特异性,诊断困难.北京协和医院报道,1953～1993年,尸检3 447具,发现深部真菌感染85例,生前明确诊断者仅5例,占5.9%,漏诊94.1%.为此,我们针对呼吸道真菌感染病原学诊断标准作一探讨.
作者：杨肇立；胡馥生；李俊如；郑遥奇；周文；李键；刘克兰；任萍；苟文强 刊期： 2003年第10期
肺炎克雷伯菌是医院和社区感染的重要病原菌,产生超广谱β内酰胺酶(ESBLs),对第三代头孢菌素产生耐药性.为了对我院产肺炎克雷伯菌的耐药情况和基因型特征进行调查,以便采取有效措施加以控制,我们对1999年8月～2001年12月临床分离的肺炎克雷伯菌,进行了耐药性和基因型研究.
作者：李从荣；李艳 刊期： 2003年第10期
我们建立了一种采用2-巯基丙酸的纸片协同法来检测产金属β内酰胺酶(metal-β-lactamases,简称金属酶)细菌的方法.
作者：王春新；谢国强；赵琪；陈文 刊期： 2003年第10期
蛋白芯片、基因芯片同属生物芯片技术.生物芯片技术是20世纪90年代中期研究进展的重大科技项目.随着生命科学的长足进步,当21世纪人类基因组计划即将完成,蛋白组计划的启动之即,生物芯片技术迅速的发展起来,受到各国专家学者的重视.然而,科学家们在基因组研究方面虽取得了很大的成果,但要认识基因及蛋白质在生命中的作用,首先必须了解细胞中的蛋白质.因细胞中的m-RNA的浓度和与之所对应的蛋白质在量上没有必然的联系.为了研究一个细胞内成百万不同的蛋白质,提出了蛋白芯片技术,显然蛋白芯片技术是伴随着基因组的研究迅速发展起来的一项高新技术.
作者：齐军 刊期： 2003年第10期
2003年7月8日,中华医学会检验医学分会在北京召开了华北五省市严重急性呼吸综合征(SARS)实验检测研讨会.会议由中华医学会检验医学分会主任委员、解放军301医院检验科主任丛玉隆教授主持.来自天津、河北、内蒙、山西、北京等地检验界专家作了报告,会议还邀请广州南方医院检验科主任王前教授做了广东省SARS回顾性分析.
作者：中华医学会检验医学分会 刊期： 2003年第10期
本研究对一种新型的嗜血杆菌分离培养基与其他4种常用嗜血杆菌培养基进行了对照,并统计了临床标本分离率,报告如下.
作者：卢先雷；喻华 刊期： 2003年第10期
肠息肉呈便隐血阳性者文献报道甚少.近期,我们从常规体检便隐血试验阳性而追踪发现1例无明显临床症状的多发性肠息肉患者.
作者：陈立敏；常蜀英；王洪波；曹传平 刊期： 2003年第10期
