目的 对基于前列腺健康指数(PHI)建立的预测前列腺癌(PCa)的列线图模型进行验证,评价该模型预测前列腺癌的价值.方法 收集2015年8月至2017年5月在北京大学第一医院就诊,疑似前列腺癌而经直肠超声引导前列腺穿刺活检的人群(年龄34～90岁)的术前血清和基本资料,筛选前列腺特异性抗原(tPSA)大于4 ng/ml的人群共391例,其中235例的tPSA在传统灰区4～10 ng/ml,156例tPSA>10 ng/ml.对所有血清统一进行前列腺特异性抗原同源异构体2(p2PSA)检测,并经计算得到PHI.以前列腺活检病理结果为诊断前列腺癌的金标准.对该人群使用来自上海地区建立的基于PHI、患者年龄和前列腺体积的列线图模型进行验证.利用受试者工作特征曲线(ROC)评估该模型对前列腺癌的诊断价值.结果 本研究纳入的391例研究对象中,175例(44.8％)终诊断为前列腺癌.ROC曲线分析显示该模型在此人群中预测前列腺癌的效能高于临床常用的传统指标tPSA(AUC:0.786比0.578,P<0.0001)和f/t(AUC:0.786比0.672,P=0.0002).对于tPSA灰区(4～10 ng/ml)的人群,该模型的预测价值也高于tPSA(AUC:0.720比0.513,P=0.0003)和f/t(AUC:0.720比0.626,P=0.0425).结论 基于PHI建立的前列腺癌预测模型经验证具有较好的前列腺癌辅助诊断的价值.
作者：孙奎霞；闫存玲；李志艳；刘平；张伟；何群；宋毅；王静华 刊期： 2018年第07期
目的 分析血清前列腺癌相关非编码RNA转录物1(PCAT-1)在结直肠癌(CRC)中的辅助诊断价值.方法 收集2015年10月至2017年1月在南通大学附属医院手术治疗并经病理确诊的CRC患者73例,结直肠息肉患者54例,健康对照者62名.运用实时荧光定量PCR的方法分别检测CRC患者、结直肠息肉患者、健康对照者血清PCAT-1的表达水平.分析CRC患者血清PCAT-1的相对表达水平与临床病理特征的关系.受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估PCAT-1、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原199(CA199)单独和联合检测对CRC的诊断价值.结果 CRC患者、结直肠息肉患者和健康对照者血清PCAT-1的相对表达量分别为2.1900(0.8525,6.7150)、0.5865(0.3318,1.6970)、0.5300(0.1275,0.9575).CRC患者血清PCAT-1的表达水平与患者年龄(U=593,P=0.7533)、性别(U=536,P=0.3908)、肿瘤大小(U=549,P=0.5572)、肿瘤部位(U=584,P=0.4267)无关,而与肿瘤分化程度(U=30,P=0.0384)和肿瘤分期(U=399,P=0.0050)相关.ROC曲线分析血清PCAT-1、CEA及CA199对CRC的诊断效能.CRC患者区别于健康对照者,PCAT-1、CEA和CA199的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.836、0.756、0.493.三项指标联合检测敏感度为93.2％(68/73),高于单一指标.CRC患者区别于结直肠息肉患者,ROC曲线下面积分别为0.739、0.673、0.515.三项指标联合检测敏感度为95.9％(70/73),高于单一指标.结论 PCAT-1对CRC具有辅助诊断价值.PCAT-1、CEA和CA199联合检测显著提升CRC的诊断效能.
作者：倪慧；申娴娟；鞠少卿 刊期： 2018年第07期
目的 分离鉴定人血清中的外泌体,探讨将外泌体癌胚抗原(CEA)作为结直肠癌诊断指标的可行性.方法 回顾性研究.选择同济大学附属同济医院2015年10月至2016年12月确诊的结直肠癌病例组64例患者(血清CEA正常病例组41例及血清CEA增高病例组23例),良性结直肠疾病对照组20例患者及正常对照者40名.采用ExoQuick试剂盒从血清中提取外泌体,应用透射电镜、Western blot对外泌体进行形态学和分子表型鉴定;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清CEA及血清外泌体CEA浓度.利用U检验和受试者工作特征曲线(ROC)判断在结直肠癌中的诊断效能.结果 采用ExoQuick试剂盒成功提取血清中的外泌体.ELISA法检测64例结直肠癌病例组外泌体CEA浓度为(1056.36～28637.78)pg/ml,显著高于良性疾病对照组(394.61～2437.83)pg/ml以及正常对照组(610.89～2076.70)pg/ml(分别U=124.000,U=119.000,均P<0.001);41例血清CEA正常病例组外泌体CEA浓度为(1056.36～5832.07)pg/ml,显著高于良性良性疾病对照组和正常对照组(分别U=113.000,U=119.000,均P<0.001);血清Exosomal CEA浓度对结直肠癌诊断的ROC曲线下面积为0.954(95％CI=0.919～0.988),优于血清CEA浓度[0.636(95％CI=0.531～0.742)]对结直肠癌的诊断效能.结论 分离并检测血清外泌体CEA浓度对结直肠癌具有良好的诊断效能,有可能成为结直肠癌早期诊断标志物.
作者：刘万超；权文强；吴军录；潘星昊；吉萍；孙祖俊；李冬 刊期： 2018年第07期
目的 建立一种新型分子探针设计方法,用于提高microRNA检测灵敏度和特异性.方法 实验研究.利用链置换原理将靶标杂交序列部分设计在分子信标茎端,在此基础上再利用核酸结构分析软件DNAman优化分子探针的二级结构设计出新的探针,分别称为链置换优化探针(MB-D)和链置换二级结构优化探针(MB-D plus),将MB-D和MB-D plus与传统分子信标(MB-C)对比检测microRNA-21及其单碱基突变体,分析不同探针对于microRNA检测的低检出限、重复性和特异性等.结果 MB-C对microRNA-21的低检出限为1 nmol/L,MB-D和MB-D plus的低检出限分别为0.1 nmol/L和0.01 nmol/L;所建立的MB-D plus探针可以显著区分miR-21与单核苷酸突变靶标.结论 基于链置换原理并通过二级结构优化的分子探针可显著提高探针对于microRNA检测的灵敏度和特异性.
作者：刘炼华；陈晓辉；周旋；陈菲；戴玲；张洪；罗阳；贾玫 刊期： 2018年第07期
目的 研究在不同浓度链霉素下,aadA2基因盒在整合子attI位点的整合频率.方法将已知序列的1类整合子克隆到pACYC184质粒,该重组质粒命名为pACIDA;将该整合子上的整合酶基因克隆到pET28a质粒,该重组质粒命名为pETINT;这两重组质粒依次转化大肠杆菌BL21(DE3).转化后的大肠杆菌在加不同浓度的链霉素的LB液体培养基中,37℃过夜培养.使用荧光定量PCR技术分别测定aadA2基因盒在attI位点发生整合作用的整合子的拷贝数和总整合子的拷贝数,前者除以后者即可获得整合频率.结果高表达整合酶的情况下,在加入的链霉素浓度分别为0、20、30、40、50μg/ml时,aadA2基因盒在attI位点的整合频率依次为(1.97±0.24)×10-3、(3.23±1.77)×10-3、(3.27±0.67)×10-3、0.45±0.13、1.32±0.11.而在没有整合酶高表达的情况下背景频率低于(1.75±0.33)×10-7.结论高浓度的链霉素能够促进整合子中aadA2基因盒在整合子中attI位点的重组效率.
作者：杨泽华；胡敏；周双艳；杜建明；申彬；杜怡青；罗晓旭；梁转霞 刊期： 2018年第07期
目的 探讨无创产前基因检测(NIPT)在产前筛查异常指标中的应用价值.方法 回顾性分析2014年11月至2016年8月在广东省妇幼保健院因产前筛查指标异常行NIPT检测的孕妇2837例,分为单纯高龄组(预产期年龄≥35岁),单纯血清学筛查指标中位数倍数(MoM)异常组及单纯胎儿颈项透明层(NT)增厚(2.5～3.0 mm)组.NIPT高风险病例行羊水或脐血产前诊断分析,NIPT低风险病例于22～26周对胎儿结构行超声多普勒检查.随访全部病例并计算各产前筛查异常指标下NIPT对常见染色体非整倍体及性染色体非整倍体的检测效能.结果 2837例孕妇中,单纯高龄组共2448例,其中NIPT高风险25例,1例拒绝产前诊断,产前诊断分析确诊17例;血清学筛查指标MoM值异常组共351例,NIPT提示性染色体异常3例,确诊2例;单纯NT增厚组共38例,NIPT提示21三体高风险1例,与产前诊断结果一致.高龄、血清学筛查指标MoM值异常及NT增厚(2.5～3.0 mm)3个指征下,NIPT对常见染色体非整倍体及性染色体非整倍体的检测效能如下:敏感度分别为17/17、2/2、1/1,特异度分别为99.7％(2423/2431)、99.7％(348/349)、100％(37/37),阳性预测值分别为68％(17/25)、2/3、1/1,阴性预测值分别为100％(2423/2423)、100％(348/348)、100％(38/38).随访发现NIPT低风险孕妇中有8例异常,其中5例因胎儿超声结构异常引产,2例因孕妇产科并发症而流产,1例死产.结论 对于高龄、血清学筛查指标MoM值异常及NT增厚(2.5～3.0 mm)的孕妇,NIPT对常见的染色体非整倍体筛查效能良好,对性染色体非整倍体的检出也有一定价值,有效地降低了漏诊和介入性产前诊断的比例;对于NIPT低风险的孕妇,常规产检和Ⅲ级超声多普勒排除胎儿发育异常也是必要的,以免漏诊异常胎儿.
作者：郭芳芳；杨洁霞；齐一鸣；侯亚萍；彭海山；王东梅；欧阳浩新；尹爱华 刊期： 2018年第07期
目的 建立一种基于正己烷萃取系统的乳糜(正己烷)实验方法.方法 取乳糜(乙醚)实验阳性的胸腔积液样本,用正己烷替代乙醚,评估方法的可行性,并寻找正己烷萃取系统的试剂与样本适体积比;对苏丹Ⅲ染色环节进行改良,建立新的乳糜(正己烷)实验和标准操作流程.选取120份人血清为模拟乳糜标本,根据甘油三酯含量不同将其分为3组:A组(TG≤1.7 mmol/L),B组(5.6
作者：王贝晗；王瑞玲；张小丽；王翠；丁琪；刘丽萍；赵榕；杨晓莉 刊期： 2018年第07期
外泌体是一类由细胞释放的直径为30～150 nm的天然微囊泡,包含与来源和功能相关的生物活性分子,可以在细胞间和组织间进行信息传递,是细胞间通讯的重要介质.外泌体介导的信息传递参与调控机体的生理功能及病理状态,在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用.本文综述了近年来外泌体在肿瘤研究领域的进展,分别从起源及生物学功能、分析检测方法和肿瘤诊治等方面进行阐述.
作者：叶芸；杨柳；郝晓柯 刊期： 2018年第07期
胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤,起病隐匿,发病率和死亡率均较高,目前仍缺乏有效的干预策略.近期研究表明,外泌体微小RNAs(miRNAs)在胃癌的发生、发展中起重要作用.胃癌细胞自分泌的外泌体miRNAs可调控胃癌的生长、复发、转移及肿瘤耐药等.不仅如此,肿瘤微环境中的外泌体miRNAs也可与肿瘤细胞进行细胞间的信号传递和交换,进而影响胃癌进展.由于肿瘤细胞释放到循环中的外泌体含有丰富的特异性miRNAs,且稳定性较好,因此外泌体miRNAs有潜力成为胃癌诊断标志物及胃癌治疗的新靶点.
作者：孙梦瑶；蔡思；王杰；倪振华；汤庆丰 刊期： 2018年第07期
本文从外泌体的发生和释放机制出发,阐述了HBV和HCV标志物在外泌体中的存在情况和随外泌体释放的效应,探讨了由此产生的传染性、保护作用以及对治疗和检测的影响.并以研究数据初步证明了核酸检测这一金标准的重要性,指出隐匿性感染的又一新的原因是HBV和HCV标志物存在于外泌体.
作者：马越云 刊期： 2018年第07期
中枢神经系统肿瘤发病率较高,累及年龄段广泛,且手术切除困难,致死率高.由于现有的检查方法(影像学、细胞形态学、细胞遗传学等)存在敏感度差、阳性率低、取材困难等缺陷,因此中枢神经系统肿瘤的早期诊断和实时监测较为困难.脑脊液循环于脑室和脊髓池,与中枢神经系统直接接触,含有大量的中枢神经系统代谢物质,因此成为了检测中枢神经系统肿瘤的理想样本.相对于传统活检而言,脑脊液的液体活检具备创伤小、连续取样、即时反映病程进展等多项优势.本文将对脑脊液中的液体活检分子靶标如DNA、RNA、循环肿瘤细胞等作一简单综述,并介绍包括二代测序、数字PCR等在内的相关检测技术在中枢神经系统肿瘤诊断、治疗和预后判断中的作用.(中华检验医学杂志,2018,41:554-558)
作者：黄秀；关明 刊期： 2018年第07期
目的 针对常规生化检测项目,制定自动审核规则,借助实验室信息管理系统实现检验结果的自动审核.方法 依据美国临床和实验室标准协会(CLSI)AUTO-10A及医学实验室质量和能力认可准则(ISO15189:2012)的指导意见,在室内质控在控的基础上,实验室设计自动审核逻辑,设置六大审核规则,包括室内质控规则、样本状态判断规则、逻辑紊乱规则、值域及多次结果比较(ΔCheck)规则(包括危急值、警示值、参考区间)、关联矛盾规则、异常模式规则,并将审核逻辑和规则搭建在实验室信息系统中.对2016年10月至2017年4月本中心实验室常规生化检测项目,分别按项目、条码统计自动审核通过情况,并与临床诊断信息及人工审核情况进行比较.结果 按项目统计自动审核通过率超过65％,按条码统计通过率为45％左右,与临床诊断符合率92％,经过规则的进一步完善,与人工审核相比较,通过一致率从97.48％提高到100％,不通过一致率从82.98％提高到85.21％.结论 (1)设置的自动审核逻辑和规则可以实现半数常规生化检验结果的自动审核,且与人工审核判断通过有较高的一致率;(2)新增加的规则必须经过一定周期的验证,方可正式应用;(3)自动审核可以实现检验后步骤的自动化,缩短报告审核时间,提高工作效率.
作者：李晓博；普智飞；陶春林；高红 刊期： 2018年第07期
