目的:建立、优化快速检测临床标本中光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法,并评价其临床应用价值.方法:以光滑假丝酵母菌ITSⅡ基因的一段高度保守序列为扩增靶序列,合成引物和探针,并与pMD19-T构建重组质粒作为标准品,建立检测光滑假丝酵母菌的实时定量荧光PCR方法.从线性范围、重复性、敏感性、特异性等4个方面对反应体系进行方法学评价.用建立的实时荧光定量PCR方法对1 042例临床标本(包括血液、尿液、痰液、胸水、支气管肺泡灌洗液)进行检测,并与真菌培养法进行比较.结果:建立的光滑假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法的灵敏度可达10 CFU/ml；与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应.重复检测样本,其循环阈值的试验内及试验间变异系数均小于10％.用于临床标本检测时共检出96份阳性标本,与真菌培养法(检出93份阳性标本)的一致性好(Kappa值为0.925).结论:实时荧光定量PCR方法检测光滑假丝酵母菌灵敏度高、特异性及重复性好；可直接用于各种临床标本中光滑假丝酵母菌的检测,能大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据.
作者：龙燕；郑磊；曾方银；王前 刊期： 2012年第02期
目的:观察短波紫外线(UVC)疗法对老年人慢性难愈合创面的疗效,并初步分析影响其剂量和疗效的相关因素.方法:选择老年慢性难愈合创面患者58例共106个创面,患者年龄73～91岁.紫外线治疗剂量为36～1 800 mJ/cm2,每日或隔日1次,直至创面完全上皮化.观察不同部位和不同分期创面的愈合情况和愈合时间,分析UVC治疗剂量和创面部位与创面愈合状态的关系.结果:经UVC治疗后,创面愈合77例,显效25例,无效4例,总有效率96.2％.不同部位创面UVC治疗剂量差异显著,手足区＞肛周会阴区＞头颈区＞四肢区＞躯干区(P＜0.01)；不同部位创面愈合总有效率差异不显著(P=0.472 4),但不同部位治疗次数和创面愈合时间差异显著,肛周会阴区＞躯干区＞手足区＞四肢区＞头颈区(P＜0.01).在93个压力性溃疡创面中,52个Ⅱ期创面治疗次数[(2.71±0.68)次]及愈合时间[(7.78±2.12)d]均少于41个Ⅲ期创面[分别为(4.09±0.84)次和(13.96±2.38)d],创面愈合率(92.3％)和总有效率(100.0％)也均高于Ⅲ期创面(愈合率为61.0％,总有效率为90.2％,P＜0.01).结论:UVC治疗老年人慢性难愈合创面疗效显著,病灶部位是影响UVC治疗剂量的重要因素,而病变分期是影响创面愈合效果和时间的主要因素.
作者：张丽；陈蔚；王秋华；郭艳梅；黎春华；彭楠；李晓瑛 刊期： 2012年第02期
目的:探讨三棱针穴位针刺结合挤压手法在北方蝮蛇咬伤救治中的应用价值.方法:2010年6月-2011年9月就诊的60例四肢蝮蛇咬伤患者,随机分为两组,对照组使用抗蝮蛇毒血清及季德胜蛇药片等常规治疗,治疗组在此基础上早期进行患肢穴位三棱针针刺并从近心端自近及远挤压肿胀部位以利毒液排出.比较患者伤后第0(就诊时)～3天的患肢肿胀评分和疼痛评分的变化,皮肤软组织坏死情况、脏器功能损害发生率、凝血功能损害发生率及住院时间.结果:治疗组伤后第1、2、3天患肢肿胀评分和疼痛评分均小于对照组(P＜0.05);治疗组并发症发生率少于对照组(P＜0.05)；组织坏死面积小于对照组(P＜0.05).结论:用三棱针穴位针刺结合挤压手法辅助治疗北方蝮蛇咬伤患者,可显著减少并发症,减轻肿胀、疼痛症状及局部组织坏死,值得推广应用.
作者：张建波；马永生；赵治国；苏琴；张宪；党伟；秦宇红；闫乐媛；赵晓东 刊期： 2012年第02期
目的:探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)对体外培养人卵巢癌SKOV3和AO细胞的杀伤作用.方法:于体外培养的SKOV3和AO细胞分别加入不同浓度的5-ALA(0.1、0.5、1.0、2.5、12.5 mmol/L)孵育4h,以波长为630 nm的半导体激光进行照射,照射能量密度分别为0.1、0.5、2.5、12.5 J/cm2.用四唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率,并与单纯药物对照组(不同浓度5-ALA孵育、无光照)、单纯光照组(无5-ALA孵育、不同能量密度光照)与阴性对照组(无药物孵育、无光照)进行比较.计算5-ALA-PDT对SKOV3和AO细胞的半数杀伤浓度(IC50).结果:5-ALA-PDT处理后两种卵巢癌细胞存活率均明显下降(P＜0.05),提示5-ALA-PDT对体外培养的人卵巢癌SKOV3和AO细胞均有杀伤作用,其杀伤作用随5-ALA的浓度和激光能量密度增加而增加,当5-ALA浓度超过2.5 mmol/L或照射能量密度超过2.5 J/cm2时细胞存活率变化不明显.单纯药物对照组、单纯光照组的细胞存活率与阴性对照组相比差异无显著性(P＞0.05).5-ALA-PDT对两种卵巢癌细胞杀伤效应强弱不同,对SKOV3及AO细胞的半抑制浓度(IC50)分别为0.34 mmol/L和2.50 mmol/L,两者差异有显著性(P＜0.05).结论:5-ALA-PDT可有效杀伤体外培养的人卵巢癌细胞SKOV3和AO细胞,且对两种细胞的杀伤作用有差异,对SKOV3细胞株的杀伤效应要强于AO细胞株.
作者：彭燕蓁；沈铿；魏薇 刊期： 2012年第02期
目的:了解1995年以来解放军总医院第一附属医院烧伤病区病原菌结构及主要病原菌耐药水平的变化.方法:分析1995-2011年烧伤病区标本细菌鉴定及药敏试验结果.结果:1995年构成比高的病原菌前3位依次为大肠杆菌(ECO,21.35％)、铜绿假单胞菌(PAE,19.53％)和金黄色葡萄球菌(SAU,17.71％),2011年构成比高的前3位变为鲍曼不动杆菌( ABA,20.32％)、SAU(19.59％)和PAE(18.29％).PAE和ABA两种病原菌对亚胺培南的耐药率逐渐升高,至2011年分别接近70％和超过了90％.SAU对苯唑西林的耐药率从1998年开始快速升高,2003年超过70％,而后波动于60％～70％.结论:17年来我院烧伤感染病原菌的结构发生了明显变化.虽然构成比经历了大幅度的变化过程,SAU和PAE依旧保持了主要病原菌的地位;而ABA则异军突起,成为构成比高的病原菌,且这3种病原菌的耐药水平也达到了非常高的水平.
作者：于勇；盛志勇；柴家科；蒋伟；朱静 刊期： 2012年第02期
目的:调查唇裂术后继发畸形患者的体像障碍特点及人格状态,探讨整形修复手术对唇裂术后继发畸形患者体像与人格状态的影响.方法:采用体像障碍自评量表及艾森克人格问卷,对75例唇裂术后继发畸形患者于整形手术前后进行问卷调查,分析结果.结果:体像障碍状态术前的检出率为13.3％(10例).75例患者体像障碍自评量表评分手术前为(23.488±11.192)分,手术后下降为(15.846±11.219)分(P=0.000)；术后躯体缺陷感、情绪受损度和社会交往度3个方面改善明显,表现为评分较术前明显降低(P＜0.05).患者术前艾森克人格问卷中的神经质或情绪的稳定性量表(N量表)、精神质量表(P量表)及掩饰量表(L量表)的分值分别为(49.381±11.754)分、(49.102±8.569)分和(45.781±9.826)分,术后分别为(45.833±12.802)分、(47.689±7.758)分和(47.939±11.083)分,术后与术前比较,差异均有显著性(P＜0.05或P＜0.01).结论:唇裂术后继发畸形患者体像障碍状态的比例较高、整形修复手术可明显纠正患者的消极体像,提高患者的自信心；术后患者情绪稳定性明显提高,社会适应性显著增强,心理防御显著提高.
作者：薛紫涵；刘晨；柴密；柳春明；李桂珍 刊期： 2012年第02期
目的:探讨FasL基因转染的抗原特异性树突状细胞(DC)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用.方法:用携带FasL基因的腺病毒转染DC和负载自体抗原——光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)R16肽段的DC,制备FasL转染的DC(FasL-DC)和抗原负载FasL-DC(“杀伤性”DC).检测FasL基因在DC中的表达及其对DC存活、表型成熟和T细胞增殖的影响.通过IRBP和完全弗氏佐剂皮下注射免疫,诱导C57BL/6小鼠产生EAU.在体外检测抗原负载的FasL-DC及FasL中和抗体对诱导EAU小鼠的抗原致敏的和活化的致敏T细胞的增殖和凋亡作用.结果:FasL-DC可高效表达FasL;FasL的表达既未诱导DC的凋亡,也不影响其表型成熟和刺激T细胞的功能；在体外抗原负载的FasL-DC对抗原致敏和活化的致敏T细胞均有特异性杀伤作用,FasL中和抗体可阻断对T细胞的杀伤作用.结论:抗原负载的FasL-DC对EAU的自身抗原特异性T细胞有明显的杀伤作用,为EAU的临床治疗提供了新思路.
作者：陈杰；刘峰；孙卫民；宋斗 刊期： 2012年第02期
目的:观察中药复方托毒生髓方治疗慢性骨髓炎的疗效.方法:45只家兔随机分成4组:空白对照组正常饲养；其余3组制备慢性骨髓炎动物模型:右胫骨内侧钻开0.5 cm×1.0 cm骨窗,注入鱼肝油酸钠0.5 ml和5× 106 CFU/ml金黄色葡萄球菌悬液0.5ml,骨蜡封闭骨缺损,3周后X线检查证实模型复制成功.托毒生髓方组以托毒生髓方提取液灌胃(5 ml,每日2次)和局部外洗(10 ml,每日4次),庆大霉素组和模型组分别以庆大霉素稀释液10 ml或生理盐水10ml外洗,每日2次或4次.治疗2个月,于治疗开始后第20、40、60天行白细胞计数、血清溶菌酶含量检测和动物病变肢体X线检查.结果:模型组白细胞计数和血清溶菌酶含量于各观察时间点均较空白对照组明显下降(P＜0.01),庆大霉素组虽有所恢复,但仍明显低于空白对照组,托毒生髓方组则较模型组和庆大霉素组明显升高(P＜0.01),治疗第60天均接近空白对照组(P＞0.05).治疗第60天,托毒生髓方组X线诊断分型明显轻于模型组和庆大霉家组(P＜0.01).治疗第20天X线影像显示,模型组则出现新的骨内脓肿及高密度坏死骨影像,庆大霉素组髓腔狭窄或消失,而托毒生髓方组炎症反应消退,原有的骨干畸形重新塑形.结论:托毒生髓方对于慢性骨髓炎兔模型病变部位的炎症控制以及骨结构恢复和髓腔再通有较好疗效,其机制可能与提高免疫力和促进成骨(没有检测促进成骨的指标,建议删除)有关.
作者：李素那；钱丽旗；郑彬丽；于洋；高飞；杨丁友；武冰；孙大铭 刊期： 2012年第02期
目的:了解我院住院患儿革兰阴性杆菌血流感染的病源菌构成及其耐药性,为临床治疗用药提供参考.方法:采用VITEK-2全自动微生物分析鉴定系统和NCCLS(2010年)的判断标准,对2011年儿科149例患儿血标本分离的革兰阴性杆菌进行鉴定和药敏试验.结果:149例患儿的血标本中分离出肺炎克雷伯菌69株,其中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)59株(85.51％),非产ESBLs 10株(14.49％)；大肠埃希菌30株,其中产ESBLs 12株(40.00％),非产ESBLs菌株18株(60.00％)；鲍曼不动杆菌感染26株,其他菌24株.所有产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美洛培南、左旋氧氟沙星,环丙沙星耐药率均为0；对β内酰胺类药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株；对哌拉西林、氨苄西林耐药率高达100.00％.他唑巴坦对产ESBLs肺炎克雷伯菌有明显的抑制作用,哌拉西林/他唑巴坦(耐药率为18.64％)对其抑菌作用强于氨苄西林/舒巴坦(耐药率为89.83％).碳青霉烯类(亚胺培南、美洛培南)是治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的满意选择.大肠埃希菌的耐药率低于肺炎克雷伯菌.结论:儿科革兰阴性杆菌血流感染中肺炎克雷伯菌是主要致病菌,产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率较高.亚胺培南和美洛培南是治疗儿科产ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌血流感染的较好选择.
作者：樊卫红；周晓英；刘杰；周海峰 刊期： 2012年第02期
目的:研究库存红细胞对内毒素(LPS)诱导的外周血单个核细胞(PBMC)释放炎性细胞因子的影响及其机制.方法:分离健康献血员的PBMC,分为PBMC组、PBMC +SN50组、PBMC +LPS组、PBMC +LPS+SN50组、PBMC+d1组、PBMC+ d1+ SN50组、PBMC+ d1+LPS组、PBMC+ d1 +LPS+SN50组、PBMC+d35组、PBMC+d35+SN50组、PBMC+ d35+LPS组、PBMC+ d35+ LPS+SN50组和PBMC+ d21 +LPS组.取保存第1、21、35天(d1、d21、d35)的悬浮红细胞,离心,取上清,与新鲜分离的PBMC混合孵育20 h(不加库存红细胞各组用完全1640培养基培养),库存红细胞上清的体积为PBMC培养体系总体积的20％.加SN50各组于培养体系中加入核因子-κB特异性抑制剂SN50,培养4h后,加LPS各组加入100 ng/L LPS刺激24 h,收集各组细胞培养上清,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度的变化;收集PBMC与库存红细胞上清及LPS共同孵育各组的PBMC,免疫印迹法检测核因子-κB抑制剂α(IκBα)的蛋白水平及磷酸化水平的变化,以PBMC和PBMC+ LPS组作为对照.结果:随库存红细胞保存时间的延长,PBMC中IκB-α的磷酸化水平逐渐升高,而蛋白水平随之逐渐下降；悬浮红细胞上清能增强LPS诱导下PBMC分泌TNF-α的作用,但能被SN50抑制.结论:NF-κB信号通路参与了库存红细胞增强LPS诱导的PBMC炎症反应的作用,阻断NF-κB的活化可以抑制这一增强作用.
作者：王晓伟；任召祺；王海平；卓海龙；张莎娜；曹慧；王全立 刊期： 2012年第02期
目的:研究梯度热打击对体外培养肠黏膜上皮细胞活性和增殖的影响.方法:肠黏膜上皮细胞株IEC-6经培养后分为正常对照组(37℃、5％CO2培养箱培养)及39℃、41℃、43℃热打击组(分别在相应温度培养箱中培养),相差显微镜观察各组细胞培养1h的形态学改变,CCK-8法比较各组细胞培养0、1、3、5、7h的细胞活性和24 h增殖率,流式细胞术研究细胞周期的改变.结果:与正常对照组比较,各热打击组各个时相细胞形态变圆,伪足变短,细胞间隙增大,活力下降(P＜0.01).24 h细胞增殖实验显示,与正常对照组比较,39℃组7h及41℃和43℃组各时相增殖率显著下降(P＜0.01),呈时间及温度依赖关系.流式细胞术检查显示,热打击组细胞呈现细胞周期G0/G1和G2/M期阻滞.结论:热打击对IEC-6细胞具有细胞毒效应,可抑制IEC-6细胞的增殖,造成细胞周期G0/G1和G2/M期阻滞.
作者：袁芳芳；苏磊；刘志锋；潘志国；谭新；耿焱 刊期： 2012年第02期
2009年5月在对血透室每月进行透析液和透析用水的监测中,发现透析液中细菌含量严重超标,且培养出革兰阳性杆菌.我们立即采取了相应措施,报告如下.1 临床资料透析液采用原厂提供桶装浓缩A、B液,经透析机接1∶34比例反渗水稀释.取样时,使液体从透析机中透析用水和透析液取样口持续流出冲洗1 min,无菌注射器抽取1ml注入无菌干燥培养管;浓缩A、B液从现场开盖的桶中直接抽取.用无菌吸管取10μl样品接种于血平皿内,置于35℃培养48 h,观察菌落数,并作细菌鉴定.合格标准为透析用水和透析液细菌数≤200 CFU/ml,浓缩液(A、B)无菌生长,内毒素＜1 EU/ml.检测结果显示,透析用水、浓缩A液细菌含量合格,8份透析液及3份浓缩B液细菌含量严重超标,分别为(1 800±213)CFU/ml和(500+86)CFU/ml(附表),其中8台透析机有5台中的透析液内毒素检测不合格.经更换新批号浓缩B液,对透析机进行全面消毒,连续采样监测,28份样本均合格.
作者：鲁娟；王建红；龚红英；李冀军；常东 刊期： 2012年第02期
急性附睾炎多见于青壮年,是男性生殖系统非特异性感染疾病中的常见疾病,虽然及时足量应用抗生素能改善症状和体征,但初期睾丸疼痛肿胀仍需要口服或者注射止痛药物来缓解不适,相当一部分患者急性期后易形成慢性附睾结节,往往影响精子质量而致不育.我科用植物油调和如意金黄散外敷辅助治疗急性附睾炎,效果良好,报告如下.
作者：任敬梅；唐媛媛；郁华亮；叶林阳 刊期： 2012年第02期
商品化的多项质控血清常作为室内质控品在日常工作中加以应用,然而多数厂家的多项质控血清都没有计算肌酸激酶同工酶(CK-MB)的定值,在日常工作常以历史积累值作为靶值,但在应用中发现不同厂家的CK-MB试剂、甚至同一厂家不同批号的试剂测相同质控品表现出较大偏差,给室内质控工作带来很大的不便.为此,本研究中观察了不同来源的肌酸激酶M(CKM)抗体对CK-MB测值的影响,报告如下.
作者：续燕 刊期： 2012年第02期
我院于2007年4月-2011年4月对32例急诊就诊的急性心肌梗死(AMI)合并缓慢性心律失常患者行紧急心脏临时起搏,现将护理体会总结如下.1 临床资料AMI并缓慢性心律失常患者32例,男18例,女14例;年龄44～78岁,平均(61.0±7.2)岁.心肌梗死范围:急性下壁16例,下壁并右室9例,广泛前壁7例.合并Ⅲ度房室传导阻滞伴宽QRS波逸搏7例,心室停搏后心肺复苏成功4例,症状性窭性心动过缓、Ⅱ度Ⅰ型房室传导阻滞、Ⅲ度房室传导阻滞伴窄QRS波逸搏经阿托品治疗无效18例,双侧束支传导阻滞3例.患者均符合中华医学会心血管病分会2001年修订的《急性心肌梗死诊断和治疗指南》中的AMI诊断标准和文献[1]的临时起搏人选标准,患者均签署临时心脏起搏置入同意书.
作者：辜丽梅；苗攀；何红梅；关珊；王曼 刊期： 2012年第02期
红皮病属于重症药疹,累及皮肤范围广,病情发展迅速,治疗难度大,常危及生命.2011年我科治疗1例肺癌脑转移放疗期伴发红皮病患者,其病情发展迅速,经精心治疗与护理,患者痊愈出院,现将护理体会总结如下.1 临床资料患者,男性,53岁,因肺癌脑转移在外院行颅内转移瘤切除术后24 d入院.人院时体温38℃,给予解热镇痛药、提高免疫力治疗.体温降至正常3d后开始行放疗,1周放疗后,患者体温38.5℃,双上肢皮肤出现红色斑疹,无触痛,无瘙痒,急查血像和系统检查均未见异常.3d内患者反复出现发热,体温高达40.5℃,全身皮肤瘙痒、弥漫性潮红并出现大面积皮疹,无触痛,皮温高;双眼睑水肿,球结膜充血水肿,颜面部鼻腔周围及外耳道有黄色脓液渗出.诊断为:红皮病.立即停止放疗.给予抗过敏药物、糖皮质激素、抗感染、营养支持治疗,1周后患者体温降至正常,颜面、躯干红斑消退,皮屑开始脱落,2周后重新开始放疔,过程顺利,未见异常.治疗结束后出院.
作者：郑丽娜；李黛 刊期： 2012年第02期
在战争、突发事故与灾害现场,由于交通破坏、后送延迟、医疗资源匮乏等原因造成常规静脉液体复苏难以实施或延迟实施,致使90％的休克伤员在被送往有条件实施常规抗休克治疗地点之前已经死亡[1,2].如能在休克现场或转运途中及时应用抗休克药物,短期内快速稳定伤员的生命体征,将为后继救治争取时间,对提高战、创、烧伤休克的现场及院前救治具有重要意义.
作者：张帆；王晓青；刘皈阳；胡森 刊期： 2012年第02期
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)主要生成和存在于骨髓中,是一种能定向分化为成熟血管内皮细胞( endothelial cells,ECs),具有自我更新、游走、高增殖潜能和定向分化特性的前体细胞.骨髓中的EPCs经特定的信号刺激能够迁移到外周血中,增加外周血中EPCs的数量,继而迁移、归巢至血管新生部位,并在归巢部位进一步增殖、分化为ECs,参与生理和(或)病理性血管形成或内皮修复.EPCs不仅参与胚胎时期的血管生成,而且还参与出生后的血管再生、受损内皮的修复及其功能维持.由于新血管形成在创伤修复过程中有着十分重要的作用,其形成障碍可能直接导致创面愈合延迟或愈合不良[1],所以EPCs在创伤愈合与组织再生等过程中可能也具有重要的作用.本文就目前有关EPCs的生物学特性及其在皮肤创面修复中的作用综述如下.
作者：黄洁；程飙；刘文忠 刊期： 2012年第02期
皮肤是人体重要的器官之一.引起皮肤组织缺损的原因很多,有撕裂伤、皮肤病、新生物形成、感染、烧伤和其他创伤等.皮肤缺损或某些疾病导致的皮肤屏障功能缺失,可能造成感染、脱水和组织坏死甚至创伤性休克等不良后果.皮肤由真皮和表皮两层结构组成,皮肤内还存在许多具有各自功能的细胞结构.理想的皮肤替代品应该能替代皮肤结构,具备籍以覆盖创面的功能,促进创面愈合,大限度地恢复皮肤功能.目前已经研制出具有两层皮肤结构的人工皮肤,并已经作为商品在临床得到应用,但它们的结构与天然皮肤还存在差距,还不能真正履行天然皮肤所特有的功能,因此,为了实现覆盖裸露创面和促进创面修复,工程化新型皮肤结构的研制仍是一项重要的工作.研究表明,蚕丝素作为生物材料支架,可以满足重建皮肤结构所希望的要求[1].本文就有关蚕丝素的特性及其在组织工程中的应用综述如下.
作者：吴志谷；盛志勇 刊期： 2012年第02期
