目的探讨氧化剂tert-butyl hydroperoxide(TBH) 诱导的氧化应激反应对视网膜色素上皮(RPE)细胞迁移的影响. 方法将人RPE细胞内氧化反应产物以Carboxy-H2DCFDA染色标记; 细胞的迁移采用改良的 Boyden 腔测定;其存活及黏附通过MTT比色法测定.肌动蛋白,局部黏附激酶及纽带蛋白的表达采用免疫荧光染色观察.通过蛋白电泳观察分裂原激活的蛋白激酶和局部黏附激酶的表达.结果 TBH处理后RPE细胞内氧化反应产物增加.TBH对RPE细胞迁移的影响呈双向反应,即低浓度促进,高浓度抑制.高浓度TBH降低RPE细胞黏附力,也能减少局部黏附激酶和纽带蛋白的表达,同时TBH可活化分裂原激活的蛋白激酶.结论由TBH诱导的氧化应激反应既能刺激也能抑制RPE细胞的迁移.(中华眼科杂志,2005,41:100-105)
作者：姜岩；何世坤 刊期： 2005年第02期
目的从血-房水屏障功能方面评价青光眼滤过手术后白内障患者行超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术的安全性.方法分别对40例(46只眼)青光眼滤过手术后白内障患者(试验组)和60例(64只眼)老年性白内障患者(对照组)行超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术,使用激光蛋白细胞检测仪(LFCM)定量检测术前和术后1、7、30、90 d房水蛋白浓度的变化,并进行比较.结果超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术前及术后1、7、30、90 d术眼平均房水闪光值试验组分别为(15.12±2.87)、(40.24±3.75)、(24.33±3.38)、(21.18±1.77)、(16.51±1.70)光粒子数(PC)/ms,差异有统计学意义(P<0.05);对照组分别为(6.94±2.34)、(26.27±10.21)、(13.96±6.44)、(9.07±2.67)、(7.16±1.89)PC/ms,差异有统计学意义(P<0.05).其中2组术后1、7、30 d均高于术前(P<0.05);术后90 d与术前比较,差异均无统计学意义(P>0.05).术前和术后1、7、30、90 d 2组平均房水闪光值比较,差异均有统计学意义(P<0.05).试验组术后1 d和30 d与术前平均房水闪光值的差值均高于对照组(P<0.05).结论青光眼滤过手术后患者血-房水屏障功能紊乱;超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术治疗青光眼滤过手术后白内障患者具有安全性,但加强抗炎性反应治疗,减轻手术损伤,是保证手术安全性的关键.(中华眼科杂志,2005,41:132-135)
作者：罗莉霞；刘奕志；葛坚；张新愉；刘玉华；吴明星 刊期： 2005年第02期
目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对小鼠胚胎干细胞(ESCs)定向诱导分化中发育基因(pax-6、slit-2、netrin-1)表达的影响.方法 ES-BALB/c细胞株用无白血病抑制因子(mLIF)的ESCs培养液培养4 d,形成胚胎体(EBs),再分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100 mm的培养皿,经5×10-7 mol/L视黄酸 (RA)诱导后,用神经细胞特异性抗原NSE和NF-200来鉴定分化细胞的类型,在诱导后1、3、5、7及14 d用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定细胞的PKCα和发育基因的mRNA表达情况 ,并观察了PKC激活剂佛波酯(PMA)和PKC抑制剂D-鞘氨醇对它们表达的影响.结果免疫组化发现在诱导后第3 d大多数细胞NSE和NF-200染色阳性,RT-PCR 证实诱导后1 d PKCα、pax-6和netrin-1的mRNA表达急剧下降,3～7 d逐渐升高,至14 d恢复至正常水平,而slit-2在诱导前后均无明显表达.PMA可使PKCα、 pax-6、netrin-1 的mRNA水平在诱导后细胞中的表达明显增强,而D-鞘氨醇的作用相反, 使它们的表达显著降低,而对slit-2无明显影响.结论发育基因pax-6和netrin-1在ESCs定向分化为神经样细胞中有重要的调控作用,可能是通过PKCα信号通路起作用.(中华眼科杂志,2005,41:123-127)
作者：高前应；葛坚；王智崇；陈慧怡；黄丹平；袁钊辉 刊期： 2005年第02期
目的探讨超声乳化联合小梁切除术及术中应用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)治疗青光眼合并白内障的疗效.方法对1996年1月至1998年12月,在新加坡国立眼科中心行超声乳化联合小梁切除术及术中应用5-Fu治疗的71例(71只眼)原发性开角型青光眼(POAG)和原发性闭角型青光眼(PACG)患者的临床资料进行回顾性分析.除外随访时间＜6个月的患者.结果术后患者平均眼压和平均用药种数均较术前明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).术后随访1～5年的患者眼压与术前比较均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).手术完全成功率1、3及5年分别为84.2%、62.7%及55.3%.在手术完全成功的条件下,POAG与PACG(P=0.281)、同一切口与不同切口(P=0.487)手术疗效比较(采用Cox模型进行多因素生存分析),手术成功率差异无统计学意义(P＞0.05).但POAG与PACG术后平均眼压比较,差异有统计学意义(P=0.02).术后较术前平均视力提高差异有统计学意义(P＜0.01).术后与术前平均视野缺损(MD)值(P=0.55)和模式标准差(PSD)值(P=0.64)比较,差异无统计学意义,表明患者术后视野保持稳定.术后4 d发生眼内炎1例,术后晚期由于脉络膜渗漏和伤口漏引起低眼压2例.结论超声乳化联合小梁切除术及术中应用5-Fu治疗POAG和PACG的成功率高,手术安全,长期观察疗效稳定.POAG与PACG或同一切口与不同切口行联合手术的成功率无明显差别.(中华眼科杂志,2005,41:128-131)
作者：才瑜；Zena LIM；Boon Ang LIM；Francis OEN；晏晓明；李美玉；Steve SEAH 刊期： 2005年第02期
目的探讨阻断培养的成人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞产生血管内皮细胞生长因子 (vascular endothelium growth factor, VEGF)后对RPE细胞形态及生长的影响.方法利用脂质体将编码反义VEGF 的表达质粒导入RPE细胞,再利用新霉素(neomycin,又称G418)筛选稳定转导反义VEGF的RPE细胞克隆,采用倒置显微镜观察、免疫荧光及免疫组化染色、酶联免疫吸附(ELISA法)技术,观察细胞形态、产生VEGF的能力及细胞标志物的变化.结果持续阻断成人RPE细胞产生VEGF后,RPE细胞的生长受到抑制,同时细胞外基质分泌增加,形态发生转变,酷似神经细胞.RPE细胞产生VEGF减少后,细胞标志物表达也发生变化,视网膜神经元样细胞特异性标志物Thy1.1及神经丝蛋白转变为阳性,VEGF的受体Flk-1表达也明显上调.结论 VEGF信号传导通路在调控RPE细胞转分化方面起重要作用.(中华眼科杂志,2005,41:114-117)
作者：吴继红；王丰；徐萍；黄倩 刊期： 2005年第02期
目的探讨舒拉明抗增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的作用及机制.方法采用体外培养的人眼视网膜色素上皮(RPE)细胞,总共10组.其中5个对照组的培养基中分别加入终浓度为1、10、100、500 ng/ml的bFGF和31.25 μg/ml的舒拉明.实验组4组,培养基中除加入31.25 μg/ ml的舒拉明外,还分别加入终浓度为1、10、100和500 ng/ml的bFGF.另设1组空白组.培养48 h后,采用MTT法,酶联免疫检测仪测定各孔吸光度(A)值,计算细胞的增殖率.采用析因分析比较bFGF和舒拉明的交互效应和单独效应.结果各组细胞生长无明显的形态学差异.舒拉明与 bFGF存在拮抗性交互效应(F=6.73,P<0.01).对照组比较空白组,全部bFGF组A值都增加,大A值为bFGF的10 ng/ml浓度组;舒拉明组则降低;实验组中,各组A值较bFGF对照组都下降,大A值左移对应bFGF的100 ng/ml浓度组.结论舒拉明能够拮抗bFGF促RPE细胞增殖的作用,其抑制RPE细胞增殖并进一步防治PVR的机制至少包括拮抗了生长因子的生物学效应.(中华眼科杂志,2005,41:110-113)
作者：朱晓波；唐仕波；罗燕；黄祥坤 刊期： 2005年第02期
目的探讨白细胞介素2(IL-2)在铁粉诱发早期眼内炎性反应中的作用.方法将新西兰雄性白兔12只,随机均分为对照组、晶状体内铁粉异物组、晶状体内铁性异物+前房注射水溶性细胞白介素2受体(SIL-2R)组,每组8只眼.分别于手术后3、5、7、10 d,对各组兔眼的前房炎性反应进行观察,测定各组家兔眼房水中的IL-2水平并对3组家兔眼做组织切片,进行HE染色和铁染色.并对各组结果进行比较.结果晶状体内铁性异物+前房注射SIL-2R组术后前房炎性反应明显轻于晶状体内铁粉异物组;晶状体内铁性异物+前房注射SIL-2R组前房水IL-2含量明显低于晶状体内铁粉异物组(P<0.01);晶状体内铁性异物+前房注射SIL-2R组前囊膜下胶原纤维板紊乱程度、铁锈范围均轻于晶状体内铁粉异物组.结论 IL-2在眼球内铁性异物诱发的眼内早期炎性反应中起重要作用,前房水中的IL-2的含量与前房的炎性反应强度明显相关,阻断IL-2的作用可减轻铁锈引起的眼内早期炎性反应的程度.(中华眼科杂志,2005,41:141-144)
作者：李学民；王薇 刊期： 2005年第02期
目的探讨过氧化氢酶(CAT)基因重组腺病毒对晶状体氧化损伤进行基因治疗的可行性.方法克隆CAT基因,构建CAT基因重组腺病毒,测定病毒液滴度.体外培养大鼠晶状体,Western印迹分析确定重组腺病毒感染大鼠晶状体后CAT表达峰值时间.按随机分组原则将大鼠晶状体分为对照组(A组)、H2O2处理组(B组)、H2O2及重组腺病毒处理组(C组),分别于6、12、18、24 h检测晶状体透明度,并采用双染色流式细胞技术进行细胞凋亡分析.结果构建出具有生物学活性的CAT基因重组腺病毒.CAT基因重组腺病毒感染体外培养大鼠晶状体后9 h,CAT表达达到峰值,并在36 h内保持恒定.6、12、18、24 h,C组晶状体的透明度均低于A组,高于B组,3组比较差异均有统计学意义(P<0.05);C组细胞凋亡率均高于A组,低于B组,3组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CAT基因重组腺病毒可抑制氧化剂导致的晶状体混浊和晶状体上皮细胞凋亡,具有用于治疗氧化所致白内障的可能性.(中华眼科杂志,2005,41:156-160)
作者：李立梅；杨笑天；刘戈飞；杨福辉；张劲松 刊期： 2005年第02期
目的探讨替德肝素(tedelparin)在抑制冷冻后的人视网膜色素上皮(human retina pigment epithelium, hRPE)细胞分泌肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,HGF)和生长中的作用.方法体外培养的RPE细胞在-80℃下进行冷冻,冷冻时间分为0、15和60 s, 随后继续体外培养(体外实验组)和注入正常兔眼玻璃体(体内实验组)并在第6天时取出一些兔眼的玻璃体液加入到正常RPE细胞培养液中孵育48 h;每实验组再分为两个亚组:替德肝素治疗(终浓度25 μl/ml)组和未治疗组,在3 d、6 d时收集细胞培养上清和玻璃体样本,ELISA法测定HGF含量,MTT法测定48 h后RPE细胞的增殖状态.结果在体外实验组,比较未冷冻组,冷冻后的RPE细胞随着冷冻时间延长HGF分泌水平增加(F=27.36, P<0.01),替德肝素干预组HGF分泌水平下降(F=179.50,P<0.01).在体内实验组(兔玻璃体)随着冷冻时间延长HGF浓度较对照组明显增高(F=6.24, P<0.01),当玻璃体液(冷冻15 s和60 s, 第6天)加入到正常RPE细胞培养液48 h后刺激细胞增殖(P<0.01),在替德肝素干预组,细胞增殖明显减弱(F=44.90,P<0.05).结论冷冻可刺激RPE细胞在体外和体内玻璃体环境中HGF的高分泌,且随着冷冻时间增加更为显著.替德肝素可降低冷冻后RPE细胞分泌HGF水平和抑制促生长环境中的RPE细胞生长,具有预防PVR的作用.(中华眼科杂志,2005,41:106-109)
作者：王方；宋正宇；陶晓锋；顾青；许迅 刊期： 2005年第02期
目的探讨腺病毒介导的反义c-myc基因(Ad-AS-myc)转染对人晶状体上皮细胞(HLEC)系B3(HLE-B3)增殖、凋亡及细胞周期的影响. 方法将Ad-AS-myc转染HLE-B3,观察细胞形态变化;采用生长曲线法、噻唑蓝比色法分析细胞增殖改变;使用流式细胞仪测定细胞凋亡变化、分析细胞周期改变(DNA倍体法);采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western免疫印迹法检测细胞c-myc mRNA及其蛋白产物表达的变化. 结果 Ad-AS-myc成功转染后,HLE-B3逐渐变圆、脱壁.转染后24～96 h细胞的增殖受到抑制,与相应对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);凋亡细胞比例(转染48 h为18.33%,转染96 h为26.93%)明显升高,与相应对照组(48 h为3.19%,96 h为1.75%)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);细胞出现G1期阻滞现象,表现为G1期细胞比例[转染48 h为(60.50±7.59)%,转染96 h为(81.90±8.60)%]增加和S期细胞比例[转染48 h为(28.40±3.38)%,转染96 h为(16.75±8.97)%]下降,与相应对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);RT-PCR法和Western免疫印迹法检测发现c-myc mRNA及其蛋白产物水平特异性下调. 结论 Ad-AS-myc可成功转染HLE-B3,并特异性抑制c-myc基因的表达,诱发细胞G1期阻滞,有效抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.(中华眼科杂志,2005,41:161-165)
作者：孙洁；谢立信；王瑶；刘廷 刊期： 2005年第02期
目的探讨移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的细胞对SD大鼠视神经横断伤后视网膜节细胞的保护作用. 方法通过脂质体将CNTF表达质粒转移至人胚肺成纤维细胞,建立稳定、高水平表达CNTF的细胞株.采用双侧背外侧膝状体及上丘核团注射3%荧光金逆行标记视网膜节细胞.将标记后的大鼠分为两组,于标记后7 d手术切断眶内段视神经:其中一组左眼不做手术作为正常对照组,右眼切断视神经作为手术对照组;另一组双眼均手术切断视神经,左眼注射PBS作为治疗对照组,右眼视网膜下移植表达CNTF的细胞作为实验组.术后5、14、17、21及28 d取出眼球,铺片后荧光显微镜观察并计数视网膜内存活的节细胞.结果手术切断眶内段视神经后2周,视网膜内节细胞数减少67.44%,视网膜下移植表达CNTF的细胞后第5 、17 、21 d视网膜内存活的节细胞数明显多于治疗对照组(P<0.05).结论视网膜下移植高水平表达CNTF的细胞对视网膜节细胞有保护作用.(中华眼科杂志,2005,41:119-122)
作者：李惠明；陆世铎；夏欣；徐萍；王丰；黄倩 刊期： 2005年第02期
目的探讨高眼压性原发性开角型青光眼(POAG)和正常眼压性青光眼(NTG)患者视神经损害的不同特点.方法应用德国Heidelberg公司生产的视网膜断层扫描仪对高眼压性POAG 39例(47只眼)和NTG 32例(38只眼)进行定量视盘参数和神经纤维层检查,并行眼底立体照相观察视网膜神经纤维层(RNFL)缺损类型,检测静态定量视野,并对检查结果进行比较.结果(1)NTG组视盘总体参数和分区(除颞侧外)盘沿面积、沿/盘面积小于高眼压性POAG组,而C/D大于高眼压性POAG组;平均 RNFL厚度和RNFL面积在颞下和颞上小于高眼压性POAG组;总体盘沿容积小于高眼压性POAG组,总体平均视杯深度和颞下视杯面积大于高眼压性POAG组,两组差异均有统计学意义( P<0.05).两组颞侧视盘各参数比较,差异无统计学意义(P>0.05).(2)RNFL缺损类型:高眼压性POAG组RNFL弥漫性缺损占53.19%,局限性缺损占4.26%; NTG组弥漫性缺损占21.05%,局限性缺损占55.26%.两组RNFL缺损类型构成比比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 NTG较高眼压性POAG具有较大的C/D值、C/D面积比和窄盘沿面积,RNFL丢失严重.高眼压性POAG患者的RNFL以弥漫性缺损为主,NTG患者的RNFL以局限性缺损为主.两者视神经损害具有不同特点,其损害机制可能不同.(中华眼科杂志,2005,41:136-140)
作者：夏翠然；徐亮；杨烨 刊期： 2005年第02期
随着准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)的普及,术后并发的感染性角膜炎逐渐引起临床医师的关注[1, 2],现将我院经临床及实验室明确诊断的一例LASIK术后非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria, NTM)性角膜炎报告如下.
作者：梁庆丰；李莹；邓世靖；王智群；李然；罗时运；孙旭光 刊期： 2005年第02期
患者女性,50岁,因头痛伴右侧面部麻木感半年,病情加重1个月,于2002年11月22日收住本院脑外科治疗.当日体检右侧面部感觉减退,伸舌偏向右侧,四肢感觉和运动正常.双眼视力均0.4.MRI检查:提示右颞底有一6.2 cm×6.0 cm×5.0 cm占位性病变,T1WI低信号,T2WI中等信号,信号有明显增强.CT扫描:显示右颞底巨大脑膜瘤.入院诊断:右颞底巨大脑膜瘤.为了解局部肿瘤供血情况,于同年11月26日在局麻下行全脑血管造影及肿瘤供血动脉栓塞术,从右侧股动脉内插管,行右侧颈内动脉造影,见大脑中动脉颞前、颞中分支弧形抬高移位,左侧颈内、外动脉造影未见异常改变.
作者：刘雅敏；魏锐利；蔡季平 刊期： 2005年第02期
患者女性,71岁,因右眼视力下降3年,于2001年6月来本院眼科诊治.患者于11年前,在外院诊断为左眼年龄相关性黄斑变性、玻璃体出血,曾于本院行左眼玻璃体切除术.术后1年又发生视网膜脱离,在当地医院行巩膜外环扎术,术后视力恢复差,并逐渐失明.体检未见异常.眼部检查:右眼视力0.05,左眼无光感.双眼角膜透明,前房深浅正常.
作者：于伟泓；戴荣平；董方田；张承芬 刊期： 2005年第02期
近年来,非穿透性小梁手术以其疗效肯定、术后并发症少等优点在临床广泛应用.但非穿透性小梁切除术后出现广泛后弹力膜脱离者,国内外尚未见报道.笔者曾于2003年收治1例,现报告如下.
作者：黄萍；晏晓明；李美玉 刊期： 2005年第02期
患者男性,48岁,因右眼球突出3个月,流泪伴胀痛1个月,于2003年10月13日来我院就诊.眼部检查:右眼视力0.3,矫正不能提高.眼球突出度:右23 mm,左10 mm,眶距100 mm.眼球运动上转受限,球结膜充血、水肿(图1),角膜上皮点状混浊,前节无炎性反应,晶状体透明,玻璃体无混浊.眼底检查:视乳头边界清、色正,网膜皱折,中心凹反光消失.左眼未见异常.外院CT检查发现右眼眶内、前颅窝、颞窝占位病变.
作者：徐青；肖利华；黑砚 刊期： 2005年第02期
先天性黄斑缺损是严重影响患者中心视力的眼底先天性异常.我们于2002年收治1例,现报告如下.患者男性,29岁.因自幼左眼视力差,于2002年11月19日来我院就诊.既往无夜盲及外伤史.家族中无类似病史,父母非近亲结婚,全身检查未见异常.眼部检查:视力右眼1.0;左眼0.04,不能矫正.眼压:右眼16 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),左眼15 mm Hg.眼位:双眼正位.右眼外眼及眼底正常;左眼前节无明显异常,散瞳见眼底视乳头色泽正常,边界清晰,黄斑区可见一类椭圆形的脉络膜-视网膜缺损区,约3 PD×4 PD大小,表面附有较多色素,并有数支视网膜血管横跨其上,缺损区下陷深约3 D,其内可见裸露粗大的脉络膜血管,边缘尚清晰,有部分色素增殖和脱失(图1).Humphrey静态全自动视野检查:显示左眼有中心性绝对性暗点.
作者：徐永宁；钱晓娃；王聪；徐金华 刊期： 2005年第02期
视网膜色素变性(RP)是遗传性致盲眼病,其患病率约为1/3500.该病目前尚无有效的预防和治愈方法.本文综述了RP分子遗传学的新进展,着重对诊断和预后有价值的基因突变进行了总结,并归纳了RP基因治疗的新动向.(中华眼科杂志,2005,41:188-192)
作者：王丹艺；范宝剑；巫向前；陈伟民；林顺潮；彭智培 刊期： 2005年第02期
眼底病(如年龄相关性黄斑变性和遗传性视网膜病)导致的失明和低视力是眼科医师目前遇到的棘手问题之一.提高眼底病诊断与治疗水平有赖于眼底病临床基础研究的突破.目前在干细胞移植研究、胚胎干细胞和视网膜干/祖细胞定向发育、微环境研究以及视网膜色素上皮细胞和虹膜色素上皮细胞的移植等方面已经取得了一些阶段性成果,但要较好地解决目前仍然存在的问题,尚需要在发育基因的测定、表达调控与修饰、干/祖细胞的定向分化以及宿主移植区域微环境的完善等等方面给予深入的研究.(中华眼科杂志,2005,41:97-99)
作者：许迅；李治平 刊期： 2005年第02期
临床上常可以见到患者因铁异物进入眼内未能及时取出而导致眼铁锈症,严重损害患者的视功能.文献报道外伤致铁异物入眼短者18 d,长者8年,诱发眼铁锈症[1].本文收集2001年1月至2002年2月于我院就诊临床资料完整的眼铁锈症患者22例(22只眼),现总结报告如下.
作者：戴怡康；周行涛；卢奕 刊期： 2005年第02期
目前,人工角膜在眼科临床应用中存在着较多的并发症.Legeais和Renard[1]认为人工角膜前表面如果能够上皮化将有利于植入物的长期稳定.硅胶是一种疏水的高分子材料,疏水性不利于细胞的黏附和生长.如果对其表面进行一定的处理,将有利于硅胶人工角膜与受体角膜的连接,从而减少人工角膜的术后并发症. 改变材料表面特性的常用方法有低温等离子体法、表面修饰法、化学改性法和杂化改性法[2,3].我们选用酸溶液和过氧化氢溶液对硅胶进行一定的处理,体外观察细胞的生长情况,细胞质和细胞膜蛋白的表达,进而推测其对组织相容性的影响.
作者：吴欣怡；闫莹；李俊起；韩少平；王勤 刊期： 2005年第02期
聚维酮碘(povidone-iodine,PI)是针对细菌、病毒、真菌及原生动物等的广谱杀菌剂.5%PI可用于眼科术前准备工作[1-5].但文献报道供体角膜保存在0.1%PI中5 d,角膜内皮可出现损伤表现[6];高浓度PI注入兔眼前房可导致角膜内皮损伤[7,8];0.01%PI对体外纤维母细胞具有毒性作用,0.1%PI可抑制纤维母细胞生长[9].因此,我们于2003年开始观察不同浓度PI对体外培养的人角膜内皮细胞的潜在影响,以期为临床提供参考,提高使用PI的安全性.
作者：李俊；李维英；彭智培；林顺潮 刊期： 2005年第02期
