目的:分析我国HIV感染者/艾滋病患者CD4细胞数和HIV载量的演变过程、相互关系及其与病程发展的关系.方法:分别用NASBA方法和流式细胞仪绝对计数法检测21名HIV感染者/艾滋病患者的HIV病毒载量和CD4细胞数.对15名病例随访4次以上,随访时同样检测HIV病毒载量和CD4细胞数,并观察临床变化.结果:在全部81组数据中,CD4细胞数小于100/mm3的34组数据HIV载量全部大于104cp/ml,而CD4细胞数大于400/mm3的27组数据,63.6 % HIV载量小于104cp/ml(P<0.05).HIV载量越高、CD4细胞数越低,二者呈明显的负相关关系(r=0.974).CD4细胞数低于300/mm3的9例患者中有5例在随访过程中出现HIV载量的上升和CD4细胞数的下降,2例患者死亡.CD4细胞数大于400/mm3的6名患者HIV载量和CD4细胞处于波动状态,临床情况较好.结论:HIV病毒载量较低和CD4细胞数较高,患者的预后较好,二者均为评估疾病进程的有效指标.
作者：李敬云；鲍作义；刘思扬；彭虹；庄道民；王宏霞 刊期： 2002年第04期
目的:探讨携带人肝细胞生长因子基因的质粒pUDKH对13日龄鸡胚绒膜尿囊膜血管生成的刺激效应.方法:以甲基纤维素为载体,将不同剂量的pUDKH(1.0,2.0,5.0μg)或空白质粒pUDK(5.0μg)置入13日龄鸡胚绒膜尿囊膜上,于孵化箱继续孵育3d后,观察鸡胚绒膜尿囊膜上小血管的密度.结果:应用质粒pUDKH各组小血管的密度均明显较对照组大(P<0.05),且有剂量-效应关系.结论:质粒pUDKH可显著刺激鸡胚绒膜尿囊膜上小血管的形成,故认为其具有在体内应用于治疗缺血性疾病的潜能.
作者：哈小琴；付生法；李元敏；唐仲雄；吴祖泽 刊期： 2002年第04期
目的:探讨彩色多普勒超声在诊断甲状腺癌方面的价值.方法:回顾性分析应用美国HP8500GP和Acuson 512彩色超声仪对55例甲状腺恶性肿瘤的诊断.结果:55例甲状腺癌中,低回声的实性结节45例,回声高低不均的实性结节6例,囊实混合型结节4例,结节边界不规则或不清楚53例,结节中检出有砂粒样钙化灶44例,颈部淋巴结转移23例,所有病变内部及周边均有血流信号.结论:甲状腺癌的超声表现具有一定特异性,超声检查结果可为临床治疗提供重要依据,特别是超声引导穿刺活检结果,可为临床提供明确诊断.
作者：杨涛；汪伟；唐英；白玲；毛京宁；陈伟 刊期： 2002年第04期
目的:实现对昆虫防御素A的分子改造及改造后分子的噬菌体表面展示,为进一步设计构象型肽库,研究分子间相互作用奠定基础.方法:分子改造包括以下内容:分子截短,突变碱性氨基酸,减少半胱氨酸的数目等.利用InsightⅡ Homology系统对改造后分子结构进行预测.然后再将合成的改造蛋白基因插入到pCANTAB 5E载体中,采用Western印迹鉴定该蛋白在噬菌体表面展示.结果与结论:模建结果显示改造后蛋白仍保持原有三维结构不变,并且成功实现了昆虫防御素分子在噬菌体表面的展示.
作者：赵安；薛沿宁；冯健男；张杰；高波；刘农乐；王芳；王会信 刊期： 2002年第04期
目的:建立庚型肝炎病毒基因(HGV RNA)的定量检测方法.方法:采用荧光转换原理,应用特异荧光物质标记的引物进行逆转录PCR(RT-PCR),检测41例临床血清标本的HGV RNA.结果:与巢式定性PCR结果比较,两者具有相关显著性.以定量实验为标准定性实验的阳性漏检率为3.33%,阴性漏检率为18.1%,两者相对符合率为92.68%.结论:定量检测HGV RNA在定性的基础上提供了量的结果,而且具有特异性强、结果稳定、操作简便等特点.
作者：李伯安；杨松涛；侯俊；郑宇；赵军；舒翠利；程云 刊期： 2002年第04期
目的:利用JSP动态网页技术建立实验动物中心网站,以实现动态的实验动物信息发布及实验动物的在线定购.方法:借助于JavaBeans组件技术集成大量的程序代码,采用Web数据库访问方式JDBC,通过Oracle 8i数据库管理系统,用动态HTML与JSP技术相结合的方式,开发了完全基于浏览器/服务器的实验动物信息的管理和发布.结果和结论:本网站的建立,使院内外医学科研工作者可以通过网络与实验动物中心进行实时交流,给双方都带来了方便和经济效益,具有一定的实用价值.
作者：李琳；周士波；岩延 刊期： 2002年第04期
目的:研究抗抑郁剂相关的基因.方法:采用不同应激方式交替持续应激20d造成大鼠慢性应激损伤模型,提取大鼠海马组织总RNA,行逆转录聚合酶链反应.PCR 产物上样于聚丙烯酰胺凝胶,银染法分离差异表达的条带,用斑点杂交方法对差异表达片段进行验证,将表达量有差异的条带测序.结果:与慢性应激组相比,地昔帕明可以上调微管相关蛋白基因的表达,氟西汀可以上调一种神经元肌动蛋白结合蛋白树状棘蛋白的基因表达.结论:结果提示地昔帕明与氟西汀可能通过上调中枢神经系统与神经再生有关的蛋白的基因表达而发挥抗抑郁作用.
作者：杨红菊；李云峰；龚正华；赵楠；张凤琴；张汉霆；罗质璞 刊期： 2002年第04期
目的:克隆牛m1和m5受体亚型特异性区域内环(innerloop)3区,并检测牛主动脉内皮细胞上两种受体mRNA的表达.方法:根据人、小鼠的m1和m5受体序列,设计并合成针对两种受体内环3区的特异性引物.采用RT-PCR法从牛海马组织中扩增牛m1和m5受体内环3区,并通过半定量RT-PCR法检测两种受体mRNA在传代培养前后的牛主动脉内皮细胞中的表达.结果:序列测定与对比表明克隆得到了牛m1和m5受体内环3区.半定量RT-PCR结果显示,原代牛主动脉内皮细胞表达m1受体mRNA而未检测到m5受体mRNA,两种受体mRNA在传10代的培养牛主动脉内皮细胞中均未检测到有表达.结论:本研究为探讨血管内皮细胞上介导乙酰胆碱诱发血管舒张反应的受体与M受体的关系提供了线索.
作者：张锦超；王莉莉；俞炜源；汪海 刊期： 2002年第04期
目的:研究可溶性肿瘤坏死因子受体(soluble TNFα receptor1,sTNFR1)在昆虫细胞中的表达.方法:应用BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统,构建含有sTNFR1基因的杆状病毒穿梭载体Bacmid,转染sf21昆虫细胞进行高效表达,利用TALON金属鏊合层析进行重组蛋白的纯化.免疫印迹和细胞测活方法鉴定重组sTNFR1的生物学活性.结果:从无血清培养上清中可纯化得到约3mg/L的重组蛋白.免疫印迹反应和细胞活性实验表明,重组蛋白具有良好的抗原结合能力和抑制TNF对L929细胞的细胞毒作用.结论:重组sTNFR1在昆虫细胞中表达稳定,易于纯化,并具有良好的生物学活性.
作者：高波；张杰；刘云；王会信；薛沿宁 刊期： 2002年第04期
目的:探讨2型糖尿病微血管病变与血浆内皮素(ET)及血管性假血友病因子(vWF)的关系.方法:采用放射免疫法(RIA)及双抗酶联免疫法(ELISA)测定12例正常人及49例2型糖尿病患者的血浆ET及vWF水平.结果:糖尿病组血浆ET及vWF水平较正常人升高;糖尿病有微血管病变组较糖尿病无并发症组升高更明显.结论:血浆ET及vWF水平的升高与糖尿病微血管病变的发生发展有关.
作者：徐静；吴娟娟；王玉环；王俊宏；谢璇 刊期： 2002年第04期
目的:探索富含GC DNA的PCR扩增条件,为大环内酯类化合物组合生物合成中模块和酶域的任意组合奠定基础.方法:在PCR扩增体系中,添加甲酰胺、甘油、二甲亚砜(DMSO)、Mg2+等增强剂,并选择合适的扩增体系,优化富含GC DNA PCR扩增条件.结果:甲酰胺对富含GC DNA PCR扩增没有影响,而甘油和DMSO均可提高富含GC DNA PCR产物的特异性和产率,以5%～10%DMSO效果好.使用Roche 长片段DNA扩增系统,在使用缓冲液2反应体系中添加10% DMSO和提高0.25mmol/L Mg2+浓度时,可以扩增长度为5kb、GC含量为73%的DNA片段.结论:应用优化的PCR扩增条件,可以扩增长达5kb富含GC的DNA片段,可以满足大环内酯类组合生物合成模块和酶域随意组合的需求.
作者：张部昌；赵志虎；于秀琴；刘传暄；马清钧 刊期： 2002年第04期
目的:研究人源分化相关新基因Ndr3的克隆、组织表达谱及亚细胞定位.方法:采用电子拼接和PCR扩增技术,从人22周孕龄胎肝cDNA文库中获得与人Ndr1基因同源的一段表达性序列标签,继而从成人脑cDNA文库分离出Ndr3的全长cDNA;采用点杂交分析和多组织Northern杂交分析方法,确定其组织表达谱;将其亚克隆入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1,用脂质体介导法转染COS-7细胞,确定其亚细胞定位.结果与结论:Ndr3的全长cDNA为2879bp,其开放阅读框(ORF)编码375个氨基酸,染色体定位为20q12-11.23.Northern 杂交和点杂交分析显示,NDR3在脑组织和睾丸中高表达,在肾、心肌和前列腺中有一定量的表达,在胚胎组织的表达较低,在8种人肿瘤细胞中的表达极低.与绿色荧光蛋白融合表达的实验结果显示,该蛋白定位于核外胞浆内.
作者：翟芸；魏汉东；瞿祥虎；周钢桥；张成岗；邢桂春；马晓芸；张令强；朱云平；贺福初 刊期： 2002年第04期
目的: 从分子水平对引进的5种虫媒病毒:马雅罗病毒(MAY)、西门利克病毒(SFV)、墨累谷脑炎病毒(MVE)、伊利乌斯病毒(ILH)和布尼安姆韦拉病毒(BUN)进行鉴定.方法:提取病毒基因组RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行5种虫媒病毒目的片段的cDNA扩增,将获得的片段分别克隆于pGEM-T-Easy载体,进行测序和同源性分析.结果:测得的病毒基因组核苷酸序列与相应病毒的序列同源性高,分别为MAY 97%,SFV 99%,MVE 99%,ILH 99%和BUN 98%.结论:通过对5种病毒基因组部分核苷酸序列的测定及同源性比较,终将这5种虫媒病毒鉴定到种.
作者：彭文明；黄如统 刊期： 2002年第04期
目的:构建合适的载体用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达.方法:利用PCR技术,对已有载体pPIC9K进行改造:在多克隆位点处增加一个NaeⅠ酶切位点;去除卡那霉素抗性基因中的一个XhoⅠ酶切位点.结果和结论:成功地构建了pMEN9K,pMEX9K两个载体,并可以利用这两个载体对外源基因进行分泌表达.
作者：齐连权；陈薇；于长明；来大志；翁少洁；王海涛 刊期： 2002年第04期
功能基因组研究的飞速发展推动了在E.coli中运用体内同源重组的方法进行DNA操作的技术革新步伐,ET体内重组方法具有应用范围广、操作灵活简便、重组效率高等优点,它可进行常规分子生物学无法实现的操作.这种方法不依赖于合适的限制酶切位点,能够在靶分子的任意位置上进行基因的插入、缺失和替换;能够直接进行亚克隆并且还可以从细菌人工染色体和基因组DNA片段中克隆所需DNA.本文所阐述的方法可应用于包括长DNA在内的任意大小DNA的修饰,并概括描述了基因调控研究的新策略.
作者：王芃；段海清；张兆山 刊期： 2002年第04期
一氧化氮(NO)是一种具有双重作用的体内局部调节因子,由L-精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)的作用下生成.近研究表明,NO及NOS在雄性生殖系统分布广泛,NOS主要分布于睾丸间质细胞、支持细胞,少量分布于生精细胞.NO能够调节睾丸的血液供应、激素的分泌和雄性的生殖能力.高浓度NO能够扩张睾丸血管、损害生精功能和抑制精子的活力,从而使男性生育能力低下,严重时导致男性不育症.本文简要介绍NO及NOS的检测方法、性质与分类,并着重讨论NOS的分布及NO对雄性生殖能力的调节作用.
作者：康友敏；张健；李健；段相林 刊期： 2002年第04期
DNA微点阵(DNA芯片)技术已经被广泛应用于基因表达分析、比较基因组学、DNA序列变异分析和基因分型等多方面的研究.随着越来越多的微生物种类完成全基因组测序,在微生物生理、致病机制、流行病学、生态学、系统发育学、途径工程、发酵优化等研究领域中,DNA微点阵技术必将成为一个常用的研究手段.
作者：周冬生；杨瑞馥；宋亚军；庞昕；翟俊辉 刊期： 2002年第04期
大肠杆菌是表达外源基因常用的宿主之一.它结构简单,遗传背景清楚,基因表达调控机制相对明确.随着对分子伴侣和折叠酶研究的深入,蛋白在大肠杆菌内的折叠机制逐渐为人们所认识.外源蛋白在大肠杆菌内的可溶性表达问题也逐步得到解决.
作者：康铁军；袁旭东；俞炜源 刊期： 2002年第04期
随着机体的衰老性腺的功能逐渐降低,而垂体促性腺激素水平升高,同时中枢神经系统对下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的调节功能也发生了改变.性腺功能的减退并不能解释HPG轴在衰老过程中出现的许多变化,新的研究表明各级调节功能的改变也参与了衰老过程中HPG轴的重塑过程.
作者：马渊；张永祥 刊期： 2002年第04期
神经元烟碱受体(nAChR)是由乙酰胆碱控制开放的阳离子通道.该受体由多种亚基组成,结构复杂,因而具有不同的药理学和生物物理学性质.本文根据有关nAChR的文献,从不同方面综述其研究进展.
作者：刘莹；池木根；王玉霞 刊期： 2002年第04期
CD3单抗是鼠抗人CD3分子单克隆抗体,在造血干细胞移植中既可用于预防又可用于治疗移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD).
作者：艾建红；马海英；薛凤珠；银惠贤 刊期： 2002年第04期
阿片类药物的耐受和躯体依赖不仅与阿片受体本身的代偿性适应有关,而且还涉及到许多非阿片受体和递质系统.一方面当改变这些非阿片受体的功能后会影响阿片类药物的药理作用,例如抑制5-HT重吸收可以增加吗啡镇痛[1];另一方面阿片类药物慢性处理会引起这些受体系统发生代偿性适应性变化,例如吗啡急性处理能抑制5-HT释放,而慢性处理反而导致5-HT释放增多[2].
作者：苏瑞斌；李锦；秦伯益 刊期： 2002年第04期
航空兵跳伞救生训练是一种强度高、难度大的训练课目,由于着陆方法和保护措施不当,发生骨折、肌肉损伤、软组织损伤等意外伤害可占跳伞事故的80%以上,新跳伞员更为突出.这种情况不仅影响到训练进度和训练质量,而且直接影响着飞行学员、跳伞学员和航空救生人员的成才率,战时还会造成非战斗减员.为此,我们就跳伞训练着陆损伤进行调查分析,对相关问题作如下讨论.
作者：李丽朝；郑丽萍；徐颖；秦凤启；徐加屯；周军；刘红杰 刊期： 2002年第04期
