目的:建立一个模拟脊髓全横断损伤后脊髓组分--原代培养的脊髓神经元损伤的模型.方法:取Wistar大鼠(孕14 d)脊髓,培养10~12 d后,采用所设计的标准模板,直视下进行损伤.观察损伤前后不同时间神经元的形态及即刻早期基因c-fos的表达变化.结果:在损伤8~12 h后,损伤两侧存活的神经元突起便开始朝着损伤部位生长,随着时间的延长,神经元突起甚至可跨越损伤处而延伸至对侧.c-fos基因在损伤后10 min即有表达,2 h达到高峰,随后逐渐下降.结论:此模型可用于模拟体外培养的脊髓神经元受到机械损伤以及观察神经元损伤后进行修复的一些分子事件,简便而可靠,实用性较强.
作者:阙海萍;贾宇峰;刘少君 刊期: 2003年第04期
目的:了解SEN病毒H亚型中国株的流行病学特点及其进化地位.方法:结合已知的基因序列设计引物,建立了半套式PCR检测方法,对58份献血者血清样本和25份non-A-E肝炎患者血清样本进行了SENV-H亚型的检测,并对部分阳性血清的PCR产物进行克隆测序.结果:检测结果显示无偿献血者中SENV-H亚型感染率为34%,在non-A-E肝炎患者中SENV-H亚型感染率为24%,两者间无显著差异;但在无偿献血者中的阳性检出率大大高于国外报道.测序结果经BLASTP软件在GenBank中检索表明,各测序株均与已知的SENV-H株序列有较高的同源性,并在此基础上用MegAlign软件进行进化树分析.结论:建立的半套式PCR检测方法适用于SEN病毒H亚型检测;SENV-H亚型中国株之间以及与已发表的国外SENV-H株序列之间都有较大的变异.与无偿献血者相比,non-A-E肝炎患者血清SENV-H株无进化上的显著倾向性.
作者:杜娟;孟庆华;詹林盛;李娅;王海平;彭剑淳;王全立 刊期: 2003年第04期
目的:用幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)长期感染蒙古沙土鼠建立胃炎、胃溃疡的动物模型.方法:蒙古沙土鼠经过禁食、禁水预处理之后,采用国际标准菌株H.pylori ATCC 43504灌胃,在末次灌胃动物后4,8,12,24,48,52周分别对H.pylori感染组和正常对照组蒙古沙土鼠的胃黏膜进行H.pylori形态学(涂片和细菌培养)、H.pylori快速尿素酶检测、H.pylori特异性PCR检测和病理组织学观察,并对血清中抗H.pylori IgG抗体进行了检测.结果:H.pylori感染组动物以上各项指标均为阳性,表明已经感染H.pylori;而正常对照组则以上各项均为阴性.病理组织学观察表明感染组8周即可见到慢性炎症性病变,12周时黏膜层和黏膜下层可见到淋巴滤泡,24周胃窦部可见到胃溃疡.结论:H.pylori ATCC 43504 可以长期定植于蒙古沙土鼠腺胃,能够产生与H.pylori 感染人胃黏膜相似的病理改变.
作者:李勣;刘纯杰;陶好霞;刘秀丽;李淑琴;张兆山 刊期: 2003年第04期
目的:建立快速、敏感、特异的虫媒病毒RT-PCR检测方法.方法:采用改进的核酸制备方法,分别从感染的乳鼠脑和细胞培养上清液中提取病毒RNA,再用RT-PCR和套式PCR方法进行检测.结果:通过对RT-PCR反应条件的优化,用3种虫媒病毒的特异引物均可从不同稀释度的感染小鼠脑和细胞上清中提取的病毒RNA扩增出特异的目的基因片段.甲病毒属的东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒之间,及与黄病毒属的黄热病毒均无交叉反应,表明建立的RT-PCR检测方法特异性强.套式PCR与RT-PCR比较可提高检测敏感性10~10 000倍.结论:建立的RT-PCR和套式PCR法可用于3种虫媒病毒的快速检测.
作者:于曼;秦鄂德;邓永强;赵月峨;范宝昌;彭文明;杨保安;司炳银;祝庆余 刊期: 2003年第04期
目的:评价携带HGF基因的腺病毒载体转染鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的效率,以及转染HGF基因对MSC增殖与分化的影响.方法:采用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效果和转染率;采用ELISA方法检测转染后HGF的表达情况;细胞增殖分析采用MTT法;MSC向成骨细胞分化采用碱性磷酸酶染色法.结果:转染效率与病毒滴度 (MOI) 具有量效关系,随着MOI的增加,转染率明显增高,当MOI=400时,转染率可达99.99%.转染HGF后,MSC表达HGF明显增高,48 h可达128 ng/ml, 随后逐渐下降并维持2周以上;转染HGF对MSC的增殖以及向成骨分化没有影响.结论:MSC是一种理想的基因载体细胞,可用于HGF的基因治疗.
作者:段海峰;吴祖泽;陆颖;刘红军;哈小琴;吴丹莉;王立生 刊期: 2003年第04期
目的:比较内毒素(脂多糖,LPS)对老龄大鼠和D-半乳糖(D-gal)致拟衰老大鼠的肝毒性.方法:给大鼠腹腔内注射(ip)单一剂量LPS(E.coli,O111B4株),复制肝损伤.用自动生化仪测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶( AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP) 和白蛋白(Alb);光镜观察肝脏病理组织学损伤.结果:LPS 10 mg/kg ip 后24 h,老龄大鼠血浆ALT,AST,LDH和ALP活性的升高幅度(与对照组比,分别平均升高24.7,9.0,13.3和4.2倍),显著大于D-gal致拟衰老大鼠(与对照组比,分别平均升高5.6,1.6,4.0和0.2倍);前者肝病理形态学损伤也比后者严重.结论:LPS对两种衰老大鼠的肝毒性存在较大差别,其对老龄大鼠的肝毒性明显大于D-gal致拟衰老大鼠.
作者:沈伽弟;叶洪金;徐在海;张敏;郭保忠 刊期: 2003年第04期
目的:探讨腋窝淋巴结转移阳性的乳腺浸润性导管癌患者的体视学指标Sv(癌巢表面积密度)与预后的关系,以寻找一个独立判断预后的量化指标.方法:统计206例乳癌患者的Sv和预后数据,并进行分析.结果:提示Sv<4.4和Sv>5.5是两个有意义的参数,前者可以认为是5年生存的安全值,后者可认为是5年生存的危险值.结论:体视学方法测定乳腺浸润性导管癌的Sv,方法简单易行,所获参数可靠,可作为反映其5年生存情况的一个重要指标.
作者:庄競;夏庆欣;李智;姬社青;韩广森;乔思杰 刊期: 2003年第04期
目的:研究非受体酪氨酸激酶c-Abl与Siva-1蛋白的相互作用及其对细胞凋亡的影响.方法:应用免疫共沉淀研究蛋白质相互作用;抗酪氨酸抗体研究蛋白体内磷酸化;体外激酶分析研究体外磷酸化;流式细胞仪测定Sub G1细胞百分比以测定细胞调亡.结果:非受体酪氨酸激酶c-Abl在细胞内及体外均与Siva-1形成复合物,通过体外翻译的c-Abl结合实验表明其为直接的相互作用,其相互作用主要通过c-Abl的SH3结构域与Siva-1直接结合,且Siva-1可以被c-Abl磷酸化.通过c-Abl显性负突变结果表明,酪氨酸磷酸化对Siva-1诱导细胞凋亡至关重要.结论:c-Abl使Siva-1磷酸化可促进Siva-1的细胞凋亡功能.
作者:李平;李楚芳;刘萱;靳彦文;黄维;易艳平;马清钧;Donald W Kufe;曹诚 刊期: 2003年第04期
目的:比较我国1953年从患者脑组织分离的森张株和2001年从患者血清中分离的MDJ01株森林脑炎病毒(TBE)的生物学特性及E蛋白基因核苷酸序列的变化,分析TBE病毒 E蛋白基因的变化与功能的关系,从分子水平上探讨我国TBE的传播、流行规律及致病机制.方法:两株病毒同时接种乳鼠和BHK/21细胞,观察两株病毒对乳鼠和BHK/21细胞的致病性;从两株病毒感染的BHK/21细胞中提取病毒的RNA,对E蛋白基因进行RT-PCR扩增,扩增产物纯化后与pGEM-T载体连接,分别进行克隆测序.结果:森张株对乳鼠和BHK/21的致病性均比MDJ01株明显;两株病毒E蛋白基因长为1 488 nt,编码496个氨基酸, 核苷酸的变异为33个,导致了2个氨基酸的变化,第一个氨基酸的变异发生在113位(MDJ01株由 I变成V),第二个氨基酸的变异发生在163位(MDJ01由P变成A), 两株病毒核苷酸序列的同源性为97.8%,推测的氨基酸序列的同源性为99.6%.与国外远东株比较,森张株核苷酸序列的同源性稍高于MDJ01株,与欧洲株、西伯利亚株的同源性基本一致.结论:新分离株MDJ01对细胞和乳鼠的致病性稍低于1953年分离的森张株,E蛋白基因的核苷酸序列分析表明两株病毒同属于远东亚型,推测MDJ01株可能是由森张株在自然界长期演变而来.
作者:司炳银;马新英;李晓萸;霍秋波;祝庆余 刊期: 2003年第04期
目的:在巴斯德毕赤酵母中表达及纯化人ω干扰素(interferon ω, IFN-ω)以对其功能进行深入研究.方法:用PCR方法扩增人IFN-ω基因,与分泌型酵母表达载体pMEX9K重组,经酶切、PCR和序列测定证实重组表达载体pMEX9Kω构建正确.将重组载体pMEX9Kω用SalⅠ酶切后,转化毕赤酵母GS115.得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中有人IFN-ω的表达,表达量为4×109 U/L.经过 Butyl Sepharose 4 FF疏水层析柱,SP Sepharose FF离子交换柱和Superdex 75凝胶过滤三步层析纯化,利用反相HPLC分析纯化的重组蛋白.结果:得到了纯度>99% 的重组IFN-ω.N端氨基酸序列测定表明重组人IFN-ω具有正确的N端氨基酸残基顺序,相对分子质量为22 000,并具有同天然蛋白相似的比活性.结论:在毕赤酵母中成功地表达并纯化得到了同天然蛋白具有相似的比活性的人IFN-ω.
作者:齐连权;付玲;于长明;于婷;徐春娥;王海涛;陈薇 刊期: 2003年第04期
目的:从影像学角度观察经导管碘油化疗栓塞(TOCE)联合高强度聚焦超声(HIFU)治疗肝细胞癌是否对肿瘤血供灭活有协同作用.方法:比较40例接受TOCE联合HIFU治疗的病例与同期40例接受单纯TOCE治疗的患者治疗前后数字减影血管造影表现,以及治疗当时与下次复查前采集的腹部平片结果.结果:联合治疗组肿瘤血管消失及减少比率高于单纯化疗栓塞组.而病灶内碘油清除程度低于单纯化疗栓塞组.结论:TOCE联合HIFU治疗肝细胞癌对肿瘤血供灭活有协同作用,是可以提高肿瘤坏死效果的有效的非手术治疗手段组合.
作者:朴相浩;王艳萍;李功杰;汪伟;汪光尧;邢旭东;刘云云 刊期: 2003年第04期
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡的作用.方法:以60Co γ射线照射法建立猪主动脉内皮细胞株PAE(porcine aortic endothelial cells)和原代培养的人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的凋亡模型.以流式细胞术[膜联蛋白(annexin)-V-FITC+PI标记]评价细胞凋亡率,观察不同浓度的bFGF对细胞凋亡的影响.结果和结论:bFGF对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡有明显的抑制作用.
作者:谷庆阳;王德文;李月娟;彭瑞云;董波;王兆海;刘杰;邓桦;姜涛 刊期: 2003年第04期
目的:应用知识发现法研究SARS可能相关病原体间的作用关系.方法:应用Arrowsmith系统检索非相关文献策略.结果与结论:通过对冠状病毒和衣原体间非相关文献检索,可推断出一些有参考价值的结论.
作者:龚焱宏;王松俊;雷二庆 刊期: 2003年第04期
本文对表皮干细胞增殖与分化的分子调控重要进展进行了综述,提示通过干预整合素家族的作用、Wnt信号转导通路、Notch信号转导通路以及c-Myc和p63基因的表达等途径,可以控制表皮干细胞命运.这些生物技术的实现将给表皮干细胞在基因治疗、组织工程皮肤构建等方面的应用带来十分诱人的前景.
作者:林京玉;丁日高;应翔宇 刊期: 2003年第04期
BP神经网络是目前应用广泛的人工神经网络模型,本文详细阐述了BP神经网络的原理和特点,并论述了其在药学研究中的应用.
作者:赵应征;韩铁;赵爱国;梅兴国 刊期: 2003年第04期
微RNA是新发现的一类非编码RNA分子,在动植物细胞中广泛表达,它的基因是短的反向重复序列.一般认为微RNA参与调控mRNA的翻译,并与其稳定性有关.微RNA可能在细胞中起着非常重要的作用.
作者:付汉江;江红;吕萍;郑晓飞 刊期: 2003年第04期
dendrimers(树枝状聚合物)是人工合成的一种具有高度分枝状结构的纳米级分子.由于其特殊的结构和表面特性,dendrimers已经被应用于生物领域的多个方面,包括诊断试剂、基因和药物载体、抗癌和抗病毒试剂、疫苗等.
作者:段海峰;蒋中华;吴祖泽 刊期: 2003年第04期
肺纤维化是以肺成纤维细胞增殖及细胞外基质聚集为特征的病变, 对人的健康和生命危害极大, 因其确切发病机制仍不十分清楚,而给防治带来极大困难.目前已知肺纤维化发生与肺成纤维细胞的间隙连接通讯功能下调、纤维化相关基因及群体基因、多种细胞生物因子的异常表达和纤维化相关信号转导途径的激活等有一定关系.因此阐明其发病机制对肺纤维化的有效防治具有指导意义.本文就近年关于肺纤维化的发生机制和早期防治研究进展进行综述.
作者:刘涛;宋良文 刊期: 2003年第04期
本文从流行病学、临床病理研究、医学统计学和生物标志物检测等方面,介绍乳癌危险预测和早期诊断的研究进展.
作者:朱月华;黄焰;尉承泽 刊期: 2003年第04期
尖锐湿疣是人乳头状病毒(HPV)感染引起的一种性传播疾病(STD),临床治疗常采用药液涂擦、电灼、微波、CO2激光、手术切除等方法,但仍有较高的复发率.本文用CL-3型多功能电离子手术治疗仪(广西桂林南方医疗仪器厂生产,以下简称电离子手术仪)及注射用重组人干扰素α-2b(远策素,北京远策药业有限责任公司生产),采取随机对照方法治疗87例尖锐湿疣患者,并对疗效及安全性进行观察.
作者:李渝;韩莉 刊期: 2003年第04期
神经生长因子(nerve growth factor, NGF)是神经系统重要的营养因子[1].NGF的主要生物学效应是维持外周交感、感觉神经元和中枢胆碱能神经元的存活和发育,促进神经系统损伤后修复,同时还参与调节免疫和造血等非神经系统的功能[2].NGF在治疗神经损伤、早老性痴呆和外周神经病等方面具有广阔的临床应用前景[3].
作者:付玲;于婷;刘红艳;杨秀旭;陈薇 刊期: 2003年第04期
我们已报道从北京市第1例SARS患者及其母亲的咽拭子中分离、检出呼肠病毒[1].在透射电镜下,发现感染细胞胞浆内有典型的晶格状排列的病毒颗粒和病毒包涵体.血清学、RT-PCR和核酸序列分析证实是一种独特的呼肠病毒(呼肠病毒科正呼肠病毒属).初步动物实验显示该病毒可导致小鼠非典型肺炎的发生和死亡.近,我们又从北京市佑安医院1例SARS患者(2003年6月7日死亡)病理尸检的肺组织标本中分离、检出呼肠病毒.
作者:杨怡;李卫华;端青;朱虹;郎振为;孟忻;张德添;何昆;周涛;张飒;陈德蕙 刊期: 2003年第04期
干扰素可作为丙型肝炎治疗的首选药物,但由于老年人机体各器官功能减退,常伴发多系统疾病,目前在老年患者中极少应用,使得老年丙型肝炎缺乏有效的治疗措施,减少了治愈的机会.为了进一步探索老年丙型肝炎的治疗办法,我们应用干扰素治疗5例70岁左右老年丙型肝炎取得了较好的效果,现将临床体会报告如下.
作者:赵平;李捍卫;程勇前;福军亮;兰云 刊期: 2003年第04期
目的:为高功率微波辐射致伤效应及其机制的研究提供可靠技术保障.方法:设计并制作垂直辐照天线和辐照平台,并建立测试系统.结果:微波源性能稳定,并具有垂直和水平线双向辐射及功率密度可调的功能,测试结果客观、科学和准确.结论:所改建高功率微波源可适合不同功率密度、不同动物乃至离体细胞的生物学效应研究.
作者:陈浩宇;王水明;曹晓哲;王德文;彭瑞云;胡文华;马俊杰 刊期: 2003年第04期