显微镜下多血管炎（ microscopic polyangitis ， MPA）是一类以小血管受侵犯为主的系统性坏死性血管炎，常累及肾、肺、皮肤、消化道等多个器官。该病病程进展较快，部分患者发现时已伴有肾功能损害，甚至出现急性肾功能衰竭等严重并发症而导致死亡。及早诊断、治疗可使患者5年生存率显著提高，对该病的预后极为重要［1］。然而，该病发病率较低，临床表现复杂多样，极易造成误诊漏诊。笔者结合相关文献对近期收治的1例MPA进行回顾性分析，现报告如下。
作者：马芸；孙洪良；谢文秀 刊期： 2015年第03期
1临床资料患者，女性，60岁，主因“直肠乙状结肠交界癌三线解救化疗1周期”于2013年3月11日入院。患者于2011年11月诊断为直肠癌，并行直肠癌根治术，术后1个月发现肝转移，先后行“化疗、肝内占位射频消融术及巩固化疗”等治疗，疗效评价：病情稳定（ SD ）。患者既往有高血压病史5年，无药物、食物及其他药物过敏史。入院诊断：①直肠乙状结肠交界癌：肝、卵巢及子宫转移；②高血压病（高危）。
作者：尹月；贾立华；张婉璐；邱新野；吴坤；任文静；韩锐；赵振满；孙爱；付桂英 刊期： 2015年第03期
高龄患者常因伴有多种疾病，影响复苏的因素较多，一旦出现心跳呼吸骤停，抢救成功率较低［1］，高龄患者心跳呼吸骤停抢救成功，临床上鲜有报道。解放军总医院急诊科于2014年11月成功抢救了1例院前心跳呼吸停止10 min的高龄老年患者，现将救治体会报告如下。
作者：韩学美；焦德强 刊期： 2015年第03期
目的：调查军人睡眠障碍的检出率及相关因素。方法研究纳入某部1879名军人，收集一般情况问卷、Zung氏抑郁自评量表和Zung氏焦虑自评量表，并评估了受访者的睡眠障碍，包括入睡困难（ DIS）、睡眠维持困难（DMS）和早醒（EMA）。结果与结论受访者在近1个月内DIS、DMS、EMA和任一睡眠障碍的检出率分别为11．5％、11．7％、10．5％和20．8％；初中文化程度、家庭关系差、服役时间超过两年、抑郁和焦虑是军人睡眠障碍的危险因素（ OR＝1．45～5．20，P≤0．028）。军人睡眠障碍的检出率高于普通人群，其发生与社会心理因素及服役时间有关。
作者：王红；于纪泽；王瑛 刊期： 2015年第03期
目的：比较不同生境来源的三角褐指藻在相同培养条件下生长状态及生理生化特性，为三角褐指藻藻种的选择和培养工艺的确定提供参考。方法选取了来自不同地区的11株三角褐指藻作为研究对象，对其进行形态学和分子鉴定，测定其中10株的比生长速率和总脂含量。结果11株藻在显微镜下呈梭形、卵圆形，为黄褐色，其中10株藻的rbcL基因序列几乎完全相同，均属于同一种属三角褐指藻；10株藻的生长速率及总脂含量均有差异，部分藻株之间差异显著；藻株B220油脂产率高，可作为生物柴油生产的候选藻种。结论该研究可为三角褐指藻作为优良能源微藻藻种的选择提供一定的参考。
作者：李树学；丁汉峰；李春波；桂宏学；吕书阳 刊期： 2015年第03期
目的：验证嗜麦芽窄食单胞菌热休克蛋白HSP70（DnaK）的抗原性。方法以嗜麦芽窄食单胞菌K279a为模板，PCR扩增DnaK基因的全序列，将该序列连接到pET－30a载体，转入大肠杆菌BL－21中，经1 mmol／L的IPTG 37℃诱导表达，目的蛋白纯化后进行Western印迹。结果与结论 Western 印迹证实表达的重组蛋白能与鼠抗人HSP70单抗特异性结合，且与该菌的全菌免疫后血清有反应，而与免疫前血清无反应。嗜麦芽窄食单胞菌HSP70具有抗原性，可作为保护性抗原候选分子。
作者：许广杨；尚学义；汤雪萍；钱垚；姜永强；李艳 刊期： 2015年第03期
有的作者将离心机转速用rpm表示，这是非法定单位的写法。正确的写法是：当低速离心时用r／min表示；当高速或超速离心时用相对离心力“×g”表示，g是斜体，前面是乘号。
作者：本刊编辑部 刊期： 2015年第03期
统计学符号一般用斜体。本刊常用统计学符号书写要求如下：样本的算术平均数用英文小写x-，不用大写X，也不用Mean，标准差用英文小写s，不用SD。标准误用英文小写sx-，不用SE。 t检验用英文小写t；F检验用英文大写F；卡方检验用希文小写x2；相关系数用英文小写r；样本数用英文小写n；概率用英文大写P。
作者：本刊编辑部 刊期： 2015年第03期
根据GB／T 3469《文献类型与文献载体代码》规定，以单字母方式标识以下参考文献类型：专著“M”、论文集（或会议录）“C”、报纸“N”、期刊“J”、学位论文“D”、报告“R”、标准“S”、专利“P”、专著及论文集中的析出文献“A”。
作者：本刊编辑部 刊期： 2015年第03期
作者在投稿时，应在研究方法中写明所用统计分析方法的具体名称（如成组设计资料的t检验、两因素析因设计资料的方差分析等）和统计量的具体值（如t＝3．45），并尽可能给出具体的P值（如P＝0．023）；当涉及到总体参数时，在给出显著性检验结果的同时，再给出95％可信区间。对于符合偏态分布的定量资料，应采用M（QR）方式表达，不应采用x-±s方式表达。对于定量资料和定性资料，应根据所采用的设计类型、资料所具备的条件和分析目的，选用合适的统计分析方法，前者不应盲目套用t检验和单因素方差分析，后者不应盲目套用χ2检验。要避免用直线回归方程描述有明显曲线变化趋势的资料。不宜用相关分析说明两种检测方法之间吻合程度的高低。对于多因素多指标资料，要在一元分析的基础上，尽可能运用多元统计分析方法，以便对因素之间的交互作用和多指标之间的内在联系作出全面、合理的解释。使用相对数时，分母不宜小于20；要注意区分百分率与百分比。统计学符号按GB 3358－82《统计学名词及符号》的有关规定书写，一律用斜体。
作者：本刊编辑部 刊期： 2015年第03期
在我们编辑稿件时，发现不少作者在参考文献中著录英、美人的姓名时常常发生错误，现将常见的几种错误及正确的著录格式列出，供参考。①不了解英、美人名前姓后的习惯，把第一个名字当作姓，而把姓当作名并且缩写，如将Steven A ．Lead－on，写成Steven AL，正确的著录应该是Leadon SA。②把教名当作姓，而把真正的姓完全舍弃不写，如将John E．Biaglow错误地著录为John E，正确的著录应该是Biaglow JE。③把表示父子间晚辈的缩写词Jr．，以及表示几代人晚辈的Ⅲ等不正确地省略，如将Earl F．Walborg Jr．著录为Walborg EF，正确的写法应该是Walborg EF Jr．。
作者：本刊编辑部 刊期： 2015年第03期
冻干血浆和人血白蛋白在战创伤休克治疗中发挥着举足轻重的作用。冻干血浆是由健康人血浆根据血型按照一定比例混合经灭活病毒和冷冻干燥制成，其成分与新鲜冰冻血浆基本相同，对于战创伤休克、烧伤等具有良好的治疗效果，也是各国军方的研究热点。随着病毒灭活技术的不断进步，冻干血浆的安全性不断提高，已经在军队应用，在特殊情况下可以民用。白蛋白是血浆中含量多的蛋白，具有维持血浆胶体渗透压、结合并输运血液中小分子物质等生理功能。目前上市的人血白蛋白包括血浆来源和重组来源两种，二者在分子组成、结构及生理功能上基本一致，在人体内的耐受性、安全性及药物代谢动力学等方面也没有明显差别。尽管人血白蛋白在休克救治中的作用曾存在争议，其在失血性休克、烧伤等的治疗中发挥着不可替代的作用。随着技术的不断进步，冻干血浆和人血白蛋白的质量将不断提高，更加安全、高效、经济，更加适用于战场环境。
作者：赵雄；章纳；马玉媛；吕茂民；贾俊婷；赵媛媛；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：建立α2－巨球蛋白（α2－macroglobulin ，α2－M）活性检测方法，检测Cohn组分Ⅳ中α2－M的活性。方法α2－M可与胰蛋白酶相互作用形成“α2－M－胰蛋白酶复合物”，利用酶标仪检测出“α2－M－胰蛋白酶复合物”与小分子底物Na－苯甲酰－DL－精氨酸－对硝基酰胺盐酸盐（ Na－benzoyl－DL－arginine 4－nitroanilide hydrochloride ，BAPNA）显色反应后的光密度值（410 nm），根据建立的血浆α2－M活性标准曲线，定量计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M的活性。结果通过对实验体系中几个关键实验条件进行优化，建立了血浆α2－M活性标准曲线，并计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M活性的平均值为1．578 PU／ml。结论以正常人混合血浆作为参考标准品，用发色底物法检测Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M的活性，方法简便易行，为α2－M制备过程中活性测定提供了实验基础。
作者：皇甫超济；吕茂民；马玉媛；王延琳；赵雄；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：以美国Gambro BCT公司生产的Trima set血小板保存袋为对照，评价山东威高集团医用高分子制品股份有限公司生产的血小板保存袋对单采血小板的储存性能。方法将1U单采血小板平分成两份，分别加入实验血袋和对照血袋中，于血小板恒温振荡保存箱中保存。分别于保存0、3、5、7d取样，比较分析两组的血小板含量和血小板平均体积、pH值、体外聚集活性、氧分压和二氧化碳分压、葡萄糖、乳酸和乳酸脱氢酶浓度、低渗休克反应、血小板活化和凋亡、血小板形态结构及细菌培养试验。结果两种保存袋保存的血小板在保存期内，相同保存时间实验组与对照组之间各项检测结果差异无统计学意义（P＞0．05）；无菌试验均为阴性。结论国产血小板专用塑料血袋与美国Trima set血小板保存袋对该实验使用的15份单采血小板具有相似的储存性能。
作者：王捷熙；周倩；刘敏霞；王艳；柴丽娜；卓海龙；易晓阳；周建伟；王建卫；韩颖 刊期： 2015年第03期
目的：优化发色底物法，使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶（ AAT）的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响；计算初速度并确定被底物饱和的大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育，剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线，测定相关样品的活性，进行精密度和准确度验证。结果胰蛋白酶浓度为0．0625 mg／ml，20 min内酶促反应处于初速度内。 AAT标准曲线范围为200～1200 IU／ml， r＞0．99。该法测定Cohn Ⅳ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为（720．59±18．63）、（601．84±19．18）、（568．09±24．83）IU／ml。每个样品之间的RSD＜10％，加样回收率均在90％～110％。结论发色底物法经优化后，准确度和精密度大幅度提高，更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。
作者：张晋超；赵雄；吕茂民；尹惠琼；王延琳；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：通过加速试验推算纤维蛋白止血贴（ FHP）的保存期。方法根据多点等温稳定性原理，温度选择70，80和90℃，将FHP样品放入不同温度培养箱中（70、80和90℃），在不同时间点（70℃取样时间为1、3、9、10、12、13、20、25、29、32 d；80℃取样时间为1、3、13、15、16、17 d；90℃取样时间为1、2、4 d）取样测定其活性，根据活性与对应时间建立FHP的模拟一级热降解曲线，得出不同温度下FHP的热降解速度，再分别建立FHP热降解速度曲线和FHP贮存时间曲线，以此推算出FHP在4、25和37℃的保存期。结果 FHP在70、80和90℃时的热降解速度分别为0．0148、0．0247、0．1057，热降解速度曲线和FHP贮存时间曲线分别为y＝－0．0399x＋4．445和y＝－1．154x－0．376，据此推算出FHP在4、25和37℃的保存期分别为5734、958和345 d。结论 FHP在25℃条件下可以保存＞2年。
作者：赵雄；章纳；马玉媛；吕茂民；贾俊婷；赵媛媛；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：建立水痘－带状疱疹病毒（ VZV）的快速微量中和试验筛查技术，用于高免原料血浆的筛选和VZV特异性免疫球蛋白（ VZIG）的制备。方法参考美国FDA批准的VZIG制品，设立原料血浆筛选滴度的下限；通过病毒滴度优化，设立快速微量中和试验筛查体系中的病毒使用滴度；建立筛选体系并引入VZIG国际标准品作为质量控制，对1∶2～1∶256倍比稀释的各滴度的单人份和混合原料血浆进行测定，同时利用抗VZV中和抗体ELISA检测试剂盒VaccZyme复核快速微量中和筛选结果，对其灵敏度进行分析。结果快速微量中和筛选试验中原料血浆的低筛选下限为1∶16（VZV中和抗体滴度不低于0．4 U／ml）；筛选体系病毒使用滴度为1500 PFU／ml；20份单采血浆中有8人份的滴度≥1∶16，混合血浆中无符合筛选标准的样本；ELISA的复核结果与快速微量中和试验呈良好的直线关系（r＝0．89524，P＜0．0001）。结论快速微量中和试验的灵敏性、通量和可操作性等，适于VZV高免原料血浆的筛选，解决了VZIG制备中原料血浆筛选的关键技术问题。
作者：王卓；吕茂民；赵雄；马玉媛；赵媛媛；章金刚 刊期： 2015年第03期
凝血因子参与机体凝血过程的内、外源性途径，与机体抗凝系统相互协调，两者的动态平衡维持着体内血液正常的生理状态。该文从分子结构、理化特性、生理功能等方面对参与创伤止血相关的凝血因子进行了详述，同时，对其在创伤出血控制、凝血方面发挥的重要作用及相关凝血因子类制品的研究进展、使用现状进行了综述，以期为凝血因子类药物的研发及应用提供借鉴。
作者：吕茂民；王方；赵雄；章金刚 刊期： 2015年第03期
血液制品是以健康人血浆为原料生产制备的一种特殊“药品”，自20世纪80年代经血液制品传播人类免疫缺陷病毒事件频发以来，如何确保血液制品病毒安全性倍受关注。经过数十年的努力，目前各国均形成了严密体系，通过多种预防控制措施确保血液制品的病毒安全性，包括原料血浆的控制、生产过程中的病毒灭活／去除处理、严格遵守药品生产质量管理规范等。未来，新发传染病病原体将对血液制品的病毒安全性造成新的威胁，因此需不断研究新的应对措施。
作者：马玉媛；赵雄；尹惠琼；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：构建表达人凝血因子Ⅶ（FⅦ）的重组腺病毒载体，利用腺病毒载体介导哺乳动物细胞表达重组人凝血因子Ⅶ（rhFⅦ）。方法利用BamHⅠ和EcoR Ⅴ双酶切pcDNA 3．1－FⅦ载体得到FⅦ基因片段，补平后，插入经SalⅠ单酶切、补平并去磷酸化处理的加强型绿色荧光蛋白（ GFP）表达盒的pAdTrack－CMV腺病毒穿梭载体，构建pAdTrack－CMV－FⅦ，继而进行酶切和测序鉴定；经PmeⅠ单酶切线性化后，pAdTrack－CMV－FⅦ在BJ5183感受态菌内与pAdEasy－1腺病毒骨架发生同源重组，构建重组表达FⅦ的腺病毒质粒pAd－FⅦ；经PacⅠ酶切后的pAd－FⅦ，使用PEI试剂转染293 A细胞，包装表达FⅦ的重组腺病毒Ad－FⅦ；利用Western 印迹检测重组腺病毒Ad－FⅦ介导293 A细胞表达FⅦ的蛋白水平；通过观察EGFP的表达来判断质粒转染及病毒感染细胞的效率。结果经酶切和测序鉴定，FⅦ克隆到pAdTrack－CMV腺病毒穿梭载体中，获得重组质粒pAdTrack－CMV－FⅦ；将其与pAdEasy－1在细菌内发生同源重组，成功获得FⅦ重组腺病毒质粒pAd－FⅦ；在293A细胞内包装重组腺病毒，Western印迹检测到FⅦ蛋白的表达。结论成功构建重组腺病毒Ad－FⅦ，并实现了rhFⅦ在哺乳动物细胞中的表达，为利用哺乳动物细胞表达rhFⅦ的研究奠定了基础。
作者：揭飞龙；吕茂民；王升尧；颜仁和；何悦；李红卫；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：对人血浆凝血因子Ⅷ（ coagulation factor Ⅷ，FⅧ）制备过程中4种柱纯化前处理方法进行比较并分析其优缺点，为血源FⅧ的纯化制备提供借鉴与参考。方法冷沉淀经Tris溶解后的上清，分别用甘氨酸沉淀法、PEG沉淀法、酸沉淀法和氢氧化铝凝胶吸附法处理；用活化部分凝血活酶（ APTT）法测定样品上清中FⅧ活性，计算总活性回收率和样品的比活性，用非还原性SDS－PAGE电泳比较去除杂蛋白的效果。结果4种处理方法中，甘氨酸沉淀法总活性回收率高[（94．00±7．60）％]，其次是酸性沉淀法[（89．47±2．60）％]、PEG沉淀法[（80．92±9．67）％]，氢氧化铝吸附法的总活性回收率低[（78．65±7．52）％]；甘氨酸沉淀法与PEG沉淀法去除杂蛋白的效果优于酸性沉淀法和氢氧化铝吸附法；经4种不同方法处理后，甘氨酸沉淀法所得样品中 FⅧ比活高[（0．6856±0．1258）IU／mg]，其次是PEG沉淀法[（0．5773±0．0787）IU／mg]、酸性沉淀法[（0．3885±0．0301）IU／mg]，氢氧化铝吸附法所得样品比活低[（0．2879±0．0472）IU／mg]。结论在上述方法中，甘氨酸沉淀法和PEG沉淀法的总体效果较佳，且因后者操作更加简便、快捷，在实际生产过程中采用PEG沉淀法较为合适。
作者：王方；吕茂民；赵雄；余蓉；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：建立能同时检测人细小病毒B19（简称B19病毒）3种基因型的通用核酸检测（ NAT）体系，并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对，选取其保守区域（ NS1区）设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果，在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中，建立B19病毒实时荧光定量PCR（ qPCR）标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果建立的B19病毒实时qPCR检测体系的标准曲线在1×109～1× 103拷贝（copies）／μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示，体系的低检测下限为10拷贝／μl；与其他血源传播病毒等无交叉反应；批内和批间实验重复性良好。结论建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系，不仅可用于B19病毒感染的诊断，还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查，对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。
作者：贾俊婷；郭逸；赵雄；马玉媛；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：建立血液制品病毒灭活／去除技术并应用于血液制品的病毒灭活／去除工艺验证。方法建立指示病毒库以及S／D处理法、低pH孵放法、干热法、巴氏消毒法、纳米膜过滤法等血液制品病毒灭活／去除技术，采用细胞病变法测定病毒滴度，Spearman和Karber法计算病毒滴度，病毒滴度降低量（ LRV）≥4判为有效，对企业的血液制品样品进行病毒灭活／去除验证。结果 S／D处理法和低pH孵放法可有效灭活有包膜指示病毒，干热法和巴氏消毒法可有效灭活有、无包膜指示病毒，纳米膜过滤法可在一定过滤量范围内去除PPV指示病毒。结论所建立的血液制品病毒灭活／去除技术可用于血液制品的病毒灭活／去除工艺验证，以提高血液制品的病毒安全性。
作者：尹惠琼；王蕊；朱凤宣；王建国；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：通过生物信息学方法分析人巨细胞病毒（ human cytomegalovirus ，HCMV）包膜糖蛋白B （ glycopro－tein B，gB）的结构及理化特性，预测gB的线性B细胞抗原表位。方法基于HCMV gB的序列，利用两种在线B细胞表位预测程序及DNAstar软件对gB进行预测；利用SWISS－MODEL服务器同源构建gB三级结构模型，进行进一步验证。结果与结论综合多项分析，预测得到HCMVgB的多个线性B细胞表位，为后续验证其优势中和表位，建立富含高效价中和抗体的原料血浆的筛选方法奠定了基础。
作者：闫晶晶；吕茂民；赵雄；尹惠琼；章金刚 刊期： 2015年第03期
目的：检测混合原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19（human parvovirus B19，B19病毒）核酸，分析我国原料血浆及凝血因子类产品中B19病毒的污染情况。方法针对B19病毒的保守区域NS1区合成引物及探针，采用TaqMan实时定量PCR法检测混合原料血浆和4类凝血因子类产品中B19病毒核酸。结果混合原料血浆的B19病毒核酸的阳性率为59．49％（116／195），高浓度可达1．35×1010拷贝／ml。因子Ⅷ、凝血酶、纤维蛋白原以及凝血酶原复合物的阳性率分别为93．55％（29／31）、100％（10／10）、85．71％（6／7）和88．89％（8／9）。结论我国混合原料血浆与凝血因子类产品中B19病毒的污染率较高，有必要进行原料血浆的B19病毒筛查，对于保障血液制品的病毒安全性具有重要意义。
作者：贾俊婷；马玉媛；郭逸；赵雄；赵福广；章金刚 刊期： 2015年第03期
特异性人免疫球蛋白是指针对某一特定病原体或生物毒素等的一类高免疫球蛋白制剂，是血液制品的重要品种，多用于预防和治疗一些发病率高、感染后果严重、无特效治疗方法的病原体感染，在传染性疾病的防治中具有其他药物不可比拟的优点。国外特异性人免疫球蛋白上市品种较多，而国内由于技术瓶颈约束、经济效益有限等原因，新型特异性人免疫球蛋白的研发进展缓慢。该文对多种特异性人免疫球蛋白及其对于传染病的防治作用进行了综述。
作者：马玉媛；向思龙；王卓；吕茂民；章金刚 刊期： 2015年第03期
自第二次世界大战期间第一个血液制品，即人血白蛋白问世以来，血液制品在战创伤救治与急救医学中发挥了不可替代的作用。目前，血液和血液制品的保障体系日益完善，新型血液制品的研发也取得巨大进展。病毒灭活通用型冻干血浆已有军方采购；白蛋白作为战创伤急救用理想的抗休克血容量扩张剂，出现了不同浓度、高纯及软包装产品；特异性免疫球蛋白制品在救治战创伤感染、新发传染病防治、应对生物战剂与生物恐怖潜在威胁等方面，已成为某些发达国家的常规贮备；基于纤维蛋白原、凝血酶等制备的局部止血剂以及重组凝血因子Ⅶ的整体止血效果，使得这类产品在战创伤出血救治中的作用日益显现；作为战创伤脓毒血症救治的潜在药物，人蛋白C、抗凝血酶等抗凝蛋白的研究已经取得了明显进展；α2－巨球蛋白等蛋白酶抑制剂，有望成为特种医学救治的良药。可以认为，在未来战争和非战争军事行动中，血液制品将会发挥更大的作用。
作者：章金刚 刊期： 2015年第03期
