目的 构建一种利用Cre重组酶体内低表达诱导K-ras G12D在小鼠肺部活化的慢性自发性肺部肿瘤模型.方法 首先构建一种肺脏特异性低表达Cre重组酶的SPC-CRE转基因小鼠,利用SPC-CRE转基因小鼠与LSL K-ras G12D 转基因小鼠杂交,获得SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠.对4月龄,5月龄,7月龄,9月龄SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠肺部进行取材,固定并进行常规石蜡切片及HE染色,镜下观察小鼠肺部病理特征.使用micro-CT对7月龄,9月龄SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠肺部肿瘤结节进行检测.结果 获得了SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠,该小鼠在肺组织特异性低表达Cre重组酶,并诱导K-ras G12D在肺组织的表达,由K-ras G12D引起肺组织肿瘤的发生.SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠4月龄肺部出现轻度炎症反应,5月龄开始肺部可见散在腺瘤样的结节,成瘤率为100%(雌6/6,雄6/6),随着月龄增加,小鼠肺腺瘤结节呈增大趋势,病理变化呈进展状态,9月龄时通过micro-CT可以检测到肺部少量散在孤立的肿瘤结节.结论 利用肺组织特异性低表达Cre重组酶的方式,建立了一种从肺部炎症反应到肺腺瘤进展时程较长的慢性自发肺部肿瘤小鼠模型,为肺癌发生的研究提供了更长的窗口期.
作者：高昆；刘学丽；高珊；高凯；董伟；张旭；刘宁；徐艳峰；张连峰 刊期： 2013年第07期
目的 用寇氏法测定螺光黑壳菌酮A腹腔注射对昆明小鼠的半数致死量(median lethal dose,LD50).方法 实验动物为啮齿昆明小鼠,雌雄各半,体重(20±2)g.用序贯法摸索出受试物的全死剂量,而后设置5个剂量组,剂量比值r=1.25(或0.80).一次性腹腔注射黑壳菌酮A后,连续观察10 d,统计各组死亡情况并计算半数致死剂量.结果 各组小鼠均出现不同程度的腹腔刺激反应,雌性比雄性反应更强烈且呈剂量依赖性,30 min后刺激基本消失;受试物腹腔注射LD50为5.35 mg/kg,其95%可信区间为4.69～6.11 mg/kg.结论 螺光黑壳菌酮A的LD50为5.35 mg/kg,死亡率呈剂量依赖性.
作者：李兵；陈晓光；陈晓梅；郭顺星；王春兰 刊期： 2013年第07期
目的 改良弥漫性脑损伤动物模型,建立一种简单实用的闭合性弥漫性颅脑损伤动物模型.方法 改良marmarou打击装置建立大鼠弥漫性颅脑损伤动物模型,脑组织的病理学改变使用渡银染色及HE染色法检测.结果 损伤呈全脑局部弥漫性分布,有出血、神经细胞肿胀、胶质细胞嗜酸性变、脑组织疏松、神经细胞变性坏死、嗜神经现象.结论 改良的marmarou闭合性大鼠颅脑损伤模型可作为闭合性弥漫性颅脑损伤研究的病理实验基础.
作者：陈梅花；陈贵珍；贾万钧；孙汝亮；胡丙杰 刊期： 2013年第07期
目的 研究衰老对肺干细胞在博来霉素致肺纤维化小鼠模型中修复能力的影响.方法 利用博来霉素处理年轻,年老小鼠建立肺纤维化模型,通过流式细胞术等方法比较肺组织干细胞在年轻、年老小鼠肺纤维化模型中的比例及增殖情况,研究衰老对肺组织干细胞的损伤修复能力的影响.结果 在博来霉素致肺纤维化的模型中,年老小鼠相对年轻小鼠肺组织干细胞增殖明显降低,肺上皮干细胞和肺间质干细胞比例显著下降.结论 在衰老过程中肺组织干细胞在肺纤维化损伤后修复能力明显减弱.
作者：何立锋；龚松迪；宋舸；李晓燕；沈晓强；林倩雅；傅晓岚；姚超；鞠振宇；张玲玲 刊期： 2013年第07期
目的 建立环境致癌物与基因突变联合因素影响下的miRNA表达谱,为肿瘤发生机制的进一步研究提供新线索.方法 同等条件下,首先制备SHP2+/+野生型(wild type,Wt)及SHP2D61G/+激活突变(gain-of-function mutation,GOF mutation)小鼠永生化的成纤维母细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)细胞,之后以0.5 μmol/L的三氧化二砷急性处理MEFs细胞48 h后提取细胞总RNA,用小鼠miRNA芯片杂交/分析,建立miRNA(microRNA,miRNA,miR)表达谱,筛选差异表达显著者,用RT-PCR进行验证.结果 重金属化合物三氧化二砷处理SHP2+/+野生型和SHP2D61G/+突变的MEFs细胞48h后,数十个miRNAs出现差异性表达,miRNA在三氧化二砷诱导前后的细胞或SHP2激活突变与否的细胞出现表达增加或减少,且发现受三氧化二砷和SHP2激活突变影响变化一致的miRNAs,如mmu-miR-100(表达下降)、mmu-miR-1907(表达升高)等,RT-PCR检测发现mmu-miRNA-100、mmu-miRNA-1907的表达趋势与芯片结果是一致的.结论 基因突变与环境污染可以影响MEFs细胞的miRNA表达谱出现明显改变,这些改变可能是细胞恶性转化及肿瘤发生的基础.
作者：崔花芹；汪心怡；陈吉；陈卓；赵华；瞿成奎；汪思应 刊期： 2013年第07期
目的 建立化妆品原料美白功效评价动物模型并应用.方法 紫外线连续照射7 d造成花色豚鼠皮肤黑化模型,在褐色无毛部位连续涂抹样品30 d.Maxmeter仪检测皮肤黑色素指数(MI)和红色素指数(EI)的变化.安乐处死动物后取皮肤组织,多聚甲醛固定、石蜡切片,多巴胺染色和氨银染色,对组织切片进行图像分析.结果 UV照射豚鼠皮肤后,MI指数升高,组织学观察显示黑色素颗粒增大和表皮层分布增多.经白藜芦醇-熊果苷复配美白原料测试,皮肤颜色MI指数显著下降,EI指数升高.组织学显示呈多巴染色阳性的黑素颗粒明显抑制,氨银染色区域在表皮内的分布下降.结论 利用紫外线造成实验动物皮肤黑化模型,运用皮肤生物物理学检测和组织学染色分析技术可以用于美白化妆品原料的功效评价和机制研究.
作者：秦瑶；程树军；黄健聪；张俊宾 刊期： 2013年第07期
目的 建立KM、ICR、C57BL/6J、BALB/C四个品系新鲜卵巢异体同位移植的方法.方法 上述四个品系出生10 d、20 d、4周的仔鼠作为供体,取出整个卵巢,将卵巢原位移植到同品系4周龄受体雌鼠,术后置于屏障系统内精心饲养,5~8周后,与同品系成年雄鼠交配,观察移植受体是否有正常的繁殖功能.结果 同品系不同时间段的新鲜卵巢,移植到同品系受体中,移植卵巢在受体体内可以恢复正常功能,受体可以正常交配,产生正常的仔鼠.结论 同品系不同日龄的异体同位卵巢移植方法可行.
作者：郁丽丽；刘丽均；王俊风；魏勤；李淼；张艺宝；施美莲；廖侃；徐平 刊期： 2013年第07期
目的 建立检测树鼩IL-2基因TaqMan探针实时荧光定量PCR方法.方法 以经ConA诱导培养的树鼩淋巴细胞总RNA为材料,设计特异性引物,通过RT-PCR技术克隆出树鼩IL-2基因,以构建的树鼩IL-2基因质粒为标准品,建立标准曲线,并进行灵敏度检测.结果 建立了树鼩IL-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,此法检测灵敏度高,线性范围可达102～109拷贝/ul.结论 成功建立了树鼩IL-2实时荧光定量PCR方法,此方法灵敏度高、特异性强,检测周期短,为探讨IL-2作用的分子作用机制奠定基础.
作者：黄晓燕；徐娟；王文广；殷安国；李晓飞；孙晓梅；夏雪山；代解杰 刊期： 2013年第07期
目的 研究感染肠道鞭毛虫转基因小鼠的生物净化技术.剖腹产方法对感染的小鼠进行净化,使其达到SPF级标准,为建立基因工程小鼠肠道鞭毛虫净化技术提供依据.方法 取感染肠道鞭毛虫的APPswe/PS1dE9阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)转基因小鼠(APP小鼠),在超净工作台内行剖腹产取胎手术,用SPF级帕金森病转基因鼠代乳,术后1、4、7、10月进行微生物和寄生虫检测;PCR技术鉴定剖腹所得APP仔鼠及其繁殖群(F1代)APPswe基因型,计算F1代每窝仔鼠APPswe基因阳性率及平均阳性率,用单样本t检验分析APPswe基因阳性率是否符合孟德尔遗传规律.结果 实施剖腹产手术10例,获仔鼠75只,7日龄仔鼠存活率及离乳存活率分别为90.67%(68/75)和73.33%(55/75);净化前APP小鼠肠道鞭毛虫感染率均为100%(5/5),净化后的4次检测,APP小鼠SPF级所要求的病原菌及寄生虫结果均为阴性.净化后的APP仔鼠共繁殖42窝F1代,平均每窝APPswe基因阳性率为48.3%,与孟德尔遗传规律50%的理论阳性值相比无统计学差异(P>0.05).结论 剖腹产净化技术可成功去除该APP小鼠的肠道鞭毛虫,且对APPswe基因遗传性状未产生明显影响.
作者：张辰子；杨林；夏冠玲；郑佳琳；刘科；刘盛来；林忠宁；唐小江 刊期： 2013年第07期
目的 介绍一种新型大鼠蛛网膜下腔置管法,并比较几种常见的鞘内置管方法,为脊髓水平的神经生理实验及疼痛研究提供更有效方案.方法 选择90只230~250 g雄性SD大鼠,随机分为Yaksh组,寰枢椎(AA)组和尾置管(L)组,分别从枕骨大孔、寰枢椎间隙、腰5-6椎间隙置管至蛛网膜下腔.三组模型建立后,观察大鼠置管后死亡率、肢体瘫痪率及体重变化情况,并测定其缩足反应阈值(PWT)、甩尾反应潜伏期(TF)和吗啡镇痛效果.对比三组间是否有差异.结果 置管后AA组和L组发生死亡和肢体瘫痪的百分率明显低于Yaksh组;且体重恢复情况明显优于Ysksh组;术后7d内,AA组大鼠的PWT值和TF值与术前基础值相比为接近;吗啡镇痛实验说明AA组置管方法与其他组相比并无差异.结论 大鼠经寰枢椎蛛网膜下腔置管方法具有死瘫率低、身体恢复快、对后续实验影响小等优点,是一种较好的新型鞘内置管方法.
作者：陈锐；王华；江伟 刊期： 2013年第07期
目的 探索盐酸塞拉嗪联合盐酸氯胺酮麻醉鸵鸟的剂量及围手术期管理方法.方法 对7例进行手术的成年非洲鸵鸟进行麻醉,麻醉诱导盐酸塞拉嗪400 mg盐酸氯胺酮2 000 mg,追加剂量盐酸塞拉嗪100 mg/次.监测麻醉诱导剂量、麻醉显效时间、麻醉维持时间、催醒时间、完全复苏时间,并观察麻醉过程中呼吸、心率及术中有无呕吐、流涎、躁动不良反应.术后尼可刹米催醒.结果 (7.83±0.32)mg/kg盐酸赛拉嗪联合(29.03±2.42)mg/kg盐酸氯胺酮使7例鸵鸟均进入麻醉状态.麻醉显效时间平均:(7.85±1.34)min.麻醉维持时间平均:(130.00±18.25)min.麻醉状态呼吸、心率平稳.术中出现流涎、呕吐各1例,躁动3例.7例鸵鸟均成功复苏,无麻醉意外发生.结论 盐酸塞拉嗪联合盐酸氯胺酮是较为简便的鸵鸟麻醉方法,麻醉效果确实、安全稳定.
作者：王鹏飞；时长江；万彦林；范猛；姜文学 刊期： 2013年第07期
实验动物的质量与动物实验能否顺利进行关系非常密切.我国要求实验用SPF级小鼠必须排除的病毒有11种,尽管如此仍然会因为动物本身携带的微生物而干扰实验结果.鼠诺如病毒就是从意外死亡的实验小鼠中分离得到,免疫缺陷小鼠感染这种病毒后发生炎症反应甚至死亡.我国关于鼠诺如病毒的报道还比较少,其致病力及对实验研究的影响尚不完全清楚,也没有明确的感染情况调查.本文重点阐述了鼠诺如病毒的发现及危害、检测情况、病原特性和国内现状,并给出建议以便更好的了解MNV并控制该病毒的传播.
作者：田胜男；刘云波 刊期： 2013年第07期
长爪沙鼠对多种病原易感,某些病原感染后的疾病特征与人类相似,因而广泛应用于感染性疾病动物模型,为感染性疾病的病理学特征、发病机制、免疫学诊断和药物研发等研究提供了重要材料.本文简要综述了长爪沙鼠在微生物和寄生虫感染等相关研究中的应用,以期为长爪沙鼠的开发应用提供借鉴.
作者：肖丽；戴方伟；宋晓明；萨晓婴 刊期： 2013年第07期
物体识别实验是一种用于检测啮齿类动物记忆功能的行为学实验方法,以其独有的特点和优势近年来得到了广泛的应用.目前,在国内物体识别实验受到越来越多的关注,但具体介绍该实验方法的相关文献却很少.因此,本文主要对大鼠物体识别实验的方法进行简要阐述.
作者：宋广青；孙秀萍；刘新民 刊期： 2013年第07期
动物尸体的安全处理是涉及动物尸体处理的生物安全高级别实验室工作中保证实验室安全的重要环节.国际上对该级别实验室中动物尸体处理的主要工艺包括焚化、碱水解、逆聚合和炼制.文章重点介绍了较适合我国国情的生物安全高级别实验室动物尸体处理工艺,并对我国现阶段自主实验室动物尸体处理系统研究的关注点进行了讨论.
作者：陈咏；亓伟伟 刊期： 2013年第07期
