目的 探讨渥曼青霉素(wortmannin)对大鼠脑外伤(TBI)模型引起的细胞凋亡的影响及可能机制.方法 ①健康成年雄性Wistar大鼠100只,随机分为假手术组(sham组)(n=20)、手术对照组(saline组)(n=40)、药物治疗组(wortmannin组)(n=40).采用改良自由落体法建立大鼠脑外伤模型,sham组暴露硬脑膜而不撞击,wortmannin组打击前左侧脑室注射5 μl wortmannin(50 nmol/L),saline组造模前注射5 μl生理盐水.②免疫印迹法、Real-time PCR检测脑组织caspase-3、Bax表达情况;DNA凝胶电泳检测脑外伤引起的DNA片段断裂.③图像分析脑体积缺损情况.结果 ①与sham组相比,saline组脑外伤可明显引起caspase-3、Bax表达增多,Bcl-2表达减少;DNA片段断裂增多,脑体积缺损情况显著.②与saline相比,wortmannin干预能明显抑制caspase-3与Bax的激活(P<0.01),促进Bcl-2表达的增高(P<0.01);抑制脑外伤引起的DNA片段断裂及脑体积缺损(P<0.05).结论 wortmannin能减轻脑外伤引起的细胞凋亡与脑损害,其机制可能是通过抑制caspase依赖的细胞凋亡途径实现的.
作者：陈晔；林凌；俞向梅；林栋 刊期： 2011年第09期
目的 本研究旨在观察经皮电刺激对废用状态下肌肉的肌电及酶组织化学的影响.方法 用大鼠尾部悬吊法使大鼠下肢去负荷,以建立废用性肌萎缩模型.大鼠随机分为三组:下肢去负荷14 d组(Hu)、电刺激组(Hu+St)及正常对照组(Control).吊尾期间给予大鼠左侧下肢皮肤低频电刺激(2 Hz,20-25 V).采用电生理和酶组织化学技术观察腓肠肌肌电图,肌重及肌肉Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性.结果 下肢去负荷14 d后大鼠腓肠肌肌重,Mmax,Hmax/Mmax,Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性均明显降低(P<0.05).而在下肢去负荷期间给予大鼠左侧下肢电刺激后,以上指标与正常对照组比较均没有统计学差异(P>0.05).结论 以上结果 提示,经皮电刺激不仅可对抗废用肌肉的肌重下降,还对肌肉肌电、Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性具有保护作用.
作者：张浩；杨威 刊期： 2011年第09期
目的 探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注损伤海马区乏氧诱导因子HIF-1α和HIF-3α表达的影响.方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2 h再灌注模型,18只大鼠随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=6)、ADSCs组(n=6).ADSCs组经尾静脉注射PKH-26标记的ADSCs细胞悬液(0.5 ml,细胞密度为4×106个/ml).缺血3 h再灌注72 h后行NSS法行神经功能评分,Western blot和实时荧光定量PCR检测海马区HIF-1α和HIF-3α蛋白和mRNA表达.结果 ADSCs移植后可见PKH26标记的ADSCs在海马区有表达.与模型组比较,ADSCs组神经功能损害评分显著降低(P＜0.05),海马区HIF-1α和HIF-3α蛋白和mRNA表达显著上调(P＜0.05).结论 脂肪源性干细胞移植可上调脑缺血再灌注损伤大鼠海马区HIF-1α和HIF-3α表达,促进脑缺血损伤神经功能恢复.
作者：王莹；赵斯达；李文媛；丁利；管业秋；张秀彪；吕文召 刊期： 2011年第09期
目的 建立活血颗粒的质量标准.方法 采用薄层色谱法对方中白芍、柴胡、白芷、穿山甲等药味进行定性鉴别;采用高效液相色谱法,对方中白芍中的芍药苷进行含量测定,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(29:71)为流动相;检测波长为230 nm.结果 本品薄层色谱斑点清晰、专属性强.芍药苷含量测定线性范围为0.123 5-0.617 5 μg;平均回收率分为97.85%;RSD值为2.34%.结论 定性鉴别和含量测定方法 准确可行,重复性好,可有效地控制活血颗粒的质量,建立了活血颗粒的质量标准.
作者：张志勇；李艳丽；高翔宇；刘恩荔 刊期： 2011年第09期
目的 建立中空纤维液相微萃取(HFLPME)-高效液相色谱法(HPLC)测定中药侧柏中黄酮类化合物含量.方法 以聚偏氟乙烯为有机溶剂载体,正己醇为接受相,10-5 mol/L HCl为供相,在1 500 r/min搅拌下萃取45 min,萃取结束后,蒸干接受相中有机溶剂,用50 μl甲醇溶解后进行HPLC分析.结果 分析物二氢杨梅素、杨梅素、漆黄素、槲皮素、柚皮素、山柰素、异鼠李素和白杨素在0.01-10.0 μg/ml范围内线性关系良好;检出限为0.01-1.0 ng/ml;平均浓缩因子在5.4-30.6倍之间;中药侧柏中分析物的平均回收率为97.5%.结论 HFLPME操作简单、快速、有机溶剂用量少、富集倍数高、对测定中药中微量或痕量黄酮类有效成分具有重要的意义.
作者：全红；张茜；陈璇；白小红 刊期： 2011年第09期
目的 改进SD大鼠胃窦平滑肌细胞的分离方法,为胃肠道疾病的研究提供技术平台.方法 Ⅱ型胶原酶消化法急性分离SD大鼠胃窦平滑肌细胞,制成细胞悬液,台盼蓝检测细胞活力,显微镜下观察记录细胞收缩长度.结果 1%Ⅱ型胶原酶消化法急性分离可获得细胞膜完整、生物活性状态良好的单个胃窦平滑肌细胞,该细胞符合胃肠道疾病实验研究的要求,可用于相关实验研究.结论 酶消化急性分离法是获得单个胃肠道平滑肌细胞的一种简便、高效、易操作的方法.
作者：谢燕东；杨琦；王景杰；黄裕新 刊期： 2011年第09期
目的 探讨西安市中心医院感染科诊治的慢性乙肝患者血清中HBV基因型的分布状况及HBV基因型与临床特征的关系.方法 采用巢式PCR法对196例慢性HBV患者的血清进行病毒基因型检测,并分析HBV基因型与患者临床特征的关系.结果 196例慢性HBV患者的基因分型结果 为C型138例(70.4%)、B型40例(20.4%)、B/C混合型18例(9.2%),基因型的分布在性别上无统计学差异;各基因型在无症状携带者、慢性乙肝、肝硬化、肝癌中的分布差异也无统计学意义(P＞0.05);C型感染者血清HBeAg阳性率(75.2%)高于B型感染者(14.2%),差异有统计学意义(P＜0.05).各基因型患者在HBV-DNA载量和ALT水平上无统计学差异(P＞0.05).结论 西安市中心医院感染科诊治的HBV患者的基因型以C型和B型为主;基因C型患者血清HBeAg阳性率高于B型;基因C型患者与B型相比在肝脏炎症程度、HBV-DNA载量方面无显著差异;基因B型和C型患者临床特点相似.
作者：付建军；白艳丽；王巧侠；赵怡生；赵英仁；李建元 刊期： 2011年第09期
目的 建立稳定的大鼠离体肝切除联合自体肝移植模型.方法 采用门静脉、肝后下腔静脉单线连续缝合法、胆管支架重建法及无损伤切肝法等技术,建立SD大鼠的离体肝切除联合自体肝移植模型.结果 大鼠无肝期(20.14±1.53)min.60例SD大鼠术后成活率91.7%,1周以上存活率80%.结论 大鼠离体肝切除联合自体肝移植模型,成活率高,重复性好,可作为离体肝切除联合自体肝移植有关实验研究的可靠、稳定的动物模型.
作者：刘文渊；张玉君；徐土炳；林恒；别平 刊期： 2011年第09期
目的 应用超声造影分析脂肪肝内相对正常肝区(FFS)与其周围脂肪肝是否存在血流灌注的差异.方法 应用低机械指数对比脉冲序列成像对比分析52例63个脂肪肝内相对正常肝区与其周围脂肪肝的常规超声回声强度、定量分析不同时间点的超声造影增强强度.结果 脂肪肝内相对正常肝区较其周边脂肪肝常规超声视频强度低,超声造影30,60,120 s增强强度较周围脂肪肝高(P<0.05).应用超声造影后诊断FFS的敏感性、精确性从63.5%、82.5%分别提高到98.4%,98.6%.结论 脂肪肝内相对正常肝区与周围脂肪肝可存在血流灌注的差异,超声造影提高了脂肪肝内FFS的诊断能力.
作者：刘利平；冯婷华；曹成；张敏 刊期： 2011年第09期
目的 构建人核心蛋白聚糖(human decorin,hDCN)pcDNA3.1(+)真核表达载体,并探讨其对S180细胞在体内、体外的抗肿瘤效应及其作用机制.方法 用PCR法从pPIC9K-DCN扩增hDCN核心蛋白分子编码序列的全长cDNA,与pcDNA3.1(+)载体连接.将重组pcDNA3.1(+)- DCN质粒通过脂质体转染法转入小鼠肿瘤细胞S180中,用G418筛选出阳性克隆细胞,RT-PCR、双酶切及测序鉴定.流式细胞仪对转染了重组质粒pcDNA3.1(+) - DCN、空质粒pcDNA3.1(+)的S180细胞和未转染的S180细胞进行细胞凋亡检测和细胞周期分析.分别注射等量的pcDNA3.1(+) - DCN/S180、pcDNA3.1(+)/S180的细胞和未转染质粒的S180细胞到随机分组的小鼠腋部皮下,观察三组小鼠的肿瘤生长情况;处死三组小鼠后,分别剥离肿瘤组织做病理学检查.结果 转染了DCN的S180细胞凋亡指数明显增高,G0/G1期细胞百分率明显高于其他两组,G2/M期、S期细胞百分率分别明显低于其他两组(P<0.01).与注射pcDNA3.1(+)/S180和S180的小鼠相比,注射pcDNA3.1(+) - DCN/S180的小鼠肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤体积小于其他两组(P<0.01).结论 成功构建了人核心蛋白聚糖真核表达载体.体外实验结果 显示转染该表达载体的S180细胞凋亡指数明显增高,且凋亡多发生在G0/G1期;转染DCN表达载体的S180细胞在实验动物体内成瘤性降低,提示转染DCN在实验动物体内外都能表现抑瘤效应.
作者：王桂琴；兰晶；于培霞；邓志华 刊期： 2011年第09期
