目的 运用SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库.方法 提取恒河猴睾丸组织总RNA并分离出 mRNA,用clontech公司SMARTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得全长cDNA双链;经SfiI酶切、层析柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB连接后电转化及铺板,建成原始文库.结果 经鉴定,原始文库为2.5×106个重组子,扩增后文库滴度为4.5 X 109CFU/mL.重组率为100%,平均插入片段为1.6kb.结论 已构建文库质量较高,为进一步筛选、克隆睾丸特异表达基因奠定了基础.
作者:陈厚仰;汤育新;文甲明;尹光明;刘志中;肖小旺 刊期: 2009年第09期
目的 研究α-受体阻滞剂、COX-2抑制剂和抗抑郁药联合治疗慢性前列腺炎/慢性盆底疼痛综合征(CP/CPPS)的效果.方法 本组57例被诊断为CP/CPPS的患者,平均年龄33岁(18~58岁).均有骨盆区域疼痛不适、尿频、尿不尽感及紧张、焦虑等症状.平均病程10月(3月~2年).均有抗生素治疗史,疗效不佳.采用α-受体阻滞剂(多沙唑嗪控释片4mg/d口服)、COX-2抑制剂(塞来昔布200mg/d口服)、抗抑郁药(舍曲林50mg/d口服)联合疗法,3月为一疗程.在治疗前、治疗后4周、8周和12周对患者进行美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)评分并记录不良反应情况.疗效评定标准为:(1)显效:NIH-CPSI较治疗前下降>15分;(2)有效:NIH-CPSI较治疗前下降>5分;(3)无效:NIH-CPSI较治疗前下降<5分或上升.总有效率为显效率与有效率之和.结果 显效31例,有效18例,无效4例,总有效率92%(49/53).2例患者因药物不良反应退出治疗.结论 α-受体阻滞剂、COX-2抑制剂和抗抑郁药联合治疗方案安全有效,可以明显缓解CP/CPPS患者的临床症状.
作者:孔良;齐隽;黄轶晨 刊期: 2009年第09期
目的 研究成人包皮环切术对男女双方性功能的影响.方法 应用男性性功能评价表(BMSFI)及阴道内射精潜伏期时间(IELT),对40例因单纯包皮过长接受包皮环切术的男性进行问卷调查,同时用女性性功能评价表(FSFI)的部分问题,对该部分男性的女性性伴侣于术前及术后4月进行问卷调查.结果 男性BMSFI中的性冲动、阴茎勃起、射精、问题评价、总体性满意度5个部分评分在包皮环切术前及术后4个月没有显著性差异,而平均IELT术后较术前延长有统计学意义(P<0.05).女性性伴侣FSFI的润滑、疼痛两个部分评分在术前及术后4个月有显著性差异(P<0.05),而性唤起、性欲高潮两个部分的评分没有显著性差异.结论 成人包皮环切术对男性性功能没有明显的影响,但是能够延长IELT.对女性性伴侣来说,可导致术后性生活中阴道分泌物的减少,阴道润滑程度的降低,性交中的不适及疼痛感增加.包皮环切术可能对女性的性生活质量造成了不利的影响.因而,单纯包皮过长的成年男性应慎重考虑包皮环切术.
作者:于圣杰;张唯力 刊期: 2009年第09期
目的 克隆人类睾丸特异基因TDRG1在不同物种间的同源序列,为研究该基因功能寻找动物模型.方法 以人TDRGI基因全长序列作为查询序列,利用BLASTN 软件检索小鼠、大鼠、黑猩猩和猕猴基因组数据库,查询到的同源序列运用RT-PCR实验验证.免疫组化染色初探TDRG1同源蛋白在不同物种间的表达.结果 生物信息学分析表明小鼠和大鼠基因组中未检索到与TDRG1同源的序列,黑猩猩和猕猴基因组中分别有相似性为98%和90%的同源序列存在.RT-PCR验证了猕猴睾丸中的同源序列,免疫组化结果显示抗人TDRG1单克隆抗体能特异结合猕猴睾丸中的同源蛋白.RT-PCR和免疫组化染色也表明小鼠和大鼠睾丸中无同源序列和同源蛋白表达.结论 TDRG1基因在小鼠和大鼠睾丸中无同源基因表达,而在猕猴和黑猩猩睾丸中有同源基因表达,为今后建立动物模型提供了理论依据.
作者:蒋先镇;文甲明;汤育新;陈厚仰;阳建福;尹光明;汤进;刘志中 刊期: 2009年第09期
目的 观察VP3基因、多西紫杉醇各浓度及VP3基因联合多西紫杉醇各浓度对PC-3细胞株的凋亡作用.方法 构建重组真核表达载体PcDNA3-VP3,采用基因转染法转染人前列腺癌细胞株PC-3.利用RT-PCR技术检测VP3基因在PC-3细胞株中的表达状况.将多两紫杉醇浓度分为3组,分别为10-8 mol/L、10-7mol/L、 10-6mol/L.应用光镜、HE染色、透射电镜形态学、MTT法、流式细胞仪TUNEL法观察转染重组质粒PcDNA3-VP3单独或联合多西紫杉醇各浓度对前列腺癌细胞株PC-3的影响.结果 VP3基因转染PC-3细胞后在细胞中得到了表达.HE染色和透射电镜下观察到PC-3细胞的典型凋亡形态学特征.MTT法检测结果显示转染质粒PcDNA3-VP3,单独应用10-7mol/L以上浓度的多西紫杉醇及转染质粒PcDNA3-VP3联合应用10-8mol/L以上浓度的多西紫杉醇均可使PC-3细胞株的增殖活性明显下降(P<0.01).流式细胞仪TUNAL法检测单独转染质粒PcDNA3-VP3、质粒PcDNA3-VP3联合10-8mol/L浓度组及质粒PcDNA3-VP3联合10-77mol/L浓度组后24h、48h、72h各个时间点上的PC-3细胞株凋亡率分别为(20.31±1.96)%、(41.50±1.03)%、(50.03±3.00)%,(P<0.01):(31.10±0.59)%、(53.10±0.77)%、(68.90±2.66)%(P<0.01);(40.01±0.53)%、(62.23±0.74)%、(75.20±0.53)%(P<0.01).结论 联合10-8mol/L以上浓度的多西紫杉醇能明显增加VP3基因诱导人前列腺癌PC-3细胞株凋亡.
作者:李天庆;王剑松;詹辉;袁顺辉;王春晖;颜汝平;李解方 刊期: 2009年第09期
目的 筛选与精子发生相关的基因.方法 将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的基因.通过RT-PCR分析差异表达基因在小鼠睾丸不同发育阶段中的表达.结果 对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知,该差异表达基因是TNP2基因.小鼠TNP2基因全长724bp,其编码框大小为375bp.RT-PCR结果表明TNP2基因在小鼠21d龄及之前的睾丸中没有表达,在35d龄睾丸开始高表达.结论 TNP2基因为小鼠年龄依赖性表达基因,小鼠TNP2基因的表达与小鼠精子发生过程有很强的一致性,因此,可以推测该基因在精子发生中可能起重要作用.
作者:李贤新;来永庆;叶炯贤;唐爱发;余振东;桂耀庭;蔡志明 刊期: 2009年第09期
目的 研究SD大鼠阴茎平滑肌细胞体外培养方法和生物学特性.方法 采用贴壁组织块培养法和酶消化培养法,对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察.结果 (1)SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形,呈长轴平行排列,具有明显的方向性;体外贴壁快,生长迅速,体外培养的阴茎海绵体平滑肌细胞在合适的传代条件和比例下能够生存并保持其稳定的生物学特性.(2)酶消化培养法获得细胞的纯度高,接种后细胞生长快.贴壁组织块培养法操作简单易于掌握.结论 贴壁组织块培养法和酶消化培养法均可以获得平滑肌细胞,方法均方便可行.我们可根据实验的需要选择不同的方法.
作者:黄晓军;年建华;吕伯东 刊期: 2009年第09期
目的 探讨激素抵抗性前列腺癌细胞增殖、凋亡状态和Caspase-3活性及意义.方法 应用DNA电泳、流式细胞术 (FCM) 等技术检测了12例正常前列腺 (NP)、31例激素性前列腺癌(HRPC)和31例激素依赖性前列腺痛(HDPC) 组织DNA条带、DNA指数(DI)、增殖指数(PI)、细胞周期和Caspase-3活性,评价激素抵抗性前列腺癌组织增殖凋亡状况和Caspase-3活性.结果 HRPC DI、细胞异倍体率明显高于HDPC和NP组织,且G1/Go期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多(P<0.05),其中SPF明显升高(P<0.01).NP、HRPC及HDPC组织前列腺癌组织G1期前端均出现了一个称之为凋亡峰的亚倍体峰(亚G1期),但HRPC细胞的凋亡峰明显低于HDPC和NP组织.HRPC组织细胞增殖指数(PI)明显高于HDPC和NP组织,HRPC凋亡峰值(AI)明显降低,PCa组织PI/AI明显增高,差异均有统计学意义(P<0.01).NP、HRPC和HDPC组织Caspase-3均处于活性状态,但HRPC组织细胞内caspase-3活性明显低于HDPC和NP组织(P<0.01).结论 与HDPC相比,HRPC细胞表现为异倍体率增高、增殖过度和细胞凋亡减少,且呈现明显的增殖凋亡失衡状态.细胞凋亡Caspase家族的Caspase-3活性下降可能与HRPC发生和进展过程相关.
作者:杨国胜;陈昭典 刊期: 2009年第09期
目的 探讨前列腺微循环在前列腺病理变化中的作用.方法 取前列腺增生症 (BPH) 未服非那雄胺者标本 (简称BPH组) 30例和服用非那雄胺标本 (简称BPHF)10例,正常前列腺标本 (简称NP组)5例,前列腺癌标本(简称PCa组)标本10例,H.E.切片,采用WX-6B型BIU-2000微循环图像处理系统分析间质面积与腺体面积的比值(S/G),正常腺体与萎缩腺体面积的比值 (N/A);CD34免疫组化显示微血管,检测平均微血管密度 (MVD)、间质内平均微血管密度 (SMVD)、正常腺体微血管密度 (NMVD)和萎缩腺体微血管密度 (AMVD).PSA免疫组化测灰度值.分别比较上述各组各指标的差异.结果 BPH组、BPHF及PCa组S/G、MVD高于NP组,BPH、BPHF组N/A和PSA灰度值低于NP组(P<0.01),BPHF与BPH组比较,S/G、N/A及SMVD降低,PSA灰度值升高 (PSA表达降低) (P<0.01).相关分析提示,PSA与S/G和SMVD都呈正相关性.结论 前列腺组织内局部微循环与前列腺病理改变密切相关.间质微血管增多可能是前列腺问质增生的原冈之一,PSA可通过影响腺体和间质内微循环而发挥刺激增生作用.非那雄胺可通过降低PSA及组织内微循环而发挥抑制前列腺增生的作用.
作者:蓝儒竹;庄乾元;杨为民;陈春莲;周晟;叶章群 刊期: 2009年第09期
目的 研究Y染色体AZFc部分缺失(gr/gr缺失、b2/b3缺失)和AZFc全缺失(b2/b4缺失)对精子发生的影响.方法 实验组选择非梗阻性无精子症者458例,对照组选择符合卫生部标准的汉族合格捐精者301例.所有受试者均抽取外周血,抽提DNA,选择Y染色体序列标签位点(STS),经多重PCR技术检测Y染色体AZFc部分缺失与全缺失,对结果进行统计学分析.结果 实验组AZFc部分缺失为:gr/gr缺失41例(8.9%),b2/b3缺失11例(2.4%):AZFc全缺失5例(1.1%).对照组AZFc部分缺失:gr/gr缺失23(8.6%)例, b2/b3缺失7例(2.3%):未发现AZFc全缺失.两组比较,AZFc全缺失差异显著(P<0.05);AZFc部分缺失(gr/gr缺失、b2/b3缺失)发生率无显著性差异(P>0.05).结论 汉族男性Y染色体AZFc部分缺失(gr/gr、b2/b3缺失)在非梗阻性无精子症患者和IE常捐精者中都存在,但无统计学意义,不能作为精子发生障碍的危险因子.AZFc全缺失(b2/b4缺失)则引起严重的生精功能障碍,可作为精子发生障碍的危险因子之一.
作者:刘玉林;张伟;李朋;龚东明;黄学锋;平萍;李铮 刊期: 2009年第09期
目的 研究Rho激酶抑制剂法舒地尔改善高脂血症新两兰白兔阴茎勃起功能的效应.方法 20只新西兰大白兔给予1%胆崮醇的高脂饲料连续喂养8周.喂养前检测血胆固醇浓度、体重、动脉血压和罂粟碱海绵体注射前后海绵体压力变化.喂养8周后再次检测上述指标.并应用0.75mg、1.5mg、3mg法舒地尔分别直接海绵体注射,检测动脉血压和海绵体压力变化情况.后应用法舒地尔诱导离体高脂血症白兔阴茎海绵体平滑肌肌条舒张,并记录平滑肌肌张力的变化.结果 (1)高脂喂养后新西兰白兔的体重(2.42±0.24)kg及血总胆固醇水平(24.21±0.84)mmol/L均明显高于喂养前的体重(1.95±0.14)kg和血总胆固醇水平(3.22±0.15)mmol/L.(2)新西兰白兔经高脂饲料喂养后,罂粟碱导致阴茎海绵体内压较喂养前明显下降(7.83±2.51)mmHg Vs(19.81±3.69)mmHg.0.75mg、1.5mg、3mg法舒地尔海绵体内注射后,高脂血症白兔阴茎海绵体内压增高分别为(4.74±0.77)mmHg、(8.73±1.59)mmHg、(18.15±1.60)mmHg.(3)新西兰白兔经高脂饲料喂养后,离体阴茎平滑肌肌条在0.5 μmol、1.25 μmol、5 μmol、12.5 μmol、50 μmol和100 μmol剂量法舒地尔诱导下产生的舒张效应分别为(1.56±0.43) %、(5.03±1.02)%、(8.28±1.35)%、(16.77±3.57)%、(39.44±5.08)%和(61.87±4.85)%.结论 Rho激酶抑制剂法舒地尔能够有效改善高脂血症白兔的阴茎勃起功能.
作者:饶可;刘继红;雷红伟;杨向利;王涛;王少刚;杨为民;叶章群 刊期: 2009年第09期
目的 探讨精浆弹性硬蛋白酶与精液主要参数及精子功能指标的关系.方法 按照WHO<人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册>要求,对170例不孕夫妇中的男性患者进行精液常规检测及精子功能分析,根据精浆弹性硬蛋白酶的检测结果将所有患者分为A、B、C3组.A组为精浆弹性硬蛋白酶含量>1 000ng/ml;B组为精浆弹性硬蛋白酶含量290~1 000 ng/ml;C组为精浆弹性硬蛋白酶含量<290ng/ml.通过比较三组的精液主要参数及精子功能指标来分析精浆弹性硬蛋白酶与男性不育各因素的相关性.结果 170例患者中A组56例(32.9%)、B组38例(22.4%)、C组76例(44.7%).与C组相比A组在精子活率、活力、头部畸形、顶体酶活性指标方面均显著低下(P<0.01),而B组与C组相比上述指标差异无统计学意义(P>0.05),各组间精子密度及DNA完整性的差异无统计学意义(P>0.05).结论 精浆弹性硬蛋白酶与精液质量密切相关,精浆弹性硬蛋白酶作为男性生殖道感染的指标,在评估男性生育力、男性不育症的诊断和治疗,以及精子功能等方面有着重要的临床意义.
作者:王贺;邹德学;李世勤 刊期: 2009年第09期
目的 探讨增瀑颗粒治疗气滞血瘀犁慢性前列腺炎的临床疗效及安全性.方法 采用随机、对照的方法,选取气滞血瘀型慢性前列腺炎患者72例,分为治疗组(增瀑颗粒)和对照组(前列通瘀胶囊),各36例,因其中有8例未能按时复诊,故治疗结束后治疗组为31例,对照组为33例.治疗4周(1个疗程)后,观察治疗前后患者美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状评分(NIH-CPSI)、中医症状评分、前列腺液常规检查(卵磷脂小体、自细胞水平)的变化.结果 治疗组临床痊愈6例,显效11例,有效9例,无效5例,脱落5例,(治愈率19.4%,显效35.5%,有效29.0%,无效16.1%,总有效率83.9%)相对于对照组临床痊愈4例,显效12例,有效11例,无效6例,脱落3例,(治愈率12.1%,显效36.4%,有效为33.3%,无效18.2%,总有效率81.8%),疗效差异无统计学意义(P>0.05).治疗组和对照组在NIH-CPSI、中医症状评分、前列腺液中卵磷脂小体等方面均较治疗前有明显改善(P<0.05),且在改善疼痛症状方面二组间比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗期间未出现不良反应.结论 增瀑颗粒治疗气滞血瘀型慢性前列腺炎临床有效且安全,能改善患者的临床症状,对疼痛的改善尤为明显,并能提高卵磷脂小体水平,提高患者生活质量.
作者:常德贵;陈海;张培海;江立行;吴天浪;蔡剑 刊期: 2009年第09期
目的 探讨爱活尿通对人类精液液化时间延长者的治疗效果,同步检测治疗前后精液中凝血因子的变化.方法 46例精液液化时间延长者口服爱活尿通为治疗组,2周后复查精液液化时间,同时检测治疗前后精液中组织因子(TF)、凝血因子Ⅶ a(F Ⅶ a)及凝血因子ⅧAg(FⅧAg)含量.45例精液常规正常者作为对照组.结果 经治疗,32例液化时间<30 min,占70%,12例液化时间在30至60 min之间,占26%,2例液化时问仍大于60 min,占4%,较治疗前液化时间缩短,且精子活力提高,差异有显著性(P<0.05);治疗后精液中TF、FⅦa及FWAg含量降低(P<0.05),与对照组相比无统计学意义(P>0.05).结论 爱活尿通对精液液化时间延长者有一定疗效;对影响精液液化的凝血因子水平可能具有改善作用.
作者:陈琳慧;刘雨生;郭通航;童先宏 刊期: 2009年第09期
习惯性流产(habitual abortion,HA),亦称复发性流产(recurrent pregnancy loss,RPL)或复发性自然流产(repeated spontaneous abortion,RSA),是指连续发生3次或3次以上的自然流产.近来国内外不少学者将复发性流产与习惯性流产等同,即凡自然流产连续3次或以上者均可称习惯性流产或复发性流产,其发生率大约为0.5%~1.0%[1].
作者:黄燕平;邓春华 刊期: 2009年第09期
慢性附睾炎多见于处在性活跃期的中青年男性,除了疼痛外,也给患者带来较大的心理负担[1].尽管该病是临床常见病,但相关文献报道却很少.目前尚无针对其发病率进行的大规模流行病学调查,对该病的定义、病因、分类、诊断、临床评价和治疗等也尚未形成统一的认识.本文通过回顾有关上述问题的文献,对慢性附睾炎的研究现状作一综述.
作者:高龙;陈斌 刊期: 2009年第09期
患者男,8个月.发现左侧阴囊肿大半年,近1月明显增大入院治疗.查体:外生殖器发育一般,尿道外口无红肿积脓,无分泌物.左侧阴囊较右侧明显增大,内触及大小约40mm×30mm肿块,质地柔软,外形欠规则,与左侧睾丸分界不清.辅检示:血AFP>1000ng/ml.二维超声检查:左侧睾丸弥漫性增大,大小约35 mm×26mm×26mm,外形欠规则,内部回声减低,分布不均匀,周边未见正常睾丸实质回声.
作者:刘东;李凤华;黄伟伟 刊期: 2009年第09期
患者男性,17岁,外伤后右侧睾丸回缩移位一月余入院.患者外伤前双侧睾丸一直位于阴囊内.一月前骑摩托车发生车祸,造成全身多处挫伤,经治疗后出院.出院后始注意到右侧阴囊空虚,同时发现右下腹一凸起肿块,触之疼痛,有时有隐胀不适感.
作者:张克;卢慕峻;董国勤;徐明曦;王忠 刊期: 2009年第09期
睾丸肿瘤是15~35岁青年男性常见的实体肿瘤,近几十年来,其全球发病率有逐渐增加的趋势,尤其在一些西方国家,发病率以每年1%~2%的速度增长[1-4].在我国发病率及死亡率均在1/10万左右,占男性全部恶性肿瘤的1%~2%,占泌尿生殖系统恶性肿瘤的3%~9%.
作者:赵晖;董强 刊期: 2009年第09期
作者: 刊期: 2009年第09期