背景与目的：癌高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1，HIC1)因表观遗传甲基化修饰导致其在多种癌细胞和组织中表达沉默，可能与肿瘤的发生、发展有关。而这一现象在前列腺癌研究中的报道甚少。该研究采用甲基化基因检测技术对前列腺癌中HIC1启动子进行甲基化状态分析。方法：采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation-specific polymerase chain reaction，MSP)和亚硫酸盐测序PCR(bisulfate sequencing PCR，BSP)技术，对前列腺癌细胞PC3、C4-2B和正常前列腺上皮细胞PrEC，以及前列腺癌组织标本和正常前列腺穿刺标本，进行HIC1启动子甲基化分析；并使用去DNA甲基化酶5-Aza-CdR处理PC3、C4-2B和PrEC，经反转录PCR(reverse transcription-PCR，RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分析HIC1在基因水平和蛋白质水平上的变化。结果：MSP分析结果发现，在PC3、C4-2B和PrEC中HIC1甲基化率分别为78.23%、72.15%和10.63%，差异有统计学意义(P<0.05)。对36例人前列腺癌实体瘤和36例人前列腺正常穿刺组织进行BSP测序，统计显示，甲基化率分别是80.30%和31.56%。5-Aza-CdR处理后的PC3、C4-2B和PrEC经RT-PCR和Western blot分析发现，与未处理对照相比，HIC1转录水平和蛋白水平表达均显著上调。结论：在前列腺癌中，抑癌基因HIC1启动子呈高度甲基化状态并出现表达沉默或下调，可作为前列腺癌的早期预测指标和潜在的治疗靶点。
作者：单孟林；丁滔；郑江花；程增辉；郭颖；夏前林 刊期： 2016年第04期
背景与目的：胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)是一种重要的肽类激素，通过与其受体(IGF-1 receptor，IGF-1R)和胰岛素受体(insulin receptor，IR)结合并激活下游信号通路发挥生物学作用，骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)因可促进多种肿瘤细胞的增殖和侵袭而日益成为肿瘤分子研究领域的热点。该研究通过RNA干扰(RNAi)技术沉默IGF-1R基因，探讨其对肝癌SMMC7721细胞中BMP2表达的影响以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法：构建靶向IGF-1R基因的RNAi真核表达质粒，转染至肝癌SMMC7721细胞，用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测IGF-1R和BMP2基因表达抑制效应，MTT实验检测IGF-1R基因沉默后细胞生长曲线，流式细胞术检测IGF-1R基因沉默后细胞凋亡情况。结果：成功构建靶向IGF-1R基因的真核表达质粒， IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2转染至肝癌SMMC7721细胞后，对IGF-1R基因的mRNA抑制效率分别达到68.9%和80.7%(P<0.05)，对BMP2基因的mRNA抑制效率分别达到79.5%和83.3%(P<0.05)，对IGF-1R蛋白表达抑制率分别为46.1%和62.1%，对BMP2蛋白表达抑制率分别为42.5%和60.9%(P<0.05)。根据MTT实验结果，绘制的生长曲线显示，IGF-1R基因沉默后SMMC7721细胞增殖速率明显低于对照组(P<0.05)，细胞凋亡比例高于对照组(P<0.05)。结论：IGF-1R基因沉默表达能介导BMP2基因不同水平下调表达，抑制SMMC7721细胞增殖，并促进细胞发生凋亡。
作者：傅敬忠；黄龙璋；于强；储节胜；匡美波；徐冠军 刊期： 2016年第04期
背景与目的：Ca2+在维持细胞生物活性方面扮演着很重要的角色，其在细胞内的储存、释放和摄取主要受内质网调节，细胞内Ca2+浓度的稳态是维持细胞生物能量代谢、蛋白质折叠和分泌的基础条件。本研究探讨Ca2+在顺铂诱导SKOV3细胞内质网应激-自噬反应中的作用机制。方法：取人卵巢癌SKOV3细胞系为研究对象，按以下步骤分组：①探讨顺铂诱导内质网应激与自噬反应，用6μg/mL的顺铂处理SKOV3细胞0、6、12和24 h；②了解顺铂和毒胡萝卜内酯(thapsigargin, TG)诱导内质网应激释放的Ca2+与自噬的关系，分别用TG和顺铂处理SKOV3细胞0、9和12 h；③探究Ca2+对自噬的作用机制，分成对照组、顺铂组、TG组、BAPTA-AM组、顺铂联合BAPTA-AM组和TG联合BAPTA-AM组。用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测内质网应激相关蛋白GRP78和自噬标志性蛋白LC3蛋白的表达水平；用Fluo-4钙离子荧光探针检测细胞质中的Ca2+浓度变化；间接免疫荧光染色后，用共聚焦显微镜检测LC3蛋白的表达情况。结果：SKOV3细胞经6μg/mL顺铂作用6 h时GRP78灰度值(1.393±0.004)与其对照组(0.679±0.011)相比显著提高(t=113.2，P=0.000)，在12 h时LC3灰度值(0.072±0.002)与其对照组(0.038±0.000)相比显著提高(t=25.5，P=0.000)。间接免疫荧光结果显示，顺铂(6μg/mL)组和TG(3μmol/L)组随作用时间的延长，细胞内LC3荧光斑点会逐渐增多，并伴随着细胞质Ca2+浓度上升。后经钙离子络合剂BAPTA-AM干预后，细胞内LC3荧光强度进一步增强。Westren blot结果显示，顺铂组LC3灰度值(0.039±0.000)小于顺铂联合BAPTA-AM组(0.071±0.001)，TG组(0.035±0.001)小于TG联合BAPTA-AM组(0.065±0.001)，差异有统计学意义(P=0.000)。结论：顺铂诱导SKOV3细胞内质网应激和自噬的发生，并伴随着细胞质内Ca2+浓度的上升。络合细胞质内Ca2+能增强顺铂诱导的自噬反应。
作者：曾林川；邓慧敏；陈君；窦茗瀚；徐冶 刊期： 2016年第04期
背景与目的：表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因的突变状态是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者使用EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors， TKIs)的重要疗效预测指标。该研究旨在探讨突变特异性免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)法检测NSCLC标本EGFR基因突变的临床实用价值。方法：同时采用突变特异性IHC法和扩增阻滞突变系统(amplifi-cation refractory mutation system，ARMS)法检测290例NSCLC患者的EGFR基因突变状态，计算突变特异性IHC法检测EGFR基因突变的灵敏度、特异度、阳性预测值(positive predictive value，PPV)和阴性预测值(negative predictive value，NPV)；比较ARMS法和突变特异性IHC法检测EGFR突变的一致性。结果：以ARMS法检测结果为金标准，当染色评分≥1+为阳性时，突变特异性IHC法诊断EGFR基因突变的灵敏度为72.92%，特异度为95.20%，PPV为93.75%，NPV为78.08%。突变特异性IHC法诊断不同类型EGFR基因突变的准确性相差明显：诊断19外显子缺失突变的灵敏度只有55.55%，但其特异度在99%以上；当染色评分为1+时，诊断L858R突变的灵敏度为90.27%，特异度为95.86%，当染色评分为2+或3+时，其特异度则为98.63%~100%。突变特异性IHC法与ARMS法检测结果有较好的一致性(P<0.001，Kappa值：0.612~0.864)。突变特异性IHC法能直观判断EGFR基因突变细胞丰度。结论：突变特异性IHC法是EGFR突变分子检测的有效补充。
作者：张龙富；姚家美；蒋冬先；洪群英；李春；赵婧雅；曾海英；侯英勇；张新 刊期： 2016年第04期
背景与目的：静脉血栓形成(venous thromboembolism，VTE)是恶性肿瘤患者的第二常见死亡原因。通过了解复旦大学附属肿瘤医院5年间收治的患者VTE的发病情况，分析VTE的相关特点，以提高肿瘤合并VTE的诊断和防治意识，改善患者预后。方法：对复旦大学附属肿瘤医院2009年7月—2014年6月收治的196例肿瘤并发VTE的患者的临床资料进行回顾性分析。分析肿瘤并发VTE的临床特点及发病情况，了解相关因素对VTE发病的影响，了解VTE首发情况。结果：复旦大学附属肿瘤医院5年间共收治肿瘤患者207514例，其中VTE患者196例，肿瘤并发VTE发生率为0.94‰。腺癌在妇科肿瘤(56.5%)、胃肠道肿瘤(91.7%)、肺癌(71.4%)和胰腺癌(80%)中所占比例较高。单变量Logistic回归分析显示，腺癌为肿瘤患者并发肺栓塞(pulmonary embolism，PE)的高危险因素(OR=0.36，95%CI：0.146~0.885，P=0.026)。化疗大于2次者明显比化疗小于等于2次者VTE的发生率更高(χ2=10.976，P=0.001)。手术组VTE发生率高于非手术组。妇科肿瘤中有大量腹水者的非手术患者并发VTE者(>2000 mL)更多(34.1%vs 10.7%，P=0.015)。术后和放化疗期间78%~88%的患者因出现深静脉血栓(deep vein thrombosis，DVT)症状发现VTE，而术前检查期间主要是在下肢静脉加压超声(compression venous ultrasonography，CUS)检查发现(59.1%)。复旦大学附属肿瘤医院术后进行物理性预防血栓措施者为15例(13.9%)。结论：复旦大学附属肿瘤医院的肿瘤相关性VTE发生率较其他流行病学调查发生率低。肿瘤患者术后并发VTE的风险明显高于非手术者。腺癌更易并发PE。对于临床无VTE症状的肿瘤患者和大量腹水的妇科肿瘤患者应积极进行VTE的相关检查，术后应更积极采取物理抗栓措施。
作者：申丽华；张忠伟；朱彪 刊期： 2016年第04期
背景与目的：近年来，随着技术发展，越来越多的基于能量传递的止血工具广泛问世并应用于开放性外科手术中。超声刀Focus刀头(Harmonic Focus?，HF)及Ligasure Small Jaw?刀头(LSJ)都是专为开放性甲状腺手术量身定做的。本文拟对北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院HF及LSJ完成的开放性甲状腺手术患者的临床资料进行病例对照分析，以期比较HF及LSJ在开放性甲状腺手术中的应用效果。探讨HF及LSJ用于开放性甲状腺手术的有效性及安全性。方法：选取本院过去1年内甲状腺癌初治患者，由同一外科医师主刀使用HF或LSJ完成甲状腺全切除＋中央区清扫术，纳入HF组100例，LSJ组104例。通过比较两组手术时间及术后第1天引流量，比较两者在甲状腺手术中应用的有效性。通过比较两组术后并发症来评估安全性。结果：有效性：HF组平均手术时间为(95.8±18.0) min，LSJ组平均手术时间为(97.8±19.1) min，差异无统计学意义(P=0.363)；术后首日引流量HF组为(35.2±20.3) mL，LSJ组为(36.3±23.8) mL，差异无统计学意义(P=0.977)。安全性：HF组出现暂时性声带麻痹者1例(1.0%)，LSJ组术后伤口出现术区血肿者1例(1.0%)；暂时性甲状旁腺功能低下者HF组18例(18.0%)，LSJ组16例(15.4%)；HF组术后首日甲状旁腺素平均下降(12.3±12.8) pg/mL，LSJ组平均下降(13.9±13.4) pg/mL；血清离子钙HF组平均下降(0.20±0.13) mg/dL，LSJ组平均下降(0.20±0.16) mg/dL，差异均无统计学意义(P均＞0.05)。结论：HF及LSJ在开放性甲状腺手术中均安全、有效，手术并发症相当。
作者：张溪微；张彬；鄢丹桂；刘杰；张亚冰；刘文胜；徐震纲；唐平章 刊期： 2016年第04期
背景与目的：二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase，DHFR)在卵巢上皮癌铂类耐药细胞中高表达。该研究旨在探讨DHFR基因沉默对卵巢癌细胞体外生物学行为的影响，为卵巢癌铂类耐药的治疗奠定基础。方法：设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA，筛选出佳siRNA沉默片段，构建携带有目的基因的慢病毒载体细胞即转染组(DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞)及阴性对照组细胞(pGCSIL-SKOV3细胞)。采用流式细胞仪检测3组细胞在不同的顺铂质量浓度(2.5、5.0、10.0和20.0μg/mL)下不同时间段(24、48及72 h)的凋亡情况以及IC50顺铂质量浓度(4.4μg/mL)的周期变化；采用高效液相色谱法检测不同顺铂质量浓度(2.5、5.0和7.5μg/mL)不同时间段(24和48 h)药物作用后3组细胞内的顺铂浓度。采用透射电镜观察IC50顺铂质量浓度(4.4μg/mL)3种细胞的超微结构变化。结果：将退火后的双链寡核苷酸片段连接到pGCSIL/GFP载体，测序结果正确。转染SKOV3细胞后，蛋白[质]印迹法(Western blot)鉴定干扰效果。在给药24、48和72 h后，DHFR-pGCSIL-SKOV3、pGCSIL-SKOV3及SKOV3三组细胞的凋亡率随着顺铂质量浓度(2.5、5.0、10.0和20.0μg/mL)的上升而升高， DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞给药48和72 h后的凋亡率明显高于pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞，差异有统计学意义(P<0.05)。3组细胞在IC50顺铂质量浓度(4.4μg/mL)给药24和48 h后，转染组G0/G1期细胞比例较阴性及空白对照组明显增多，G2/M、S期则反之；而给药72 h后，3组细胞以G2/M及S期为主，转染组低于阴性及空白对照组。采用高效液相法检测细胞内顺铂质量浓度时，转染组在2.5和5.0μg/mL顺铂质量浓度给药24和48 h后，其细胞内顺铂浓度均明显高于对照组。转染组在7.5μg/mL顺铂质量浓度给药24 h后，其细胞内顺铂浓度均明显低于对照组细胞，在48 h后却又高于对照组，差异有统计学意义(P=0.034，P=0.014)。未给药时，转染组细胞的微丝明显多于对照组，线粒体亦改变明显。IC50(4.4μg/mL)给药24和48 h后3组细胞均未见微丝；而给药72 h后微丝明显增多，且排列紊乱。结论：成功构建携带DHFR基因的pGCSIL干扰慢病毒载体的卵巢癌细胞。通过对DHFR下调后耐药性能研究得知，DHFR的下调与经过铂类药物作用的体外卵巢癌细胞的药物耐药性有一定的联系，卵巢癌细胞中下调DHFR基因可以考虑作为多药耐药的逆转机制。
作者：李状；张玮；王琪；阳志军；李力 刊期： 2016年第04期
背景与目的：长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)可参与肿瘤调控，有研究提示lncRNA PCGEM1可能影响雄激素受体(androgen receptor，AR)通路。本研究拟检测前列腺癌lncRNA PCGEM1和AR的表达情况，探讨其在前列腺癌中的表达及意义。方法：构建RNA核酸探针，应用荧光原位杂交(lfuores-cencein situ hybridization，FISH)技术检测前列腺癌lncRNA PCGEM1的表达情况，并使用荧光免疫组织化学技术检测前列腺癌AR的表达；采用RNA-pull down技术检测PCGEM1和AR的共同作用。结果：依赖AR的LNCaP细胞的PCGEM1表达水平显著高于非AR依赖性的PC3和DU145细胞，差异有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌组织中PCGEM1的表达与AR表达程度显著相关。与良性前列腺肿瘤相比，转移性肿瘤中的PCGEM1细胞核内定位显著不同，雄激素去势显著影响PCGEM1的表达及细胞内定位。而共定位检测发现，PCGEM1与AR之间存在一定程度的共定位现象。结论：本研究通过FISH研究发现，PCGEM1表达在雄激素去势条件下显著上调，而在转移性前列腺癌中，PCGEM1和AR的共定位表达表明，lncRNA PCGEM1和AR相互作用可能共同参与调控前列腺癌的恶性进展及转移。
作者：朱竹先；余晨；邱忠民；吕寒静；关广聚；张子强 刊期： 2016年第04期
1临床资料患者男性，34岁，因排尿困难伴尿频、尿痛、腰痛4个月，在外院于2013年10月行B超提示前列腺增大伴钙化，前列腺左侧周缘区结节。查前列腺特异性抗原为0.87 U/mL，游离前列腺特异性抗原为0.07 U/mL。2013年11月5日于本院行盆腔MRI检查提示前列腺癌(病灶大小6.8 cm×5.5 cm×6.7 cm)累及膀胱、精囊腺，盆腔淋巴结增大(图1)。于2013年11月18日行前列腺穿刺术，术后病理显示为(前列腺)梭形细胞恶性肿瘤，结合免疫组织化学考虑为横纹肌肉瘤。免疫组织化学结果显示，瘤细胞Des(部分)阳性，MyoD1(少数)阳性，Myogenin(少数)阳性，雌激素受体阴性，孕激素受体阳性，抗平滑肌抗体阴性，CD34阴性，CD117阴性，Dog-1阴性，雄激素受体阴性，肌酸激酶阴性，钙调蛋白阴性，Ki-67阳性表达约40%。
作者：罗伟明；李纲；杨梅；李云海 刊期： 2016年第04期
作者： 刊期： 2016年第04期
作者：上海市医学会肿瘤放疗专科分会 刊期： 2016年第04期
骨转移是晚期乳腺癌常见的远处转移，多伴有局部疼痛、肢体功能障碍等症状，常导致患者的生存质量下降。由骨转移引起的病理性骨折等骨相关事件(skeletal-related events，SREs)会显著增加乳腺癌患者的死亡风险。积极有效的骨转移治疗有重要的临床意义，放疗是重要的局部治疗手段。本文就放疗在乳腺癌骨转移中的临床应用进展进行综述，着重阐述放疗实施手段及综合治疗模式的循证医学证据。
作者：胡群超(综述)；俞晓立；郭小毛(审校) 刊期： 2016年第04期
卵巢癌是死亡率高的妇科恶性肿瘤，其5年生存率仅为30%。尽管70%~80%的卵巢癌为上皮性癌，但越来越多的证据表明，癌间质细胞如内皮细胞、成纤维细胞和巨噬细胞等对卵巢癌的恶性进展具有重要的调控作用，因此研究这些间质细胞的相关功能可能会找到有效治疗卵巢癌的新靶点。该文就目前已发表的关于卵巢癌间质细胞功能及其相关作用蛋白为主要线索，对其与卵巢癌治疗的相关性研究进行综述分析，旨在总结和寻找卵巢癌治疗的新途径和新方法。
作者：梁凡；陈亚萍；杨恭 刊期： 2016年第04期
随着发病率和死亡率的增加，癌症不仅成为中国疾病致死的重要原因，也同样是困扰世界的一个重大公共卫生问题。尤其令人担忧的是，全世界每年新发胰腺癌病例数呈现逐年上升的趋势。胰腺癌患者的预后较差，其5年生存率仅约6%，其主要原因包括：①在疾病的早期缺乏典型的临床症状，早期诊断困难；②高侵袭转移特性导致难以控制的复发和转移；③缺乏有效的化疗及靶向治疗药物；④容易对现有化疗药物产生耐药。手术根治性切除仍是目前有效的治疗方式，但是根治术后早期转移复发仍是造成手术预后不良的主要问题。本文将就2015年全球范围内针对胰腺癌发病因素、流行病学调查、基础研究热点、外科手术相关进展、内科治疗和精准医学等方面的研究及诊疗前沿进展进行回顾性分析。
作者：项金峰；施思；梁丁孔；虞先濬 刊期： 2016年第04期
