目的 研究骨调素(OPN)反义寡核苷酸 (AS-ODN)对高糖环境下人肾小管上皮细胞(HK-2) OPN mRNA和蛋白表达及Ⅲ型胶原分泌的影响.方法 将HK-2细胞分为正常糖对照组、高糖组、渗透浓度对照组进行体外培养.用脂质体介导的方法将OPN反义、正义、错义寡核苷酸转染细胞,并进行高糖培养.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测OPN mRNA表达;流式细胞仪检测细胞内OPN蛋白合成;ELISA方法检测上清中Ⅲ型胶原分泌情况.结果 高糖环境下,HK-2细胞OPN mRNA及蛋白表达明显升高(P< 0.01),OPN反义寡核苷酸转染后,其OPN mRNA、蛋白表达及Ⅲ型胶原分泌均明显低于高糖组(P< 0.01),而正义和错义的OPN寡核苷酸转染后与高糖组之间的差异无统计学意义(P> 0.05).结论 体外培养的HK-2细胞经高糖诱导表达OPN,OPN反义寡核苷酸能够抑制OPN表达及Ⅲ型胶原分泌,表明阻断OPN可能是延缓高糖环境下肾小管上皮细胞细胞外基质积聚的有效手段之一.
作者:张红梅;李英;张靖;戴芳;李晓东;丁新国 刊期: 2007年第04期
目的 提高阿昔洛韦抗乙肝能力,合成其前体药物阿昔洛韦棕榈酰酯并制成脂质体.方法 利用阿昔洛韦和棕榈酰氯在60℃吡啶中合成阿昔洛韦的前体药物阿昔洛韦棕榈酰酯,然后应用脱氧胆酸钠法将其制备成脂质体,并通过HepG2 2.2.15细胞进行体外抗乙肝病毒作用研究.结果 合成反应的收率为68%,合成化合物通过紫外光谱、质谱、红外光谱、 1H NMR谱、13C NMR谱、重水交换NMR谱、1H-1H COSY 谱、 1H-1H TOCSY 谱、BB-DEPT谱、HSQC谱及HMBC谱进行了结构验证,证明为阿昔洛韦棕榈酰酯.脱氧胆酸钠法制备的阿昔洛韦棕榈酰酯脂质体平均粒径为61 nm,粒径分布在20~100 nm之间.脂质体中的阿昔洛韦棕榈酰酯在浓度为0.044 μmol/mL、0.088 μmol/mL、0.222 μmol/mL时,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别达到20.3%、52.6%、68.4%和29.3%、42.4%、53.5%.结论 阿昔洛韦和棕榈酰氯在无水吡啶中经60℃ 24 h高效合成了阿昔洛韦棕榈酰酯;脱氧胆酸钠法可将其制备成平均粒径为61 nm脂质体;脂质体中阿昔洛韦棕榈酰酯的体外抗乙肝病毒作用明显优于其母药阿昔洛韦.
作者:蔡钦生;冯美卿;黄海;周珮 刊期: 2007年第04期
目的 探讨镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)增殖、凋亡、分化及矿化的影响.方法 用混合酶消化法分离大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养;成骨细胞与不同浓度的Cd2+作用后,MTT法测定细胞增殖;AO/EB双染法进行凋亡形态学观察;PNPP法检测碱性磷酸酶活性;矿化结节计数和面积测量分析镉对成骨细胞矿化能力的影响.结果 各剂量组氯化镉均可抑制成骨细胞增殖,其中2.0 μmol/L以上剂量组与对照组相比差异有统计学显著意义(P<0.01);16.0 μmol/L、32.0 μmol/L剂量组OB可见较多凋亡细胞;各时点、各剂量组氯化镉均能抑制ALP活性,尤其是48h以上影响作用更明显(P<0.01);0.5 μmol/L、1.0 μmol/L浓度的氯化镉可明显抑制成骨细胞矿化能力.结论 镉离子可以抑制成骨细胞增殖、分化及矿化能力,促进成骨细胞凋亡,对成骨细胞的骨形成能力有明显抑制作用.
作者:陈晓;朱国英;王莉华;金泰廙 刊期: 2007年第04期
目的 初步研究Wnt通路及蛋白激酶B(PKB)在非甾体类抗炎药sulindac诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡过程的作用.方法 利用流式细胞仪检测肝癌细胞7721的凋亡,利用Western blot检测caspase-9、PARP(poly ADP-ribose polymerase)等凋亡相关分子的剪切,β连环蛋白(β-catenin)及糖原合酶激酶3β(GSK3β)与蛋白激酶B(PKB)磷酸化水平的变化,利用RT-PCR检测β-catenin 及c-myc 的mRNA水平.结果 sulindac能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,显著降低β-catenin的蛋白水平,抑制GSK3β 9位丝氨酸的磷酸化,同时促使caspase-9、PARP等凋亡相关分子发生剪切;β-catenin的mRNA 水平未见变化;PKB的磷酸化水平未见降低,反而略有增高.结论 sulindac能够通过抑制Wnt通路,促进β-catenin的蛋白降解,降低其蛋白水平,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且该作用不依赖PKB活性的抑制.
作者:冯晓铖;王晓明;张毅;李姣;申宗侯 刊期: 2007年第04期
目的 探讨载阿霉素的纳米活性碳在治疗恶性肿瘤淋巴道转移中的应用效果.方法 雌性Wistar大鼠,右后肢脚掌皮下接种Walker256瘤细胞悬液后形成淋巴结转移模型,分别在肿瘤部位注射载有阿霉素的活性碳混悬液、阿霉素水溶液和生理盐水.注射后21 d处死大鼠取腘窝淋巴结,测量各组淋巴结重量、淋巴结中肿瘤细胞坏死率和凋亡率.结果 载阿霉素活性碳组大鼠的淋巴结重量较其他两组为轻,淋巴结中肿瘤细胞坏死率、凋亡率较其他两组明显增高.注射载阿霉素活性碳组大鼠皮肤无溃烂,而单纯注射阿霉素水溶液组大鼠皮肤均有溃烂.结论 活性碳作为化疗药物的载体,在不影响化疗药物抗肿瘤活性的同时,可将药物导入淋巴系统内并有助于在淋巴结中停留,能较好地发挥药物杀灭淋巴系统中的肿瘤细胞的作用,并且减轻了药物的毒性.
作者:陈浩;黄广建;倪泉兴;张延龄 刊期: 2007年第04期
目的 观察瘦素(leptin)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中的升高比例.方法 测81例PCOS患者(PCOS组)的体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血清leptin、血清睾酮(T)、血清胰岛素(INS)、黄体生成素与卵泡刺激素比值(LH/FSH).另测20例健康同龄女性为对照组的BMI、WHR及血清leptin、T、INS.结果 PCOS组平均血清leptin水平为(22.57±12.45)ng/mL,对照组平均血清leptin水平为(10.49±6.08)ng/mL,两者比较有显著性差异(P<0.01);经校正BMI的影响后,PCOS组与对照组leptin仍有统计学差异(P<0.01),PCOS组中肥胖组平均血清leptin水平为(31.89±13.42)ng/mL,非肥胖组平均血清leptin水平为(20.03±11.00)ng/mL,两者血清leptin水平在校正了BMI的影响后无差异(P>0.05).结论 血清leptin水平升高是PCOS患者中的普遍现象.
作者:王兴娟;王静;贾丽娜;戴婷 刊期: 2007年第04期
目的 利用基因芯片筛选apoE-/-动脉粥样硬化小鼠心脏与主动脉内膜中可能受到生物钟调控的动脉粥样硬化基因,并研究其表达情况.方法 采用apoE-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,以同品系C57BL/6J小鼠作为对照;使用动脉粥样硬化基因芯片检测在ZT0与ZT12处死的两种小鼠心脏与主动脉内膜中113个动脉粥样硬化相关基因的表达情况;应用Real-time PCR检测在心脏与主动脉内膜中表达均发生改变的ACE与MMP3的昼夜表达节律. 结果饲以高脂膳食(含0.15%的胆固醇和21%的脂肪)4周的apoE-/-小鼠主动脉粥样斑块形成;apoE/动脉粥样硬化小鼠血清胆固醇与低密度脂蛋白明显高于对照组C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白则明显低于对照组;基因芯片结果显示apoE-/-动脉粥样硬化小鼠与C57BL/6J小鼠心脏与主动脉内膜动脉粥样硬化相关基因表达有较大差异,apoE-/-小鼠心脏与主动脉内膜分别有6个及10个基因在两个时间点表达均下调,此外,心脏与主动脉内膜中分别有15及12个原本在C57BL/6J小鼠表达随时间改变的基因在apoE-/-小鼠中不再随时间改变;Real-time PCR结果显示ACE与MMP3在对照组C57BL/6J小鼠心脏中具有昼夜节律,但在apoE-/-动脉粥样硬化小鼠中,这种表达节律消失,且表达水平降低. 结论动脉粥样硬化相关基因表达节律发生改变,这可能在动脉粥样硬化的病理过程中发挥了重要作用,对其机制的研究对我们更好地认识这种心血管疾病将具有重要意义.
作者:徐晨;张雪晴;华鲁纯;陆超;金惠铭;钱睿哲 刊期: 2007年第04期
目的 探索能够应用于临床辨别早期缺血心肌生物学活性的敏感代谢变化指标.方法 SD大鼠行冠状动脉前降支结扎术建立心肌缺血模型,分别结扎0(对照组)、5、20、45 min.采用luciferin/luciferase法,RT-PCR法和免疫组织化学法分析心肌组织在不同缺血时间段梗死区、梗死边缘区及正常区ATP含量变化,葡萄糖调节蛋白75(grp75)和缺氧诱导因子1α(HIF1α)基因表达变化,以及细胞色素C释放、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)降解的情况.结果 大鼠冠状动脉前降支分别结扎5、20、45 min时,梗死区及梗死区边缘心ATP含量上升,并于20、45 min时明显高于正常水平;grp75及HIF1α基因转录水平未见明显改变.免疫组化结果显示少数细胞细胞色素C的释放出现于冠状动脉前降支结扎5 min,而PARP的降解发生较迟,出现于冠状动脉前降支结扎20 min.冠状动脉前降支结扎45 min时细胞色素C的释放和PARP的降解明显增强免疫反应呈现片状染色.结论 大鼠急性心肌缺血后早期梗死区发生细胞凋亡,细胞色素C释放、PARP降解出现较早,可用作为临床辨别缺血心肌生物学活性的早期变化指标.
作者:张晖;顾兴华;徐丹令;孙爱军;夏蓓莉;刘雯;王克强;左伋;葛均波 刊期: 2007年第04期
目的 研究选择性头部降温对缺血性脑损伤胎羊纹状体神经元凋亡和星形胶质细胞增殖的影响.方法 胎羊于妊娠117~124 d时通过双侧颈动脉阻塞30 min造成双侧脑缺血损伤,损伤后将胎羊随机分为:损伤组(n=10)、2 h低温组(损伤后2 h开始亚低温治疗,n=7)和6 h低温组(损伤后6h开始亚低温治疗, n=8),另设正常对照组(n=5).通过冷循环水进行选择性头部降温,取脑组织用免疫组化法检测胎羊纹状体caspase-3(半胱天冬氨酸酶-3),GFAP(胶质纤维酸性蛋白)和PCNA(增殖细胞核抗原)的表达.结果 ①纹状体神经元凋亡:正常对照组中,caspase-3表达极少(11.00±13.77),损伤组caspase-3免疫阳性细胞为177.70±48.69,明显增加(P=0.000), 损伤后2h治疗组(54.14±39.44,P=0.000)和损伤后6 h治疗组(122.43±52.36,P=0.017)均能减少caspase-3免疫阳性细胞.②纹状体星形胶质细胞增殖:与正常对照组(163.40±21.98)相比,缺血性脑损伤组的GFAP免疫阳性细胞明显增多(433.25±66.69,P=0.000),损伤后2 h开始亚低温治疗(219.50±35.31,P=0.000)和损伤后6 h开始亚低温治疗(272.50±86.20,P=0.000)均能减少GFAP免疫阳性细胞.③纹状体PCNA阳性细胞的表达:在正常对照组中,PCNA免疫阳性细胞较少,为153.40±12.46,缺血性脑损伤组的PCNA免疫阳性细胞明显增多(353.70±45.60,P=0.000),损伤后2h开始亚低温治疗(187.14±26.26,P=0.000)和损伤后6 h开始亚低温治疗(230.25±67.46,P=0.000)均能减少PCNA免疫阳性细胞.结论 亚低温可以抑制纹状体神经元的凋亡和星形胶质细胞的增殖,该作用可能为选择性头部降温的脑保护作用机制之一.
作者:骆菲;曹云;Guan J;Gunn AJ;Bennet L;George S;Gluckman PD;杨毅;陈莲 刊期: 2007年第04期
目的 探讨以Triton-X 100、脱氧胆酸钠和核酸酶去细胞后的组织工程心脏瓣膜支架的生物学特性. 方法经Triton-X 100、脱氧胆酸钠和核酸酶处理新鲜猪主动脉瓣膜,去除内皮细胞和间质细胞,常规苏木精伊红染色,电子扫描显微镜检查,评价去细胞效果,并检测去细胞瓣叶的力学特性、可溶性蛋白含量、同时行兔皮下包埋实验,观察其免疫反应性. 结果 Triton-X 100、脱氧胆酸钠和核酸酶能有效去除细胞成分,获得组织工程心脏瓣膜支架.去细胞瓣叶与新鲜瓣叶有相同的拉伸强度-拉伸率曲线.可溶性蛋白含量明显降低,去细胞瓣叶的免疫反应性明显降低.结论 经Triton-X 100、脱氧胆酸钠和核酸酶去细胞处理的猪主动脉瓣膜可以做为组织工程瓣膜支架.
作者:孙晓宁;赵强;徐德民;陈安清;翟万银 刊期: 2007年第04期
目的 评价超声心动图组织多普勒和应变/应变率在心力衰竭患者心脏再同步化治疗(cardiac resynchronization therapy,CRT)中的应用价值.方法 34例患者植入双室起搏器后随机进行4种不同模式起搏(双腔起搏BiV,左室起搏LV,右室起搏RV和不起搏即窦性心律状态).行常规超声心动图及二维彩色组织多普勒(doppler tissue imaging, DTI)检查,测量射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、每个节段的心肌收缩速度峰值、节段心肌收缩位移、应变及应变率和每个节段心电图QRS波起始至该节段收缩达峰时间(Ts).并比较不同基础疾病导致的心力衰竭起搏后的改善情况.结果 LV和BiV能够提高每搏输出量(P均P<0.02)和射血分数(P均P<0.001);左室节段心肌收缩位移LV时明显改善;LV心尖段室间隔以及侧壁收缩期应变率和应变均改善;但是,BiV只有侧壁心尖段应变率明显改善.不同基础疾病起搏后心功能的改变差别没有统计学意义.结论 LV和BiV可明显改善心力衰竭患者的心功能.超声心动图DTI、应变/应变率可以无创伤性评价CRT治疗效果,并随访预后.
作者:程蕾蕾;孙静平;James D. Thomas 刊期: 2007年第04期
目的 用大长度序列(MLS)脑干听觉诱发电位技术检测有围产期缺氧早产儿生后早期的脑干功能,研究不同程度缺氧对脑干功能的影响,并比较MLS脑干听觉诱发电位是否较常规法对异常的检出具有优越性.方法 胎龄29~33+6周的早产儿,重度缺氧组51例,轻度缺氧组36例,对照组为相对正常早产儿41例.MLS脑干诱发电位的声刺激速率为91、227和455次/秒,选常规法21次/秒作为对照,观察指标为Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潜伏期和振幅,Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ峰间期.结果 随着缺氧程度加重,缺氧组早产儿V波潜伏期、Ⅲ-Ⅴ和Ⅰ-Ⅴ峰间期较正常对照组逐渐延长,V波振幅逐渐降低;通过MLS提高刺激速率后,缺氧早产儿Ⅲ波的潜伏期、Ⅰ-Ⅲ峰间期也表现出明显延长,Ⅲ波振幅也逐渐降低,并且随刺激速率逐渐增高,统计学差异逐渐明显.轻度缺氧组常规21次/秒时各参数与正常早产儿组无明显差异,但在MLS 227及455次/秒时,Ⅲ、Ⅴ波潜伏期,各个峰间期也显示出延长[455次/秒时,轻度缺氧组Ⅲ波潜伏期为(6.55±0.53)ms,Ⅴ波潜伏期为(10.13±0.86)ms,Ⅰ-Ⅲ峰间期为(3.60±0.34)ms,Ⅲ-Ⅴ峰间期为(3.58±0.57)ms,Ⅰ-Ⅴ峰间期为(7.18±0.73)ms],同时部分振幅降低;重度缺氧组与轻度缺氧组的差异主要为Ⅴ波潜伏期、Ⅲ-Ⅴ和Ⅰ-Ⅴ峰间期延长及Ⅴ波振幅降低,而与正常早产儿组比较不仅上述差异更加显著,同时Ⅲ波的潜伏期及振幅、Ⅰ-Ⅲ峰间期也都显示出异常[455次/秒时,重度缺氧组Ⅴ波潜伏期为(10.57±0.93)ms,Ⅲ-Ⅴ峰间期为(3.93±0.53)ms,Ⅰ-Ⅴ峰间期为(7.60±0.73)ms,Ⅴ波振幅为(0.02±0.02)μV].结论 围产期缺氧会对早产儿生后早期的脑干功能造成损伤,且随缺氧程度加重诱发电位的变化也更加明显.MLS脑干听觉诱发电位通过提高刺激速率,加大神经元负荷,对脑损伤有更高的诊断价值.
作者:李志华;陈超;蒋泽栋 刊期: 2007年第04期
目的 检测上皮性卵巢癌中雌激素受体β(ERβ)基因启动子CpG岛甲基化状况,探讨ERβ基因甲基化在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及其临床意义.方法 收集石蜡包埋上皮性卵巢癌标本47例,卵巢良性肿瘤标本5例,正常卵巢组织5例.采用甲基化特异性PCR (MSP)技术对ERβ基因CpG岛甲基化进行检测.并采用免疫组织化学技术检测上皮性卵巢癌中ERβ的表达.结果 ERβ基因甲基化在上皮性卵巢癌中的发生率为40.4%(19/47),在卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织中均未检测到ERβ基因甲基化.ERβ基因甲基化在上皮性卵巢癌中的发生与之病理分期分级、肿瘤盆腔淋巴结转移有关,ERβ基因甲基化与其蛋白表达之间存在相关性.结论 上皮性卵巢癌的发生发展与ERβ基因甲基化有关, 检测甲基化状况对卵巢良恶性肿瘤的鉴别诊断可能有辅助作用.ERβ可能成为卵巢癌治疗的新的靶点.
作者:张旭垠;丁景新;易晓芳;丰有吉;金鸿雁;蒋红元;谢梦 刊期: 2007年第04期
目的 探求可能诱导局部高雌激素浓度的乳腺癌芳香化酶表达对淋巴结阴性乳腺癌预后的影响.方法 应用免疫组织化学方法检测244例原发性淋巴结阴性乳腺癌组织内的芳香化酶蛋白表达,并作单因素及多因素生存分析,研究芳香化酶表达的预后意义.结果 134 (54.9%)例乳腺癌组织内高表达芳香化酶,单因素生存分析发现肿瘤的大小、组织学分级和术后三苯氧胺辅助治疗是影响本组患者无瘤生存的预后因素(P<0.05),芳香化酶的状态对本组患者的无瘤生存率的影响具有临界统计学意义(P=0.058),比例风险Cox模型的多因素生存分析提示原发肿瘤大小、组织学分级和术后三苯氧胺辅助治疗是影响本组患者无瘤生存的独立预后因素,而芳香化酶状态对预后的影响呈现时间依赖性特点(P<0.05),时间依赖性非比例风险模型的多因素生存分析提示芳香化酶是本组患者无瘤生存的独立的预后因素(P<0.05).结论 芳香化酶可能是淋巴结阴性乳腺癌患者的预后因素,高表达芳香化酶患者的复发转移的相对风险高,但其程度随时间的改变而改变,这对于针对性制订治疗和随访计划具有一定的临床意义.
作者:陆劲松;李鹤成;曹道成;狄根红;吴炅;沈坤炜;韩企夏;沈镇宙;邵志敏 刊期: 2007年第04期
目的 构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体.方法 采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列.分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5.转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养.采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况.结果 抗人CD28鼠人嵌合抗体得到表达并能与CD28分子特异性结合.结论 抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人CD28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础.
作者:程钢;陈永井;马震宇;费敏;孙中文;徐耀瑜;胡玲玲;邱玉华 刊期: 2007年第04期
目的 探讨ATP是否促进原代培养的星形胶质细胞(astrocytes,As)发生类似反应性星形胶质化的变化以及嘌呤类受体P2X7在该过程中的作用.方法 原代As的分离和培养;实时照相观察As形态变化;用BrdU掺入法及流式细胞观察As增殖变化;用荧光标记实时定量PCR(real-time RT-PCR)检测GFAP mRNA,P2X7 mRNA,TGF-β1 mRNA表达的变化;用Western blot检测GFAP 表达; ELISA检测培养上清中TGF-β1的变化.结果 成功分离并培养原代As,免疫荧光鉴定阳性率为99%.不同浓度ATP(50 μmol/L,100 μmol/L,500 μmol/L)作用于As,均可使之表现出类似反应性胶质化的形态改变,表现为胞浆丰富,细胞突起增加且更为明显.ATP 100 μmol/L作用1 d后,As 的S期细胞数目明显增加,提示细胞增殖的活跃,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,5-BrdU)掺入法显示细胞核阳性率明显增加.500 μmol/L 浓度的ATP能促进As的 GFAP mRNA,P2X7 mRNA表达.用P2X7特异性的受体激动剂2′-3′-O-(4-benzoylbenzoyl)-adenosine-5′-triphosphate (BzATP) 50 μmol/L,75 μmol/L,100 μmol/L作用于原代培养的As,在培养基有Ca2+情况下可明显促进GFAP表达.在培养基有Ca2+的情况下BzATP作用2 h及12 h时As中TGF-β1 mRNA升高.培养上清中TGF-β1蛋白的含量在8 h 及48 h 均有升高.TGF-β1中和抗体能部分抑制P2X7引起的As GFAP含量的增加.结论 100 μmol/L的ATP可以促进As增殖.各种浓度ATP均可促进As形态产生类似胶质化反应的变化.P2X7特异性受体激动剂BzATP可引发胶质化样反应,并且在有Ca2+的情况下促进TGF-β1的转录和释放.TGF-β1参与了P2X7受体诱导的类似反应性星形胶质化过程.
作者:刘颖;梁华征;孙景军;叶诸榕 刊期: 2007年第04期
目的 观察黄芪多糖(APS)对糖尿病(DM)仓鼠心肌chymase/ACE-AngⅡ的影响,探讨其对DM心肌病变的干预机制.方法 检测APS治疗组和DM对照组仓鼠的血糖、胰岛素、C肽、心肌酶谱、糖化血清蛋白水平,血浆和心肌组织的AngⅡ含量;免疫组化法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原;荧光定量PCR法检测心肌chymase和ACE mRNA表达;放免法检测chymase和ACE活性.结果 APS组血糖、糖化血清蛋白、心肌酶谱和心肌AngⅡ水平较DM组显著下降,胰岛素、C肽、血浆AngⅡ水平和DM组无差异;APS组心肌Ⅰ型胶原表达和Ⅰ/ Ⅲ型胶原比值较DM组显著下降;APS组 chymase mRNA表达和活性均显著低于DM组,ACE基因的表达和活性与DM组无显著性差异.结论 APS可以抑制糖尿病心肌中chymanse依赖性AngⅡ的生成,起到对糖尿病心肌病变的保护作用.
作者:陈蔚;俞茂华;叶红英 刊期: 2007年第04期
椎管内阻滞是目前普遍应用的一种分娩镇痛方式,综述近年来椎管内阻滞分娩镇痛的研究进展,包括:病人自控硬膜外镇痛给药模式的优化、腰麻-硬膜外联合阻滞镇痛、对新局麻药的评价、椎管内联合使用的其他辅助药物、可行走的镇痛对分娩的影响、镇痛开始及终止的时机、不良反应或潜在的风险.
作者:黄绍强 刊期: 2007年第04期
bHLH转录因子家族是一类重要的神经发育调节因子,在神经系统发育的多个部位、不同时期发挥神经决定作用.近年来的研究尤其是在内耳毛细胞再生中Math 1发挥作用的研究取得了重要的进展--Math 1的介入可以使成熟的听上皮再生毛细胞.这给听觉障碍的恢复带来了希望.本文就此对Math 1的研究进展进行综述.
作者:韩朝;迟放鲁 刊期: 2007年第04期
D-半乳糖衰老动物模型是由我国学者龚国清等在1991年构建的.与其它几种衰老动物模型如SAMP系小鼠衰老模型,臭氧损伤衰老模型,去胸腺衰老模型,自然衰老模型等相比,该模型简便易行,价格低廉,结果稳定,因而得到广泛运用.鉴于该模型近年来的运用和发展,且众文献中的检测指标各有侧重,本文拟对该模型构建方法和原理以及检测指标从行为学水平,生化水平,形态学水平,分子生物学水平等方面由浅入深进行综述.
作者:朱亚珍;朱虹光 刊期: 2007年第04期
骨缺损一直是困扰矫形外科医师的一大难题,针对此的研究较多,但目前仍没有一种特别令人满意的治疗方案.研究表明,血管束植入骨缺损处可以促进成骨.本文主要就血管(或束)植入在自体骨、组织工程骨治疗骨缺损的应用研究作一综述.
作者:赵明东;尹望平;董健 刊期: 2007年第04期
肿瘤早期诊断的蛋白组学研究是近来国内外研究的热点.本文综述了胰腺癌早期蛋白质组的改变在胰腺癌早期诊断的作用,为胰腺癌的早期诊断提供科学手段.
作者:罗国培;傅德良 刊期: 2007年第04期
目的 回顾分析28例冠状动脉解剖异常患者资料,探讨此症的外科治疗措施及初步体会. 方法 28例冠状动脉解剖异常患者,其中冠状动脉起源于肺动脉2例,冠状动脉瘘8例,左前降支心肌桥14例,冠状动脉瘤4例.体外循环下手术12例,非体外循环下手术16例.其中冠状动脉起源于肺动脉手术采用冠脉开口移位于主动脉1例,Takauchi手术1例;冠状动脉瘘体外循环下修补6例、冠状动脉下瘘口切线缝扎1例,非体外循环下左前降支-肺动脉之间瘘管结扎1例;左前降支心肌桥行MIDCAB 4例,OPCAB 8例,体外循环下行心肌桥松解术2例;冠状动脉瘤采用体外循环下CABG术2例,OPCAB 8例,其中冠状动脉瘤成形术1例,冠状动脉瘤切除术1例. 结果全组病例术后无死亡.12例体外循环手术平均体外循环时间(62.67±21.39)min,平均主动脉阻断时间(40.25±14.07)min.冠脉搭桥手术血管桥共28支,静脉桥5支,平均搭桥(1.79±1.12)支.平均住院时间(19.20±8.64)天.冠状动脉瘘病例术后心脏超声检查未见瘘口残余分流,冠脉搭桥术后病例未见心绞痛再发,心电图检查未见明确心肌缺血表现.25例无任何术后并发症,恢复良好,3例出现术后心肌缺血,心绞痛症状. 结论本研究中出现术后心肌缺血症状,手术疗效有待进一步临床积累和随访.冠状动脉解剖异常外科治疗时,应争取解剖学和生理学上同时纠正冠状动脉病变,避免术后心肌缺血的发生.
作者:孙勇新;陆晨希;夏利民;徐德民;潘翠珍;赵强 刊期: 2007年第04期
目的 探讨听诊三角保留肌肉(Muscle-Sparing, MS)剖胸切口在胸外科手术中的临床应用价值.方法 我科自2000年3月至2006年6月应用听诊三角保留肌肉剖胸切口共完成各类胸外科手术48例,包括Ⅰ期周围型肺癌8例,肺转移性肿瘤9例,肺部良性肿瘤14例,纵隔肿瘤/囊肿12例,自发性气胸5例.其中胸腔镜辅助听诊三角Muscle-Sparing剖胸切口完成纵隔肿瘤/囊肿切除术9例.结果 全组无手术死亡病例发生,无术中、术后严重并发症.在应用该切口的早期发生1例伤口血肿,未予特殊处理自行愈合.开胸时间为(13.2±1.3)min,关胸时间为(12.3±1.6)min,术野面积(87±10)cm2.结论 在合理选择病例并恰当使用一次性手术器械的前提下,听诊三角保留肌肉剖胸切口是一种安全可行的微创剖胸切口,且操作较其他胸壁小切口更为简便.
作者:蒋伟;王群;范虹;徐松涛 刊期: 2007年第04期
目的 观察并比较布托啡诺硬膜外与静脉两种给药途径对预防阑尾牵拉反应的效果.方法 选择美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅱ级在硬膜外阻滞下进行阑尾切除术的患者42例,随机分为硬膜外组与静脉组.在切皮时分别从硬膜外和静脉注射2 mg布托啡诺,观察术中患者对牵拉阑尾的反应情况.结果 硬膜外和静脉注射布托啡诺都有预防阑尾牵拉反应的效果,但硬膜外组优良率高于静脉组(P<0.05);两组病人注药后脉搏氧饱和度(SpO2)及平均动脉压(MAP) 均稍降,静脉组下降明显,差异有显著性(P<0.05) .硬膜外组不良反应较静脉组少.结论 硬膜外注射2 mg布托啡诺能有效预防阑尾牵拉反应.
作者:谢致;周守静;沈雅芳 刊期: 2007年第04期
目的 研究干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对表达乙肝病毒的HepG2.2.15细胞的协同致凋亡作用及其意义.方法 光学显微镜观察细胞形态,MTT方法定量测定细胞成活力,用琼脂糖凝胶电泳阶梯状条带分析有无凋亡.结果 1 000 U/mL IFN-γ单独或与5 ng/mL TNF-α联合能诱导表达乙肝病毒的HepG2.2.15细胞凋亡.用拉米夫定抑制乙肝病毒能降低IFN-γ和TNF-α对HepG2.2.15细胞的致凋亡作用.结论 IFN-γ和TNF-α对表达乙肝病毒的HepG2.2.15细胞有协同致凋亡作用.拉米夫定能降低IFN-γ和TNF-α对HepG2.2.15细胞的致凋亡作用.
作者:石虹 刊期: 2007年第04期
目的 评价家兔膝关节前交叉韧带切断(ACLT)及内侧半月板前1/3切除制作骨关节炎(OA)模型方法的可行性,同时探索关节炎发病的不同时期,关节软骨中基质金属蛋白酶(MMP)-1,MMP-13的基因表达、蛋白表达水平的变化情况.方法 实验组家兔30只行ACLT及内侧半月板前1/3切除术造模,分别于术后4周、8周、12周处死10只,假手术对照组家兔10只于术后12周处死.进行股骨髁关节软骨退变的大体评分;取退变的软骨组织,用实时定量PCR(Real-time PCR)及Western blot印记杂交方法测定软骨组织中MMP-1和MMP-13的mRNA和蛋白表达水平.结果 ACLT及内侧半月板前1/3切除术后4周即可见软骨退变,8周和12周时退变进一步加重,对照组无明显软骨退变,不同组动物关节软骨评分有统计学差异.MMP-1的mRNA表达和蛋白表达在正常对照组水平均较低,造模4周开始升高,到第8周及第12周持续升高, 且mRNA表达和蛋白表达升高的趋势相同;MMP-13在造模4周时表达开始升高,mRNA表达和蛋白表达趋势相同,造模第8周时持续升高,但在造模第12 周时MMP-13 mRNA表达和蛋白表达下降.结论 家兔膝关节ACLT及内侧半月板前1/3切除制作OA模型的方法简便可行,MMP-1和MMP-13在骨关节炎的发病过程中有不同程度的升高,可以作为OA研究的评价指标.本实验结果提示,在OA发展的过程中,MMP-1和MMP-13的表达不平行,二者调控通路可能存在差异.MMP-13的mRNA表达的变化趋势与其蛋白水平的变化趋势相符合,说明引起MMP-13在OA病程中晚期下降的调控发生在翻译前水平.
作者:杨丰建;俞永林;乔健;夏军;任志伟;王静 刊期: 2007年第04期
目的 探讨醛糖还原酶抑制剂(ARI)影响血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)促体外培养大鼠系膜细胞(MsC)增殖作用的机制.方法 用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比PDGF-BB刺激MsC生长速度与MAPK 3条信号通路(ERK、JNK及p38)抑制剂及PI3K信号通路抑制剂对PDGF 促MsC增殖作用的影响.用半定量RT-PCR检测醛糖还原酶抑制剂(ARI)对MsC合成内源性PDGF-B 链的影响.蛋白印迹法观察ARI 对PDGF引起的信号通路磷酸化的影响.结果 (1) ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SP600125及PI3K抑制剂LY294002能明显抑制PDGF对MsC的促增殖作用(P<0.05),而p38抑制剂SB203580不能抑制PDGF的促MsC增殖作用;(2) ARI在转录水平对MsC 合成内源性PDGF-B链没有明显影响.(3) PDGF刺激MsC后引起ERK、JNK及PI3K/Akt信号通路的磷酸化,而ARI仅能抑制JNK及PI3K/Akt两条信号通路的磷酸化(P<0.05),对ERK信号通路的磷酸化没有明显影响.结论 ARI部分抑制PDGF促MsC增殖作用可能与其影响JNK和PI3K/Akt信号通路活化有关.
作者:邹丽萍;蒋涛;车祺;李慧;瞿俊杰;陈琦;张农 刊期: 2007年第04期
目的 对加哇挥发油的化学成分提取、分离后进行定性分析.方法 采用超临界CO2流体萃取加哇的挥发油成分,并用GC-MS法对萃取物进行定性分析.采用面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果 从加哇的挥发油中共鉴定出28种化学成分,主要成分包括十八烷酸,异士木香内酯和棕榈酸等.结论 该方法适于加哇挥发油成分的定性分析,加哇的挥发油中富含不饱和脂肪酸、酯等成分.
作者:张海英;张国英;段更利;凌建亚 刊期: 2007年第04期
目的 探讨两种大鼠异位心脏移植模型的制备要点以及受者发生死亡与并发症的原因及预防措施.方法 2004年6月至2006年3月,采用显微外科技术,施行大鼠腹部心脏移植术356例(腹部组)和颈部心脏移植术86例(颈部组).结果 腹部组和颈部组的手术成功率分别为92.98%和90.70%;手术时间分别为(58.1±9.7)min和(63.7±7.2)min;热缺血时间均为0 min,冷缺血时间分别为(26.4±6.8)min和(29.3±5.6)min;血管吻合时间分别为(24.3±5.6)min和(27.7±4.2)min,心脏复跳时间为(1.1±0.4)min和(0.8±0.2)min,两组以上各指标间均无显著性差异(P>0.05).两种术式并发症发生的原因与特点不尽相同.结论 重视两种大鼠异位心移植模型的制备要点并预防并发症的发生均能使两者达到较高的成功率和稳定性.
作者:顾晓;赵鸿;古涛 刊期: 2007年第04期
目的 研究杏仁核电刺激点燃的难治性癫(癎)大鼠脑内P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)表达的情况.方法 建立杏仁核电刺激点燃的难治性癫(癎)大鼠模型,用RT-PCR、免疫组织化学及免疫蛋白印记(Western blot)的方法,分析比较PGP蛋白在癫(癎)模型组与正常对照组的表达.结果 在基因和蛋白水平药物难治性癫(癎)大鼠组皮层和海马PGP的表达都显著高于正常对照组(P<0.05),癫(癎)模型组内皮层和海马间的多药耐基因1(multidrug resistance gene 1, MDR1)的表达无明显统计学差异(P>0.05);癫(癎)组大鼠脑内皮层和海马的PGP免疫阳性细胞数较对照组明显增多,统计学比较有差异(P<0.05).结论 癫(癎)大鼠脑内高表达的PGP参与了难治性癫(癎)的耐药机制.
作者:陈英辉;赵永波;祖衡兵;赵永飞;邬军锋 刊期: 2007年第04期
目的 以芬太尼为对照,观察氯诺昔康、曲马多不同药物配伍对悬雍垂-腭-咽成形术 (uvulopalatopharyngiplasty,UPPP) 的患者行静脉自控镇痛(Patient-controlled an algesia,PCIA)的有效性和安全性.方法 90例择期行UPPP的阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAS,即鼾症)患者,ASAⅠ~Ⅱ级,随机分为3组(n=30),F组:芬太尼10 μg/kg;FL组:芬太尼5 μg/kg+氯诺昔康0.4 mg/kg;TL组:曲马多5 mg/kg +氯诺昔康0.4 mg/kg;每组镇吐药物均为氟哌啶5 mg,均以生理盐水稀释至100 mL,背景剂量2 mL/h,PCIA 1.5 mL/次,锁定时间15 min.观察患者术后2、4、8、12、24 h的视觉模拟评分值(VAS)和镇静效果(Ramsay评分);记录患者血流动力学及通气功能的变化及恶心、呕吐、头晕、呼吸抑制、异常出血、尿潴留等不良反应.结果 3组病人均镇痛良好.从VAS值和Ramsay评分来看,F组在术后2 h镇痛效果好于FL组、TL组,但有镇静过度存在(P<0.05),其余时点3组效果无差异.血流动力学方面,与术前比较,F组、FL组患者MBP在术后2~4 h有所下降(P<0.05);TL组患者MBP、HR、SPO2无明显变化(P>0.05);F组患者在术后2 h MBP、 HR、SPO2下降较其他两组显著(P<0.01).从不良反应来看,F组在呼吸抑制方面与其他两组有差异(P<0.05),恶心呕吐的发生率TL组略高于其它两组,但无统计学差异(P>0.05),其余不良反应发生率3组无显著差异.结论 与使用芬太尼比较,曲马多复合氯诺昔康应用于鼾症患者的术后镇痛对呼吸影响小,更为安全.
作者:张旭;白浪;陈英子;周守静 刊期: 2007年第04期
目的 建立同时测定人血浆中抗癫(癎)药物唑尼沙胺(ZNS)、苯妥英(PHT)、卡马西平(CBZ)及其活性代谢物环氧卡马西平(CBZE)浓度的高效液相色谱法. 方法以氯唑沙宗为内标,血浆样品经甲醇蛋白沉淀后,取上清液直接进样测定.色谱柱采用Phenomenex SynergiTM Fusion-RP C18 柱 (250 mm× 4.6 mm,4 μm),柱温:40℃;流动相为甲醇:乙腈:0.1%三氟乙酸水溶液(27:15:58, V/V/V),流速为1.2 mL/min,双波长双通道检测,215 nm测定PHT和CBZE,235 nm测定ZNS和CBZ. 结果血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,色谱峰分离良好.ZNS、PHT、CBZ和CBZE的低定量限为1.0 μg/mL,线性范围分别是1~80 μg/mL,1~50 μg/mL,1~25 μg/mL和1~10 μg/mL,相关系数 (r) 均大于0.999 1.平均方法回收率分别为94.77%~113.41 %,各组分的日内、日间RSD均小于7.21 %.样品在25℃放置4 h,4℃放置24 h,反复冻融3次均保持稳定.结论 该方法具有良好的准确性、精密性和灵敏性,且操作快速、简便,适用于临床抗癫(癎)药物血药浓度的监测.
作者:马春来;焦正;施孝金 刊期: 2007年第04期
目的 建立紫杉醇原料药中残留溶剂甲醇、丙酮、乙酸乙酯、正庚烷、二氯甲烷、四氢呋喃、正己烷和吡啶的测定方法.方法 采用毛细管气相色谱法,色谱柱为DM624(6%氰基甲基硅酮)毛细管柱(30 m×530 μm×3.00 μm),载气为氮气,检测器为氢焰离子化检测器,以程序升温方式使甲醇、丙酮、乙酸乙酯、正庚烷、二氯甲烷、四氢呋喃、正己烷和吡啶达到了完全分离.结果 8种溶剂的线性关系、精密度、准确度、灵敏度均达到了预定的分析要求,在紫杉醇原料药中仅检出了正庚烷.结论 本法能快速准确的检测8 种有机溶剂,可用于紫杉醇原料药质量控制中的有机残留溶剂检查.
作者:戴维;周玲洁;梁建英 刊期: 2007年第04期
目的 探索卵巢成熟及明确早胚发育过程中,构建小鼠卵母细胞cDNA文库筛选所涉及的相互作用蛋白.方法 利用SMART技术,构建酵母双杂交筛选卵母细胞中与输卵管蛋白相互作用的靶分子成分为目的,构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库.采用Stratagene RNA prepkit抽提500枚卵母细胞总RNA,应用线性化载体pGADT7-Rec在体构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库.结果 文库的滴度为3.7×106,重组片段大小主要集中在0.6-0.9 kb,重组率为60%.结论 所构建的小鼠卵母细胞cDNA文库可用于酵母双杂交筛选.
作者:沈煜;申宗候;左嘉客 刊期: 2007年第04期
目的 为进行移植免疫研究的需要,建立一种大鼠肾移植模型.方法 采用原位低温灌注、手术显微镜下原位端--端吻合肾动、静脉,将输尿管带膀胱瓣吻合于膀胱.结果 建立了稳定可靠的大鼠肾移植模型,手术成功率为86%.结论 此方法建立的模型稳定可靠,较为理想的满足了肾移植研究的需要.
作者:张建平;张豪杰;王翔;朱同玉;林宗明;王国民 刊期: 2007年第04期
异位妊娠是妇科常见的急腹症之一,近年来异位妊娠发病率呈上升趋势,而其中输卵管妊娠所占比率高,达90%以上[1],是孕产妇死亡的主要原因之一.
作者:黄卫红;屠蕊沁;赵栋 刊期: 2007年第04期
全身进行性骨化性肌炎是一种进行性结缔组织疾病,发病率极低,临床极罕见.现报告典型病例1例.
作者:田生杰;姜建元;马昕;吕飞舟;王旭;黄刚勇 刊期: 2007年第04期
二甲四氯钠(英文名:MCPA-Na;化学名:2-甲基-4-氯苯氧乙酸钠;分子式: C9H8ClNaO3 )属选择性苯氧乙酸类除草剂,主要适用于水稻、麦类、玉米等禾本科作物田.
作者:袁敏;沈波;邹建洲;滕杰;方艺;钟一红;丁小强 刊期: 2007年第04期
腹膜恶性间皮瘤是原发于腹膜的恶性肿瘤,临床少见,诊断困难,容易误诊.现报告5年来我院收治的2例腹膜恶性间皮瘤,结合文献探讨其临床特点、诊断和治疗问题.
作者:蔡斌;张佳荣;祝亚平;万小平 刊期: 2007年第04期