综述了提高抗生素有效组分产量的4类生物学方法.随机诱变筛选和定向推理选育;在发酵培养基中添加前体或诱导物;改变培养基组成或控制发酵条件;基因工程理性化筛选.
作者：李慧；夏焕章 刊期： 2002年第03期
随着生物技术的发展,制备高纯度和活性的药物和研究用蛋白质越来越重要,在分离纯化中,特别是不稳定蛋白的分离纯化,需要控制影响蛋白质稳定性的因素和采用分离纯化新技术,以确保目标蛋白的纯度和高活性.
作者：李世崇；陈昭烈 刊期： 2002年第03期
对脂质体作为生物大分子载体,即作为基因物质、生物药物的载体、新型疫苗佐剂和载体,以及生物药物脂质体的给药途径进行了讨论.
作者：王弘；吴梧桐；顾学裘 刊期： 2002年第03期
概述了生物方法制备D-泛酸的研究情况,主要介绍了发酵葡萄糖生成D-泛解酸,添加β-丙氨酸,直接发酵生产D-泛酸的方法;酶法转化或拆分,特别是不对称还原酮基泛解酸(或内酯),立体选择性水解拆分DL-泛解酸内酯的拆分方法,并对其发展前景进行了评论.
作者：孙志浩；汤一新 刊期： 2002年第03期
简要阐述了微生物Baeyer-villiger单加氧酶在制备R-(+)-硫辛酸关键手性中间体中的应用,并对三种不同的转化方式加以了比较.
作者：孙菁；王旻；陈代杰 刊期： 2002年第03期
从E.coli MC4100菌株的染色体DNA中利用鸟枪法克隆含编码巴豆甜菜碱还原酶和L-肉碱脱水酶的caiAB基因片段,并经序列分析验证.由重组质粒pZJD-1480亚克隆得到pT7-A以及pT7-B重组表达质粒,后者转入E.coli BL21(DE3)菌株中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)上分子质量为40 ku附近可见明显的表达蛋白带.
作者：段世伟；季岷岚；周雪峰；张惠展 刊期： 2002年第03期
利用PCR定点突变技术对人胰岛素样生长因子(huIGF-I)基因进行改造,克隆到pGEMT载体测序.并构建酵母表达载体pGaAIGF-I,转化毕赤氏酵母GSn5.摇瓶发酵4 d后,检测表达水平占可溶性总蛋自的15%以上,且表现出较好细胞增殖活性.
作者：赖心田；周鹏；洪葵 刊期： 2002年第03期
为了探索红栓菌多糖的免疫增强作用,实验从深层发酵培养的红栓菌菌丝体中提取多糖PCP,通过动物实验证实PCP能明显增加小鼠免疫器官胸腺和脾脏的重量,提高巨噬细胞Mψ的吞噬活力,促进T细胞体外增殖及接触性皮炎反应,提高小鼠血清凝集素滴度,以上作用在ip剂量50,150,250mg/kg体重范围内呈现出明显的量效关系.
作者：周莹；沈萍萍；彭士明；华子春 刊期： 2002年第03期
组织因子是外源性凝血途径的启动因子,为膜受体蛋白,胞外区的促凝血功能几乎与完整分子相同,因此采用重组DNA技术制备组织因子的胞外区分子,并对其活性进行研究,以便替代兔脑粉用于PT检测.以人胎盘总RNA为模板,用RT-PCR扩增组织因子胞外区cDNA基因,经序列分析证实后在大肠杆菌中表达,产物形成包涵体.表达产物经复性、离子交换和凝胶过滤色谱纯化后与磷脂结合,进行促凝血试验.结果表明在磷脂存在下,可溶性TF有明显的促凝血活性,可以取代兔脑粉用于PT检测.
作者：于敏；王羽雄；顾银良；宋后燕 刊期： 2002年第03期
针对菠萝蛋白酶稳定性方面存在的实际问题,研究了湿度条件、温度条件及60Coγ辐射对菠萝蛋白酶活性的影响,结果表明,随着储存时间的延长,湿度条件比温度条件更能影响酶的活性;选用60Coγ辐射(8 kGy)对菠萝蛋白酶进行杀菌,酶活损失率为11.0%.
作者：章佩芬；郭勇 刊期： 2002年第03期
利用RT-PCR技术从MH 3T3细胞中克隆出环氧化酶II cDNA,全长1815bp,测序分析表明与文献报道已知相符,构建真核表达载体.用阳离子脂质体介导转染的方法转染至宿主细胞HEK 293细胞中,G418筛选出稳定转染的细胞克隆.加入底物花生四烯酸,通过测定PGE2含量的变化判断酶活,结果表明重组质粒能够表达环氧化酶.
作者：汪志军；周建伟；张娟；李爱萍；谢晨；王旻；张奕华；张玉彬 刊期： 2002年第03期
应用RT-PCR技术,从人脐静脉内皮细胞中扩增出编码Flt-l胞外区前四个结构域的基因片段,将Flt-1基因片段连接到表达载体pPIC9K上,获得重组质粒pPIC9K-F,将重组质粒转化到甲醇酵母Pichia pastorisGS 115中,得到基因工程菌株P.pastoris(pPIC9K-F),对培养上清进行SDS-PAGE和Westem blot分析.结果显示在74.2 ku处有阳性条带出现,表明sFLT-1在甲醇酵母中获得了成功表达.受体配基结合实验显示表达产物与VEGF可特异性结合,表明其具有配基结合生物活性.
作者：姜自彬；王丽非；李元 刊期： 2002年第03期
通过单因素考察及正交实验优化了用超声波法提取海带多糖的实验条件,并与酸提取方法进行了比较.结果显示在海带干粉中加入62.5倍体积的水,在pH 2.0的条件下用超声波提取45min得到的海带多糖的量多.与酸提取法相比,超声波法的粗提物提取率稍高(分别为10.95%和11.45%,P＞0.05);但提出物中的糖含量明显增加(分别为19.8%和28.19%,P＜0.01),大分子杂质明显减少(分别为1.92%和0.97%,P＜0.01).抗肿瘤实验结果表明,两种提取方法得到的海带多糖都可以显著的抑制小鼠S-180瘤株的生长(抑瘤率分别为33.7%和39.5%),抑瘤效果相当(P＞0.05);而且在抑瘤的同时不影响小鼠的正常生长(P＞0.05).因此,超声波法提取多糖是一种很有希望的多糖提取新方法.
作者：廖建民；张瑾；沈子龙 刊期： 2002年第03期
利用凝胶层析法对灵芝子实体和破壁孢子粉的蛋白初提液进行了分离,通过体外免疫反应初步检测了各蛋白质成分的免疫调节活性.小鼠脾淋巴细胞转化试验表明其中有三种灵芝蛋白体外具有较强的促进淋巴细胞增殖的活性,分别命名为LZP-1,LZP-2和LZP-3,其中来自于灵芝孢子粉的LZP-2和LZP-3用量为50μg/ml时,它们体外促进淋巴细胞的增殖率可达(41.3±3.1)%和(38.7±4.8)%,并且呈现出一定的剂量依赖效应,而来自于灵芝子实体的LZP-1促进淋巴细胞的增殖率较低(18.2±3.9%,使用剂量为50μg/ml).SDS-PAGE测得它们的相对分子质量分别为67,000,43,000和45,700.该蛋白有可能是灵芝中具有免疫调节活性的成分之一,具有潜在的临床应用价值.
作者：叶波平；王庆华；周书进；金国虔；奚涛；吴梧桐 刊期： 2002年第03期
以金属铜螯合的亲和层析方法分离纯化重组人锰超氧化物歧化酶,采用3种不同的洗脱方法都可以对重组酶进行分离纯化,但是通过鉴别比较,采用方法1即逐步降低洗脱液的pH和固定洗脱液的NH+4的浓度可以获得较好的结果,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得到一条分子质量约为22000u的蛋白条带,证明所得到的为纯度较高的重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD).
作者：廖晓全；张艳红；袁勤生 刊期： 2002年第03期
作者： 刊期： 2002年第03期
作者： 刊期： 2002年第03期
