大环内酯类抗生素的基因工程研究进展十分迅速.不仅对此类抗生素的生物合成途径,参与基因及调控机理有了更透彻的认识,而且还应用基因工程技术有目的地改造其结构并创造出了一些体内外抗菌活性及治疗效果显著改观的新的大环内酯类抗生素.
作者：顾觉奋；刘昂；吴梧桐 刊期： 2002年第04期
文章参考了国内外近期文献,综述了转基因植物食用乙肝疫苗的研究进展,提出了存在问题及展望.
作者：周国辉；李华平 刊期： 2002年第04期
近十年的研究证明DNA疫苗在众多的鼠和灵长类动物模型中,能同时诱发体液免疫和细胞免疫.同时,DNA疫苗具有众多传统疫苗无法比拟的优点,因而成为目前疫苗研究中的焦点.文章综述了DNA疫苗的发展、免疫机制、质粒构建、接种途径和方式.DNA疫苗既可用于预防,亦可用于治疗,可应用于感染性疾病,肿瘤及婴幼儿免疫.
作者：韩双艳；郭勇 刊期： 2002年第04期
用表面呈现技术构建文库并从中筛选新的生物活性物质,如抗体、受体或疫苗,已成为研究生物新药的捷径之一.文章就原理及相关应用对各种表面呈现技术进行了综述.
作者：黄永城；刘景晶 刊期： 2002年第04期
考察了不同理化因子对西洋参冠瘿组织生长及其主要活性成分人参皂苷(ginsenosides)Rb1的影响,采用HPLC法测定了Rb的含量.结果表明:在考察的6种培养基中,White培养基适合人参皂苷Rb1的累积(0.755%);培养25d时Rb1累积含量高(0.732%);接种量为6gFw/flask有利于Rb1合成(0.618%);培养基pH值在5.6时Rb1累积量高(0.692%);肌醇的浓度为0.05g/L时,能明显促进Rb1合成(1.881%).
作者：于荣敏；宋永波；李铣；张荫麟 刊期： 2002年第04期
以2-甲基-3-羰基丁酸乙酯为原料,以面包酵母为生物催化剂,采用化学-生物法合成了光学纯(4R,5S)-5-羟基-3-羰基-4-甲基己酸(99.2%ee).
作者：吉爱国；Michael Mueller；Michael Wolberg；Christian Wandrey 刊期： 2002年第04期
对间歇补料分批发酵提高纳他霉素产量的工艺进行了研究,结果表明,在5 L自动发酵罐条件下,初始葡萄糖浓度40g/L,以发酵液中的还原糖为控制指标,当还原糖降至2%以下时开始间歇补糖使葡萄糖浓度维持在2%,葡萄糖流加总量为20～25/L,在佳的间歇补料分批发酵工艺下,使纳他霉素的产量从1.5g/L提高到2.3g/L,提高率为35%.
作者：何艳玲；邬建国；路福平；杜连祥 刊期： 2002年第04期
为优化发根农杆菌对药用植物苦豆子(Sophora alopecuroides)遗传转化的条件,系统地研究了苦豆子外植体的种类(子叶、下胚轴、幼茎、幼叶),发根农杆菌的悬浮介质和密度、乙酰丁香酮的有无,以及共感染时的辅助处理方法(振动培养、真空渗透)等因素对转化率的影响.实验结果发现,(1)以子叶为外植体;(2)用MS培养基重悬菌体至光密度OD600=0.6,并添加终浓度为100μmol/L的乙酰丁香酮作为诱导菌液;和(3)真空(7.0×l04Pa)渗透15 min,3者的组合可有效地提高发根农杆菌M对苦豆子的转化频率,高频率可达到89.1%.
作者：赵东利；张春广；王新宇；郑国锠 刊期： 2002年第04期
以注射用尿促卵泡成熟激素(Metrodin HP)的生物测定为实例,采用国际上通用的SAS统计软件包编写的程序计算其效价、95%可信限和平均可信限率等,并与生物统计软件包(Biostatistics,BS)进行比较,结果两种统计软件的计算结果基本一致.为便于国际交流,建议采用SAS统计软件包进行生物测定结果的计算.
作者：黄卓；钱亢；王依群；唐黎明；王依婷 刊期： 2002年第04期
将分别含有细胞毒素gelonin基因片断的重组子pUC-gell和pUC-gelⅡ,按照预先设计的酶切位点,通过亚克隆得到含有gelonin全基因的重组子pUC-gel.然后将pUC-gel与pET28a同时用NdeI/EcoRI双酶切,相关片段构建成表达重组子pET-gel,并进行DNA序列测定.工程菌E.coli B121/pET-gel表达产物经两步SP-Seph-rose柱层析,可得电泳纯的重组gelonin,分子质量为28000 u.无细胞体系蛋白质合成实验表明,其IC50(使蛋白质合成抑制50%所需浓度)为35μg/xg/L.酶联免疫实验为阳性.
作者：李卓玉；郭晨云；袁静明 刊期： 2002年第04期
建立了尿嘧啶的薄层扫描测定方法.测定波长265 nnl,参比波长360am.线性范围1.0～6.5μg,相关系数r=0.9994,平均回收率为99.31%,相对标准偏差RSD=6.43%.为转化液中尿嘧啶含量控制提供了一个简便、迅速、微量、准确的方法.
作者：顾萱；傅蓉；顾觉奋 刊期： 2002年第04期
采用ELISA竞争抑制法和光学干涉生物传感器试验对预测的7个段肽进行抗原性鉴定.结果表明7段合成肽中,f(192TPARKHTS199)和g(280AKNGTA286)肽段抗原性较强.研究探索了光学干涉生物传感器在B细胞表位研究中的应用,为进一步抗原位点精细定位打下良好的实验基础.
作者：吴敬；吴梧桐；王德育；蒋笃孝；袁春伟 刊期： 2002年第04期
为了获得重组CHO细胞培养的佳条件,使其能连续高效表达HBsAg,以含不同量谷氨酰胺的DMEM溶液培养重组CHO细胞,测定了不同阶段氨基酸、氨、乳酸含量及HBsAg滴度.结果表明谷氨酰胺的分解产物氨与乳酸均能抑制细胞的生长和分泌HBsAg,减少细胞培养液中的谷氨酰胺用量可使HBsAg分泌量增加.
作者：李玉；姚伟；张岩锐；吴玉梅；郑菊梅 刊期： 2002年第04期
探讨脂多糖(LPS)引起大鼠小气道上皮细胞损伤及机制.将SD大鼠随机分为脂多糖气管注射组(LPS 100μg/100μl L1组,50μg/100μlL2组)和对照组(生理盐水100μl,C组).光镜和透射电镜动态观察小气道上皮细胞损伤改变,以原位分子杂交方法检测小气道上皮细胞TNFamRNA和TNF受体mRNA表达的变化.结果:L1组和L2组病理改变趋势相似.LPS注射2d后,小气道上皮细胞轻度变性;LPS注射4 d后,上皮细胞坏死,脱落明显,周围炎症也加重.与C组比较,L1组各时间处死大鼠小气道上皮细胞TNFamRNA和TNF受体mR-NA表达均增高(P＜O.01);u组d8TNFamBNA比d4TNFamnRNA表达明显增强(P＜0.05).L1组d4和d8TNT受体mRNA分别比d2TNF受体mRNA表达增强(P＜O.001).脂多糖在体内可引起大鼠小气道上皮细胞明显损伤;小气道上皮细胞TNFamRNA表达上调在脂多糖引起上皮细胞损伤中具有重要作用.
作者：许燕萍；许浒 刊期： 2002年第04期
人工合成编码TAT蛋白转导区核心区域11个氨基酸的双链寡核苷酸,构建pET28a-TAT-LacZ表达子,转化大肠杆菌,得到高表达的TAT-βGal融合蛋白.TAT-βGal加入体外培养的平滑肌细胞中,15 min细胞即出现蓝染,1 hTAT-β-Gal 100%进入细胞.该融合蛋白ip到Wistar大鼠体内,30min各组织出现蓝染,4 h光密度值达高峰.实验证明TAT蛋白可有效携带大分子物质穿过生物膜,是一良好的生物大分子运载体.
作者：严世荣；丁爱玲；朱明磊；张红梅 刊期： 2002年第04期
为寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗,利用甲醇营养型酵母Pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2 1.3kb基因.对构建的酵母分泌型表达载体pHIL-SI/HEV和pPIC9/HEV重组体,酶切线性化后转化入GSll5酵母菌,经表型鉴定,PCR扩增筛选阳性克隆,对不同表型,不同表达载体的重组株用含甲醇的培养基诱导表达,ELISA及SDS-PAGE筛选表达活性菌株,Western-blot证实表达蛋白与HEVORF2单克隆抗体有特异性反应.得到有效表达HEVORF2蛋白的菌株并初步优化表达条件.
作者：张春江；沈心亮；雷清；李启民 刊期： 2002年第04期
