玻璃酸的医学应用目前主要是利用其溶液的高黏弹性和润滑性等物理性质,新的研究表明,玻璃酸还具有许多生理、生化和药理作用,许多相关的潜在医学应用有待开发.
作者:郭学平;凌沛学;张天民;胡红杰 刊期: 2002年第05期
对Monaclin K的基本性状、用途、红曲霉Monacolin K产生菌育种、生产方法、检测方法、毒性物质问题以及生产现状进行综述.
作者:王伟平;夏福宝;吴思方 刊期: 2002年第05期
文章综述了orexin和OXR(orexin受体)的基因结构、氨基酸序列、组织分布状况及orexin的生理活性;探讨了orexn的作用机理,并对其临床应用前景作了展望.
作者:孙迎基;沈子龙 刊期: 2002年第05期
为了研究胰岛素B链羧端的自由度对于胰岛素与受体相互作用的影响.在人胰岛素B链羧端(转角区回折点B23与B24之间插入一个Gly.B23-Gly-B24人胰岛素原在大肠杆菌的表达产物占细胞总蛋白量的28%,B23-Gly-B24人胰岛素的受体活性分别是标准猪胰岛素的122%和人胰岛素的111%.说明以较高的受体结合活性获得了高纯度的B23-Gy-B24人胰岛素.
作者:陈来同;姚蒙 刊期: 2002年第05期
为了利用植物细胞作为生物反应器生产基因工程药用蛋白,将克隆的人β-趋化因子RANTES基因经Ti质粒衍生的双元表达载体导入根癌农杆菌(A.tumefaciens)菌株.通过共培养法转化烟草(N.tobacum)外植体,以抗生素筛选转化细胞并再生转基因植株.经生物素标记探针杂交确认RANTES基因的整合,用免疫斑点印迹法对重组基因表达水平进行定量测定.结果表明,人RANTES基因已在烟草细胞中成功地整合与表达,这为在植物细胞中大量生产基因重组药物打下了基础.
作者:冯丽玲;杨瑞仪;曾庆平 刊期: 2002年第05期
嗜热菌组蛋白基因序列中精氨酸密码子在大肠杆菌中的表达率极低,限制了组蛋白的大量获得.运用分子生物学技术,在传统PCR定点突变技术的基础上进行改进,参照古核嗜热菌组蛋白基因序列和大肠杆菌偏爱密码子表,设计了一对含有5个精氨酸突变密码子的单链DNA,全长为115nt,在3'端有20nt互补序列.将单链DNA在94℃变性,45℃复性,使其互补结合,72℃进行延伸反应,得到含有突变位点的组蛋白基因;再以此基因为模板设计相应的一对引物进行PCR扩增反应,得到大量组蛋白突变基因.该研究为一些序列已知,片段较小基因的多点突变提供了一种简单、易行的方法.
作者:翁梁;纪昕;王智;刘丹;马吉胜;李娜;曹淑桂;冯雁 刊期: 2002年第05期
探讨血红素的薄层色谱分析和含量测定法.将血红素配制成-定浓度的KOH甲醇溶液,点样于硅胶G板上,以4%盐酸丙酮溶液为流动相,采用λs=380nm,λr=460nm进行薄层扫描并计算含量.Rf值为0.85,标准曲线的相关系数为0.9967,精密度、重复性、回收率的相对标准偏差分别为2.7%,3.8%和3.54%.用薄层色谱法作为血红素的含量测定方法可行.
作者:周淡宜;张炜煜;阎小伟;徐水祥 刊期: 2002年第05期
对FⅧ cDNA进行分子改建,并分别克隆到表达载体中,在多种哺乳动物细胞表达体系(CHO、BHK等)成功地获得了表达.结果证实:基因的改建可以有效的提高FⅧ在细胞中的表达.FⅧ B结构域的缺失比全长FⅧ的表达量提高了3倍左右,而重链和轻链的共表达及vWF与FⅧ的共同转染使得其表达量进一步提高.与CHO表达系统相比较,FⅧ在BHK表达系统中的表达量提高了近10倍.
作者:王琪;方向东;陈淳;戚正武 刊期: 2002年第05期
为构建人激肽释放酶(human kallikrein,hk)基因真核表达细胞系,从人胎胰中用RT-PCR方法扩增了hk基因全序列及其前导肽序列,克隆到真核表达质粒pCDNA3.1中,得到含全长hk eDNA及其前导肽序列的真核表达质粒pCDNA3-hk,并用脂质体lipofectamine介导其转化到野生型CHO细胞株中,获得了能稳定表达hk蛋白的CHO细胞系CHO-hk.检测CHO细胞及其培养基中hk活性水平及培养基对兔血压的影响.结果表明,97%的hk分泌到细胞外,其中62%左右以活性形式存在,另38%以酶原形式存在.培养基浓缩液具有显著降血压作用.说明CHO-hk细胞系能分泌具完整生物活性的hk,为后续生产治疗高血压的基因工程药物打下了基础.
作者:屈艺;王正荣;陈立国;刘荣韬;肖静;尹华虎;郭惠玲 刊期: 2002年第05期
对检测脂肪酶活力的实验方法进行了研究.对检测脂肪酶活力的底物选择、底物乳化方法、检测方法等进行了比较.
作者:高贵;韩四平;王智;翁梁;王柏婧;冯雁;曹淑桂;高淑娟 刊期: 2002年第05期
用重组人巨细胞病毒(rhCMV)gp52蛋白作抗原及相应的单克隆抗体酶标记物建立捕获ELISA,检测人血清中的HCMV特异性IgM抗体.其工作浓度均由方阵滴定法确定.并进行精密度、特异性和干扰实验.用该法检测体检献血员病毒性肝炎患者及疑似CMV感染的肝炎综合症患者血清共计939份.结果gp52蛋白抗原佳浓度为lμg/ml,酶标单抗的工作浓度为1:1600,批内平均变异系数CV3.7%,批间CV7.9%.634例献血员IgM抗体阳性17例(2.7%);288例病毒性肝炎患者,阳性10例(3.5%);17例肝炎综合症患者,阳性11例(64.7%).均经免疫印迹法证实.该组合特异性强,灵敏度高,不受类风湿因子的影响,结果可靠,优于全病毒抗原构成的检测试剂.适用于临床诊断和流行病学调查.
作者:郑纪山;周宗安;邓小昭;李越希;何亮;李鹤林 刊期: 2002年第05期
比较了常用的三种提取天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)方法的提取效果,通过SDS-PAGE分析了大苞栝楼籽的蛋白组成和分子质量分布,以及大苞栝楼的根、叶、茎和愈伤组织中蛋白组成的异同,同时分析了各个器官中26ku蛋白的氨基酸组成.结果表明,Wong的方法较好;栝楼和大苞栝楼的图谱符合程度为56.3%,图谱特征系数为43.7%;大苞栝楼的各个器官的蛋白组成差异较大,其中多数为低分子质量蛋白,具有很多共同的谱带,而且,根、叶、茎和种子中都具有与TCS和核糖体失活蛋白TCK电泳行为相似的蛋白,氨基酸分析也证明了它们组成上的一致性.从而证明大苞栝楼具有潜在的药用价值.
作者:曹焕生;徐明芳;李定坚 刊期: 2002年第05期
为测定硫酸酯化螺旋藻酸性多糖单糖组成及摩尔比,并比较不同的衍生化方法的优劣,先后采用糖腈乙酸酯衍生、糖醇乙酸酯衍生及气相色谱同时测定醛糖和糖醛酸3种衍生方法,分别进行气相色谱分析.结果硫酸酯化螺旋藻酸性多糖由甲基化鼠李糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖及半乳糖醛酸组成,其摩尔比为4:6.5:2:3:1.糖腈乙酸酯衍生方法简单、操作简便,糖醇乙酸酯衍生及气相色谱同时测定醛糖和糖醛酸2种方法定量结果十分接近.
作者:张芳;尹鸿萍;王旻;郑珩;汪水娟 刊期: 2002年第05期
为了研究PKC在NIH3T3细胞中G2/M期作用,检测了PKC的激动剂1-oleoty-2-acetyl-sn-glycerol(OAG)对G2/M期关键的调控因子MPF活性变化及细胞周期进程的影响.细胞同步化处理用Aphidicolin.用PI(PropidiumIodide)染料与DNA结合,流式细胞仪检测细胞周期的改变.同时测定OAG加入后G2期PKC和MPF的活性改变.结果表明Aphidicolin同步在G1/S期的细胞,释放后在经过1-2h的恢复期后,约在7h左右到达早G2期,并在10h达到G2末期.OAG在浓度为50μmol/L,100μmol/L,150μmol/L时都可激活PKC,而CalphostinC在300nmol/L时大限度地抑制PKC活性.50μmol/L的OAG至少1150 sec没有改变细胞内钙.50μmol/L的OAG在G2期使MPF活性降低,而300nmol/L calphostin C可以使MPF活性升高.在G2早期加入OAG50μmol/L可以引起NIH3T3细胞阻滞在G2/M期交界.
作者:刘莹;王亚杰;张杰;袁莹;宗志红;于秉治 刊期: 2002年第05期
通过褪黑素(MT)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(IRI)的影响的研究,证实了MT能抗心肌缺血/再灌注损伤,并探讨其作用机制.实验采用在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的模型,观察了MT对此模型大鼠缺血期、再灌注期心律失常发生的抑制作用及再灌注结束后心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性的影响,同时用酶组织化学染色法观察琥珀酸脱氢酶(SDH)的改变.结果表明MT能明显降低缺血和再灌注后室速(VT)和室颤(VF)的发生率,显著缩短其持续时间,明显提高心肌SOD活性,显著减少MDA含量,减少血浆LDH,CK的含量,明显减轻SDH损伤性反应,从而证实它对心肌的保护作用与增强机体内源性抗氧化能力,清除氧自由基,减少脂质过氧化以及保护线粒体有关.
作者:明章银;吴基良;陈金和;汪丽华 刊期: 2002年第05期
作者: 刊期: 2002年第05期