概述了木瓜凝乳蛋白酶(EC3.4.22.6)在结构、性质、药理作用方面的研究进展以及开发前景.
作者:蔡小玲;郭勇 刊期: 2003年第03期
SARS冠状病毒是诱发SARS的主要病原体,文章综述了SARS冠状病毒基因组序列分析的新进展,SARS冠状病毒编码的蛋白酶在病毒繁殖过程中具有重要功能,可以其作为靶点进行抗SARS冠状病毒药物的筛选.
作者:李谦;王友同;郑珩;吴文俊;吴梧桐 刊期: 2003年第03期
文章综述了单抗药物用于临床肿瘤治疗的研究进展.开发一个成功的抗肿瘤单抗药物应从以下几方面考虑:(1)选择特异的肿瘤抗原;(2)制备人源化单抗以降低单抗药物的免疫原性;(3)利用抗体工程改造抗体结构以延长半衰期;(4)改进给药方式以提高抗体药物在肿瘤组织的局部浓度;(5)提高单抗药物的抗肿瘤活性;(6)进一步提高单抗药物的选择性.还简述了单抗药物抗肿瘤的可能机制及单抗药物的前景展望.
作者:刘煜;沈子龙;汤家铭;奚涛;成国祥 刊期: 2003年第03期
Cathelicidins是一族在哺乳动物中发现的含有保守的cathelin区域的抗菌肽,是宿主防御系统的重要组成部分,具有广谱且强大的抗菌活性.文章综述了cathelicidins抗菌肽家族的基因组成、结构、抗菌活性、作用机制及构效关系等.
作者:金飞燕;王旻;陈代杰 刊期: 2003年第03期
采用超临界CO2流体萃取(SFC)和水蒸气蒸馏法(SD)提取温莪术挥发油,通过GC-MS分析比较了提取物的化学成分及其相对含量,并研究了其对肺腺癌细胞SPC-A-1的体外抗肿瘤活性.结果表明,SFC法温莪术挥发油中主要抗肿瘤活性物质莪术二酮、异莪术醇明显高于SD法;SFC法温莪术挥发油具有显著的抗肿瘤活性,在浓度为62.5μg/ml时,抑制率可达62.57%,而SD法温莪术挥发油在高浓度下才表现出较弱的抗肿瘤活性,当浓度为500μg/ml时,其抑制率仅为25.79%.
作者:聂小华;敖宗华;尹光耀;陶文沂 刊期: 2003年第03期
将A4发根农杆菌感染长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)后所长出的发根(hairy-root)进行培养,比较不同营养成分、碳源及初始糖浓度、外源激素以及温度和摇床转速对发根生长及产碱的影响.结果表明,当培养基为1/2B5培养基时发根生长良好;一定范围内初始糖浓度增加,有利于发根生长和生物碱生成;加入500mg/L的L-色氨酸利于发根的生长和产碱;将发根在28℃、75r/min的条件下悬浮培养10d可获得较高产量的生物碱.
作者:刘红蕾;张玉臻;陶文沂 刊期: 2003年第03期
利用混合植物甾醇(45%β-谷甾醇,30%豆甾醇,25%菜油甾醇)作为底物筛选适合菌株Mycobacteri-um HCCB006转化生成雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)的双水相系统,并用表面活性剂对系统进行进一步的优化.经初步研究得到的佳转化系统为16%PEG20000/4%Dextran20 000/8%OP,从而使得在底物加量为1%时ADD的产量达到2.858g/L.
作者:郝雪秦;许激扬;陈代杰;戈梅 刊期: 2003年第03期
建立了快速分析测定大豆甾醇侧链降解过程中底物大豆甾醇和产物雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)及雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)的方法.采用薄板层析(TLC),在板层为硅胶60GF254,流动相为石油醚-乙酸乙酯(6:4)的条件下,成功的分离了底物与产物,从而能快速简便的监测底物的消耗与产物的生成情况.另外根据底物与产物AD与ADD在紫外区的吸收情况,利用254nm与298nm双波长测定ADD与AD的生成量.上述两种方法便于工厂对生产情况的同步检测.
作者:王风清;王敏;路福平 刊期: 2003年第03期
目的高密度培养重组细菌和高效表达重组幽门螺杆菌尿素酶A融合蛋白.优化细菌培养和重组幽门螺杆菌尿素酶A融合蛋白表达的发酵工艺条件.重组细菌的培养条件:培养温度为35℃,培养基pH值为7.0~7.5,葡萄糖浓度为0.5%~2.0%,采用合理的策略控制发酵过程代谢副产物乙酸盐浓度不高于4mg/ml.在BiofloⅢ发酵罐中,3批实验结果表明:重组细菌的平均生物量大约为60g/L发酵液(DCW),重组幽门螺杆菌尿素酶A融合蛋白平均表达量为35%左右.
作者:谈宁馨;刘社际;刘忠荣;徐琦;梁波;陈德高;吴洽庆 刊期: 2003年第03期
报道了氢化可的松生产菌新月弯孢霉的原生质体制备与再生条件.将培养22h的菌丝体用0.3mol/L的二硫苏糖醇处理20min,0.6mol/L的KCl作为渗稳剂,30℃下经0.5%新生酶234和1%溶壁酶混合液(pH5 6)酶解3.5h,原生质体释放量达到大值8.15×106个/ml,再生率为23.07%.再生菌株菌落形态不变,保留了对底物RSA的羟化能力.
作者:卢文玉;郭亚文;龚未;王敏;杜连祥 刊期: 2003年第03期
对链霉菌等10株菌种进行筛选,发现灰色链霉菌(Streptomyces griseus)YD-007菌株将左旋四氢巴马亭转化为左旋紫堇达明的转化率较高.通过碳、氮源筛选、正交实验,得到佳培养基配方为:玉米粉30g,黄豆粉10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,NaCl 5g,蒸馏水1000ml,pH7.0;转化率从6.03%提高到17.00%.研究了转化温度和时间对转化率的影响,同时比较了链霉菌细胞在不同转化液中的转化率,并选用不同pH磷酸缓冲液,确定转化适pH为pH5.0.
作者:张文伟;余伯阳;彭娟 刊期: 2003年第03期
为了提高胰岛素原的表达量,用pQE-40质粒构建了(His)6-Arg-Arg-人胰岛素原[(His)6-Arg-Arg-human Proinsulin,RRhPI]的大肠杆菌表达系统.通过培养条件的优化,在摇瓶培养的条件下,目标产物RRhPI以包涵体形式获得了高效表达,每升培养基收获湿菌体约27g,包涵体6g(干重1.8g),RRhPI约540mg.该水平已超过现有文献报道的摇瓶培养的高水平.
作者:李晓红;余蓉;曾蓉;彭先凤;杨继虞 刊期: 2003年第03期
研究浙江眼镜蛇(Naja naja atra)蛇毒的镇痛活性组分,为寻找镇痛效果好,而无成瘾性的新型镇痛药奠定基础.采用CM-Sephadex离子交换色谱和Sephadex G-50凝胶过滤色谱对浙江产眼镜蛇蛇毒中的镇痛活性组分进行分离纯化.采用PAGE IEF及HPLC等实验方法对产物纯度进行鉴定.采用SDS-PAGE法和HPLC法测定产物的分子质量,用IEF法测定产物的等电点,用小鼠热板法与醋酸扭体法考察产物的镇痛活性.结果表明眼镜蛇毒经3次柱色谱后,产物AAP经鉴定为单一组分.AAP经SDS-PAGE法和HPLC法测定的分子质量分别是7.28Mr和7.25Mr,等电点是9.58.AAP的痛阈提高百分率和扭体抑制率分别为91.3%,77.2%.眼镜蛇毒经3次柱色谱后得到具有镇痛活性的单一组分.
作者:王春晓;李新宇;王起振;刘岩峰 刊期: 2003年第03期
克隆TRAIL基因的95-281位(sTRAIL),构建表达载体,建立原核表达体系,优化诱导表达的条件.分离人外周血淋巴细胞,提取总RNA,RT-PCR,克隆sTRAIL的cDNA,构建原核表达载体,优化IPTG诱导的条件.结果:(1)克隆了TRAIL基因95-281位的cDNA,DNA测序结果与报道的一致.(2)构建了sTRAIL基因的原核表达载体,酶切结果与预期的一致.(3)转化宿主菌,优化IPTG诱导条件,发现3mmol/L,诱导3~4h表达好.sTRAIL基因的克隆及表达为下游中试发酵及纯化奠定了上游的基础,也为研究TRAIL抗肿瘤的机制提供了可能.
作者:杨芳;刘红岩;徐维明;肖红剑;龙海亭;李珺;刘云丽 刊期: 2003年第03期
鲨肝活性肽是从鲨鱼肝脏中分离纯化的一种活性多肽,对正常小鼠血清溶血素的生成无明显影响,但在1.5、0.75和0.37mg/kg时,却能部分缓解环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)对小鼠血清溶血素生成的抑制作用;在0.75~6mg/kg剂量时,能够上调环磷酰胺所致免疫低下小鼠血清IL-2的含量.在体外未发现鲨肝活性肽促进小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2.故鲨肝活性肽对免疫低下小鼠的免疫功能具有一定的正向调节作用.
作者:吕正兵;李谦;陈向东;刘昂;张玉彬;吴梧桐 刊期: 2003年第03期
依据途径工程的基本原理,为构建大肠杆菌苏氨酸高产菌林,需强化表达苏氨酸生物合成途径中的关键基因.以Ecoli MC4100染色体DNA为模板,用PCR扩增了天冬氨酸激酶基因thrA部分片段,以之为探针从基因文库中克隆得到thr操纵子,包括启动子、结构基因(thr A、thrB、thrC)、终止子.将结构基因装载于pET-Ⅱa质粒上的T7启动子下游,得到了表达质粒pTHlla-08.转化E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了高效的表达.含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明,天冬氨酸激酶的活性为含载体质粒pET-Ⅱa的对照菌的100倍.
作者:沈琼;黄雪峰;吴海珍;张惠展 刊期: 2003年第03期
采用反相高效液相色谱法,固定相为十八烷基硅烷键合硅胶,以乙腈-水(20:80)为流动相,检测波 长274nm,测定绿茶和饮料中的咖啡因含量.结果线性范围为3.9~3900ng,r=0.9999;绿茶和2种饮料的平均加样回收率分别为100.2%、100.1%和99.8%.该方法准确、简便、快速,适合绿茶和可乐型饮料中咖啡因的测定.
作者:乐健;洪战英 刊期: 2003年第03期
作者: 刊期: 2003年第03期