对深层培养裂褶菌(Schizophyllum commune Fr)所获得的裂褶菌素进行了结构研究.经凝胶柱层析,聚丙烯酰胺凝胶电泳,高效液相色谱分析裂褶菌素为均一组分,分子质量4×104u.通过完全水解,纸层析,气相色谱分析单糖组分,红外光谱,酶解反应,高碘酸氧化和固体核磁共振分析结构,证明了裂褶菌素是以葡萄糖为单一组分的β-(1-3)-D葡聚糖,其中每3个葡萄糖分子上连有一个β-(1-6)的分支.
作者：冀颐之；迟文鹤；杜连祥 刊期： 2003年第05期
通过运用半经验计算方法对α和β两类抗菌肽的抗菌活性的定量构效关系研究,获得了两个相关性较好的线性回归方程.结果显示,α多肽的活性和键合能、溶剂可及面积、极化能、氧上大负电荷相关;β多肽的活性和生成热、分子范德华面积、分子体积、极化能线性相关.logP对两类抗菌肽影响不大.在设计抗菌肽时,结构上应采用管状空间结构,性质上充分考虑其两性和两亲性,可采用正电性的赖氨酸或精氨酸与负电性的谷氨酸和天冬氨酸搭配;亲水性的丝氨酸或苏氨酸与疏水性苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸搭配,提高抗菌肽的活性.
作者：林克江；刘智华；尤启冬 刊期： 2003年第05期
采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功的将深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因导入大豆.从发芽5～7 d的大豆无菌苗切取子叶节外植体,经农杆菌浸染和共培养后,在含50mg/L卡那霉素的选择培养基上培养2～4周后,从子叶节处诱导出抗性不定芽.将不定芽转移到伸长培养基上,4～6周后长至2～3 cm高的再生苗.再将再生苗切下转入生根培养基,2～6周生根.生根后的再生植株经逐步锻炼移入花盆中,部分移栽成活的T0植株能正常开花结荚.从T0植株上收获T1种子,按株系种植.T0和T1代经PCR检测和DNA分子杂交分析,证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组内并能遗传给后代.
作者：卜云萍；王广科；胡国武；孙红妍；任勇；李航；李明春；邢来君 刊期： 2003年第05期
灰树花发酵液浓缩,醇析后得多糖粗品.经H2O2脱色,Sevag法脱蛋白,透析,DEAE Sepharose FastFlow柱层析纯化,得到灰树花胞外纯多糖GLP.HPLC检测为单一均多糖,其平均分子质量为83 000.完全酸水解后经纸层析,气相色谱分析,GLP只含有葡萄糖.经红外光谱,刚果红实验,高碘酸氧化,Smith降解分析,初步推测其结构是具有(1→6)和(1→3)β型葡聚糖.
作者：史宝军；张家骊；杨平平；聂小华；陶文沂 刊期： 2003年第05期
利用液体培养基对冬虫夏草菌丝体进行培养,在18～20℃ 160 r/min摇瓶中培养72h,可得到266g/L的湿菌体,并对天然冬虫夏草和冬虫夏草菌丝体的蛋白粗提液进行了蛋白含量,SDS-PAGE和HPLC分析.结果表明天然冬虫夏草与冬虫夏草菌丝体中水溶性蛋白含量分别占其干重的2.00%和7.24%;在12%SDS-PAGE中低分子蛋白标准的回归方程为y=5.01847-1.11588X,其相关系数r=-0.99131,由此推算出天然冬虫夏草与冬虫夏草菌丝体含有4种相同的蛋白质亚基,其相对分子质量分别为46971,51087,86681和95685;天然冬虫夏草中特有的蛋白质亚基的相对分子质量为17142及小于12372的多肽,其余的蛋白质亚基稍有差异,在天然冬虫夏草中蛋白质亚基的相对分子质量为28942,37237和58091,而在冬虫夏草菌丝体中为28658,34920和55018.水溶性蛋白经HPLC分析,可以分离出不同的蛋白峰,冬虫夏草菌丝体所含蛋白质较天然冬虫夏草简单且分离效果好.
作者：石继红；党化宁；万一；包春杰 刊期： 2003年第05期
以悬浮培养的中国红豆杉细胞株E2为实验材料,使用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)比较了中国红豆杉细胞在紫杉醇合成期与非紫杉醇合成期基因的表达差异,并对紫杉醇合成期细胞中出现的特异条带进行了回收和克隆,经Northern杂交验证,从中获得一紫杉醇合成期特异表达的cDNA克隆TS2,对其进行了测序、序列同源性分析和读框分析.结果表明,TS2长度为371bp,与已知基因没有同源性,它位于3'端非翻译区.对此基因的进一步研究有可能揭示它在紫杉醇生物合成中所扮演的角色.
作者：胡国斌；樊廷俊；梅兴国 刊期： 2003年第05期
利用微生物转化的方法,选取桔青霉(Penicillium citrinum)为转化菌株,对头孢呋辛酯转化产率等方面进行了研究.采用枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]作为检测菌株检测转化产物,结果表明,桔青霉能产生稳定的具抗菌活性的转化产物,且重现性好,转化产物的平均产率71.9%.高效液相色谱检测证明转化产物为头孢呋辛.
作者：陈向东；汪辉 刊期： 2003年第05期
研究了酵母菌乳糖酶中试制备工艺包括发酵、菌体破壁、酶液精制等.以2%乳糖、2%葡萄糖、2%玉米浆、0.5%酵母膏、1.5%尿素配方作为发酵培养基,通过对发酵各参数的优化控制,在500L规模发酵罐中进行发酵,单位体积酶活达13.8U/ml.此外,还建立了较大规模酵母菌细胞壁快速破壁方法,以及简便的乳糖酶提取制备工艺.整套工艺操作简便,成本低廉且无须添加任何大型设备,酶的总提取收率在67%以上.该酶制品在6℃低温条件下可在较短时间内有效水解乳制品中的乳糖,降解率达70%以上.
作者：谭树华；高捷；海迪勒；尚新燕；高向东；吴梧桐 刊期： 2003年第05期
通过液体及平板溶菌活性测定,证明了灰色链霉菌(Streptomyces griseus)RX-17发酵液中存在对变链球菌(Streptococcus mutans)Ingbritt有强力溶解作用的物质-RX-17溶菌酶.产酶培养基碳、氮源适配比为蔗糖3%、大豆蛋白胨1.25%、牛肉膏0.2%;适产酶温度为33℃;高溶氧水平对酶的产生有利.溶菌特异性试验证实了RX-17溶菌酶对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、乳脂链球菌(S.cremoris)、保加利亚乳杆菌(Lactoba-cillus bulgaricus)、短乳杆菌(L.brevis)、产氨短杆菌(Brevibacterium ammoniagenes)及铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)等多种G+、G-细菌均有良好的溶解作用.
作者：赵昕；任光文；屠晓平；张玉臻 刊期： 2003年第05期
利用毕赤氏酵母SMD1168构建huIFNα-2b分泌型高效表达工程菌株,以提高huIFNα-2b表达量和生物比活性,增强临床治疗效果和降低临床应用的毒性副作用.将克隆修饰的huIFNα-2b基因插入pGAPZα-A之GAP启动子下游位点,构建成含α-factor信号肽的重组表达载体,转入毕赤氏酵母(Pichia pastoris)SMD1168,构建成分泌型表达huIFNα-2b的酵母工程菌株.SDS-PAGE分析表明,该工程菌株huIFNα-2b表达量占菌体分泌总量的50%以上,表达量为100～120μg/ml;MTT法测定纯化样品的生物比活性为6.69×108IU/mg蛋白～1.11×109IU/mg蛋白,并通过柱层析分离纯化了huIFNα-2b,纯度达99.7%,回收率达15%～20%;Western blotting分析表明表达的huIFNα-2b具有与天然huIFNα-2b相同的免疫原性.
作者：周鹏；郭安平；沈文涛；黎小瑛；梁国栋 刊期： 2003年第05期
基质金属蛋白酶是一组重要的蛋白水解酶类,可以水解细胞外基质的多种成分.近年来其与心肌肥厚及扩张型心肌病的关系逐渐成为研究的热点.基质金属蛋白酶是治疗心肌肥厚和扩张型心肌病的潜在的、重要的药物作用靶点.
作者：沈祥春；钱之玉 刊期： 2003年第05期
抗体酶是一类以过渡态类似物为半抗原通过诱导免疫系统产生的具有类似天然酶催化活性的免疫球蛋白.它可促进许多用普通化学方法很难完成,或者天然酶尚未能催化的新奇转变.近,抗体酶也显示出在许多领域的潜在应用价值.文章扼要介绍了抗体酶的设计策略,制备方法及应用前景.
作者：陈年根；刘新泳 刊期： 2003年第05期
白细胞介素2在治疗某些癌症方面有重要作用.文章介绍重组白细胞介素2的基因工程和下游加工过程.
作者：余顺惠 刊期： 2003年第05期
基因工程药物带来了治疗学的新突破,在临床治疗中日益发挥举足轻重的作用.为了适应现代生物技术的发展,掌握基因工程药物的有关知识,促进基因工程药物合理用药.对该院1999～2002年基因工程药物的临床应用进行了统计分析.基因工程药物临床应用品种逐年增加,销售金额不断增长,临床用途越来越广泛.基因工程药物疗效确切、使用安全、不良反应少,在糖尿病、心血管疾病、病毒感染性疾病、类风湿性关节炎、创面修复和抗肿瘤等方面具有广泛的应用前景.
作者：徐国华 刊期： 2003年第05期
FADD是Fas受体和部分TNF死亡受体家族成员介导信号通路中的胞浆死亡信号衔接蛋白.FADD含有2个结构域,即C端的死亡结构域(DD)和N端死亡效应结构域(DED),DD结构域与Fas及TNF受体家族中的其它受体中的DD结构域结合,接受凋亡信号.DED结构域则招募并激活caspase-8酶和细胞凋亡信号.FADD不仅在细胞凋亡途径中发挥重要作用,而且还与别的非细胞凋亡途径相关.
作者：李文斌；华子春 刊期： 2003年第05期
