用正交试验对血管抑素生产菌株E coli pQE32-AGN的发酵培养基成分进行了优化,优化后的合成培养基组成为:无水葡萄糖1%,(NH4)2SO4 0.4%,NaCl 0.2%,KH2PO4 0.3%,K2H PO4 2%,MgSO40.01%,盐酸硫胺素0.4 mg/L,核黄素0.1 mg/L,盐酸吡哆醇0.6 mg/L,D-泛酸0.3ml/L,硫酸亚铁30 mg/L,硫酸锂30mg/L,硫酸锰25mg/L,醋酸锌20mg/L,硫酸铝9mg/L,优化后的生物量达到9.0g/L以上,比采用LB培养基培养的生物量提高了一倍多.同时,优化培养基对工程菌目的蛋白的表达、溶解及复性未产生不利影响.
作者：邵玲莉；周楠迪；金坚；许正宏；田亚平 刊期： 2004年第02期
构建人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的植物表达载体pCA1302NSF-tPA.将重组载体转入根瘤农杆菌GV3101中,通过叶圆盘法转化烟草.转化植株经PCR鉴定整合有t-PA基因,通过荧光显微镜可检测到绿色荧光蛋白(GFP)的表达.
作者：王庆华；王永中；陈宇坤；张新元；叶波平；奚涛 刊期： 2004年第02期
利用琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺梯度胶电泳及等电聚焦电泳对从螺旋藻中分离出的酸性多糖进行了研究.结果表明,螺旋藻酸性多糖的琼脂糖凝胶电泳呈单一斑点,与其他几种硫酸化多糖相比,迁移率有较大差异;利用聚丙烯酰胺梯度胶电泳可按分子质量大小将其分成3个组分,该结果与高效液相检测结果比较,两者基本吻合;螺旋藻酸性多糖的等电聚焦电泳呈单一条带,分布范围在pH值6.67～7.72.
作者：郑震寰；尹鸿萍；叶波平；王旻 刊期： 2004年第02期
用正交试验法对硫酸锌诱导的兔肝锌-金属硫蛋白(zn-MT)的提取工艺进行优选,以原子吸收法测得锌提取量和差示紫外分光光度法测得巯基活性为评价指标,选用L9(34)正交表进行正交实验.考察影响提取Zn-MT的四个因素分别为:pH值8.6的Tris-HCl缓冲溶液浓度、温度、用量和-20℃预冷乙醇-氯仿(1:0.08)混合液与缓冲溶液体积比.所得佳方案为:每克兔肝加3 ml 80℃,pH值8.6的0.05 mol/L TrisHCl缓冲溶液,匀浆,再按每克兔肝加2 ml乙醇-氯仿(1:0.08)混合液,摇匀,提取.佳方案所得提取液经凝胶色谱法初步分离得Zn-MT收率约为4.2 mg/g肝.
作者：彭新君；徐丽霞；刘平安；吴萍 刊期： 2004年第02期
抑肽酶作为天然非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂,用途广泛.目前抑肽酶制品主要从牛肺中提取.用基因重组技术,将抑肽酶结构基因导入表达载体pGrxA,并在抑肽酶基因上游引入FXa识别位点.将重组质粒转化至OrigamiTM中,用异丙基硫代β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,产物以可溶性形式存在于胞内.将菌体超声破壁和离心,融合蛋白经分子筛层析和离子交换层析纯化后,用FXa切割该融合蛋白可得到N端不含多余氨基酸残基且与天然构像一致的活性抑肽酶.
作者：王淼；谭树华；吴梧桐 刊期： 2004年第02期
以软骨蛋白多糖为底物,木瓜凝乳蛋白酶的适反应温度为60°C(pH=7.0),适pH值7.0(37℃).在pH值7.0、反应温度为37℃的条件下,木瓜凝乳蛋白酶的Km值为11.11 mg/ml,Vmax为0.03 mg/(min·ml).一定浓度下的NaCl和Ca2+对木瓜凝乳蛋白酶均有激活作用,并研究了其它金属离子对酶活性的影响.
作者：邓静；赵树进 刊期： 2004年第02期
目前认为真菌中脱落酸生物合成是经甲羟戊酸、焦磷酸法尼酯的直接合成途径.高等植物中脱落酸的生物合成除可能存在直接途径外,更主要的是经类胡萝卜素等四十碳前体降解转化的间接合成途径,然而真菌中是否存在类胡萝卜素为前体的间接生物合成途径尚未见报道.该文报道了在脱落酸产生菌培养过程中添加类胡萝卜素及维生素A等物质,能够促进脱落酸的合成,表明在真菌中脱落酸的生物合成也可能存在经类胡萝卜素降解的间接途径,并可通过添加类胡萝卜素等前体的方法提高脱落酸发酵产量,降低生产成本.该实验还应用正交设计法考察了前体及营养物质的适添加浓度,经优化脱落酸液体发酵产量可比对照提高122.3%.
作者：梁研；郑珩；吴亮；王旻 刊期： 2004年第02期
研究基因工程菌E.coli ASl. 357在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性.以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱和水蛭素的表达量以及比活等方面进行考察,以评价工程菌的稳定性.重组水蛭素Ⅲ工程菌在传代50代的过程中质粒稳定性高,传代10代内质粒稳定性(ST)为98%,且表达稳定,表达产物可达发酵液可溶性蛋白总量的60%,产物的抗凝血酶活力大于2.0×103ATU/ml,传代50代的菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态.重组水蛭素Ⅲ工程菌菌种稳定.
作者：韦利军；阮期平；郭海；吴梧桐 刊期： 2004年第02期
动态动力学拆分扩展了制备单一手性化合物的工艺方法.文章介绍了动态动力学拆分的反应原理,并举例说明了该技术在制备单一手性化合物中的应用与潜力.
作者：程瑛琨；刘成柏；于大海；王智 刊期： 2004年第02期
配体-受体系统介导的药物靶向性研究在过去10年中得到了很大的发展.配体介导的主动靶向能够将药物定向运送到血管腔隙、细胞表面和细胞内.使用的配体包括抗体、蛋白质、肽、脂蛋白、糖类以及其他内源性分子.文章介绍了药物靶向研究中使用的多种配体-受体系统,包括运铁蛋白受体、脂蛋白受体、细胞因子受体、凝集素受体、清道夫受体和叶酸受体.
作者：谢云飞 刊期： 2004年第02期
文章讨论了现存各种抗AIDS药物及其作用与研究进展,文末附表作了概括,为抗HIV药物研究提供参考.
作者：石彦；郝勃 刊期： 2004年第02期
冠心病与低密度脂蛋白(LDL)浓度过高有着密切关系,低密度脂蛋白血液净化已成为一种有效的治疗严重高胆固醇血症方法被广泛采用的.文章综述了低密度脂蛋白血液净化的方法及其净化材料研究概况.
作者：张迎庆；干信；谢笔钧 刊期： 2004年第02期
通过亲和筛选获得的TPO模拟肽和功能筛选获得的非肽类模拟物均具有刺激巨核细胞增殖、成熟和增加血小板数目的功能,而且两者体外的生物活性均与TPO相当.这些结果可能为化疗引发的血小板减少症的药物治疗增加新的选择.
作者：叶祥忠；程度胜 刊期： 2004年第02期
包涵体蛋白质复性是生物工程下游技术中的一个重要问题.利用传统的方法复性复性率低和步骤繁琐,无法用于大规模生产.近出现的层析复性方法,具有较强的优势.其原理是将层析技术应用于蛋白质复性和纯化,使变性蛋白质在层析柱上折叠为正确的空间构象,在洗脱的同时实现部分纯化.在层析技术中分子排阻色谱法由于操作简便,复性效率高,成为研究的重点.文章就分子排阻色谱法的研究情况作一综述.
作者：车婧；韩金祥 刊期： 2004年第02期
作者： 刊期： 2004年第02期
作者： 刊期： 2004年第02期
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