采用高效液相色谱法,以C18柱(3.9 mm×150mm,5 μm)为固定相,乙腈-异丙醇(4:1,v/v)为流动相,流速1.0 ml/min;检测波长210 nm,测定鸡蛋蛋黄中胆固醇含量,结果胆固醇浓度在0.05～0.8 g/L范围内与色谱峰面积呈线性关系,相关系数r=0.999 2,高、中、低3个浓度的加样回收率为98.26%～100.2%,日内精密度(RSD)(3.8%).4种鸡蛋蛋黄的胆固醇平均含量分别为11.61 mg/g蛋黄、10.49 mg/g蛋黄、9.82 mg/g蛋黄和9.46 mg/g蛋黄,该方法适用于蛋黄胆固醇的快速测定,具有准确、快速、简便、重现性好等优点.
作者：齐永秀；高允生；费洪荣；曲晓兰；高艳霞 刊期： 2005年第04期
为了保留蜂毒肽抗类风湿关节炎活性,降低溶血性和致敏性,设计合成蜂毒肽的片段,观察它对兔免疫性关节炎的治疗作用.采用多肽合成法合成蜂毒肽结构中亲水性片段,经高效液相色谱及质谱分析,确定合成多肽片段的氨基酸组成.建立家兔卵蛋白性关节炎模型,进行溶血性试验、致敏性试验以及动物模型治疗实验.结果:蜂毒肽片段溶血率<5%,致敏率<8%,动物模型治疗有效率可达到70%.实验证明蜂毒肽片段的合成可有效地保留蜂毒肽抗类风湿关节炎活性,减低蜂毒肽的强溶血活性及致敏活性.
作者：于美丽；李晓华；方淑昌；薛钧尘；宋继昌；王勇 刊期： 2005年第04期
文章针对ATP生产的现场检测过程,建立了一个以离子交换树脂为分离介质的色谱分析方法,并对其分析效果进行了试验研究.色谱条件为:D201树脂柱(O6 mm×500 mm),流动相分别为pH值3.0的乙酸溶液和pH值9.0、1.5 m01/L的NaCl溶液,检测波长254 nm,流速10 ml/min,室温23±2℃.检测重复性较好,在0.1～8 g/L范围内,ATP浓度与ATP.峰面积呈较好线性关系,r=0.997 7;平均回收率为98.60%,整个色谱过程可在30 min内完成.
作者：王龙耀；阮莉姣；谢小瑜；童张法；雷爱祖 刊期： 2005年第04期
SARS(严重急性呼吸综合征)是由一种新型的人类冠状病毒引起的.由于SARS冠状病毒3CL蛋白酶在病毒的复制翻译中起关键作用,所以成为抗SARS药物设计的关键靶标之一.该研究中,利用以pET28a为载体的高效原核表达系统,克隆表达出SARS冠状病毒3CL蛋白酶,然后由NTT-Ni2+亲和层析柱对表达的蛋白进行分离纯化.3CL蛋白酶在大肠杆菌表达系统中的成功表达为今后进一步筛选抗SARS病毒药物奠定基础.
作者：叶沁媛；郑珩；王旻；吴梧桐；叶波平；郑苏婷 刊期： 2005年第04期
人工合成了编码AD7c-NTP的基因,并将其中的6种密码子GGA AGG AGA ATA CTA CCC分别突变成大肠杆菌偏爱密码子GGT CGT CGT ATC CTG CCG,PCR扩增后克隆到表达载体pMAL-c2上,构建表达质粒pMAL-AD7c,重组质粒导入E.coli BL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导实现了MBP-AD7c-NTP融合蛋白在工程菌中的高效表达,细胞裂解液经Amylose-resin亲和层析、DEAE-Sepharose离子交换层析以及Su-perdex 200凝胶过滤层析,得到了电泳纯的融合蛋白.纯化的融合蛋白免疫家兔制备了兔抗MBP-AD7c-NTP融合蛋白的抗血清,利用该抗血清及点杂交技术,初步分析了10例AD疑似患者的尿样,结果表明5例疑似患者的尿样呈阳性,另5例呈阴性.
作者：李荣贵；汪靖超；刑伟；王帅；赵仁亮；吴光耀 刊期： 2005年第04期
热水抽提法提取盐泽螺旋藻多糖,DE-52柱层析纯化,Sepadex G-100柱层析鉴定其纯度,获得纯化组分SP.通过体外细胞实验发现纯化的多糖可以选择性的抑制肿瘤细胞的生长.通过对肿瘤细胞形态的观察,发现在SP作用下,细胞出现凋亡小体;结合Hochest-33342染色,初步认为多糖是通过促进肿瘤细胞的凋亡来抑制肿瘤细胞的生长.
作者：于光；马宇翔；张成武；李朝军 刊期： 2005年第04期
建立熊去氧胆酸胶囊中有关物质的含量测定方法.采用高效液相色谱法,色谱柱为Merck Superspher 100 RP-18;流动相为乙腈-0.001 mol/L磷酸二氢钾溶液(50:50)(用磷酸调pH2.0);流速1.2 ml/min;检测波长为205 m;柱温40℃.熊去氧胆酸胶囊中有关物质胆酸、7-酮基胆石酸、鹅去氧胆酸、胆石酸在25 min内洗脱并完全分离.胆酸在0.138 9～0.277 7 mg/ml间线性关系良好,r=1.000 0,进样浓度为0.013 89 mg/ml时仍能检出;7-酮基胆石酸0.106 7～0.213 5 mg/ml间线性关系良好,r=1.000 0,进样浓度为0.010 67 mg/ml时仍能检出;鹅去氧胆酸在0.264 3～0.528 5 mg/ml间线性关系良好,r=1.000 0,进样浓度为0.026 43 mg/ml时仍能检出;胆石酸在0.026 86～0.053 72mg/ml间线性关系良好,r=1.000 0,进样浓度为0.006 71 mg/ml时仍能检出.方法回收率、精密度均符合要求.本法操作简便,结果准确可靠,适用于熊去氧胆酸胶囊中上述有关物质的含量测定.
作者：陈华；梁蔚阳 刊期： 2005年第04期
采用体外培养幼鼠心肌细胞过氧化氢损伤模型,检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶(MSD)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)含量,并用流式细胞仪及DNA电泳检测细胞凋亡,观察复方三七川芎软胶囊135,67.5,13.5 mg/L预处理组对过氧化氢损伤的原代培养心肌细胞的保护作用.结果:乳鼠心肌细胞经0.1 mmol/L H2O2损伤后LDH、MSD、SOD、MDA、心肌细胞凋亡率均与对照组有显著性差异(P<0.01),135,67.5 mg/L预处理组与模型组比较LDH活性降低、MSD和SOD活性提高、心肌细胞凋亡率降低,差异显著(P<0.05).
作者：毛晓伏；高美风；周成林；吴梧桐；卢振初 刊期： 2005年第04期
在裂殖酵母基本培养基的基础上,通过正交设计,优化了培养基6个组分;优化后的培养基,摇瓶发酵,目的蛋白产量在26～51 mg/L之间,发酵罐的批次发酵,产量在51～102 mg/L之间.
作者：钱坤；吕正兵；文良柱；周玉燕；顾林；沈子龙 刊期： 2005年第04期
盐藻粉经过热碱水提,乙醇醇沉等方法从中得到盐藻多糖(PD),进一步纯化后得到一个组分PDS,通过TLC、IR、UV、GC、HPLC、高碘酸氧化、Smith降解等技术方法对PDS初级结构及性质进行了测定;糖含量为85.50%,硫酸根含量为4.63%,相对分子质量为548 082.83 u,由4种单糖组成,单糖之间主要是1,2-、1,3-、1,4-连接,以β-异构为主.
作者：谢强胜；尹鸿萍；陈昕；谢春红；王旻 刊期： 2005年第04期
探讨鲨鱼肝细胞再生因子(Shark Hepatic Regenerative Factor,SHRF)完全抗原的偶联方法和兔抗体的制备.分别考察了戊二醛(GA)一步法,戊二醛二步法和1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳化二亚胺(EDC)法3种偶联方法对SHRF与BSA的偶联效果,并将制备的完全抗原免疫新西兰白兔.实验表明碳化二亚胺法具有反应条件温和,偶联效率高等优点,并得到了高效价的兔抗体,为SHRF的ELISA方法的建立奠定了基础.
作者：张奉国；魏复雷；孙迎基；廖建民；沈子龙 刊期： 2005年第04期
利用AP-PCR技术对来自于海南东寨港红树林自然保护区的5种海桑属植物的遗传多态性进行了分析.由选用的46条随机引物共扩增出908个DNA片段,其中有403个DNA片段分别为不同种海桑所特有的,占总扩增条带数的44.4%,呈现出较高的多态性,它们是海桑属植物不同种间潜在的分子标记.以NT-SYSpc分析软件对这5种海桑属植物进行了聚类分析,结果表明:5种海桑属植物可聚类为3个组,其中Ⅰ组有海桑和拟海桑,Ⅱ组有无瓣海桑和海南海桑,Ⅲ组仅包括卵叶海桑一种,与传统的植物分类学研究结果略有不同,其原因有待进一步认识.
作者：蔡春海；金国虔；于凌杰；吴梧桐；李萍；叶波平 刊期： 2005年第04期
合成了一种新型的蛋白质及多肽胍基的PEG化试剂,其化学本质为mPEG单取代的乙酰丙酮,用于改造蛋白质及多肽的溶解性、稳定性、免疫原性和蛋白质多肽药物的体内循环时间.该方法提供的PEG化试剂主要针对蛋白质及多肽中精氨酸的胍基,具有广阔的应用前景.
作者：何明磊；熊玉春；魏东芝 刊期： 2005年第04期
单克隆抗体对相应的抗原有高度特异性.因此,利用单抗作为特异性载体制成导向药物(免疫偶联物),对于治疗肿瘤有巨大潜力和引人瞩目的前景.文章对烯二炔类抗肿瘤抗生素,特别对新制癌菌素、力达霉素和calicheamicins及其单克隆抗体免疫偶联物的研究进展作了概述.
作者：李丽；顾觉奋；吴梧桐 刊期： 2005年第04期
从蚯蚓中提取的各种活性成分主要具有纤溶酶、抗肿瘤、抗菌作用.文章主要综述了蚯蚓活性成分的抗肿瘤作用及其各种机制的研究进展.
作者：朱锋荣；何执中 刊期： 2005年第04期
单克隆抗体药物特异性高、结构与性质均一稳定,其制备技术日益完善,临床应用越来越广泛,已有18种产品上市并用于人类疾病的诊断和治疗,100多种单克隆抗体药物进入l临床研究阶段;单克隆抗体药物研究在生物技术药物中占有突出位置.文章综述了其国内外研究开发情况.
作者：姜倩倩；刘京贞；苏瑞强 刊期： 2005年第04期
许多微生物是以非核糖体方式合成生物活性肽.生物活性肽的合成以及它们的序列专一性是由一定数目按顺序排列的蛋白质模板所决定的.因此可以构建一种编码肽合成酶系的杂交基因,从而改变肽合成酶系对底物专一性.这里介绍一种两步重组法(two-stepmethod)在基因水平取代相应的蛋白质模板中的一个氨基酸激活功能域.这种技术显示了将基因工程方法用于肽类抗生素生物合成的潜力.
作者：高向阳；陈念；林壁润 刊期： 2005年第04期
DNA疫苗技术在近十年来取得了显著的进步,而它在肿瘤预防和治疗领域的优势,使得抗肿瘤的DNA疫苗成为当前医药界的一个研究热点.文章主要介绍了一些作为DNA疫苗免疫靶点的肿瘤抗原,包括已经鉴定并进入临床试验研究和潜在的,可作为治疗靶点的肿瘤抗原,并着重介绍了如何解决由于肿瘤抗原作为一种自身抗原而导致的抗肿瘤DNA疫苗所面临的免疫原性较弱和抗肿瘤效果不理想这两个主要的问题,包括:加入分子佐剂,主要是一些细胞因子而有效提高抗肿瘤DNA疫苗的免疫原性;通过使用与肿瘤抗原基因种属不同,但具有一定同源性的基因而打破肿瘤抗原的外周免疫耐受.后主要从肿瘤疫苗免疫的靶点入手,介绍了能够有效增强DNA疫苗抗肿瘤作用的几种新的策略.
作者：陈怡琼；刘景晶 刊期： 2005年第04期
