采用响应面法对丙酮丁醇梭菌的发酵条件进行了优化,确定了厌氧发酵佳条件为温度38℃、pH值6.0、热休克时间1.5 min.在此条件下进行实验,所得氢气含量高达10.5 L/L,丙酮含量为5.94 g/L,正丁醇含量为9.41 g/L.
作者:林赛珍;徐敏;章宗铭;周牡丹;陈奇剑;金志华 刊期: 2006年第02期
将重组E. coli水蛭素HV3和BSA交联后免疫豚鼠和家兔,DEAE-纤维素柱层析纯化IgG.用这两种抗体和酶标二抗羊抗兔IgG-HRP建立三抗体夹心酶联免疫吸附法,测定重组E. coli水蛭素HV3的含量.本测定方法的线性范围为0~2 ng/ml,灵敏度为0.04 ng/ml.建立的三抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组E.coli水蛭素HV3具有良好的精密度、回收率、灵敏度和特异性.
作者:郭丰;谭树华;吴梧桐 刊期: 2006年第02期
比较螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后体内外抗肿瘤及免疫活性.采用MTT比色法研究药物在体外对人肿瘤细胞株的抑制作用,促进正常小鼠脾淋巴细胞的增殖活性以及对荷瘤小鼠NK和CTL细胞活性的影响.采用移植性肿瘤实验方法考察了药物对小鼠S180肉瘤的抑制作用.结果显示,螺旋藻多糖(NPSP)对肿瘤细胞株几乎无细胞毒作用,硫酸酯化螺旋藻多糖(SNPSP)对肿瘤细胞株具有显著的细胞毒作用,其中对SMMC-7721人肝癌细胞株抑制率高达50%.NPSP50 mg/kg对小鼠S180肉瘤无抑制,相同剂量的SNPSP对小鼠S180肉瘤的抑制率达35.42%.NPSP具有促进脾淋巴细胞增殖作用,但对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应无促进作用,SNPSP促进脾淋巴细胞增殖作用较NPSP增强,同时对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应也具有明显的促进作用.NPSP和SNPSP均能促进荷瘤小鼠NK细胞和CTL细胞活性,其中SNPSP促进CTL细胞活性较NPSP增强.
作者:盛玉青;尹鸿萍;李海涛;徐士君 刊期: 2006年第02期
利用菌种Lactobacillus helveticus(ATCC 10697)所产生的N-脱氧核糖转移酶,以底物鸟苷和6-氯嘌呤为原料通过碱基交换合成6-氯嘌呤核苷,并优化了反应条件,25 m1的锥形瓶装有反应液10 ml,结果显示佳反应条件如下:底物适反应浓度为30 mmol/L(鸟苷)和10 mmol/L(6-氯嘌呤),菌体添加量8%~10%(湿重),反应温度40℃,0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH值6.0),摇床转速120 r/min,反应时间24 h,6-氯嘌呤核苷收率可达到51.6%,具有较好的应用前景.
作者:樊华伟;傅绍军;朱利民 刊期: 2006年第02期
为解决CHO-C28细胞在大规模培养中易增厚、大片脱落、不易维持以及HBsAg滴度低的问题,对细胞培养液pH值和新生牛血清(NCS)浓度进行调整.结果表明,CHO-C28细胞在2个月维持时间内未出现明显增厚和大片脱落,HBsAg表达量明显提高.该实验为大规模培养CHO-C28细胞提供了依据.
作者:寇桂英;林杰;张平;徐枫;姚伟 刊期: 2006年第02期
文章详细报导了工业化生产高纯度胆红素的一种新工艺,用DMSO:CH2Cl2=5:1的溶剂溶解胆红素,通过活性炭吸附工序除去极性杂质,优化DMSO与水混合比例向滤液中加水析出胆红素固体,抽滤,得纯品,用甲醇超声进一步纯化,再用氯仿精制,得到纯度在99%以上的高纯度胆红素.该工业制备工艺简单、易操作、制造成本低,并且可得到高纯度产品(99%以上),该工艺适合于工业化生产.
作者:徐利锋;关鹏;朱彦卓;周云鹏;刘革萍;曾晓非;王永贵 刊期: 2006年第02期
为建立一种快速敏感的SARS冠状病毒核酸酶免PCR检测方法,根据SARS冠状病毒基因序列,自行设计引物、杂交探针,优化反应体系和探针共价交联,采用简套式PCR扩增SARS-CoV的cDNA.其产物通过包被特异性探针的微孔板捕获杂交、比色检测,以构建的假病毒颗粒作为内对照,监控操作的全过程,同时,与现有的可靠SARS检测方法进行比较.通过对几种方法的临床检测比较,说明简套式PCR检测方法是SARS临床早期诊断快速、敏感、重复性好的有效方法.
作者:景建洲;李振勇;屈凌波;赵玉芬 刊期: 2006年第02期
从专属性、灵敏度及实际操作的可行性等几个方面,对TAME法和纤维蛋白平板法进行了比较研究.结果:TAME法灵敏度高,操作简便,适合作为常规的分析检测手段,而平板法虽专属性高,却操作繁琐,适宜于定性分析.结论:利用TAME法与平板法各自的优点,将两者结合起来作为纳豆激酶的活性检测方法,可达到高效灵敏、专属性强的目的.
作者:熊迎新;尹宗宁;杨超;孟延发 刊期: 2006年第02期
针对抗生素污染日益严重的现状,对医用、饲用、农用和工业生产中抗生素污染对环境微生态所造成的影响进行了系统的分析,从而辨证地认识其危害.
作者:王兰 刊期: 2006年第02期
研究发酵液中R-扁桃酸的离子交换分离工艺.采用711-OH型阴离子交换树脂从发酵液中分离R-扁桃酸时,适动态吸附条件为上柱液pH值6.0~7.0、R-扁桃酸浓度70~80 mmol/L、苯乙酮酸浓度8~10 mmol/L和流速0.5 Bv/h,适动态解吸条件为2% HCl为解吸液、解吸流速1.5 Bv/h.采用本工艺,发酵液中R-扁桃酸的总提取率为90.3%.
作者:陈剑锋;史迎莹;陈浩;肖美添;毕鸣波;郭养浩 刊期: 2006年第02期
为了提高白术药材的品质和产量,对组织培养条件下诱导获得的白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)四倍体株系,进行了田间农艺性状的鉴定,同时采用苯酚-硫酸法和高效液相色谱法测定了其水溶性糖和白术内酯的含量.结果表明:优选出的14个多倍体株系表现出典型的多倍体性状,根部药材质量均有较大幅度提高,有8个株系的水溶性糖、白术内酯I、白术内酯Ⅲ的产量和含量高于二倍体对照,并初步优选出有效成分含量及产量均高于对照的D69、D88、E72 3个优良品系,为今后进一步选育出产量高品质优的优良白术品种展示了很好的应用前景.
作者:唐宁;高山林 刊期: 2006年第02期
用基因工程技术表达的SARS-CoV S蛋白片段和N蛋白片段的融合蛋白作抗原免疫Balb/c小鼠,将免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合,经ELISA法筛选阳性克隆及测定效价,用免疫印迹法进行特异性鉴定.终获得2株(1F11和3D2)能稳定分泌抗SARS-CoV融合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞.其培养上清的ELISA效价分别为1:1024和1:512;腹水效价分别为:1×10,2×10-5.1F11株识别融合蛋白上的N抗原表位,3D2识别其上的S抗原表位.该单抗可望成为快速诊断SARS-CoV感染的特异性抗体.
作者:郑纪山;李越希;唐祖明;高健;周宗安;邓小昭 刊期: 2006年第02期
实现羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中的可溶性表达,并对表达产物进行激活和纯化,得到活性CPB.采用摇瓶发酵,对诱导温度,诱导时间,诱导剂IPTG的浓度进行优化,促成其可溶性表达;优化酶解激活条件,提高粗酶液比活.粗酶液用DEAE-FF离子交换柱和Octy卜FF疏水柱两步纯化.结果:实现可溶性表达的佳条件为15℃下,0.1 mmol/LIPTG诱导20 h.此条件下得到的粗酶液经激活后两步纯化,得到比活为128.2 u/mg protein的较纯的活性CPB,活性回收率达39%.
作者:张映新;李素霞;杨梓;袁勤生 刊期: 2006年第02期
将细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg.)延伸因子(Elongation factor 1,E卜1)与pGEX-6P-1构建成重组质粒并进行表达、纯化及对其特性进行鉴定.将构建好的EF-1/pGEM-T经双酶切后获取目的基因片段,定向重组于表达载体pGEX-6P-1并转化大肠杆菌(Escherichia coli)E.coli BL21,IPTG诱导表达,用蛋白亲和层析柱GSTrap FF对表达产物进行纯化,特异性蛋白解离酶PreScissionTM Protease酶切融合蛋白从中获取重组Eg.EF-1;SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物.获得的Eg.EF-1/pGEX-6P-1/E.coli BL21菌株,诱导表达融合蛋白和纯化分离得到的31 ku Eg.EF-1均能被细粒棘球蚴天然抗原免疫的兔多克隆抗血清识别.证明成功构建出具有有效表达的Eg.EF-1/pGEX-6P-1菌株,初步证实重组蛋白具有较好的抗原性.
作者:王健;赵嘉庆;王娅娜;丁淑琴;张焱;王洁;王淑静;高岭;赵巍 刊期: 2006年第02期
运用盐酸控制解聚的方法,通过单因素考察和正交试验优化,得到了平均相对分子质量约为10 000的低分子螺旋藻多糖(LNPSP),用硫酸化试剂氯磺酸-吡啶合成3种不同取代度的LNPSP硫酸酯(SLNPSP1,SLNPSP2,SLNPSP3),采用体外抗肿瘤实验测定3种硫酸酯化物对人肝癌细胞SMMC7721的活性.结果显示:低分子螺旋藻多糖的硫酸酯化物具有良好的体外抗肿瘤活性,与未修饰的LNPSP相比有显著性差异,且随着硫酸化程度的增高抗肿瘤活性也相应提高.
作者:乐晓桐;尹鸿萍;王旻;徐士君 刊期: 2006年第02期
采用超速离心、分级饱和硫酸铵沉淀法等从猪心肌中成功的分离出了肌凝蛋白,并应用DEAE-Sephadex A-50离子交换层析对心肌肌凝蛋白进行了进一步的纯化,Fiske-SubbaRow法测定蛋白质的活性,Bradford法测定蛋白质的浓度.用变性、非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳及质谱分析对蛋白质进行了精确的鉴定.研究表明,蛋白质粗提产量约为15mg/g,经过纯化后的蛋白质中基本不含杂质蛋白,活性为0.22 Piμmol/(mg·min),变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白质为3条带,分子质量约是200 ku,27 ku和20 ku.与标准肌凝蛋白同时进行电泳显示条带相同.非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白质为一条带,此条带经过质谱分析准确的证明为心肌肌凝蛋白.结果表明以上方法成功的从猪心中提取了高纯度高产量心肌肌凝蛋白,为肌凝蛋白在临床和科研中的应用打下了基础.
作者:王青青;苑海涛;王玉林 刊期: 2006年第02期
TGF-β3是一种多功能的生物活性调节因子,广泛调控细胞增殖与分化、机体的生长和发育、组织修复、各种癌变等生理和病理过程,具有重要的生物学功能和广阔的临床应用前景.文章综述TGF-β3的生物学特性、功能及临床应用研究进展.
作者:宋江南;李校堃;苏志坚;吴志玲;黄亚东 刊期: 2006年第02期
以生物技术药物制剂的新技术和新剂型为着眼点,综述3高分子材料在生物技术药物制剂中的研究进展.大量优良的高分子材料被作为生物技术药物的载体,提高了生物技术药物的稳定性和生物利用度,使药物在治疗上更加有效和安全,病人也更易使用.高分子材料的发展带动了生物技术药物制剂的发展.
作者:项琪;姚崇舜;肖健;黄志峰;李校堃 刊期: 2006年第02期