为研究马齿苋多糖组分的性质,采用水提醇沉方法从马齿苋全草中提取粗多糖,通过Sevage法脱蛋白质后,再经DEAE-纤维素柱层析和Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化得到马齿苋精多糖POPⅡ,由醋酸纤维薄膜电泳和Sephadex G-200葡聚糖凝胶过滤法鉴定为均一性组分,化学定性反应和光谱鉴定表明POPⅡ不含蛋白质和核酸、不含酚类物质,但含有糖醛酸的非淀粉类多糖,其相对分子质量为12 100.POPⅡ完全酸水解后经薄板层析、气相色谱分析(结合半乳糖醛酸含量),确定它由阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成,其中阿拉伯糖:半乳糖的摩尔比为1.00∶1.05,其组成中半乳糖醛酸含量为9.18%.红外光谱分析表明POPⅡ具有典型的多糖吸收峰,结构中存在β-型糖苷键.
作者：朱丹；牛广财 刊期： 2007年第02期
优化了石刁柏细胞L-天冬酰胺酶发酵条件并对其粗提进行了探索.其佳产酶条件为:适培养基为MS+蔗糖(35 g/L)+6-(苄胺基)嘌呤(0.01 mg/L)+α-奈乙酸(3 mg/L)适pH值为6.4、适温度为27℃、适转速为110 r/min、接种量为5.0×104 个/ml.在此发酵条件下,L-天冬酰胺酶发酵液酶活力的峰值可达到22.37 U/ml、产酶稳定期持续7～8 d,利用吴氏提取工艺可以得到回收率为30.8%,纯化倍数为9.85,比活力为0.55 U/mg的L-天冬酰胺酶.
作者：张永和；洪亚辉；兰时乐；胡雄贵；黄丽华；吴娜 刊期： 2007年第02期
利用富硒酵母菌的新陈代谢和菌体繁殖,通过对发酵培养基组成及发酵条件的优化,如对C源、N源、硒浓度、PH、装液量以及发酵时间等因素进行了探讨.在实验室条件下制备出高硒酵母并得到优发酵条件,优化后所得到富硒酵母的生物量、细胞硒含量以及总硒含量比优化前都提高了1倍多.
作者：牛海涛；汤燕花；谢必峰 刊期： 2007年第02期
研究6种大孔吸附树脂对万古霉素的静态吸附与解吸性能,从中选出适树脂进行动态吸附实验,研究上样液浓度、pH值、上样体积流量对树脂动态吸附量的影响及洗脱过程.结果:选择XAD-16树脂进行动态吸附实验.适合的上样液浓度、上样液pH值、上样液体积流量分别为2.09 mg/ml,9.o和2.5 ml/min.以10%乙醇/0.1%盐酸/水为洗脱剂,以1.5 ml/min的流速进行洗脱即可基本将万古霉素从树脂上解吸下来.结论:万古霉素发酵液经XAD-16树脂吸附洗脱后,洗脱液中万古霉素高效液相色谱峰面积百分比可达85.61%.
作者：张一；杜连祥；马书章；张颖 刊期： 2007年第02期
用氧化型极低密度脂蛋白(ox-VLDL)制备小牛主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,探讨首乌复方冲剂对该模型的作用.用MTT法测定不同剂量未修饰极低密度脂蛋白(VLDL)和ox-VLDL分别作用的VSMC,以及首乌复方冲剂处理的模型组的光密度值(A);用流式细胞仪测定对照组、模型组和用药组的细胞周期.VLDL和ox-VLDL作用下的VSMC与各自的对照组MTT的A值相比,(P＜0.01);不同剂量用药组,除低剂量组外,其他3个剂量组与模型组的MTT的A值相比,分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01.模型组与对照组相比,细胞分裂增殖指数明显增高;用药组与模型组相比,细胞分裂增殖指数降低.表明首乌复方冲剂能抑制ox-VLDL引起VSMC的增殖.
作者：吴慧平；戴晓明；陈亮；陈文垲 刊期： 2007年第02期
研究从催吐萝芙木中提取利血平的结晶工艺.催吐萝芙木根粉经粗提、沉淀生物碱、溶解沉淀、沉淀胶质、粗结晶、重结晶,制得利血平.通过单因素法实验,对可能影响利血平提取的因素进行了考察.确定了适宜的利血平结晶工艺.得到的利血平纯度达98.4%,提取总收率29.8%.本结晶工艺所得利血平的纯度和收率均较高,适宜于工业生产.
作者：孙蕾；冯蕾；周叶；钱秀萍；赵凤生 刊期： 2007年第02期
产朊假丝酵母尿酸酶由基因工程菌表达,文章对重组蛋白的亚基相对分子质量、适作用温度、适作用pH及其热稳定性和pH稳定性等理化性质进行了考察.成功构建了小鼠高尿酸血症动物模型,并用于重组尿酸酶的初步体内药效学研究.结果:经SDS-PAGE检测重组尿酸酶亚基的表观相对分子质量为32.4 k.酶的适作用温度和pH分别为40℃和8.0,且在pH6～12,温度20℃～60℃条件下比较稳定.初步体内药效学研究结果表明,重组尿酸酶可以显著降低模型小鼠体内的血尿酸水平.
作者：李晓娟；李依芯；陈建华 刊期： 2007年第02期
研究将东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch)抗神经兴奋肽Ⅱ(ANEPⅡ)基因序列定向克隆到植物表达载体pBI121中,构建了植物表达载体pBI-ANEPⅡ.采用三亲交配法和液氮冻融法将重组质粒pBI-ANEPⅡ导入农杆菌中,获得了工程菌pBI-ANEPⅡ/LBA4404.通过农杆菌介导的叶圆盘法转化烟草叶片外植体,在含卡那霉素的培养基上进行转化体的筛选,获得了转基因烟草.通过PCR检测、RT-PCR和Western blotting鉴定,检测结果表明ANEPⅡ蛋白在转基因烟草植株中得到表达.
作者：宋永波；盛钰；王轶；来琳琳；张景海 刊期： 2007年第02期
实现产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)嘧啶核苷磷酸化酶(Pyrimidine-nucleoside phosphorylase,PyPNase)基因在大肠杆菌中的高效表达.用来源于产气肠杆菌的核苷磷酸化酶N末端序列与NCBI中公布的已知序列进行比对,设计一对引物,以该菌株基因组DNA为模板扩增出PyPNase基因.定向克隆到PET-28a(+)载体后转化到表达宿主大肠杆菌BL21中,筛选阳性克隆并测序,然后在LB培养基中优化发酵条件.结果:目的基因片断长度为1 302 bp.表达产物经SDS-PAGE和酶活测定表明PyPNase基因在大肠杆菌中获得活性表达,43 ku处有表达蛋白.37℃培养2 h至对数生长中期,降温到31℃,0.1mmol/L IPTG诱导5 h获得大酶活力为512.3 U/mg,为出发菌株的17.2倍.重组PyPNase的成功表达为今后大规模生产5-FUR打下了基础.
作者：魏元刚；倪孟祥；葛亚文；吴梧桐 刊期： 2007年第02期
对腹足纲软体动物罗曼蜗牛Helix pomatia的氧运输蛋白(βC-血清蛋白)的功能单位d,e和f中的一个半胱氨酸-组氨酸之间的硫醚桥键进行了研究.以该βC-血清蛋白为载体,通过限制性胰蛋白酶水解,产生片段a-c,ef,以及功能单位d,g,和h.以片段ef降解后的产物为研究对象,通过亲合色谱的分离纯化,得到功能单位e和f.通过对羧甲基化功能单位d的胰蛋白酶和链霉蛋白酶水解,得到一个含有硫醚桥键的4肽.同样在吡啶乙基化功能单位e和f的胰蛋白酶水解产物中也分离得到一个含有相同硫醚桥键的小肽.因此一个半胱氨酸-组氨酸之间硫醚桥键的存在似乎是腹足纲软体动物罗曼蜗牛Helix pomatia氧运输蛋白(βC-血清蛋白)功能单位的一个共有的特征.
作者：蔡皓；Gielens Constant；Préaux Gisele 刊期： 2007年第02期
利用基因工程技术对红色糖多孢菌进行改造,提高红霉素产率.用PCR技术克隆vgb,采用电穿孔法与红色糖多孢发酵菌染色体整合,鉴定采用Western blot与Southern blotting分析.VHb活性分析采用一氧化碳(CO)差示光谱法,红霉素效价测定采用管碟法.结果克隆了含vgb的红色糖多孢菌表达质粒(pBlueⅤ),筛选了重组红色糖多孢菌株.与原始菌株比较,重组菌株细胞发酵密度分别为1.37与2.82,红霉素效价分别为3.8与5.1,相当于重组菌株提高红霉素体积产率约29%.重组红色糖多孢发酵菌提高了红霉素产率,对解决抗生素工业和基因工程菌高密度发酵有良好的应用前景.
作者：吴益民；王洪军；孙艳；王立强；张志强；冯立；杨青 刊期： 2007年第02期
通过用HPLC对氢化可的松发酵液不同提取次数所得产物进行分析,对不同杂质含量的提取物用不同的方法进行分离纯化,所得氢化可的松成品的含量提高1.0%,收率提高6.0%,生产周期缩短20%.
作者：孙丽丽；董艳苓；袁东超；杨云沛 刊期： 2007年第02期
采用正交试验设计方法,进行了杭白菊试管苗快速繁殖技术的优化,同时进行了组织培养条件下杭白菊同源四倍体诱导与鉴定技术的研究.结果表明,诱导愈伤组织的优外植体为叶片,适培养基为MS+KT(激动素)2.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.2 mg/L;确定了杭白菊佳繁殖培养基为MS+BA(6-苄基嘌呤)0.2 mg/L+IAA(吲哚乙酸)0.05 mg/L+NAA0.2 mg/L;佳生根培养基为1/2MS+IAA 0.2 mg/L+ABT(生根粉)0.3 mg/L.在诱导四倍体的试验中,秋水仙碱浓度对存活率有显著影响,诱导杭白菊同源四倍体的佳条件是在2%二甲基亚砜和浓度为0.2%的秋水仙碱中浸泡36 h,诱导率高达13.33%.通过根尖细胞染色体鉴定,共获得11个同源四倍体株系.
作者：赵慧娜；高山林；陈兰兰 刊期： 2007年第02期
通过对穿膜肽TAT-PTD构效关系的分析和结构改造,构建能有效进入血脑屏障且低毒的新穿膜肽.该研究用分子克隆技术构建出表达型载体pET28a-T1-GFP,重组质粒在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白His-T1-GFP,经组氨酸亲和层析纯化后,用荧光显微镜和免疫组化的方法来检测His-T1-GFP在活体动物小白鼠体内的跨膜递送作用.经测序证实成功构建了表达型载体pET28a-T1-GFP,融合蛋白His-T1-GFP在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达率为20%.经组氨酸亲和纯化,得到纯度达85%的融合蛋白.SDS-PAGE和Western Blotting显示纯化蛋白为His-T1-GFP,动物实验表明融合蛋白His-T1-GFP能够有效跨过血脑屏障,主要分布在大脑皮层和海马回.该研究成功地构建了一种新的穿膜肽-T1,为其携带有生物活性的大分子物质到达脑部进行蛋白治疗奠定了基础.
作者：王怡；蔡绍晖；姜丽娟；李校堃 刊期： 2007年第02期
3-甾酮-△1-脱氢酶(KSDH)属于黄素蛋白酶类,位于细胞膜上,能在3-甾酮化合物的C1和C2之间引入双键,提高原有底物的抗炎活性,在甾体药物的生产上发挥着重要作用.文章对已报道的不同微生物来源的KSDH进行比较分析,着重介绍了关于KSDH基因表达和敲除方面的研究,并对该酶在甾体转化方面的应用做一简要总结.
作者：李玉；田琳；刘逸寒；路福平 刊期： 2007年第02期
高亲和性多聚体(Avimers)是新发展的一种由多个亲和单体聚集在一起的治疗性蛋白质,它包含了多个对靶分子的亲和结构域,每个结构域都具有结合某种靶点的能力,Avimers也可以同时对一个或多个靶点进行结合.在结构上,Avimers跟抗体是没有关联的,但它将同样具有与抗体相似的生物活性作用,因而在某种程度上可以作为抗体的替代物.由于Avimers对目标物具有高亲合性、高专一性,且低分子质量和低免疫原性,在一定程度上可以弥补传统抗体治疗所带来的局限性,因而非常有希望出现于临床应用中.文章试从Avimers的结构特征、功能特性、设计方法和作用机理等方面阐述其目前的研究现状,同时展望了它的应用的前景.
作者：骆静辉；方雪恩；许宁一；吴敏 刊期： 2007年第02期
胭脂虫红色素在国外已广泛应用于食品、化妆品、药品及纺织品等领域,在我国有着很好的发展前景.文章综述了胭脂虫红色素的种类、制备及应用方面的研究,为胭脂虫红色素的进一步研究和利用提供了参考.
作者：王素芳；俞超；王忠华 刊期： 2007年第02期
文章对细胞穿透肽PEP-1在大分子物质体内外跨膜转导中的应用进行了综述,为进一步研究PEP-1介导有潜在治疗价值的大分子物质跨膜转导进行疾病的蛋白治疗提供了依据.
作者：董晓；王家宁 刊期： 2007年第02期
