探讨TAT-穿透生物膜的效应,为临床上应用生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供实验基础.按分子克隆常规操作构建pET28a-TAT-EGFP重组表达载体,转导入宿主菌BL21后用IPTG诱导TAT-EGFP融合蛋白表达,经镍金属鳌合层析柱纯化获得融合蛋白.通过腹腔注射到小鼠体内,观察TATEGFP融合蛋白穿透各组织生物膜及达到各组织的时间、浓度.腹腔注射TAT-EGFP,30 min后各主要脏器经检测均有荧光出现,4 h各组织荧光强度达大值.证明在生物大分子的N-末端加上TAT具有穿透力的蛋白转导区肽段形成的融合蛋白可有效穿透细胞膜到达各组织.
作者:严世荣;闫莹;孙军;宗义强;王小波;屈伸 刊期: 2007年第05期
初步比较小檗碱静脉注射及鼻腔给予在大鼠血浆和海马组织中的药代动力学参数的差别.120只大鼠随机分为小檗碱静脉注射6 mg/kg和鼻腔给予9 mg/kg组,分别在给药后12个时间点采血和分离海马组织,采用反相高效液相色谱内标法,检测血浆和海马给织中小檗碱含量,并利用DAS软件计算其药代动力学参数.结果表明,小檗碱血药浓度-时间曲线经拟合二房室模型,鼻腔给药的生物利用度3.05,在海马中的直接转运率为52.663%
作者:巴拉;袁艳红;寇俊萍;余伯阳 刊期: 2007年第05期
在大鼠的离体小肠标本中比较几种多肽、蛋白质和氨基酸的吸收率.主要通过两种方法计算肽在小肠中的吸收率:一是通过测定肽吸收前后的蛋白质含量,另一种是运用HPLC测定肽吸收前后分子质量图谱.结果:小肠能吸收多种肽(白蛋白肽、大豆肽、菜籽肽、花生肽和胶原肽),被吸收的肽的相对分子质量多在1000以内.小肠对肽的吸收率高于对氨基酸和蛋白质的吸收率.小肠各段均具有吸收肽的功能.该研究为肽类生物药物的口服途径吸收提供了实验依据.
作者:吴冬梅;唐良艳;黄志玲;杨明;戴鑫杰;余承高;陈栋梁 刊期: 2007年第05期
为了建立稳定的玄参ISSR-PCR反应体系,本试验采用5因素(dNTPs、Taq DNA聚合酶、MgCl2、引物及模板)5水平正交设计筛选PCR体系,并利用单因子梯度进一步优化反应体系各因素浓度和扩增程序(退火温度、延伸时间和循环次数).结果表明:在20μ1反应体系中含10×buffer,0.3 mmol/LdNTPs,0.5~1.0 UTaq DNA聚合酶,2.0 mmol/L MgCl2,0.2μmol/L引物,150ng模板,扩增效果好.PCR扩增程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,50~61 ℃退火(退火温度随引物不同而变化)45 s,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸7 min.从而建立了适合玄参的ISSR-PCR反应体系,为采用ISSR-PCR分子标记技术研究参种质资源遗传多样性提供了技术依据.
作者:赵志新;梁宗锁;姜在民;薛媛菲;杨永宙 刊期: 2007年第05期
为研究口服鲨鱼肝再生因子脂质体对四氯化碳(CCl1)和硫代乙酰胺(TAA)对小鼠急性肝损伤的保护作用,采用CCl4和TAA致小鼠肝损伤,观察肝组织切片,测定生化指标,检测小鼠给药后血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)活力.结果口服鲨鱼肝再生因子脂质体能明显减轻CCl4和TAA所致小鼠急性肝损伤模型的肝组织损伤作用,降低ALT、AST活力.因此口服鲨鱼肝再生因子脂质体对急性肝损伤也有明显的保护作用.
作者:李谦;叶波平;戎晶晶;庞太宇;马迅;吴梧桐 刊期: 2007年第05期
优化筛选极难溶性的氮氧供体型非甾体抗炎药ZLR-8自乳化制剂的处方.采用HPLC法测定ZLR-8在各溶剂中的溶解度,初步确定自乳化制剂中的油相、表面活性剂和助表面活性剂;采用水滴定法制备伪三相图,确定自乳化制剂中各组分的应用范围;再根据这些范围,采用Design Expert软件进行D-优化设计得到了ZLR-8自乳化制剂的优化处方,其自乳化性能及乳液粒径的预测值与实测值基本一致.D-优化设计对于ZLR-8自乳化制剂的处方优化是一种有效手段.
作者:李莉;高缘;张建军;钱帅;周建平;张奕华 刊期: 2007年第05期
采取薄层层析法分析单糖组成,高效液相色谱法测定分子量及其分布,高碘酸氧化、Smith降解等方法确证糖苷键类型,紫外、Tricine-SDS-PAGE和β-消除等方法确证结合态蛋白的存在,利用柱前衍生化高效液相法测定氨基酸的组成,对薄芝糖肽(Ganoderma Capense glycopeptide,GCGP)结构组成进行研究.结果:GCGP的多糖部分由葡萄糖组成,连接方式为1→6和1→2两种,含有结合态蛋白,氨基酸组成分析显示GCGP富含谷氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、半胱氨酸,碱水解结果表明GCGP含微量色氨酸.糖肽连接方式初步定为O-连接.
作者:陆莹;金宇灏;张慧慧;倪扬林;高向东 刊期: 2007年第05期
为研究五倍子提取物对活性氧自由基的清除作用,采用电子自旋共振(ESR)和自旋捕集技术直接测定不同浓度的五倍子两种方法提取物对1,1-二苯基苦基苯肼自由基的清除作用.五倍子两种提取物具有良好的清除1,1-二苯基苦基苯肼自由基的作用,在实验条件下,五倍子水提取物清除DPPH自由基的IC50为0.414 7 mg/L,五倍子醇提取物清除DPPH自由基的IC50为0.858 6 mg/L.实验结果显示,五倍子中多酚类物质具有较强的抗氧化活性.
作者:于敏;杨春荣;陈帅 刊期: 2007年第05期
通过PCR技术从pMD18-T/hu-bFGF质粒中扩增出hu-bFGF基因,并将其克隆到pGEM-T Easy克隆载体中.经测序鉴定后,目的基因通过XhoⅠ和XbaⅠ酶切后,以正确的阅读框插入到pGAPZα-A的编码α-factor信号肽序列的下游,构建成pGAPZα-A/hu-bFGF重组分泌表达载体.表达载体用BlnⅠ线性化处理后电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,转化子经Zeocin抗性筛选、菌落PCR鉴定、SDS-PAGE复筛获得分泌表达hu-bFGF的工程菌.Western Blot结果表明:重组蛋白能够与兔抗人bFGF抗体发生特异性反应,具有良好的抗原性.对工程菌培养条件的优化表明:以麦芽糖为碳源、培养基起始pH值为6.5、培养96 h时重组蛋白的表达水平高.
作者:韦雪芳;林育泉;周鹏 刊期: 2007年第05期
从人工培样的灰树花子实体中,经过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂和Toyopearl HW-75分子筛分离纯化得到一种多糖.运用紫外扫描,薄层层析,高效液相色谱法进行纯度鉴定和红外光谱、核磁共振进行结构鉴定.结果表明,在经过分离纯化后得到了一种α葡聚糖.经过初步药效学实验证明这种多糖可以有效降低KKay小鼠体内血糖含量,并且能够较长期的控制小鼠血糖水平.
作者:马迅;雷红;李谦;高美风;孔毅;吴梧桐 刊期: 2007年第05期
建立适合功能基因分析的浙贝母Fritillaria thunbergii Miq.鳞茎总RNA的提取方法,将为后续与药效成分相关功能基因的分析奠定良好的工作基础.本研究通过紫外分光光度法、非变性琼脂糖电泳法以及DDRT-PCR方法比较异硫氰酸胍法、改良的异硫氰酸胍法、改良的SDS法和改良CTAB法提取浙贝母鳞茎总RNA的质量.结果表明,通过改良的CTAB法提取出的总RNA的完整性好(28 s/18 s约为2),纯度高(其A260/A280和A260/A230分别为1.95和2.30),以其为模板进行DDRT-PCR分析时能获得清晰的差异条带.通过本研究建立的改良CTAB法可于浙贝母鳞茎总RNA的提取,并可为其它植物鳞茎的总RNA提取提供参考.
作者:胡晓立;金国虔;陈鹏;叶波平;李萍 刊期: 2007年第05期
文章针对近几年量子点(Quantum Dots,QDs)的发展趋势,综述了几种特征性的量子点制备方法,其中包括沉淀法,溶胶-凝胶法,水热法等,及其在生物医学、材料科学等方面的应用.通过运用比较的方法对量子点的优点及劣势进行了阐述.量子点又可称为半导体纳米微晶体(semiconductor nanocrystal),它是一种由Ⅱ-Ⅵ簇或Ⅲ-Ⅴ簇元素组成的稳定的、溶于水的、尺寸在1~100 nm之间的纳米晶粒.近年来,半导体量子点由于其独特性质越来越受到人们重视,其研究内容涉及物理、化学等多个学科,已经成为一门新兴的交叉学科.作为一种新型的荧光材料,与传统的有机染料分子相比,量子点具有多种优势,其中大优点在于有丰富的颜色,因此可以作为生物体系的荧光探针.这些优良的光学特性使量子点在生物化学,分子生物学,药品筛选等研究中有极广阔的应用前景.
作者:李丹;严拯宇 刊期: 2007年第05期
对近年来化学修饰硫酸酯化多糖的制备,构效关系及其抗HIV病毒活性的研究进行综述.用化学方法对多种来源的天然多糖进行不同程度的硫酸酯化或去硫酸酯化,研究主链结构、支链、分子量、硫酸基取代度、硫酸基取代位置对化学修饰硫酸酯化多糖体内外抗HIV活性的影响,以及硫酸酯化多糖抗HIV活性的作用机理.
作者:王樱华;黄文龙;张惠斌 刊期: 2007年第05期
G蛋白偶联受体具有重要的生理功能和病理意义,已成为一类重要的药物靶点.针对靶标G蛋白偶联受体从大量化合物中筛选出理想的药物,就需要开发特异且灵敏的高通量筛选体系.真核酵母细胞具有易操作、培养条件简单稳定、基因组学研究透彻、外源蛋白表达工具丰富多样、检测分析方法成熟等优点,使它成为一种理想的药物筛选工具.文章对酵母表达G蛋白偶联受体用于构建药物高通量筛选模型的研究现状和发展前景做综述.
作者:杨洋;陈家琪;杨文博;白钢;朱旭东 刊期: 2007年第05期
主要论述人类基因组拷贝数变异与新药研究开发的进展.参阅近年来文献,对基因拷贝数变异、基因拷贝数变异图谱与疾病关联的研究及重大疾病新药研究开发的进展进行综述.人类基因组拷贝数变异(CNVs)或称拷贝数多态性(CNPs)是人类基因组变异研究的新发展.首次综合性的人类基因组的拷贝数变异图谱为基因结构和人类疾病研究提供了一个重要的资源,为新药的研究开发开拓了更加广阔的前景.
作者:陈执中 刊期: 2007年第05期
磁性纳米粒子由于独有的特性在医药中有着多种用途.其中独特的特性是磁响应性,利用这一特性磁性粒子被应用于药物载体、磁性分离和细胞的分选.近年来由于其可作为对比剂用于磁共振成像、作为热疗介质用于癌症热疗,并且可应用于磁力组织工程而引起研究者们的广泛关注.具有独特特性的功能性纳米磁性粒子的这些应用将更进一步促进医药生物技术的发展.该综述主要介绍磁性纳米粒子在磁性分离与磁性转染、磁力组织工程、药物靶向载体、核磁共振、肿瘤热疗中的应用.
作者:王晶;徐玉清;王文秀 刊期: 2007年第05期
作者: 刊期: 2007年第05期
作者: 刊期: 2007年第05期