药用植物内生真菌资源丰富,具有潜在的应用前景.利用内生真菌发酵实现生物活性物质的工业化生产,可以提高其产量,同时有利于珍稀、濒危药用植物资源的保护,对减少野生药用植物多样性的破坏具有重要意义.文章综述了近年来国内外药用植物内生真菌及其次生代谢产物的研究概况和新进展,并对研究中存在的问题进行了讨论及展望.
作者：张黎光；魏希颖；马彩霞 刊期： 2011年第05期
多孔微球作为一种药物新剂型,在药物新制剂的研发以及新剂型的改造方面应用广泛.多孔微球材料来源丰富,如天然高分子材料,无机材料,合成大分子聚合物等.作为一种新型缓/控释给药载体,微球具有保护药物免遭破坏、与某些细胞组织有特殊的亲和性、控制药物释放速度、延长药物作用时间、减少药物不良反应及降低用药量等优点,还可用于特定组织和器官的药物靶向释放等.由于多孔微球具有巨大的比表面积和孔体积,药物可吸附在多孔微球的表面或进入孔道内部,根据机体需要被做成速释或缓释制剂而发挥药效.该文综述了几种典型的多孔微球材料研究概况及其在生物医药领域中的应用,并对其发展前景进行展望.
作者：杨晓霞；栾玉霞；蔡晓青；庞建梅；姜悦 刊期： 2011年第05期
蛋白质和多肽类药物具有良好的选择性和生物活性,已成为治疗众多疾病的首选药物.由于胃肠道内酶的降解作用以及肠道粘膜的低通透性,蛋白质和多肽类药物口服生物利用度极低,其常规给药一直以注射为主.为了使蛋白质和多肽类药物能够广泛应用于临床,研究人员对蛋白质和多肽类药物口服给药系统做了大量研究.目前用于提高蛋白质和多肽类药物口服生物利用度的方法主要有微粒给药系统、内源性细胞转运系统、应用酶抑制剂和黏附给药系统等.文章就这些方法在蛋白质和多肽类药物口服给药中的应用进行了综述.
作者：王西龙；田法；姚文兵 刊期： 2011年第05期
莽草酸代谢途径是芳香族氨基酸合成过程中的一段共同代谢途径,广泛存在于植物和微生物中.莽草酸途径的代谢产物莽草酸、奎尼酸和没食子酸均含有多功能的六碳环状结构以及3个不对称的碳原子手性中心,可以在化学修饰下形成一系列具有潜在药理学活性的衍生物,广泛应用于医药工业.文章着重介绍莽草酸代谢途径的相关产物及其衍生物在抗病毒、抗肿瘤、抗菌、抗炎及抗血栓等方面的应用.
作者：林军；胡海峰；胡又佳；朱宝泉 刊期： 2011年第05期
基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases,MMPs)是与肿瘤相关的一个蛋白酶家族,这个家族拥有29个成员,它们广泛参与肿瘤细胞的生长、侵袭和转移以及血管生成过程.基质金属蛋白酶7(MMP7)由于其结构特点和生理活性,被认为是这个家族中重要的成员之一.在MMPs广谱抑制剂临床实验均不理想的情况下,对MMP7与肿瘤关系的深入研究,有助于更好的针对MMP7的肿瘤药物的研发.文章介绍了MMP7在肿瘤生长、侵袭转移和肿瘤血管生成中相关作用机制,并对MMP7在肿瘤诊断和治疗中的新研究进展做了简要综述.
作者：章冬银；孙冰丽；顾月清 刊期： 2011年第05期
文章归纳并讨论了抗菌肽的来源及分类、作用及其分子机制、应用领域、基因表达策略和应用前景等.
作者：刘石宝；倪孟祥；罗学刚 刊期： 2011年第05期
为了利用基因工程技术高效制备具有治疗Ⅱ型糖尿病功能的垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)衍生物RMBYLL,并在体外研究其生物学效应,采用基因重组技术表达重组肽RMBYLL,纯化、制备并鉴定重组肽RMBYLL后,利用特定细胞系和Western-blot等技术,检测RMBYLL对VPAC1、VPAC2和PAC1受体的选择性和激动活性,以及重组肽RMBYLL对胰岛素受体介导的信号传导终效应物-葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响.实验结果表明:利用重组肽技术制备的RMBYLL的Mr为3.901k,纯度大于95％,其产率为18.7 mg/(L发酵产物)；制备的RMBYLL可与VPAC2受体特异结合并显著促进VPAC2-CHO细胞cAMP的产生,其受体半激活浓度(EC50)为0.90 nmol/L,目的肽RMBYLL可显著增强3T3-L1脂肪细胞GLUT4的表达,阳性实验组是对照组的1.91倍.由此表明,利用本研究确立的表达、纯化策略可实现高活性RMBYLL的高效制备,应用前期构建的含有特定受体的CHO细胞和3T3-L1脂肪细胞模型,可方便有效地进行相关药物肽的体外生物学效应研究.
作者：马义；叶祖禄；罗天杰；徐文娜 刊期： 2011年第05期
将-环糊精的2位羟基进行硒化得到的产物(2-SeCD)作为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的一种人工模拟酶具有广阔的应用开发前景.为了对其进行进一步的研究及生产,需得到大量的产物.在原有的研究基础上,将中试放大实验的剂量扩大为小试实验的50倍,在7次工艺成熟的中试放大实验中获得了大量的2-SeCD.通过碳氢元素分析、红外光谱分析、核磁共振分析、质谱分析等表征实验验证了放大实验所得产物的结构正确,并测定其活力为5.2 U/mol.在2-SeCD对细胞的生物学效应实验中,发现在2-SeCD浓度较低的条件下可降低细胞死亡率而在浓度较高的条件下却抑制细胞生长.通过形态学观察与DNA ladder检测发现高浓度的2-SeCD可诱导Hela细胞凋亡,并经凋亡因子caspase-3的相对活力检测确定此凋亡是由线粒体caspase激活途径诱发的.
作者：王程；梁冬雪；吕绍武；龚平生；沈娜；吕莉敏；赵杨；徐亚维；赵刚；牟颖；罗贵民；闫岗林 刊期： 2011年第05期
对传统的根癌农杆菌冻融法转化条件进行优化,研究了根癌农杆菌EHA105和LBA4404的菌株生长状态、CaCl2浓度、质粒加入量、二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇(PEG4000)对质粒pBI121-Ctube转化根癌农杆菌EHA105和LBA4404的影响.结果表明:EHA105比LBA4404更容易接受外源质粒,两株农杆菌在Ca2+浓度为0.06 mol/L时,感受态转化能力佳.OD600分别为0.5和0.4时,EHA105和LBA4404的转化效率较高.10 μg的pBI121-Ctube质粒会降低转化率.低浓度的DMSO和PEG4000均可以提高转化率,浓度过高会抑制农杆菌转化甚至产生毒害作用.在初步优化的感受态细胞中,添加DMSO和PEG4000(4％)的EHA105和LBA4404感受态细胞,转化率比没有DMSO和PEG4000制备的佳农杆菌感受态细胞转化效率增加了28.6和22.3倍(P＜0.01),结果表明该法比传统的优化效果更加有效.
作者：王学全；沈晓；何赟绵；任天年；吴梧桐；奚涛 刊期： 2011年第05期
探讨重组鲨肝刺激物质类似物(r-sHSA)对CCl4急性肝损伤模型的保护作用.采用CCl4花生油溶液(0.15％,ip)诱导小鼠急性肝损伤,用改良赖氏法测定血清ALT、AST、MDA水平,并观察病理变化.结果显示r-sHSA能显著降低CCl4所致小鼠ALT和AST升高,恢复AST/ALT比值,降低MDA的含量.病理切片显示r-sHSA能明显减轻CCl4对肝组织的损伤.r-sHSA对CCl4急性肝损伤小鼠具有一定的保护作用.
作者：杭永付；张晓园；薛晓燕；王颖；叶波平；丁选胜 刊期： 2011年第05期
为了研究葛根素单体和葛根提取物中的葛根素在大鼠肝微粒体中的代谢是否存在差异,建立微粒体孵育体系.采用高效液相色谱法测定葛根素在肝微粒体代谢系统中的含量,并应用GraphPad Prism 5.0软件分析数据,计算酶促反应动力学参数.在体外代谢系统中,葛根素单体的酶促反应动力学参数Km为(0.93±0.17)μmol/L,Vmax为(93.59±2.82) nmol/min·mg,CLint(Vmax／Km)为(100.6±1.07) mL/min·mg；葛根提取物中葛根素的相应的动力学参数分别为(1.02±0.09)μmol/L,(22.48±1.53) nmol/min· mg和(22.04±1.72) mL/min·mg.葛根素单体和葛根提取物中的葛根素在大鼠肝微粒体的代谢存在明显的差异,葛根素单体的代谢速度快于葛根提取物中的葛根素的代谢速度.结果提示中药提取物中的其它成分可影响有效成分单体的代谢过程.
作者：刘莹；王国丽 刊期： 2011年第05期
将薏苡仁添加到茯苓发酵罐液体发酵培养基中组成药性培养基,薏苡仁可促进茯苓的生长.文章研究了以薏苡仁为基质的茯苓发酵罐补料液体发酵,确定了佳的补料时间和补料量.在佳补料液体发酵工艺下,茯苓菌丝体产量达15.09 g/L,茯苓胞外多糖产量达7.52 g/L.
作者：李羿；李晨；游元元；钟世红 刊期： 2011年第05期
研究马尾松花粉多糖硫酸酯化前后对小鼠脾细胞内游离钙离子的影响及作用机理.应用氯磺酸-吡啶法将马尾松花粉多糖进行硫酸化修饰,采用钙离子荧光探针Fura 2 -am测定修饰前后的两种多糖对小鼠脾细胞内游离钙离子浓度.马尾松花粉多糖经硫酸酯化后可显著提高脾细胞内钙离子浓度,而酯化前作用不明显.特异性L型钙通道阻滞剂维拉帕米可部分抑制酯化多糖促钙离子浓度升高的作用.在外钙为零时,酯化多糖仍可小幅度提高脾细胞钙离子浓度.马尾松花粉多糖经硫酸化修饰后可通过引发外钙内流和内钙释放两条通路提高脾细胞钙离子浓度.
作者：刘媛；赵红；蔡云；夏瑜；耿越 刊期： 2011年第05期
对北极放线菌Streptomyces sp.MLA-21的发酵条件进行优化,提高发酵液中抗肿瘤活性部位的产量.以发酵液对肺癌A549细胞的抑制率(IR)作为观测指标,利用响应面分析法对通过单因素实验和Plackett-Burman设计筛选出培养基初始pH值、黄豆浸出物含量,可溶性淀粉含量等关键因素进行优化.建立二次回归模型.得到菌株MLA-21发酵的优条件为KNO3 1.0 g/L,可溶性淀粉23.04 g/L,黄豆浸出物7.1 g/L,K2HPO40.5 g/L,MgSO40.5 g/L,NaCl 0.5 g/L,pH 7.67,接种量:7.5％,培养温度:28℃,摇床转速:150 r/min.对优化结果进行验证发现优化后的培养基能够显著提高发酵液对A549细胞的抑制率和活性部位的产量.
作者：马益华；邢莹莹；马毅敏；奚涛 刊期： 2011年第05期
以实验室筛选得到的产生物碱的金钗石斛内生菌CPU0029为出发菌株,为了提高生物碱产量对其进行紫外及亚硝酸钠复合诱变,筛选出1株正突变菌株；运用正交实验的方法对发酵液中生物碱成分进行提取优化,后采用薄层、气相方法进行检测.结果:通过复合诱变筛选出的正突变株,生物碱产量达到6.9mg/L,比出发菌株高出63％,且其遗传性状较稳定；通过提取纯化,该生物碱纯度提高了70.6倍.
作者：朱媚玲；吕炜锋；高向东 刊期： 2011年第05期
建立了同时测定制马钱子中4种生物碱士的宁(S)、马钱子碱(B)、士的宁氮氧化物(SNO)和马钱子碱氮氧化物(BNO)含量的毛细管区带电泳法(CZE).考察了缓冲溶液的种类、浓度和pH值以及分离电压等因素对分离结果的影响.以盐酸麻黄碱(EP)为内标,在缓冲溶液为40 mmol/L醋酸铵(以200 mmol/L醋酸溶液调pH 3.64)、分离电压25 kV及检测波长203 nm的优化条件下,7 min内即可实现分离测试.S、B、SNO和BNO分别在13.7～109.8 μg/mL、13.4 ～ 107.5μg/mL、13.6 ～ 108.5 μg/mL和3.3～106.2μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.998 2、0.994 2、0.996 5和0.996 5；低检出限分别为0.83、0.96、2.1和2.5μg/mL(信噪比为3)；加标回收率分别为95.1％～102.5％、95.3％ ～ 102.0％、96.7％～102.9％和97.2％ ～ 104.2％,相对标准偏差3.75％、3.82％、3.55％和3.51％.
作者：张芳；潘扬；刘亮镜 刊期： 2011年第05期
为在大肠杆菌中构建萜类化合物代谢工程学研究与应用平台,首先需要在工程菌中重组甲羟戊酸合成途径的相关酶系.该实验采用分子克隆方法在大肠杆菌中构建了甲羟戊酸合成途径的上游酶系,其中包括乙酰辅酶A酰基转移酶、羟甲戊二酰辅酶A合成酶和截短的羟甲戊二酰辅酶A还原酶.DNA测序结果证明载体构建是成功的,气相色谱法检测结果也表明该实验构建的工程菌可以用于生物合成甲羟戊酸.该实验构建的工程菌可以为下一步在大肠杆菌中构建完整的甲羟戊酸合成途径提供基础.
作者：钟云鹏；倪孟祥 刊期： 2011年第05期
为了确立草果挥发油佳提取条件及对小鼠小肠运动的影响,采用正交试验法系统考察粉碎粒度、水料比、浸泡时间和蒸馏时间对草果挥发油得率的影响,建立响应面方程,确定草果挥发油的佳提取工艺条件.以炭末作为指示剂,测定炭末在肠道的推进距离,确定草果挥发油对小鼠小肠推进的作用.显示各因素对挥发油得率的影响大小为蒸馏时间＞水料比＞粉碎粒度＞浸泡时间,优选草果挥发油佳提取工艺为颗粒度40目、水料比8∶1、浸泡时间1.5h、蒸馏时间6h,草果挥发油对小鼠小肠推进有明显的抑制作用.本验证试验表明,所选的佳提取工艺稳定、合理、可行.
作者：杨小方；赵成城；汪维云；薛璟；孙珊 刊期： 2011年第05期
研究PEG修饰抗肿瘤多肽HM-3单次尾静脉注射后在大鼠体内的组织分布特点和排泄途径,为临床试验提供依据.采用ELISA方法检测静脉注射修饰产物mPEG-SC20k-HM-3后各时间点大鼠组织器官生物样品中药物的含量以及尿、粪和胆汁中mPEG-SC20k-HM-3的排泄情况.大鼠单次静脉给予26 mg/kg mPEG-SC20k-HM-3后的组织分布试验表明,药物主要分布在大鼠肝和肾组织,其药物含量均于给药后1h达高,分别为(25.75±5.85) μg/g组织和(25.58±5.79) μg/g组织；大鼠静脉给予mPEG-SC20k-HM-3( 26 mg/kg)后从(0～104 h内)尿和粪中排泄的原型药物分别占给药总量的1.5％和0.02％；从(0～44h内)大鼠胆汁中排泄的原型药物小于给药总量的0.1％.表明PEG修饰药物mPEG-SC20k-HM-3主要分布在肝和肾组织,并主要由尿中排泄.
作者：刘振东；常海民；张奉国；孙浩；徐寒梅 刊期： 2011年第05期
低分子肝素是通过酶解或化学降解的方法得到分子量较小的普通肝素片断,较普通肝素抗凝血作用小,出血等不良反应发生率低,是一类很有价值的药物.本文采用聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳对低分子质量肝素进行纯化,从凝胶中回收肝素寡糖片段,并通过高效凝胶渗透色谱法测定回收样品的相对分子质量.结果制备得到平均Mr约为3019的肝素寡糖,构建了梯度电泳制备肝素寡糖的方法.
作者：何书英；高婷；绪广林 刊期： 2011年第05期
对一株从南极海泥样品中分离出的放线菌菌株N-1分泌的抗菌活性物质进行初步研究,并对该菌进行菌种鉴定.通过纸片法对其发酵液进行体外抗菌活性研究；将其发酵液调至不同pH用不同极性的有机溶剂萃取,研究该活性物质的酸碱性和极性；将调至不同pH值的发酵液按不同时间温度梯度做加热处理,研究该活性物质的稳定性；并通过形态学观察、培养特征、生理生化特征及16S rDNA分析方法对其进行系统发育分析和菌种鉴定.结果表明该菌株发酵液对耐青霉素G、苯唑西林、四环素、莫西沙星、氯洁霉素、红霉素等抗生素的葡萄球菌、无乳链球菌等有明显抗菌作用,其抗菌活性物质在酸性条件下有良好的热稳定性,碱性条件下易于被氯仿等有机溶剂萃取；菌种鉴定数据表明该菌归属于生金链霉菌(Streptomyces aureofaciens).研究确定南极放线菌菌株N-1为生金链霉菌,其代谢产生的抗菌活性物质稳定性好,大部分为极性中等的弱碱性化合物,对多重耐药菌有良好的抑制作用,有很好的研发价值.
作者：倪孟祥；田静 刊期： 2011年第05期
比较昆明鼠与裸鼠原位胃癌模型的区别.采用两种不同的肿瘤细胞株分别在两种不同品系的小鼠胃部原位建立胃癌模型.造模后对原位移植瘤的生长速度进行观察,并对胃癌组织中VEGF的表达及MVD进行检测.结果显示两种模型的成瘤率均为100％.裸鼠原位移植瘤的微血管密度(Microvessel density,MVD)与昆明鼠原位移植瘤的MVD没有明显差异,而血管内皮生长因子(Vascular endothelial growthfactor,VEGF)表达高于昆明鼠原位移植瘤的VEGF.昆明鼠胃部原位移植瘤的生长速度快,缩短了胃癌模型建立周期,为筛选抗胃癌药物提供了有效简单的模型.
作者：何心；王芳；顾月；卢传文；黄晓峰；刘煜 刊期： 2011年第05期
