以醋酸纤维素膜为基膜,采用环氧氯丙烷活化法活化基膜并在碱性条件下偶联磺胺二甲基嘧啶亲和配基,制备磺胺二甲基嘧啶亲和膜,对活化条件进行了优化并对其性能进行了表征.结果表明:膜上环氧基和配基含量分别为158.6 μmol/g和114.6 μmoL/g,将其应用于腹水中分离纯化IgG,实验显示IgG在膜上的吸附平衡符合Langmuir方程,大IgG吸附量为5.7 mg/g,一步分离IgG的纯度大于95％.
作者：梅建凤；朱丽；易喻；陈建澍；王鸿；应国清 刊期： 2013年第02期
制备槲皮素醇质体凝胶剂并进行质量评价及其抗炎作用的研究.采用注入法制备槲皮素醇质体,再加入适量卡波姆制成凝胶剂.对槲皮素醇质体的形态、粒径、表面电位、包封率、载药量进行了考察,并研究了其抗炎作用.结果表明得到的槲皮素醇质体为类球形,粒径分布均匀,平均粒径为352.7 nm,Zeta电位为-10.78 mV,包封率为61.25％,载药量为3.05％,具有明显的抗炎作用.以上结果说明所制备的槲皮素醇质体凝胶剂性质稳定,具有良好的应用前景.
作者：胡蓉；邓琪；张纪法；翟光喜 刊期： 2013年第02期
构建有利于人肿瘤坏死因子α(TNF-α)大量表达及有效纯化的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达.通过密码子优化构建表达质粒pET28-TNF,并将其转化入大肠杆菌,对表达条件进行优化后进行大量表达并通过两轮镍柱亲和纯化获得高纯度重组人TNF-α(rhTNF-α)蛋白.应用Western blot和细胞测活分别检测重组人TNF-α蛋白的抗原性和细胞毒活性.成功构建了重组人TNF-α原核表达载体,并通过表达纯化获得了纯度＞95％,具有生物活性(LD50＜ 10 ng/mL)的rhTNF-α蛋白.
作者：缪小牛；陈卫；张娟；解伟；王旻 刊期： 2013年第02期
为了建立适合匹伐他汀钙片微生物限度检查方法,消除匹伐他汀钙片在微生物限度检查法中的抑菌作用,采用稀释液加入增溶剂和促微生物生长物质后,用常规法及培养基稀释法(0.2 mL/皿.和0.5 mL/皿)进行方法验证,结果表明细菌和大肠埃希菌可采用常规法,真菌可经过稀释液(2)稀释后,采用培养基稀释法(0.2 mL/皿.),白色念珠菌和黑曲霉对匹伐他汀钙片非常敏感,可作为匹伐他汀钙片微生物限度检查方法的质控菌株.
作者：张丹；闵红；郭耀武；陈书伏；高娟；卫延明 刊期： 2013年第02期
研究黄芩苷对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用并探讨其可能的机制.记录去甲肾上腺素(NE)和KCl预收缩的大鼠离体主动脉环张力变化,观察黄芩苷的舒血管作用及不同工具药对其影响.实验发现黄芩苷对NE和KCl引起的去内皮和内皮完整大鼠胸主动脉环的收缩均有舒张作用；L-硝基精氨酸甲酯、亚甲蓝不能抑制黄芩苷对大鼠胸主动脉环的舒张作用,吲哚美辛能显著抑制；钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶、四乙基胺、BaCl2不能抑制黄芩苷对胸主动脉环的舒张作用,格列苯脲能抑制黄芩苷的舒张作用；无钙环境下,黄芩苷预处理对NE收缩有明显抑制作用.因此,黄芩苷具有浓度依赖性血管舒张作用,此作用具有内皮依赖性和非内皮依赖性特点,内皮依赖性收缩可能与前列环素途径有关,非内皮依赖机制可能与KATP通道及钙离子通道有关.
作者：卞筱泓；张映桥；许激扬；赵刚刚；李兰娥；王旻 刊期： 2013年第02期
克隆并鉴定何首乌中二苯乙烯合成酶基因FmSTS2,并研究其在何首乌各组织的表达与二苯乙烯苷表达的关系,为研究二苯乙烯合成酶基因在二苯乙烯苷合成及其调控中的功能奠定基础.采用互补cDNA末端快速扩增技术克隆目的片段,得到一种二苯乙烯合成酶基因FmSTS2(GeneBank登录号:JX914503),其互补cDNA全长1 644bp.将FmSTS2连接pET-28a原核表达载体并转化BL21大肠杆菌构建原核表达系统,Ni-NTA亲和树脂纯化可溶性蛋白后以丙二酰-COA和香豆酰-COA为底物进行催化反应,HPLC鉴定反应产物为含有二苯乙烯母核的白藜芦醇,证明FmSTS2是一种二苯乙烯合成酶基因.HPLC测定何首乌各组织二苯乙烯苷含量；RT-PCR检测何首乌的块根,老藤,茎,叶中表达FmSTS2的程度依次降低,与二苯乙烯苷在各个组织的含量高低一致.
作者：陆娣；赵炜；夏晚霞；赵树进 刊期： 2013年第02期
为了制备垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)衍生多肽RDB并初步研究其改善脂肪细胞胰岛素抵抗的作用,利用基因工程技术,选用大肠杆菌偏爱密码子,以重叠延伸PCR方法合成RDB基因序列,定向插入到高效表达载体pKYB-MCS中,用大肠杆菌ER2566进行表达,融合蛋白经Chitin-Beads柱纯化后,利用β-巯基乙醇诱导蛋白内含肽的N端自剪切,释放目的肽,再用HPLC制备纯度较高的PACAP衍生多肽RDB,实现RDB的高效制备；利用制备的重组肽RDB研究其对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的改善作用及初步机制.制备的重组肽RDB的Mr为3.990 k,纯度大于95％,其产率为17.3 mg/L发酵产物；制备的RDB可明显促进胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖利用及信号分子IRS-1的表达.结果表明在确立的优化条件下可高效制备纯度较高的PACAP衍生多肽RDB(纯度≥95％),RDB能改善胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性,其作用机制与胰岛素信号通路相关蛋白的表达有关.
作者：罗天杰；马义；叶祖禄；徐文娜；饶磊；洪岸 刊期： 2013年第02期
从条纹斑竹鲨中克隆肌钙蛋白基因,在大肠杆菌中进行表达,并检测其抑制血管生长的活性.文献发现人肌钙蛋白(TnI)具有抑制肿瘤血管生成的功能,根据人TnI的基因序列在条纹斑竹鲨鱼肝脏中克隆出于鲨鱼TnI基因,在大肠杆菌中进行表达,获得重组蛋白,通过MTT实验和鸡胚尿囊膜(CAM)实验验证其抑制血管生长的活性.条纹斑竹鲨TnI的cDNA全长692 bp,其中开放阅读框552 bp(编码具有183个氨基酸多肽).该蛋白与角鲨鲨鱼TnI的氨基酸同源性高达85.2％,而与人类、鲑鱼、斑马鱼的TnI的氨基酸同源性分别为68.9％,64.5％和62.3％.在大肠杆菌中进行重组表达,纯化获得蛋白,MTT实验证明其具有抑制血管内皮细胞生长的功能,鸡胚尿囊膜实验显示其有抑制血管生长的功能.结论:条纹斑竹鲨TnI具有抑制血管生成的功能.
作者：谢秋玲；王亚玉；陈先金；李观贵；张玲；梁旭方 刊期： 2013年第02期
从高表达叶酸受体α的卵巢癌细胞株SKOV3中提取总RNA,RT-PCR扩增FRα基因片段,使用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切及测序鉴定；用脂质体介导法将重组质粒转染入人胚肾细胞HEK293中,并利用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色检测细胞内FRα基因的表达情况.通过RT-PCR扩增得到750 bp左右的FRα基因片段,并构建了真核表达重组质粒,经酶切、测序鉴定正确.转染HEK293细胞后,RT-PCR检测到细胞中FRα mRNA的存在,Western blot、细胞免疫荧光证明FRα蛋白在细胞中的表达.成功构建了FRα基因的真核表达重组质粒,该质粒可在真核细胞中表达FRα蛋白,这些实验结果为卵巢癌基因疫苗的研究奠定了基础.
作者：刘欣欣；邱郑；王筱萌；邢黎军；张娟；张芳；王旻 刊期： 2013年第02期
制备胶原蛋白-壳聚糖复合膜,根据中国人民共和国国家标准医疗器械生物学评价推荐方案测评胶原蛋白-壳聚糖的溶血性、全身急性毒性、亚急性毒性、皮内刺激性、致敏性.研究结果表明,胶原蛋白-壳聚糖溶血率为2.17％符合国家标准,急性全身毒性、亚急性全身毒性试验小鼠没有中毒症状、内脏器官正常,对皮内无刺激,并且对皮肤没有致敏性作用.胶原蛋白-壳聚糖生物相容性优秀.
作者：毛熊；张家骊 刊期： 2013年第02期
泛素/26S蛋白酶体途径参与植物在盐胁迫过程中损伤蛋白或错误折叠蛋白的清除,对植物的耐盐功能发挥了重要作用.多聚泛素基因(UBQ)所表达产物为首尾相连泛素单体所组成的聚泛素蛋白,主要参与泛素/26S蛋白酶体途径中的蛋白质水解,是一个可重复利用的识别靶蛋白的信号分子.该研究前期结果显示,木榄根和叶中的BgUBQ10基因的mRNA表达水平在高盐度环境(25‰～50‰)较无盐环境(0‰)增强,而在50‰盐度环境下BgUBQ10的表达量高；同源性比较发现,BgUBQ10与其它植物来源的UBQ在氨基酸水平上的同源性介于98％ ～ 99％之间,但进化关系较远.为了研究BgUBQ10功能,分别构建了木榄BgUBQ10基因的正义和反义表达载体,并通过根癌农杆菌介导分别转化野生型拟南芥.分别BgUBQ10过量表达转基因拟南芥、BgUBQ10反义表达转基因拟南芥与野生型拟南芥进行了耐盐性分析,BgUBQ10过量表达拟南芥植株的耐盐性明显高于野生型拟南芥植株,而BgUBQ10反义表达拟南芥植株耐盐性低于野生型拟南芥,结果提示BgUBQ10基因可能与木榄耐盐功能有关,为通过基因工程提高农作物耐盐性及培育耐盐农作物品系奠定了基础.
作者：李谊；胡文军；叶波平 刊期： 2013年第02期
探讨马尾松花粉硫酸酯化多糖对MIN6细胞胰岛素分泌和[Ca2+]i的作用.选取60％乙醇沉淀的马尾松花粉多糖(PPM60),氯磺酸-吡啶法得到硫酸酯化物(SPPM60)；检测PPM60及SPPM60刺激后MIN6细胞胰岛素分泌量和[Ca2+]i的变化.观察钙离子抑制剂维拉帕米和低分子肝素的影响.PPM60对MIN6细胞胰岛素分泌几乎没有影响,SPPM60能显著促进胰岛素的分泌和[Ca2+]i升高(P＜0.05).维拉帕米和低分子肝素钠均可以降低SPPM60引起的胰岛素分泌增加,但差异不显著.同样两者均可显著性降低SPPM60引起的[Ca2+]i的升高(P＜0.05).维拉帕米可以明显抑制3.6 mg/mL葡萄糖的促胰岛素分泌(P＜0.05)和升高[Ca2+]i的作用(P＜0.01).SPPM60可以单独促进胰岛素的分泌,其作用机制与葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)有一定相似性,但同时存在其他的信号通路.
作者：刘月冉；冯潍；耿越 刊期： 2013年第02期
Wnt信号被认为是多发性骨髓瘤(MM)致癌作用的一个重要角色.为了观察Wnt/β-catenin信号通路在多发性骨髓瘤特别是多发性骨髓瘤干细胞中的表达及Wnt/β-catenin信号通路抑制剂CAY10404对多发性骨髓瘤的治疗作用,对13个多发性骨髓瘤患者的骨髓样本和多发性骨髓瘤细胞株中的Wnt/β-catenin相关基因的表达情况进行分析和运用Western-blot方法分析β-catenin蛋白在多发性骨髓瘤不同细胞亚群中的表达及COX2抑制剂CAY10404对β-catenin蛋白表达的抑制,通过体内外试验观察CAY1040对多发性骨髓瘤不同细胞亚群的增殖抑制作用.结果显示Wnt/β-catenin信号通路在多发性骨髓瘤病人样本CD138-/CD19+干细胞亚群中比CD138+细胞亚群表达显著增高(P＜0.05)；体内外试验显示CAY10404明显抑制多发性骨髓瘤干细胞亚群的增殖(P＜0.05).该研究通过靶向干预Wnt/β-catenin信号通路,对治疗多发性骨髓瘤尤其是多发性骨髓瘤干细胞进行了探索.
作者：杨烨；顾春艳；陆美龄；王旻 刊期： 2013年第02期
研究胶原诱导性关节炎大鼠淋巴细胞基因表达谱,探讨类风湿性关节炎的发病机制.用大鼠全基因表达谱芯片研究胶原诱导性关节炎及正常大鼠淋巴细胞基因表达谱,比较模型大鼠及正常大鼠淋巴细胞基因表达的差异.结果显示,胶原诱导性关节炎大鼠差异表达基因822个,其中上调基因558个,下调基因264个.差异基因主要涉及功能基因为免疫应答及炎症刺激相关基因,涉及的代谢及信号通路主要有细胞凋亡、氧化应激、凝血系统、类花生酸合成、TGF信号通路等.模型组差异表达上调的基因主要有Ccr2、Ccr1、Il1b、Vcan、IgG-2a、Cyr61、Bmp8a、Tgfb1、RGD1564318等,差异表达下调的基因主要有Ifi2711、Oas1a、G1p2、Sgk1、Irf7等.胶原诱导性关节炎是一个涉及多基因表达异常的全身免疫性疾病,筛选到的差异表达基因初步反映了类风湿关节炎的发病机制,为类风湿关节炎的防治提供重要线索.
作者：刘静；邸志权；王晶晶；胡金芳；申秀萍；应森林 刊期： 2013年第02期
蛋白质-蛋白质相互作用在细胞生命活动中起着十分关键的作用,包括信号转导,细胞骨架的重新构建以及转录控制.重新设计蛋白质-蛋白质相互作用可以指导新药开发,疾病治疗,可以为探讨重大疾病的机制提供重要的理论基础.由于蛋白质之间通过复杂多样的界面发生作用,不同的蛋白质相互作用的界面氨基酸残基组成以及残基之间的相互作用倾向性都有所不同,因此对蛋白质-蛋白质相互作用界面进行研究设计就显得尤为重要.近年来关于蛋白质相互作用界面的设计已有不少成功的例子.该文对蛋白质界面设计的研究进展进行了综述,主要包括蛋白质相互作用界面的性质,结构特点以及它的研究方法等.
作者：沈素萍；刘言；李娟；方慧生 刊期： 2013年第02期
由于抗生素药物的不合理使用等原因,病原微生物耐药性问题日益突出,严重影响了细菌性感染疾病的治疗效果,也逐渐成为目前人类着重关注的健康问题.微生物可通过多种方式来抵御抗生素引起的毒性,其中利用耐药泵将药物直接外排的方式是细菌主要的耐药性机制之一.通过对耐药泵结构和机制的研究,有利于开发以多药耐药泵为作用靶点的细菌敏感型药物,对于降低细菌耐药性和进行临床治疗有重要指导意义.文章概述了当前细菌的多药耐药外排泵的主要分类和分布、结构特征、作用机制及表达调控等方面,阐明了多药耐药外排泵抑制剂的研究意义和价值,并对其研究前景进行展望.
作者：刘茜醇；王丹；何亚峰；陈未中；陈浩 刊期： 2013年第02期
自由基是机体氧化反应中产生的有害化合物,具有强氧化性,可损害机体的组织和细胞,进而引起慢性疾病及衰老效应.文章对氧自由基产生的过程、对人体的影响及生化机制、氧自由基在老年疾病代谢中的作用机制等研究进行了综述.
作者：殷晓煌 刊期： 2013年第02期
蛇毒类凝血酶(Thrombin-like enzyme,TLE)是蛇毒中与血浆凝血酶性质相似的一类丝氨酸蛋白酶,所不同的是在蛇毒类凝血酶结构中已经没有纤维蛋白稳定因子激活组分.由于蛇毒类凝血酶在新药研究中扮演重要角色,比如来自Bothrops jararaca和Bothrops atrox蛇毒的立芷雪、来自东北白眉蝮蛇毒的邦停和来自尖吻蝮蛇毒的苏灵,它们是具有止血作用的新药；来自Gloydius shedaoensis和Gloydius ussuriensis蛇毒的东菱克栓酶、来自白眉蝮蛇和尖吻蝮蛇毒的降纤酶、来自Calloselasma rhodostoma蛇毒的安克洛酶和来自Crotalus adamanteus蛇毒的Crotalase,它们是具有溶栓作用的新药.这些药用蛋白质的来源和产量因有限的蛇毒原料而有很大限制,通过基因克隆可解决资源问题.文章综述了蛇毒类凝血酶的基因结构、糖基化特点和各种重组表达体系,为大量制备供临床和基础研究使用奠定基础.
作者：李家祺；李谦；唐松山；李红枝 刊期： 2013年第02期
赖氨酸是蛋白质的翻译后修饰位点以及多种酶活性中心关键残基,与蛋白质的结构与功能密切相关.应用遗传密码扩充技术,由来自于M.barkeri的吡咯赖氨酰tRNA合成酶(PylRS)和吡咯赖氨酰tRNA(tRNAPy1)构成非天然氨基酸定点引入系统,可以实现蛋白质中赖氨酸残基的定点修饰,在蛋白质中定点引入乙酰基等翻译后修饰基团、光反应基团、正交反应基团和光谱活性基团等.目前该系统已在大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞中及线虫体内成功地将10种赖氨酸衍生物编码入蛋白质中,为研究蛋白质翻译后修饰、定点标记和定点修饰、蛋白质相互作用提供了有力的工具.综述了应用该系统在蛋白质中定点引入赖氨酸衍生物的应用研究进展,并分析了该系统与目前常用的系统相比的优势所在.
作者：陆颖菲；陈海；姚文兵；高向东 刊期： 2013年第02期
文章从中医药在美国作为补充与替代医学的发展历程、当前美国的中医教育、中医执照考试、针灸立法及保险等方面,对中医药在美国的生存概况进行分析.目前中医药作为补充与替代医学在美国深受重视,针灸疗法被普遍接受及广泛应用,中药如属天然植物药,按“药”对待,大部分中草药作为食品添加剂得到广泛应用,科研机构积极支持中医中药科研活动,中医药在美国发展大有可为.
作者：高佳；杜仲燕；李东成；窦晓兵 刊期： 2013年第02期
比较喹硫平单药与合并艾司西肽普兰治疗首发广泛性焦虑的疗效与不良反应,将90例首发广泛性焦虑患者随机分为单用喹硫平和合并艾司西肽普兰两组,每组各45例,治疗16 w,采用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评定临床疗效,用治疗中出现的症状量表(TESS)评定药物不良反应.经过16 w治疗,单用组42例完成研究,显效率54.76％,有效率83.33％,合用组44例完成研究,显效率71.11％,有效率86.36％,两组临床疗效无显著性差异(P＞0.05),合用组4w后的HAMA评分较单用组有显著性差异(P＜0.05),两组不良反应无显著性差异(P＞0.05).喹硫平单药治疗首发广泛性焦虑疗效与合并艾司西肽普兰疗效无显著性差异,合并用药显效率更高,中远期总体疗效更好.
作者：孙莉红；穆莉莉；冯丽平；陈林 刊期： 2013年第02期
探讨MMP-2蛋白及mRNA在胶质瘤细胞中的表达及其在胶质瘤的发生及恶性进展中的作用.采用免疫组化法及原位杂交法检测5例正常脑组织及40例不同级别胶质瘤中MMP-2mRNA蛋白及mRNA的表达情况.正常脑组织中MMP-2mRNA蛋白及mRNA的表达均为阴性.在脑胶质瘤中MMP-2蛋白主要表达于瘤细胞及血管基底膜的内皮细胞的胞浆,其表达是在胞浆中出现棕色或棕黄色染色.在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本23例中阳性4例、弱阳6例、阴性13例,阳性表达率为43.48％ (10/23),LI值为(5.91±4.78)％,在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本17例中强阳性4例、阳性7例、弱阳4例、阴性2例,阳性表达率为88.24％ (15/17),LI值为(30.06±22.94)％,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异显著,P＜0.05.在脑胶质瘤中MMP-2mRNA主要表达于瘤细胞及血管基底膜的内皮细胞的胞浆,其表达是在胞浆中出现棕色或棕黄色染色.在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本23例中阳性3例、弱阳3例、阴性17例,阳性表达率为26.09％ (6/23),LI值为(6.43±5.32)％,在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本17例中强阳性4例、阳性7例、弱阳1例、阴性5例,阳性表达率为70.59％ (12/17),LI值为(29.88 ±23.96)％,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异显著,P ＜0.05.MMP-2蛋白及mRNA的表达在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤组明显低于Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组,与胶质瘤的恶性程度及进展呈正比,更有利于对人脑胶质瘤的恶性生物学行为进行评价和判断.
作者：陈广；邱虹；于向东；李云超 刊期： 2013年第02期
