研究天麻素对高糖所致的神经小胶质细胞损伤的保护作用.选择不同浓度的葡萄糖细胞培养液(30,35,45 mmol/L)培养神经小胶质细胞,观察添加天麻素(50 mg/L)培养24 h后细胞形态变化,用逆转录聚合酶链反应方法评价IL-1β、IL-6mRNA表达改变,并用酶联免疫吸附法测定细胞培养上清液IL-1β,IL-6的浓度.研究表明在葡萄糖培养的小胶质细胞中加入天麻后,细胞突触减少,当葡萄糖浓度为35 mmol/L时,天麻素对IL-1β、IL-6表达抑制率分别为47.9％和29.9％,当葡萄糖浓度为45 mmol/L时,抑制率分别为35.6％和44.5％.由此表明,天麻素降低了高糖对神经小胶质细胞的损伤,并抑制葡萄糖上调的神经小胶质细胞IL-1β、IL-6的表达.
作者：夏玲珍；陈雅 刊期： 2014年第02期
通过对抗菌肽的一系列修饰,包括缩短长度、增加抗菌能力以及延长其体内半衰期来降低抗菌肽的生产成本.基于抗菌肽LL-37的氨基酸序列,对抗菌肽进行结构与功能改造,对改造抗菌肽的抗菌谱、抗菌能力、体外血浆中的抗菌动力学以及其体内抗菌功能进行了详细研究.成功改造了2种抗菌肽,分别由21和29个氨基酸组成,它们具有强的体内外抗菌活性和广的抗菌谱.改造的抗菌肽抗菌能力更强,生产成本更低.
作者：李崇阳；陈梅梅；张小琴 刊期： 2014年第02期
建立茅苍术高频快繁和试管苗移栽技术体系,为种苗的大规模工厂化生产提供技术依据.以野生茅苍术种子为试验材料,用0.1％的HgCl2消毒后建立无菌系,采用均匀设计法对茅苍术的增殖及生根培养基进行优化,并对试管苗移栽基质进行筛选.结果表明:采用0.1％的HgCl2灭菌4 min,种子萌动率达87％;茅苍术增殖佳培养基为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L,30 d的平均增殖系数达10.00±0.71;生根佳培养基为1/2 MS+ NAA 1.0 mg/L,平均生根条数达7.60±0.40;试管苗在蛭石基质中成活率达到91％.该研究建立的茅苍术种苗大规模工厂化生产技术体系,为茅苍术人工栽培所需大量种苗的工业化生产奠定了基础.
作者：王红娟；杨岚；向增旭 刊期： 2014年第02期
探讨Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对Src蛋白及其下游信号的作用.半定量RT-PCR法检测Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后的人膀胱癌细胞T24各浓度组的c-Src、MMP9基因表达的变化情况,使用Western blot检测Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后T24细胞内的c-Src蛋白(包括其磷酸化与非磷酸化两种类型)表达情况.Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理有下调后的人膀胱癌细胞T24各浓度组的c-Src mRNA的表达有下调;MMP9基因的表达有下调.处理后T24细胞内c-Src基因在蛋白表达水平上其磷酸化类型随Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ浓度的增高表达逐渐下降,并且呈剂量效应关系.Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ可能通过竞争Src蛋白磷酸化位点,使其不能激活,从而使得T24细胞增殖得到抑制,同时可能通过在转录水平上对MMP9的表达调节,使得MMP9基因在mRNA表达水平上下调,从而抑制T24细胞的增殖,诱导T24细胞凋亡,抑制或减弱人膀胱癌T24细胞的迁移/侵袭/转移的能力.
作者：龙永其；阳新华；谌磊；杨罗艳；欧阳曙光；刘劲戈；刘文进 刊期： 2014年第02期
实验旨在对络石藤的降血脂及抗氧化效果进行研究.选用高脂饲料喂饲法造成高血脂症模型,给药21 d后,络石藤高、中剂量组都能显著降低高脂血症大鼠的血清TC、TG、LDL-C,显著升高HDL-C,表明络石藤提取物对高脂血症大鼠有一定的降脂作用.另外,络石藤可以提高高血脂症大鼠的SOD和GSH-Px活性,降低MDA的水平,推测络石藤能够降低氧自由基反应,从而防止脂质过氧化,对机体起到保护作用.
作者：徐梦丹；王青青；蒋翠花 刊期： 2014年第02期
表皮生长因子受体与其配体结合后可以诱导细胞的分化与增殖.该受体位于细胞表面,与配体结合后能够活化该受体细胞内的酪氨酸激酶.酪氨酸激酶能够使许多细胞内的底物磷酸化后引起细胞增殖、DNA合成和fos及jun癌基因的表达,所以表皮生长因子受体是肿瘤治疗的潜在靶标.一些表皮生长因子受体抑制剂作为潜在的药物用于肿瘤的治疗.然而,一些上市的药物表现出某些副作用,因而限制了其使用.为了发现改进疗效的新的表皮生长抑制剂,基于表皮生长因子晶体复合物采用DS软件中的受体-配体药效团产生模块,一个高相关性的药效团模型被构建.该药效团模型包括3个氢键受体和1个疏水特征.然后,基于药效团和对接虚拟筛选用于筛选商业数据库,用于获得新的表皮生长抑制剂.后,具有高对接打分的两个化合物被挑选出来作为新的候选抑制剂.该研究结果的报道,提供了一种基于一组蛋白-配体复合物的晶体结构来产生药效团去用于虚拟筛选的方法,这个研究也认为该方法对于合理的理解结构和理化特性提供了重要的信息.
作者：艾观华；顾月清 刊期： 2014年第02期
以比色法(PNPG法)对10株海洋微生物经摇床的发酵液进行α-葡萄糖苷酶抑制活性检测,发现南极放线菌N-1的代谢产物对α-葡萄糖苷酶抑制活性强.文章旨在建立稳定的南极放线菌N-1产α-葡萄糖苷酶抑制剂的分析方法,为α-葡萄糖苷酶抑制剂的含量测定和纯化做前期工作.以乙酸乙酯∶乙醇=27∶1为展开剂,将南极放线菌N-1的发酵液在GF254硅胶板上展开后,以紫外灯254 nm波长下显影观察得到两个组份,组份A的抑制率为10.03％,纯度达到81.6％,组份B的抑制率为2.91％,纯度达到71.32％,组份A可作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的相对工作标准品.分别用高效液相和薄层扫描光密度法绘制其标准曲线,然后对已经分离纯化的成品进行纯度分析.用高效液相检测成品的含量是88％,薄层扫描光密度法测定成品的含量是91.6％,比较接近.结果表明薄层扫描光密度法可以作为检测α-葡萄糖苷酶抑制剂含量的一种新方法.
作者：倪孟祥；张扬；葛羚超；魏爽 刊期： 2014年第02期
考察不同浓度(50,100,200μg/mL)黄原胶(XG)对脂多糖(LPS)刺激的兔膝骨关节软骨细胞氧化损伤的影响.玻璃酸钠(SH)、维生素C(Vc)作为阳性对照药,采用流式细胞术和荧光酶标仪检测活性氧(ROS)表达,试剂盒检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量.两种ROS检测方法显示,与模型组相比,XG各剂量组均能降低ROS水平,XG与SH无显著性差异,Vc的抗氧化能力强于XG及SH.与模型组相比,XG、SH均能减少LPS诱导软骨细胞产生的NO,SH较为显著.XG、SH能显著降低LP诱导产生的MDA,高剂量组XG优于SH.XG能增强LPS诱导兔软骨细胞产生SOD的活性.综上所述,XG能逆转LPS造成的兔软骨细胞氧化损伤,消除ROS,提高SOD活性,降低MDA、NO水平,是OA的潜在治疗药物.
作者：赵丽娟；凌沛学 刊期： 2014年第02期
血管新生在肿瘤发生过程中起着重要作用,VEGF通过与其特异性受体Flt-1、KDR结合参与了这一过程.该研究在大肠杆菌中分别表达了Flt-1 D2、KDR D3以及Flt-1 D2与KDR D3的融合蛋白FK,表达率依次占菌体中蛋白的24％,39％,35％,随后使用SPFF阳离子层析柱对溶解后的包涵体蛋白进行了纯化,并通过透析的方法进行复性获得活性蛋白.Flt-1 D2、KDR D3、FK与VEGF的结合都具有剂量依赖性,解离常数Kd值分别为13.8,38.8,2.7 pmol/L,表明FK比Flt-1及KDR更容易结合VEGF.使用HMEC和HUVEC两种内皮细胞测量了重组蛋白的生物活性,Flt-1 D2的IC50分别为12.51和15.77 nmol/L,KDR D3的IC50分别为24.37和28.83 nmol/L,而FK的IC50分别为1.46和2.63 nmol/L,表明FK能明显抑制VEGF165刺激的HMEC和HUVEC细胞增殖.该研究为肿瘤治疗提供了一个新的候选药物.
作者：李壮林；姚雪静 刊期： 2014年第02期
探讨复方米非司酮配伍米索前列醇治疗稽留流产两种方法的可行性和副反应.将150例稽留流产患者随机分为A组和B组,每组75例,所有患者均为口服复方米非司酮2片bid×2 d,d3晨A组口服米索前列醇3片,B组阴道后穹隆放置米索前列醇3片,待妊娠物排出后再行清宫术.观察妊娠物排出情况、治疗后的副反应、清宫时宫颈软化扩张程度及一次清宫成功率.结果B组流产有效率90.66％略高于A组86.66％,但无明显统计学差异(P＞0.05);B组总副反应率41.33％明显低于低于A组56.00％,差异有统计学意义(P＜0.05);B组和A组宫颈软化、扩张总有效率无明显差异(P＞0.05),一次清宫成功率无差异(P＞0.05).复方米非司酮配伍米索前列醇治疗稽留流产两种方法均可行,流产效果好,但阴道给药副反应明显下降.
作者：陆品红；陆静；邹珊 刊期： 2014年第02期
通过提取葡萄幼叶总RNA,用RT-PCR的方法获得白藜芦醇芪合酶基因,并将其成功克隆到pFastBac HTA中,获得重组pFastBac HTA-STS载体,转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,筛选获得重组Bacmid DNA后转染家蚕BmN细胞,进一步筛选获得重组杆状病毒,重组病毒接种家蚕蛹,工程蚕蛹匀浆后经初步纯化收获粗酶液,利用粗酶液对葡萄提取液进行转化,体外生物合成白藜芦醇,提取液中的白藜芦醇含量显示出明显的上升.该研究为体外生物合成白藜芦醇提供了新途径.
作者：潘晶晶；潘华晔；严珍珍；叶甫云；张耀洲；吕正兵 刊期： 2014年第02期
观察重组人ADAM15去整合素区域蛋白干预肿瘤细胞增殖效应,为研究其作用机制提供基础.采用SRB法筛选重组人ADAM15去整合素区域蛋白敏感肿瘤细胞,分析其剂量依赖关系.利用流式细胞仪分析重组人ADAM15对肿瘤细胞周期的影响,并利用DAPI染色检测其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用.重组人ADAM15去整合素区域蛋白对于观察的8种肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用,其中人宫颈癌细胞Hela及野生型乳腺癌细胞MCF-7为敏感,IC50分别为2.97,2.90 μmol/L,当其浓度低于8μmol/L时,细胞增殖抑制率与蛋白浓度呈剂量依赖关系.选择Hela细胞进行周期检测发现,重组人ADAM15去整合素区域蛋白浓度高于2μmol/L时,Hela细胞周期开始出现S期阻滞,G2/M期含量下降,并出现核凋亡现象.当蛋白干预浓度达6μmol/L时,(53.57±1.43)％的Hela细胞出现凋亡.重组人ADAM15去整合素区域蛋白通过阻滞细胞分裂和诱导凋亡抑制肿瘤细胞的增殖.
作者：侯颖；储敏；杜芳芳；王晓敏；陈蕴；金坚 刊期： 2014年第02期
通过对钠钾ATP酶及其与哇巴因的复合物进行分子动力学模拟来研究哇巴因对该酶构象的影响,首先利用对接得到复合物,然后在相同环境中模拟酶单体及其复合物.结果显示,哇巴因的结合使酶αM1与αM2向小分子靠拢,酶的A区向P区发生轻微移动.酶活性腔中疏水残基Phe783,Thr797,Val322,Gly319,Ile320,Ile321,Leu125,Ile315,Ala112与哇巴因形成疏水作用,极性残基Asp121,Thr797,Gln111与哇巴因形成氢键.通过复合物与酶单体比较,在复合物中,A区的212TGES215基序loop区与侧翼残基的移动掩埋了磷酸化Asp369残基,使其不能自身水解,妨碍了酶执行其功能时E2与E1构象转变,从而抑制酶的活性,并且激发钙离子介导的信号传导通道.此方法不仅直观的展现出酶构象的变化并且很好的解释了哇巴因抑制该酶的机制,同时得到的数据结论对传统实验进一步研究该酶起到指导性作用.
作者：方彩云；徐金兵；李娟；方慧生 刊期： 2014年第02期
研究以猪脾脏为原材料制备转移因子胶囊的方法.通过低温匀浆破碎、反复冻融、低分子质量膜超滤、低温冷冻干燥等技术提取高活力的转移因子,并通过处方筛选,优选甘露醇和淀粉作为转移因子胶囊的稀释剂,确定处方量.使用该工艺生产的转移因子胶囊,具有生物活力高、产品质量稳定、含量高、安全有效等优点,适合大规模生产.
作者：周天琼；俞保彬；倪燕红 刊期： 2014年第02期
筛选有效抑制乏氧诱导因子-1α(HIF-1 α)表达的小干扰RNA (siRNA)序列,并观察其对细胞中HIF-1α表达的抑制作用.设计针对HIF-1 α的6对(siRNA1217,siRNA1612,siRNA2258,siRNA2752,siRNA3724,siRNA3168)及一条阴性对照siRNA(称为NC).在Lipofectamine 2 000介导下转染人鼻咽癌细胞系CNE2.同时采用RT-PCR法和Western blot方法检测细胞中HIF-1α含量,以β-actin蛋白做内参照.结果:Lipofectamin 2 000在2μL转染40 pmol/L时,能实现大转染效果.与其他各组相比,转染了siRNA3724,siRNA3168基因序列的人鼻咽癌细胞中,编码HIF-1α mRNA的含量明显减少.成功设计了针对HIF-1α的siRNA,并从中筛选出HIF-1 αsiRNA1612,siRNA3724,siRNA3168能够有效抑制人鼻咽癌表达,为肿瘤的放射治疗及其临床应用奠定了基础.
作者：张俊玲；汪步海；沈雁；王珏 刊期： 2014年第02期
以酿酒酵母(Saccharomyces cervisiae)基因组DNA为模板,克隆并表达了编码磷酸胆碱胞苷转移酶的基因cct.根据NCBI提供的序列信息,设计扩增cct基因的引物,经PCR扩增、酶切后,将cct插入到表达载体pET-29a(+)中,构建了重组质粒pET-29a-cct,经过酶切验证和测序后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在30℃条件下经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE结果显示构建的工程菌可高效表达相对分子质量约45 k的蛋白,与理论值相符.对粗酶液进行活性测定,表达产物可检测到CCT酶活性,即可转化CTP和磷酸胆碱为CDP-胆碱,此结果可为CDP-胆碱的生物合成提供依据.
作者：李晓丹；夏冰；汪仁 刊期： 2014年第02期
建立小鼠腹水中JWA单克隆抗体(Monoelonalantibody,mAb)的制备方法及鉴定,获得高纯度、高效价的JWA单克隆抗体.对预先用弗氏不完全佐剂处理的小鼠腹腔接种JWA单克隆抗体杂交瘤细胞,收集小鼠腹水、离心,采用Protien G亲和柱层析法进行亲和层析纯化JWA单克隆抗体,并采用SDS-PAGE检测方法分析纯化抗体的纯度.分别运用细胞免疫荧光、免疫印迹技术鉴定纯化的抗体特异性.BCA法测定纯化后JWA单抗的浓度为6.79 mg/mL;SDS-PAGE电泳显示纯化的抗体只有IgG的重链和轻链,而没有其它杂蛋白带;纯化后的JWA单抗在免疫荧光实验可以检测到细胞中JWA蛋白在胞浆中呈丝状均匀分布,与前期实验结果一致.免疫印迹实验中1∶800、1∶400均可以得到清晰的目的条带.用Protein G亲和层析法获得了高纯度和较高效价的JWA单克隆抗体,这将为JWA蛋白的基础和应用研究提供技术支持.
作者：李爱萍；陈敏娟；王稀琛；金可心；张红；周建伟 刊期： 2014年第02期
氟是人体必需的14种微量元素之一.氟化物在一定的浓度范围内对人体有着积极的作用,但过量的氟将会影响机体健康,因此,准确检测氟离子浓度是十分重要的.文章主要介绍氟离子检测方法的一些新进展,并且横向比较了几种氟离子检测方法的异同点或优势和不足,主要包括离子色谱法、分光光度法、离子选择电极法,以及近来受到广泛关注的氟离子荧光指示剂.其中,离子色谱法对于一些化学性质相似的离子其选择性较差,且灵敏度不高.分光光度法稳定性好,简单而快速,但其影响因素较多,从而导致结果的准确性不高.离子选择电极是目前应用为广泛的氟离子检测方法,其成本低,操作简单,快速而高效的方法,但其影响因素也较多.3种传统方法都无法实现对生物体内氟离子浓度的检测.氟荧光指示剂包括3种:氢键类,氟硼络合物类以及氟化物介导的脱甲硅烷基化类.这些氟荧光指示剂具有高选择性及高灵敏度,其影响因素较少,它们在生物体内应用存在一定限制:因为氟离子具有强烈的水化倾向,因此氢键键合的方法不能有效在水介质中实现;硼氟络合物的局限在于细胞毒性作用和自身不稳定性等;氟化物介导的脱甲硅烷基化具有高敏感性、准确性以及多功能生物成像的特点.
作者：焦阳；段小红 刊期： 2014年第02期
鉴于用于动物细胞培养的血清培养基存在诸多缺陷,无血清培养基已成为动物细胞培养的主要培养基.无血清培养基主要由基本培养基和补充因子组成,补充因子包括结合蛋白、贴壁因子、生长激素、生长因子和微量元素等.尽管无血清培养基已经在动物细胞培养和蛋白类药物生产中广泛使用,但其中重要的蛋白类补充因子的研究进展并没有得到很好总结.文章系统总结了各类蛋白补充因子在无血清培养基中的生理功能和相关的重组生产方面的新研究进展,对蛋白类补充因子高效生产和高质量无血清培养基的规模化制备具有借鉴意义.
作者：宗超；黄磊；蔡谨；徐志南 刊期： 2014年第02期
天然产物生物合成途径中的“隐藏”的修饰反应有着新颖的酶催化机制和特殊的生物学意义,文章概述了几种不同类型的隐藏反应方式,包括卤化、甲酯化、氨基酰化、脂肪酰化和磷酸化5类.分析并总结“隐藏”的修饰反应对于我们认识天然产物生物合成途径的复杂性和多样性,推动天然产物生物合成领域的研究具有重要意义.同时也对新酶学机制的发现和利用基因工程手段来改造新药打下良好的基础.
作者：赵建萍；徐飞 刊期： 2014年第02期
不同来源及生产工艺得到的硫酸软骨素(Chondroitin sulfate,CS)其硫酸化的位点和程度、相对分子质量均存在差异,而这是影响CS生物活性的关键因素.该文旨在通过概述CS结构和相对分子质量对其生物活性的影响,促进CS的进一步深入研究和临床应用.通过查阅近年来国内外发表的相关文献,对其进行整理、归纳、分析与总结.该文综述了CS结构和相对分子质量的差异,以及这些差异对CS的药代动力学、抗氧化、抗骨关节炎、抗凝血等生物活性的影响.观察到CS的活性与其结构和相对分子质量息息相关,并深入研究了CS结构和相对分子质量与其活性之间的内在关系,将有利于提高CS临床应用的安全性、有效性,更有利于拓展CS的临床应用价值.
作者：王金凤；臧恒昌；李连；张惠；姜玮；王凤山 刊期： 2014年第02期
pH敏感脂质体作为新型的药物载体,能够主动靶向肿瘤细胞,降低正常细胞的毒性,提高治疗效果.近年来,pH敏感脂质体已成为抗癌药物传递系统的研究热点.pH敏感材料的发展促进pH敏感脂质体的发展,pH-敏感脂质体可以用来包载不同性质的药物.文章对pH敏感脂质体所用pH敏感材料以及其包载的药物进行简要介绍.
作者：卢杉杉；邵伟；李荫；林贵梅 刊期： 2014年第02期
化学药物治疗、放射治疗和生物治疗是目前临床上除手术治疗外治疗肿瘤的常见手段,但在肿瘤治疗的同时,不可避免地产生许多毒副作用,对肿瘤的进一步治疗产生了不良影响.该文总结了放化疗过程的常见毒副作用并概述了其血液毒性的常见治疗手段和有关生物技术的药物,并对生物治疗和中医药治疗的优势进行了简单的探讨.
作者：詹领；于敏；莫炜 刊期： 2014年第02期
