探讨阿托伐他汀对心房颤动细胞模型中ATBF1/PIAS3/STAT3信号通路的作用.通过高频电刺激(5 ms,25 Hz,7 V/cm) HL-1心房肌细胞系构建房颤细胞模型,并采用CCK-8实验检测梯度浓度阿托伐他汀(0.01,0.1,1,10,50和100 μmol/L)干预下心房肌细胞系HL-1细胞活性,以筛选出阿托伐他汀的药物安全浓度,同时应用Western blotting实验测定以上每组p-STAT3和STAT3蛋白表达情况来选择佳给药浓度,并分别检测在对照组、房颤组和药物实验组3组中ATBF1/PIAS3/STAT3信号通路中各个蛋白表达水平.实验结果证明,CCK-8实验筛选阿托伐他汀的药物安全浓度为0.1～50 μmol/L.房颤细胞模型中,ATBF1的蛋白表达量显著下调,PIAS3蛋白水平降低,p-STAT3水平明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.05),但总STAT3的表达水平并无显著性改变(P＞0.05).阿托伐他汀药物干预后,p-STAT3蛋白与STAT3蛋白比值随浓度升高,在1μmol/L时达到大.在此药物浓度下,房颤模型中ATBF1和PIAS3表达上调,p-STAT3表达下调,有统计学差异(P＜0.05),而总STAT3无显著性差异(P＞0.05).提示阿托伐他汀抗心房颤动的分子作用机制可能与其抑制ATBF1/PIAS3/STAT3信号通路有关.
作者：张瑜丽；蒋奇；周阳；汤依群 刊期： 2016年第01期
通过对伊曲康唑注射液无菌检查法的建立及方法优化研究,筛选出适合该药品质量控制更为有效的无菌检查法.方法参照《中国药典》2010年版二部无菌检查法建立伊曲康唑注射液的无菌检查法并对方法优化筛选,分别选择0.1％蛋白胨水溶液,pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液,0.9％无菌氯化钠溶液为冲洗液,采用薄膜过滤法,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌和黑曲霉菌为试验菌进行方法学验证.建立了3种不同稀释液和前处理方式处理的薄膜过滤法,即有3种方法可用于伊曲康唑注射液的无菌检查.该药品的无菌检查法可选用3种中的任意1种进行无菌检查.方法2与方法1所选冲洗液不同,检查效果相同,而0.1％蛋白胨水溶液的使用成本更为低廉.方法3虽较好的模拟了该产品使用前的配制过程,冲洗量也较少,但过程略显繁琐,且稀释冲洗过程有样品结晶状况的发生,不利于过滤.综合分析后建议选择方法1(取伊曲康唑注射液20支,采用薄膜过滤法处理,以0.1％蛋白胨水溶液为冲洗液,冲洗量:500 mL/膜,100 mL/次,以白色念珠菌为阳性对照菌)进行伊曲康唑注射液的无菌检查法.结论选择方法1,作为伊曲康唑注射液的无菌检查法,所建立的方法简便、准确、可靠、重现性好.
作者：陈丽萍；杨晓莉；李辉 刊期： 2016年第01期
构建重组pET28a(+)-rReg3β表达质粒,转入T7 Expression E.coli表达菌,获得鼠源重组Reg3β表达菌株,经IPTG诱导后以包涵体形式表达重组Reg3β蛋白.重组Reg3β蛋白通过裂解菌体、镍柱亲和层析等方法进行分离纯化,纯化后透析复性,通过Western blot进行定性分析,SDS-PAGE及HPLC进行纯度分析.小鼠胰岛素瘤MIN6细胞系MTT检测显示重组Reg3β蛋白具有明显的促进细胞增殖作用,Western blot方法证明其能够显著提高Akt和Erk1/2信号分子的磷酸化水平从而刺激细胞增殖.结论:该课题成功构建和制备了重组Reg3β蛋白,并在体外实验中证实重组Reg3β具有促进胰岛β细胞系增殖的活性,并进一步探讨了其作用机制,可能在胰岛细胞的保护和再生领域具备较好前景.
作者：杨孟奇；庾璐婷；李想；罗晨；王旻 刊期： 2016年第01期
HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用.该研究合成了gp41全长基因序列,将其与pIVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达.考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的影响,在0.2％ Brij78条件下,可溶性gp41重组蛋白的表达水平达到650μg/mL.Ni2亲和层析纯化目标蛋白,纯度达到95.6％;超滤浓缩后,蛋白浓度为0.9 mg/mL,总回收率为70.8％.免疫反应性检测结果显示该gp41重组抗原制备的乳胶HIV抗体诊断试纸能与不同滴度的HIV-1型阳性标本反应,在检测线位置出现红色条带,而与HIV-1型阴性标本无反应.该研究制备了具有完整氨基酸序列的HIV-1型gp41重组抗原,为进一步提高HIV抗体诊断试剂的质量打下了基础.
作者：来力；杨修亮；盛嘉元；黄磊；蔡谨；徐志南 刊期： 2016年第01期
了解Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对人膀胱癌T24细胞的抑制作用,诱导细胞凋亡的效果及对其迁移能力影响.运用Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ干预人膀胱癌T24细胞的体外生长,显微镜观察法观察T24细胞干预前后的生长情况,MTT法检测存活率,Hoechst染色后荧光显微镜下观察细胞凋亡,流式细胞计数(Annexin V/PI双染法)检测凋亡比率,Transwell肿瘤细胞迁移实验来了解Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对T24细胞迁移的影响.Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对人膀胱癌T24细胞有抑制作用,并且呈明显的剂量效应关系.Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ能够诱导T24细胞凋亡,凋亡比率呈剂量依赖性关系.经Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ干预后透过人工基底膜的T24细胞明显减少.Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ具有能够抑制或减弱人膀胱癌T24细胞的生长、增殖、迁移/侵袭/转移的能力,可诱导T24细胞凋亡.
作者：龙永其；周志军；阳新华；谌磊；欧阳曙光 刊期： 2016年第01期
建立一种快速、高效检测MAP30酶活性的方法,并初步研究其部分生物活性.利用MAP30能以PET28aDNA为底物并脱去一些腺嘌呤碱基使超螺旋DNA解旋的特点,建立了测定MAP30酶活性的一种新方法,检测MAP30的酸碱和温度酶活性.MAP30灵敏度1μg,酶催化反应的时间是30 min.适温度和pH值是37℃和8.0.不同pH值环境对MAP30特性的影响是不同的,酸性越强或碱性越强对MAP30的影响越大.不同湿度值环境对MAP30特性的影响是不同的,温度越高MAP30活性损失.因此,合适的酸碱和温度为广泛和深入地研究MAP30酶活性提供了有利的条件.
作者：冷波；吴宇；谭诗珂 刊期： 2016年第01期
细菌群体感应控制致病菌毒力因子分泌、生物膜形成以及耐药性等生理过程,干扰细菌群体感应系统可以降低细菌致病性,筛选具有群体感应抑制作用的中药.该研究以紫色色杆菌ATCC12472作为指示菌,用于筛选群体感应抑制剂,应用化学试剂法测定各个毒力因子表达量.筛选出穿心莲,栀子,连翘,前胡等4种中药具有群体感应抑制作用,亚抑菌浓度的中药提取物能有效降低铜绿假单胞菌绿脓菌素和胞外蛋白酶的表达,抑制生物被膜形成,并能抑制细菌的泳动运动.研究结果显示抑制细菌群体感应能有效降低细菌毒力,为新型抗感染药物的开发提供一条新的途径.
作者：张安；吴洁；储卫华 刊期： 2016年第01期
PCR法扩增叶酸受体α基因片段,经Nco Ⅰ和EcoRⅠ双酶切后克隆到原核表达载体pet22b,并进行双酶切和测序鉴定;将测序正确的重组质粒通过CaCl2法转入BL21(DE3)表达菌株,IPTG诱导蛋白表达,镍柱亲和纯化,通过SDS-PAGE,Western blot和ELISA鉴定蛋白表达;免疫小鼠,血清效价检测蛋白免疫原性.经双酶切和测序验证,成功构建FRα-pet22b表达载体.Western blot验证表明,叶酸受体α基因能在BL21中表达目的蛋白,但ELISA值较低.经免疫后小鼠血清与市售叶酸受体α亲和力差,预示原核表达虽能得到叶酸受体α,但其构象可能与真核表达蛋白不同.
作者：张梅；邱郑；邢黎军；强旭；张娟；王旻 刊期： 2016年第01期
比较前醇沉与后醇沉两种工艺提取虫草素的乙醇用量与虫草素回收率.以醇沉杂质含量及上清液中虫草素浓度为指标,分别选择不同洗脱液浓度、乙醇体积分数、醇沉时间测定醇沉杂质含量及虫草素浓度.结果表明,在优化工艺条件下,后醇沉比前醇沉乙醇用量减少88％,但单次提取虫草素回收率比前醇沉的低20％左右.因此,两种工艺各有优缺点,且均可用于提取虫草素.
作者：张传能；李从镇；毛宁 刊期： 2016年第01期
研究聚山梨酯80各组分中醚链长度(Ethylene oxide number,EO数)与溶血性的关系.用合成聚山梨酯80的生产工艺,以纯化合物山梨醇(Sorbitol)、1,4-失水山梨醇(1,4-sorbitan)及异山梨醇(Isosorbide)为起始原料,与不同摩尔数的环氧乙烷醚化,然后与高纯油酸酯化,合成了不同醚链长度的山梨醇聚氧乙烯醚油酸酯(Ⅰ)、1,4-失水山梨醇聚氧乙烯醚油酸酯(Ⅱ)和异山梨醇聚氧乙烯醚油酸酯(Ⅲ).3种组分分子中,母核、环氧乙烷及油酸的摩尔比为1∶n∶1.2,根据聚山梨酯80的分子结构,取n值为12 ～ 42,再用合成得到的样品考察体外溶血作用.结果证明:聚山梨酯80中3种组分均具有溶血性,溶血性不仅与组分中母体结构有关,而且组分中醚链的长度对溶血性也有很大的影响.3种组分溶血性的大小为Ⅲ＞Ⅱ≈ Ⅰ,当醚链的EO数大于40时,3种组分的溶血性均比较低.
作者：吴仁荣；彭文勇；涂家生 刊期： 2016年第01期
在摇瓶条件下,利用SAS9.0.2软件中的响应面法对裂殖壶菌发酵生产DHA的培养基进行了优化.首先设计Plackett-Burman实验对影响裂殖壶菌(Schizochytrium sp.FJU-512)生产DHA的相关因素进行分析,结果表明,葡萄糖、甘油对DHA产量的影响极显著,(NH4)2SO4对DHA产量影响显著.采用Box-Behnken实验设计和响应面分析方法对Schizochytrium sp.FJU-512发酵产DHA复合碳氮源培养基进行了优化.实验优化确定佳产DHA培养基配方为(g/L):葡萄糖63.94,甘油74.90,(NH4)2SO4 0.24,酵母浸粉10.00,蛋白胨10.00,海水晶15.00,KH2PO4 3.5,MgSO43,维生素B10.005,维生素B12 0.005.在此优化条件下,Schizochytrium sp.FJU-512发酵得到DHA产量可达15.23g/L,较优化前的6.18 g/L,提高了2.46倍,由此可见,Schizochytrium sp.FJU-512具有很好的工业化潜力.实验结果证明用响应面设计方法寻求菌体积累DHA的佳培养基组分是可行的.
作者：张明亮；江贤章；黄建忠 刊期： 2016年第01期
探讨黄芩苷与利巴韦林联用在体内外抗甲型流感病毒的作用.体外实验中,以甲型H1N1流感病毒及甲型H3N2流感病毒感染MDCK细胞,测定黄芩苷与利巴韦林联用对流感病毒的抑制作用;体内实验中,以甲型H1N1流感病毒感染ICR小鼠,测定黄芩苷与利巴韦林联用对实验小鼠的死亡保护作用及小鼠病毒性肺炎的治疗作用.黄芩苷与利巴韦林联用高剂量组,对H1N1和H3N2病毒的抑制率分别达到81.2％和73.0％,对小鼠死亡保护率达80％,显著延长平均生存时间至12.9 d,抑制其体重下降,并对感染小鼠的病毒性肺炎有一定保护作用.黄芩苷与利巴韦林在体外联用,对不同亚型流感病毒的抑制表现为协同作用;二者联用对感染流感小鼠的保护效果明显优于单用.
作者：李梦薇；王婷婷；丁玥；郁洁；靳京；徐君；窦洁；周长林 刊期： 2016年第01期
同时测定中国不同产地甘草中18α-甘草酸和18β-甘草酸含量.采用高效液相色谱法,色谱柱Ecosil-C18分析柱,流动相为乙腈0.1％磷酸盐缓冲液(80∶20,pH =7),体积流量为1.0 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量为10μL.18α-甘草酸和18β-甘草酸检测质量浓度分别在3.145 ～314.7、3.184 ～318.4μg/mL范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关(r =0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.03％;平均加样回收率分别为99.81％、99.47％,RSD分别为0.71％、0.94％(n=6).内蒙古杭锦旗的甘草中甘草酸的含量较高,新疆喀什、宁夏盐池县出产的出产的甘草中甘草酸含量较接近.
作者：张祎 刊期： 2016年第01期
可传播性海绵状脑病(Transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)是一类严重的神经系统退行性疾病,其发生发展与朊病毒蛋白(Prion protein,PrP)的错误折叠有关.兔子是迄今为止已知的极少数难以感染TSEs的哺乳动物之一,其抗TSEs感染的能力缘于兔朊病毒蛋白(Rabbit prion protein,RaPrPC)自身的结构特点.作者通过分析比较兔子以及其它种属朊病毒蛋白β2-α2 loop溶剂可及性(Solvent accessibility),首次揭示RaPrPC分子具有不同于其它朊病毒蛋白的独特的溶剂可及表面.这一特性极可能影响了RaPrPC分子与X蛋白等伴侣因子的相互作用过程,从而有效地阻止了RaPrPC向错误构象的转变.本工作为人们更好理解RaPrPC抗致病因子感染的分子机制提供了有价值的新线索,有助于深化人们对TSEs传播种属屏障的认识.
作者：熊敏倩；文祎；胡薇；林东海 刊期： 2016年第01期
miR-139在结肠癌、肝癌、外周神经鞘瘤、食管鳞状细胞癌、胶质瘤、胃癌中低表达,表明其在上述各种肿瘤中起到重要作用.本研究旨在验证miR-139在胃癌组织中的表达情况,就其在胃癌发生发展中的作用机制进行初步研究.采用实时荧光定量RT-PCR分析胃癌和癌旁组织中miR-139的表达水平;运用生物信息学手段,预测miR-139靶基因,并采用RT-PCR和Western blot分别检测潜在的靶基因在胃癌组织中的mRNA表达和蛋白水平表达变化;将miR-139mimics瞬时转染胃癌细胞AGS细胞系,RT-PCR检测靶基因的表达水平.对瞬时转染miR-139 mimics及inhibitors的AGS细胞系,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化,Tran swel实验检测细胞侵袭能力.结果:(1)miR-139在胃癌中低表达.(2)生物学预测ROCK2是miR-139的靶基因,其在胃癌组织中mRNA和蛋白高表达.(3)miR-139 mimics转染后,抑制ROCK2 mRNA表达.(4)miR-139对胃癌的抑制作用:MTT结果表明,miR-139可抑制胃癌细胞增殖.Transwel实验提示miR-139可抑制细胞的侵袭,miR-139可能通过下调靶基因的表达抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力.
作者：王舰平；许锋；李脉；赵树进 刊期： 2016年第01期
GPR40是典型的7次跨膜受体,是游离脂肪酸的特异性受体.在游离脂肪酸的刺激下,在胰岛β细胞中,它能够放大葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应,激活胰岛β细胞内信号转导途径,调节胰岛素分泌,引起胰岛β细胞过度增殖;在下丘脑中,能够刺激β内啡肽分泌,调节内源的疼痛控制系统,是一种潜在的治疗Ⅱ型糖尿病、中枢系统疼痛、雷夫叙姆综合症、泽尔韦格氏综合症等疾病的靶标.文章对GPR40的激动剂AMG-837、TUG-770、JTT-851、P-11187等药物研究进展进行综述,并对其研究前景进行了展望;虽然基于GPR40受体治疗中枢性中风后疼痛等神经性疾病药物研究较少,但是由于靶点定向优势,要比以前化学合成药物柔和、高效,研究前景不可限量.
作者：王杰；魏云林；季秀玲 刊期： 2016年第01期
疫苗是防止传染性疾病传播有效的方法.然而,由于缺乏能有效激活细胞免疫的疫苗,HIV感染,肿瘤等慢性疾病还不能通过疫苗得到有效防治.树突状细胞是机体功能强的专职抗原提呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和提呈抗原,并引发T细胞介导的细胞免疫反应.理想的生物材料佐剂通常具有3种功能:能将抗原靶向性运输至树突状细胞;并控制抗原在树突状细胞内的释放方式;同时可以激活树突状细胞,增强抗原提呈能力,从而增强抗原特异性的细胞免疫反应.充分了解生物材料和免疫系统的相互作用有利于合理设计生物材料,从而开发出新一代具有细胞免疫激活作用的疫苗佐剂,提高疫苗免疫效力,实现疫苗对更多疾病的有效防治.
作者：陈晓茜；陈欢；张玉彬 刊期： 2016年第01期
长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是长度大于200个核苷酸的非编码RNA的统称,参与了染色质修饰、基因表达调控、转录激活、转录干扰、核内运输等多种生物过程,在肿瘤发生和发展中扮演了重要角色.肺癌是一类致死率高的恶性肿瘤,其发病率也在不断增长,找到预测和治疗肺癌的有效手段是目前极为紧迫的任务.该文对lncRNA在肺癌中的功能机制新进展进行了综述.
作者：张彩艳；金由辛；李艳利 刊期： 2016年第01期
巯基化的聚合物是将巯基化合物与已知高分子共价偶联形成的衍生物.文章综述了巯基化聚合物的制备、理化性质以及在药物和基因传输中的应用,提出了目前巯基化聚合物研究存在的问题以及它的发展趋势.
作者：汪冬梅；邓体瑛 刊期： 2016年第01期
口服给药因简便易操作、不直接损伤机体皮肤或粘膜、生产成本低、可用于长期给药等优点被大多数患者接受.然而,许多药物由于溶解度低、稳定性差和较低的渗透性等因素而难以跨越胃肠道粘膜屏障,导致口服生物利用度低.研究发现,结构和性能相似的载体材料可在水溶液中自发形成混合胶束体系用于包载难溶性药物.与传统的单一胶束制剂相比,混合胶束因具有更好的稳定性、更高的载药量和更强的抗稀释能力而备受关注.将混合胶束用于口服给药系统有助于显著提高难溶性药物在水中的溶解度,保护其免遭胃肠道消化液的降解,增加药物在吸收部位的浓度,从而促进药物的口服吸收.文章结合具体实例,综述了混合胶束在口服给药系统中的新进展,以为后续研究提供参考.
作者：毕学玲；刘建波；张海波 刊期： 2016年第01期
核因子κB(NF-κB)普遍存在于真核生物的细胞中,是重要的诱导性转录因子,在细胞的生长、增殖、分化、凋亡,以及癌变过程中均发挥重要作用.当细胞受到各种内外界的刺激,NF-κB信号通路被激活,核因子与相应基因结合从而调节靶基因的表达.研究发现NF-κB信号通路激活主要有经典途径和旁路途径两种.同时还发现,NF-κB信号通路的激活和抑制会相应的调节细胞各种生理生化反应.在机体中,NF-κB信号通路的激活往往伴有肿瘤或炎症的发生.文章主要综述了NF-κB信号通路相关蛋白的结构和功能,以及NF-κB信号通路的激活和抑制在治疗肿瘤和炎症等疾病方面的的新研究进展.对NF-κB信号通路相关靶点的研究,为新的消炎和抗肿瘤药设计以及疾病的治疗等提供有益的思路.
作者：于锦超；于敏；莫炜 刊期： 2016年第01期
中性粒细胞是非特异性免疫系统中的重要一员,介导吞噬和杀菌作用.中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞受到刺激后释放的一种纤维网状结构.近年来,NETs作为中性粒细胞一种全新的机制在自身免疫性疾病上的研究备受关注.NETs在固有免疫中主要利用其特殊的网状结构捕获病原微生物并对其消化加工.内源性和外源性抗原的修饰是中性粒细胞胞外诱捕网主要特点,可产生多种新的自身抗原.诱捕网中组蛋白瓜氨酸化已确定参与多种自身免疫病,并且患者体内存在异常的NETs,并与疾病严重程度呈正相关.文章结合近年来的文献对NETs的形成、NETs参与自身免疫性疾病的发生发展以及探索其应用于临床研究的可能机制分别进行了综述.
作者：刘坤锋；吴洁 刊期： 2016年第01期
