高尔基体磷蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)在正常细胞中是一种磷酸化的高尔基体膜蛋白,参与执行高尔基体的蛋白质分选功能.GOLPH3已报道参与多种人类癌症,研究表明GOLPH3是一个全新的致癌基因,能促进肿瘤细胞的增殖和迁移,同时也可能是肿瘤治疗的新靶点.然而,其在胰腺癌中的临床意义和生物学作用尚不清楚.该研究通过重组慢病毒表达RNAi的方法,构建稳定细胞系使GOLPH3基因在胰腺癌细胞株colo357中表达沉默,同时构建过表达GOLPH3基因的colo357稳定细胞系,通过MTT实验,伤痕愈合实验以及Transwell实验研究GOLPH3基因在胰腺癌细胞中的增殖、侵袭以及转移能力中的作用.结果显示沉默GOLPH3基因的表达可抑制人胰腺癌细胞的增殖力、迁移力和侵袭力,提示GOLPH3有可能成为潜在的肿瘤标志物和独立的预后因子.
作者：张利科；侍阳 刊期： 2016年第05期
研究在大肠杆菌中表达重组人胱抑素C(Cystatin C,Cys C)重链单域抗体(Variable domain of the heavy chain of heavy-chain antibody,VHH),经纯化和复性后,建立测定人血清Cys C的胶乳增强免疫比浊法(Particle enhanced turbidimetric immunoassay,PETIA).根据大肠杆菌编码蛋白的特性设计Cys C重链单域抗体编码基因序列,人工合成目的基因克隆至PET32a(+)载体中,构建重组人Cys C重链单域抗体原核表达质粒PET32a(+)-Cys C重链单域抗体,测序鉴定正确后转入大肠杆菌BL21中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,所获得的目的抗体经Ni-NTA亲和层析法进行纯化,通过稀释复性,SDS-PAGE鉴定其纯度.Cys C重链单域抗体化学偶联胶乳颗粒,建立PETIA法测定人血清Cys C.SDS-PAGE电泳分析显示,表达的Cys C重链单域抗体相对分子质量约为53 k,经Ni-NTA亲和层析法纯化后抗体纯度达90％以上,复性回收率为60％左右.用Cys C重链单域抗体建立的测定人血清Cys C的PETIA,能检测到血清中的Cys C含量.成功构建Cys C重链单域抗体原核表达系统并获得了有活性的Cys C重链单域抗体,该抗体可用于建立测定Cys C的PETIA法,为下一步开发Cys C的免疫检测试剂盒奠定了基础.
作者：赵志杰；朱月蓉；刘海霞；樊燕蓉；徐根兴 刊期： 2016年第05期
建立RP-HPLC法测定盐酸伊托必利片的含量及有关物质.采用Diamonsil C18 (4.6 mm ×250 mm,5μm)色谱柱,含量测定以0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(用稀磷酸或稀氢氧化钾溶液调节pH至4.0)-乙腈(80∶ 20)为流动相,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为258 nm,柱温为30℃.有关物质测定以0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(调节pH至4.0)为流动相A,乙腈为流动相B,进行梯度洗脱(0～ 12 min,80∶20;12～17 min,80∶ 20→60∶40;17～22 min,60∶40;22 ～23 min,60∶ 40→80∶20;23～ 38 min,80∶ 20),体积流量为1.0 mL/min,检测波长为258 nm,柱温为30℃.结果表明,在该色谱条件下,有关物质各杂质峰与主峰之间的分离良好,辅料对主成分的含量测定无干扰.盐酸伊托必利在10～ 200 μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r为0.999 7,检测限为6 ng,平均回收率为100.49％(RSD=0.58％).3批样品含量测定结果分别为100.66％,99.94％,99.73％,单个大杂质分别为0.12％,0.25％,0.19％,总杂质分别为0.47％,0.62％,0.54％.本方法重现性好,专属性强,可用于盐酸伊托必利片的质量控制.
作者：徐月华；钱佳佳 刊期： 2016年第05期
建立同时测定非诺贝酸含量和有关物质的高效液相色谱法.采用苯基硅烷键合硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为10 mmol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至2.5)-乙腈(35∶65),体积流量为1.0 mL/min,检测波长为287 nm,柱温为室温.应用该色谱条件进行有关物质测定时,非诺贝酸与各有关物质之间分离度良好,各杂质对主成份的含量测定无影响.非诺贝酸浓度在0.100 2 ～ 1.002 μg/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系,r =0.999 9,平均回收率为99.60％,99.81％,99.85％,RSD值为0.8％.定量限为50.25 ng.低检出限为12.65 ng.3批样品的含量测定结果分别为99.10％,99.58％,100.02％.总杂质分别为:0.05％,0.07％,0.07％.该方法灵敏度高,简单易行,结果准确可靠,可用于测定非诺贝酸的含量和有关物质.
作者：吉秋霞；高云兵 刊期： 2016年第05期
9α-羟基雄烯二酮(9α-OH-AD)是制备倍他米松及地塞米松等甾体类药物的重要中间产物之一,在工业应用中,常使用谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇等植物甾醇作为底物,通过分枝杆菌等菌种生物转化获得9α-OH-AD.在此过程中,3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)是生物转化植物甾醇为9α-OH-AD的关键酶,该酶由3-甾酮-9α-羟基化酶(KshA)和3-甾酮-9α-羟基化酶还原酶(KshB)两个亚基构成.因此,提高3-甾酮-9α-羟基化酶的活性对促进9α-OH-AD的合成具有极其重要的作用.为了获得高效积累9α-OH-AD产物的重组菌株,根据NCBI提供的基因序列为主,相关设计引物软件Prime 5和DNAMAN等辅助工具设计引物KshA和KshB,PCR扩增,经过EcoRⅠ、NdeⅠ和EcoRⅠ、Hind Ⅲ分别双酶切KshA和KshB,同时与载体pNIT进行连接,获得了含有KshA基因和KshB基因的重组质粒pNIT-KshA-KshB,后再将构建好的质粒电转化入分枝杆菌中,根据小抑菌浓度卡那霉素抗性平板上筛选得到1株阳性转化子M-ksH.发酵催化积累9α-OH-AD的实验结果表明,当底物植物甾醇投料为10 g/L时,M-ksH积累9α-OH-AD产量相比较出发菌株提高了0.486 g/L,重组菌的转化率提高了50.78％.研究结果可为提高甾体类药物9-OH-AD生产效率提供一定的基础.
作者：王贵娥；陈艺强；范永仙；李剑锋；陈小龙 刊期： 2016年第05期
探究蓝藻PCC7002是否可以对黄芩苷进行生物转化.通过吸光度法检测蓝藻生长能力,利用薄层色谱法检测转化产物,利用高效液相色谱法进一步确认.确定蓝藻生物转化方法为:先将蓝藻培养到浓度达到A700nm值0.8,再将培养液pH调为5.5,加入0.1 mg/mL的底物,在35℃摇床培养3d后,取上清进行薄层色谱检测,结果显示薄层板上有新的点出现,经高效液相验证为新的转化产物,极性略大于黄芩苷.蓝藻PCC7002能对黄芩苷进行转化,转化效率初步推断为37.5％.
作者：曹江叶；陈斌；刘永刚；王春梅 刊期： 2016年第05期
喜树碱是从喜树(Camptotheca acuminata Decne.)里提取的一种抗癌药物.但由于喜树中喜树碱的含量十分低,喜树碱的获取十分困难.在这个研究中,我们采用了组织块法从喜树的果实、树皮、叶片中分离筛选能够生产喜树碱的内生真菌,一共从分离得到了15株菌株.经过摇瓶发酵培养后,用TLC法与HPLC法对其菌丝体提取物进行分析,发现有1株菌株能够产生喜树碱(Camptothecin,CPT),其喜树碱产量为227 μg/L.且该菌株在常规的PDA液体培养基中易于培养、生长迅速,表明该菌是一株优良的喜树碱产生菌.
作者：盛贻林；李云霞；俞文榜；张璨 刊期： 2016年第05期
对链霉素发酵培养基的配方进行优化,以提高发酵产物链霉素的效价.用Minitab软件的试验设计功能对培养基的配方进行因子及水平设计.先后通过Plackett-Burman设计、陡爬坡实验和响应面法中的中心复合实验对实验数据和结果进行统计分析,并利用软件中的优化器获得优设置,进行验证试验,与未优化之前进行比较.实验设计初始进行的发酵实验的平均效价为2 921.08 u/mL.经过设计与分析、调整与优化,以确定的优培养基配方进行实验,结果显示链霉素的平均效价为3 346.50 u/mL,提高了425.42 u/mL,提高率为14.6％.实验稳定性好,具有可重复性.利用Minitab软件的试验设计功能进行链霉素发酵培养基的配方设计与优化取得了良好的效果.
作者：高春慧；金伟；高春景；张哲；卢春玲；闫婷婷；晁红英；祈维蓉 刊期： 2016年第05期
极端微生物由于生长环境特殊,因而具有较为特殊的遗传背景和代谢途径,可产生结构新颖的活性代谢物质和一些特殊功能的酶类,在药物的研发和工农业生产中具有良好的应用前景.该文对近年来有关极端微生物在药物先导化合物的发现、农业生产中的生物防治以及环境治理方面的应用进行了总结.
作者：庄原；彭程；叶波平 刊期： 2016年第05期
三叶青含有黄酮类、多糖类等多种有效成分,具有非常高的药用价值,如具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛、抗肿瘤等功效.文章在查阅相关文献的基础上,从生物学性状、理化指标及分子水平系统阐述了目前三叶青种质资源评价方面的研究进展,同时从组织培养与理化诱变两个方面对三叶青种质资源创制方面的研究进行了综述,以期为以后的研究提供参考与思路.
作者：徐旻；尹海日；张宁；沈晓霞；王忠华 刊期： 2016年第05期
青霉属真菌是自然界中生物有机成分的重要分解者,广泛分布在地球的各个角落.青霉属真菌能产生许多具抗菌、抗肿瘤和抗病毒功能的活性次生代谢产物,分泌多种高活性的多糖、蛋白质、脂肪和木质素等多聚物的水解酶类,降解多种单环和多环芳香类环境污染物.近年来,随着对青霉属真菌全基因组序列分析工作的开展以及对各种极端环境中生长的青霉属真菌资源的挖掘,该属真菌在分类学、活性代谢产物和功能酶类研究以及环境污染物的生物降解等领域取得了一系列新的进展,特别是通过向培养基中添加特定成分,或者令青霉菌与其它微生物共培养,获取新型活性代谢产物,以及通过宏基因组学和基因组学方法,探索和获取新的酶及其编码基因,新的代谢途径和代谢产物.该文在总结近年来有关工作的基础上,对青霉属真菌资源开发进行了综述和总结.
作者：罗清；彭程；叶波平 刊期： 2016年第05期
胸腺素作为一种超家族蛋白在免疫调节、机体发育等生理活动中发挥重要作用,广泛分布于脊椎动物和无脊椎动物中,在进化过程中高度保守.对于脊椎动物胸腺素功能的研究比较清楚,已经被开发成药物应用于临床,治疗免疫缺陷性疾病、肝炎以及某些癌症.但对于无脊椎动物特别是对于家蚕等昆虫的胸腺素研究较少.在NCBI数据库中可以找到仅20种包含THY保守结构域的相关蛋白,这些蛋白分别存在于家蚕、果蝇等物种.该文就昆虫胸腺素超家族蛋白近20年来的研究进展进行了综述,包括昆虫胸腺素超家族蛋白的同源性、进化分析以及不同昆虫胸腺素的功能和特征.
作者：张晨；吴业卿；方强；王永娣；张文平 刊期： 2016年第05期
CRISPR/Cas (Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9)是近年来出现的一种基因组定点编辑新技术,由于它具有突变效率高、操作简单及成本低等巨大优势,所以被广泛地应用于生物医药研究的各个领域,并取得了革命性的变化.该文对CRISPR技术在生物医药研究领域的应用作了综述.检索并归纳相关国内外文献,分别介绍了CRISPR/Cas系统的作用原理、技术流程、研究进展以及该技术可能的应用前景等方面内容,以期为相关领域的科研人员提供有价值的参考.
作者：姜泽群；杨烨 刊期： 2016年第05期
蛋白多肽类药物是指能影响和调节机体生理、生化和病理过程,用以诊断、预防和治疗的内源性生物大分子.具有原料简单易得、特异性强、使用剂量少、毒性低、治疗效果显著等优点.但是此类药物的稳定性差,生物半衰期较短,为维持疗效,将此类药物制成缓释药物传递系统,来保护其结构稳定,提高给药效率,并实现靶向给药,选取优良的载体是十分重要的.文章就蛋白质多肽类药物缓释传递系统的载体材料进行了概述,表明合成高分子材料比天然来源聚合物和无机物更具有优势,同时对比了几种常用的合成高分子材料如聚乳酸,聚乳酸-羟基乙酸共聚物,聚己内酯等用于载蛋白多肽类药物的优缺点,以期为后续研究提供参考.
作者：丁婷婷；范洋；林贵梅 刊期： 2016年第05期
基因治疗是生物治疗的重要领域之一.近年来,类风湿性关节炎的基因治疗得到越来越多的关注.该文对类风湿性关节炎基因治疗的研究进行了综述,重点介绍了治疗类风湿性关节炎的目标基因和递送方法,为发展类风湿性关节炎的基因治疗提供参考.
作者：魏卓远；鞠曹云；张灿 刊期： 2016年第05期
声动力疗法是一种新型的疾病治疗手段,主要利用低强度超声激活声敏剂,促使其发挥声动力活性以治疗疾病.它具有无创性、毒副作用低、且能够克服多药耐药性等优点.然而,声敏剂较低的水溶性、无序的组织分布和药代动力学参数差等特点,极大地制约了声动力疗法的临床应用.引入纳米技术,不仅能够显著增溶难溶性声敏剂,还能够提高声敏剂的声动力活性,改善其组织分布,提高治疗安全性.文章结合具体实例,综述了纳米技术在疾病声动力疗法中的应用优势和进展,为后续研究提高参考.
作者：李宁；刘晓燕 刊期： 2016年第05期
单增李斯特菌是一种致病菌,且由于其强大的繁殖和生存能力,广泛存在于自然界.单增李斯特菌可导致人畜共患病,严重阻碍了食品工业的发展,得到世界各地的广泛关注.因此检测单增李斯特菌以预防其感染动物和人类的检测方法和技术显得至关重要,人们渴望找到一种高效并准确检测单增李斯特菌的有效方法.如今,借助于许多科研工作者的努力,许多检测技术和方法已问世或处于探索之中.例如,传统检测技术被许多地方如国家食品药品监督管理局所采用,但耗时过久无法适应食品工业的迅速发展;许多被实验证明有效的快速检测技术耗时短,却面临着如高成本或低灵敏度等其他急需解决的缺点以便于推广应用.总的来看,许多新的检测技术与免疫学方法、生物传感器、PCR或其它先进技术有关,基于不同的原理有不同的特点和适用领域.文章整合近年来国内外单增李斯特菌检测技术的研究进展成果或调研,对目前国内外较为常用的检测方法如传统培养检测法、生物传感器法、环介导等温扩增技术、PCR-RFLP法或ERIC-PCR等的作用机制、检测效果和优缺点等进行对比,让相关工作者对目前的单核增生李斯特氏菌检测方法及进展有一个全面的了解,帮助相关工作者更好的选择相应检测技术或对具潜在价值的某一技术进行进一步的探索.
作者：郑泽添；鲁博；吕正兵；盛清；聂作明 刊期： 2016年第05期
核桃是常见的坚果之一,在中国因产量丰富,种植面积广而闻名.核桃仁是核桃的主要食用部分,因其含有丰富的脂质、蛋白质、糖类和矿物质等,被封为“四大坚果”之一,因此深入探究核桃的成分和活性就变得尤为重要.文章结合已有的文献和成方探讨核桃仁的成分及多种药理作用,综述了核桃仁中的主要成分脂质,蛋白质,碳水化合物等的提取方法,及不同成分的功效,实验证明核桃仁有抗氧化、健脑保健、抑菌、抗肿瘤、抗疲劳、增强抵抗力及降血糖等功效.为进一步研究开发利用核桃资源提供了思路和方法.
作者：李照；孙磊；高飞；钱永常；王向军 刊期： 2016年第05期
在肿瘤治疗过程中,小分子化疗药物对肿瘤细胞具备高度杀伤力但靶向性较差,副作用较严重;而单克隆抗体虽靶向性良好但抗肿瘤活性较弱,使用剂量较大.抗体-药物偶联物(Antibody-drag conjugates,ADCs)的出现正好使两者互补,代表了新一代抗体技术的发展方向,被认为是抗肿瘤的有力武器.文章从ADCs的3个组成部分即抗体、化学药物及连接物3方面讨论其研发过程中的影响因素并介绍ADCs的安全隐患、企业研发现状、研发难点及挑战.展望了ADCs的发展趋势.
作者：朱芹汶；周婧琪 刊期： 2016年第05期
阐述酵素化妆品及其研发动态.通过调研及文献资料分析和总结.酵素化妆品是包括酶以及产酶微生物和相关调节因子的一类生物制品,在美白祛斑、脱屑、祛痘、防晒、抗衰老、抗菌等方面发挥多重的化妆品功效.现已有169个酶类及108个酵素类进口化妆品批文,国产有15个酶类和2个米糠酵素特殊用途化妆品批文,近年国产非特殊用途酵素化妆品突飞猛进,仅产品名称含酵素一词的化妆品就已备案3 000多个,大多为添加了蛋白酶、酵母提取物、酵母菌发酵产物和乳酸菌发酵产物等的产品,并以面膜、洗发护发和沐浴系列化妆品为主.酵素化妆品是近年化妆品领域的热点,发展前景广阔.
作者：刘祺；陈朝银；赵声兰 刊期： 2016年第05期
