研究胶原蛋白-壳聚糖-海藻酸盐(Collagen-chitosan-alginate,CCA)复合敷料的促愈合效果,并初步评价生物安全性.制备大鼠背部全皮层创伤模型,以医用纱布为阴性对照,市售壳聚糖敷料为阳性对照,术后不同时期取材并进行组织学和EGF、bFGF、TGF-β和CD31免疫组化染色观察.采用CCK-8细胞毒性实验进行初步安全性评价.CCA复合敷料能促进创面愈合,术后d7,CCA组伤口愈合率为(70.26±1.39)%,显著高于纱布组的(60.59±0.71)%(P<0.05),极显著高于壳聚糖组的(58.38±0.68)%(P<0.01).术后d 12,CCA组愈合率达到(98.32±0.48)%.免疫组化结果表明,术后d5,CCA组的EGF、bFGF、TGF-β表达率达到峰值,提前于纱布组.CD31染色结果表明,CCA组新生血管生成于术后d5活跃,极显著高于纱布组(P<0.01).各浓度的敷料浸提液细胞增殖率均大于75%,毒性等级为一级,无细胞毒性.CCA复合敷料具有显著的促愈合作用,有望开发为高效医用敷料.
作者:谢海霞;沈先荣;葛卫红;陈秀丽;何颖;王庆蓉;陈伟 刊期: 2016年第06期
采用主动载药技术制备盐酸表阿霉素脂质体,用甲氧基聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)对其进行修饰制备表阿霉素长循环脂质体,以降低药物的毒性,提高药物对肿瘤部位的被动靶向性.并对处方工艺进行优化,考察其体外释放.以包封率为指标采用乙醇注入法结合硫酸铵梯度法制备表阿霉素普通脂质体和长循环脂质体,采用正交设计优化处方,激光粒度分析仪测定粒径及分布,电位仪测定Zeta电位,应用微柱离心法测定脂质体的包封率;以累积释药百分率为指标,通过方程拟合释药曲线,考察制剂的体外释药特性.通过正交试验设计优化确立普通脂质体的处方为大豆磷脂浓度为2.5%,药物磷脂比为1∶12.5,磷脂胆固醇比例为4∶1,硫酸铵浓度为200 mmol/L,载药孵育温度为50℃,载药时间为30 min.采用与普通脂质体相同的工艺及处方制备表阿霉素长循环脂质体,其中PEG2000-DSPE摩尔比为4%.优化处方制得的两种脂质体外观为均一桔红色半透明乳状液,平均粒径分别为144 nm和126 nm,Zeta电位分别为-16.5 mv和-35.3 my,用微柱离心法测得包封率分别为94.30%和97.84%.采用透析法对普通脂质体和长循环脂质体进行了体外释放研究,24h的累计释放度均分别为38.15%和24.65%,长循环脂质体释放比普通脂质体缓慢.长循环脂质体体外释放符合Higuchi方程Q=0.056 4 t1/2-0.032 2(r =0.971 9).本实验获得了较理想的盐酸表阿霉素长循环脂质体,其体外释放特性符合缓释制剂特征.
作者:王晶 刊期: 2016年第06期
以赖氨酸(Lys)修饰阳离子交换树脂D155合成出赖氨酸修饰两性阳离子交换树脂(Lys-D155),再以该树脂为载体,制备出固定化腈水解酶(I-Nit-D155),后以I-Nit-D155为催化剂水解R,S-扁桃腈研究制备固定化腈水解酶的优化条件、主要酶学性质并对水解产物进行表征.红外分析表明,经赖氨酸修饰的D155成功制备出固定化腈水解酶I-Nit-D155.制备I-Nit-D155的优化条件为:室温、pH 5.25、载体游离氨基/戊二醛/腈水解酶摩尔比1:0.11:2.12×10-4,I-Nit-D15活力为10 ~ 15 U/mg、偶联率43.2%、Km值23.11 mmol/L,重复使用15次后活力仍可保持50%以上;I-Nit-D15水解R,S-扁桃腈的产物的熔点、比旋光度等分别为133℃、-155.57°,与R-扁桃酸一致,经红外、1H-和13C-核磁共振波谱表征确证为R-扁桃酸.
作者:陶仁友;江文;石业新;徐扬;康宏宽;周小华;周志明 刊期: 2016年第06期
为了探讨近红外光谱分析技术作为快速分析技术应用于检测万古霉素血药浓度的可行性,配制浓度梯度在2~98 μg/mL的万古霉素绵羊血浆样品,采用透射模式采集样品在10 000 ~4 000 cm-1的透射光谱.利用K-S方法将样品集划分为校正集和验证集,通过预处理方法的优化选择优的光谱预处理方法,建立万古霉素血药浓度分析模型并对模型进行评价.利用一阶导数Norris平滑对光谱进行预处理后建立的PLS模型,模型的RMSEP=3.182 μg/mL,Rp=0.993 9,RPD =8.6,可用于血浆中万古霉素的定量分析.近红外光谱分析技术用于血浆中万古霉素浓度具有很高的准确性,可用于体外血浆样品中万古霉素浓度的检测.
作者:赵洁;臧恒昌;姜笃银 刊期: 2016年第06期
为了建立气相色谱法测定鼻炎康片中马来酸氯苯那敏的含量,采用HP-5MS毛细管柱经程序升温技术分离待测组分,外标法计算含量,进样口温度:270℃;FID检测器,检测器温度300℃;进样量1μL.马来酸氯苯那敏在0.01 ~0.1 mg/mL(相关系数r=0.999 9)范围内呈良好线性关系,实验仪器精密度良好(RSD=0.199%),重复性好(RSD=0.46%),实验稳定性良好,平均加样回收率为98.4%(RSD=0.503%,n=9).方法灵敏度高,重现性好,专属性强,且操作简便,可用于鼻炎康的质量控制.
作者:梁凤兰;黄政贵 刊期: 2016年第06期
从T细胞亚群变化的角度探讨补肾活血汤治疗免疫性卵巢早衰的免疫调控机制.对B6AF1小鼠进行皮下注射ZP3多肽,建立自身免疫性卵巢早衰小鼠模型,用补肾活血汤进行灌胃治疗,实验结束后,计算脏器指数,对卵巢进行H&E染色和ZP3免疫荧光染色来检测卵巢组织形态变化和透明带抗体分布,流式细胞术检测脾脏中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+ CD25+ Treg细胞和CD4+ IL-17+ Th17细胞比例.结果显示补肾活血汤能够提高免疫性卵巢早衰小鼠的卵巢指数,减少卵巢组织中炎症细胞浸润,增加卵泡的数量,减少卵巢组织中透明带抗体的产生;补肾活血汤能够下调脾脏中CD8+T细胞和Th17细胞的比例,上调脾脏中CD4+T细胞和Treg细胞的比例.表明补肾活血汤能够通过调节T细胞亚群的平衡,减轻炎症反应的程度,从而改善免疫性卵巢早衰.
作者:卢燕;陈思;王佩娟 刊期: 2016年第06期
利用基因工程技术表达重组人组织因子(Human tissue factor,hTF),并进行纯化及复性研究.构建插入目的基因的pET28a(+)-hTF重组质粒,转化到大肠杆菌中,获得重组菌,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导其表达,菌体经超声裂解、离心收集包涵体,用8 mol/L尿素溶解包涵体、Ni-NTA纯化,采用透析复性和柱上复性两种方式获得复性的重组人HTF.柱上复性和透析复性均获得具有生物活性的重组人hTF,但柱上复性的复性率为72%,明显高于透析复性的复性率16%.成功构建高表达人重组hTF的工程菌,通过柱上复性获得高纯度具有生物活性的重组人hTF蛋白,为hTF的研究奠定了基础.
作者:徐艺菲;李佳萌;齐永;陈红霞;潘英;李素芹;李素梅;陈晨;王新国 刊期: 2016年第06期
为了研究半寄生药用植物百蕊草组织培养,为其工厂化育苗和获得药用活性成分的细胞悬浮培养奠定基础,以百蕊草茎和叶为外植体,MS为基本培养基,添加不同种类和浓度的激素,研究其愈伤组织、丛生芽诱导及其继代培养和生根诱导等一系列百蕊草植株再生条件.百蕊草的茎是愈伤组织诱导的适外植体,并以MS+2,4-D 1.0 mg/L为适培养基,愈伤组织继代培养的适培养基是MS+ 2,4-D 0.5 mg/L;丛生芽诱导以MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.25 mg/L和MS +6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.125 mg/L为好,适当降低激素浓度完成丛生芽继代培养;百蕊草愈伤组织或丛生芽的瓶内诱导生根佳组合是MS+ ABT 0.3 mg/L+活性炭2.0 mg/L;丛生芽瓶外生根诱导以ABT 90 mg/L浸泡60 min效果佳.文章建立了较为完善的百蕊草植株再生的技术体系.
作者:黄浩;杨大为;侯巧玉;沈丽萍;赵莹;李姝颖;吴月娴;金国虔 刊期: 2016年第06期
研究了基于荧光定量PCR方法的肝素粗品种属来源质控方法,用于肝素药品生产企业的原料验收质量控制.该方法采用实时定量PCR法,针对猪、牛、绵羊、山羊基因组特有的基因序列设计引物与探针,采用聚合酶链式反应对目标基因进行扩增,利用扩增曲线的Ct值绘制标准曲线,通过未知样品的Ct值对未知样品初始模板中的基因进行定量.测定时通过肝素酶处理肝素原料,以消除肝素介导的PCR抑制效应.结果:该方法在本实验室条件下具有较好的专属性、准确度、精密度和耐用性:猪基因在30 ~0.06 ng/μL范围内呈良好线性,牛、绵羊、山羊基因在0.6 ~0.000 3 ng/μL范围内呈良好线性;猪基因的定量限为0.001 ng/ μL,牛、绵羊、山羊基因的定量限为0.000 3 ng/μL.本质控方法较基因组纯化试剂盒提纯方法具有保证被检基因的真实性、原始性、完整性等优点.
作者:周翔;顾春华;陶翎;吴海燕;姚毅;韦利军;何义飞 刊期: 2016年第06期
某些革兰阴性菌是临床感染的重要病原菌,面对越来越严重的耐药菌威胁,多黏菌素已经成为临床抗多药耐药革兰阴性菌病原菌的后一道防线.革兰阴性菌中脂质A的修饰可以造成细菌表面电负性的变化,进而造成对于多黏菌素的耐药,该文综述了铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、沙门氏菌和弗朗西斯菌等重要革兰阴性菌中,脂质A修饰的研究进展,以期为临床多黏菌素耐药机制及其相关药物的开发提供参考.
作者:李国亮;郑昆;陈代杰;王华;邵雷 刊期: 2016年第06期
单细胞测序是在单个细胞水平对基因组或转录组进行扩增并测序的先进技术,在解决生物异质性和生物材料的低获取量等问题上具有独特优势,极大改变了人们对许多生物现象的理解.文章概括了当前单细胞基因组、转录组以及DNA甲基化测序的常用方法,重点举例详述了单细胞转录组测序的技术流程,并列举了单细胞测序技术在肿瘤学、发育生物学、免疫学等医药研究领域中的应用.
作者:周立华;程智悦;杨烨 刊期: 2016年第06期
血管生成是肿瘤组织迅速增殖和转移、扩散的重要条件之一,血管内皮生长因子是肿瘤血管生成的关键调控者,也是一种表达于整个肿瘤生命周期的血管生成因子.针对血管生成、特别是血管内皮生长因子为靶点来进行肿瘤治疗已经成为当前研究的一个热点.天然产物及其化学成分具有良好的抑制肿瘤血管生成的效用,且毒副作用小,具有多成分、多环节、多靶点效应等特点,该文以三叶青为代表,综述了天然产物在以血管内皮生长因子为作用靶点的抑制肿瘤转移方面的研究进展.
作者:孙磊;李照;高飞;白岩;钱永常;王向军 刊期: 2016年第06期
万古霉素属于糖肽类窄谱抗生素,临床上主要用于治疗耐药金黄色葡萄球菌引起的严重感染,如骨髓炎、肺炎、心内膜炎等.因其不易产生细菌耐药性,受到了越来越多的关注,一直被专家称为“人类对付顽固性耐药菌株的后一道防线”.但是,万古霉素在临床上有时需要长期大量给药,在体内会产生许多不良反应,如肾功能衰竭、耳毒性、过敏反应等.为了解决万古霉素的毒性问题,提高其疗效,研发万古霉素新剂型成为近年来新药研发的热点之一.通过检索文献,文章就万古霉素载体的研究进展进行综述.
作者:田柳;杨振磊;黄桂华 刊期: 2016年第06期
树突状细胞是目前已知的功能强的抗原呈递细胞,具有调节免疫应答与诱导免疫耐受的能力,发挥抗肿瘤生长的功效.随着肿瘤免疫治疗的发展,人们发现利用树突状细胞表面的受体设计靶向给药系统,可以提高药物的疗效.受体介导的药物传输是当前主动靶向给药研究的热点,通过参考近3年的文献,文章综述了靶向树突状细胞的药物输送载体,展示其良好的应用前景.
作者:魏词 刊期: 2016年第06期
胃肠道是集消化、吸收、代谢、免疫、内分泌于一体的特殊的“微生物摇篮”,菌群数量众多,各菌种之间互相制约,互相依存,在质和量上达成一种生态平衡.随着分子生物技术以及微生物鉴定技术的发展,胃肠道微生物研究也随之进入了一个新时期,国内外众多新研究表明,胃肠道微生物在机体的营养物质代谢、自身发育、自身免疫、疾病产生及癌症治疗等方面都起到极其重要的作用.胃肠道菌群具有的特殊免疫活性,对宿主生理机能的影响也越来越为人们所关注.海洋鱼类种类丰富,其生活环境的多样性及特殊性,使得其胃肠道微生物较为特殊.目前我国对于鱼类的研究主要集中在淡水养殖鱼类上,对于海洋鱼类的研究较少,且此方面的研究主要集中在大黄鱼、大菱鲆等海洋经济鱼类上.近年来陆续有研究表明在海洋鱼类胃肠道中中分离到的微生物种类繁多,但以细菌居多.具有拮抗致病菌活性的菌系,作为胃肠道内的益生菌,其对宿主具有特殊的作用.文章就海洋鱼类胃肠道微生物的研究概况做简述,特别展示海洋鱼类胃肠道微生物巨大的研究价值以及利用前景.
作者:李倩;洪梦佳;章雨牧;张文杰;吕正兵 刊期: 2016年第06期
阳离子抗菌肽是一类小分子多肽,具有抗细菌、抗真菌、病毒等微生物感染以及杀伤恶性肿瘤细胞等多种生物学功能,具有发展为新型抗菌、抗癌药物的重要应用前景.然而,抗菌肽的溶血毒性仍然是阻碍抗菌肽应用的关键因素.该文主要从螺旋度、两亲性、疏水性、电荷等阳离子抗菌肽自身的结构参数以及膜脂、膜蛋白、糖分子等红细胞膜的结构组分两方面对抗菌肽溶血机制的研究进展进行了综述,并简述了降低溶血性的研究进展,期望能有助于设计治疗潜力的抗菌肽应用于临床.
作者:李绘春;荣炜炜;钱康英;陈玉清 刊期: 2016年第06期
感染人类的8种疱疹病毒中的3型人类疱疹病毒——带状疱疹病毒和4型型人类疱疹病毒——EB病毒,感染范围广、病痛时间长.并且都与多种癌症的发生相关,备受国内外广泛关注.文章从病原学、流行病学方面,探讨这两型病毒的发病机制、及其在特殊人群中传染的影响,讨论围绕这两型病毒研制开发的重组疫苗、亚单位疫苗的国内外在研疫苗的的进展进行综述,探讨其中可行的技术及思路,展望两类疫苗在预防病毒传染和临床治疗相关癌症的应用前景.
作者:赖欣;王丽丽;钱雯 刊期: 2016年第06期
CRISPR-Cas9技术来源于细菌的适应性防御系统,除了广泛应用的基因编辑功能之外,还可应用于基因激活或基因抑制(CRISPRa或CRISPRi)的功能研究,为研究基因调节提供了新的方法.目前,已有报道探讨了CRISPR技术在基因调节方面的潜能,该文就CRSIPR-Cas9技术在基因调节方面的研究进展以及与其它技术的比较进行了综述,并对该技术在将来的应用进行了展望.
作者:吴卫军;赵婕青;周振华;孙倩;葛卫红 刊期: 2016年第06期
鸡蛋包括胚胎发育所必需的营养物质和生长因子,还有从母鸡血液转移到蛋黄为小鸡提供免疫力的抗体.自从19世纪末期发现卵黄抗体(IgY),抗原特异性卵黄抗体被医学和研究领域广泛应用.IgY研究有价值和前景的是被动免疫预防和治疗人类和动物疾病.IgY结构中Fc片段的存在使得其更加疏水,适合在卵黄这种高脂环境存在,而且IgY性质较稳定,口服不易发生过敏反应,在家禽腹泻和人类胃炎、肠炎及牙周炎等疾病的预防和治疗中有非常出色的表现.免疫母鸡可获得特异性抗体,卵黄中的IgY经稀释、凝集和离心等步骤纯化,制成含抗原特异性IgY产品,这种IgY产品致力于改善家禽和人类健康.
作者:王芳;付强;姜胜男;郭锐华;周喻;包斌;吴文惠 刊期: 2016年第06期