目的: 观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影响,找出适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法. 方法: 采用免疫荧光的方法观察在使用不同固定剂(2%多聚甲醛,4%甲醛,甲醇,丙酮,10%三氯醋酸)及0.3%TritonX-100穿孔的条件下,RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位.结果: 用2%多聚甲醛固定,不用0.3%TritonX-100时,染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布,核内则有RhoA蛋白浓聚;用0.3%TritonX-100后,质内只能见极少量阳性染色,核内蛋白染色变得清晰.甲醛固定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布,使用TritonX-100后染色更为清楚.甲醇和丙酮固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布,核内基本未见阳性分布,加TritonX-100后核内染色增强,胞质染色减弱.另外,使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡,胞质胞核都可见,加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚,胞质染色减少.结论: 用免疫荧光法观察RhoA定位时,固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定位具有较大的影响.
作者：秦犹；陈永昌 刊期： 2006年第05期
目的: 研究SARS-CoV表面S蛋白由动物向人类跨种传播过程中的适应性进化过程.方法: 用系统进化树构建和群体遗传学方法,对100个S基因序列进行了分析.这些序列均从GenBank获得,并能反映整个SARS流行期.结果: 依据系统进化树和流行病学资料,将SARS病毒分为三个流行群:02-04跨种传播群、03-早中期流行群和03-晚期流行群.它们分别代表SARS-CoV克服种间障碍实现跨种传播阶段、进入人类后的初适应阶段以及在人类中建立感染后的阶段.在前两个流行群中,S蛋白受到了阳性选择压力,而在03晚期流行群中却遭受了很强的负选择压力.三个流行群选择压力的比较显示,SARS-CoVs从动物向人类跨种传播过程中,S蛋白受到的阳性选择压力依次减小.结论: 从初的阳性选择到后的负选择,S蛋白经历了变化的自然选择压力.这种变化的选择压力不仅反映了SARS-CoV由动物向人类跨种传播的适应性进化过程,也为研究其他病毒的跨种传播机制提供重要线索.
作者：张驰宇；魏继福 刊期： 2006年第05期
目的: 研究低氧预适应诱导神经胶质细胞瘤细胞(C6 Glioma Cells,简称C6细胞)对氧葡萄糖剥夺(OGD)的耐受及其机制.方法: C6细胞通过低氧(1%)预处理,在经受OGD打击后,观测其对细胞活力的影响.利用Western blot分析低氧预适应对C6细胞磷酸化-ERK(p-ERK)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和红细胞生成素(EPO)蛋白的影响;通过PD98059和LY294002的使用,分析低氧诱导C6细胞预适应现象与MEK/ERK通路的关系.结果: 低氧能诱导细胞预适应的发生,而且对于24 h的OGD,有效的低氧预适应时间为16 h;低氧能诱导细胞p-ERK信号蛋白的上调,激活HIF-1α和增加EPO的表达,且能被PD98059所抑制.结论: 低氧预适应能增强C6细胞对24 hOGD的耐受,产生预保护作用,其中以低氧预适应16 h效率高;MEK/ERK信号转导途径参与了低氧预适应作用;低氧预适应可通过激活HIF-1α和增加EPO表达水平来实现.
作者：何炜；朱俐；金淑仪 刊期： 2006年第05期
目的: 检测食管鳞癌组织中P-gp、nm23的表达水平,探讨其与肿瘤大小、分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及患者生存期的关系.方法: 采用免疫组织化学技术检测P-gp、nm23的表达水平.结果: 94例标本中, P-gp、nm23基因阳性表达率分别为30.85% (29/94) 、42.55% (40/94).P-gp的表达与肿瘤的大小、分化程度没有相关性(P＞0.05),与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及患者生存期有相关性(P＜0.05).nm23的表达与肿瘤的大小、分化程度、浸润深度之间没有相关性(P＞0.05),与淋巴结转移及患者生存期之间密切相关(P＜0.01). 结论: 检测P-gp 、nm23的表达对食管癌治疗方案的选择及判断预后有一定的指导意义.
作者：孙瑞清；吴建农；陈淼 刊期： 2006年第05期
目的: 从猪关节软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定.方法: 选择猪关节软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖、胃蛋白酶消化、氯化钠盐析、DE22纤维树脂处理等步骤,提取纯化Ⅱ型胶原蛋白.采用SDS-PAGE、吸收光谱分析、氨基酸成分分析等方法对Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定.结果: 4 mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖;分步加入胃蛋白酶的限制性酶解结果满意;氯化钠盐析浓度为2.4 mol/L 时佳.SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的Ⅱ型胶原蛋白与Sigma公司的产品一致.Ⅱ型胶原大吸收峰为230 nm,氨基酸成分分析显示甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量高.结论: 实验结果提示从猪关节软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高,符合II型胶原的特征.提取材料广泛、实验条件简便,结果可靠.
作者：姜旭淦；陈盛霞；丁建霞；王卉放；马洁；吴亮；许化溪 刊期： 2006年第05期
目的: 了解β-胡萝卜素对腹腔注射Con A诱导昆明鼠肝纤维化有无预防作用. 方法: 30只Balb/c鼠随机分组:对照组10只 ,PBS腹腔注射、生理盐水灌胃.未预防组 10只, 腹腔注射Con A、生理盐水灌胃8周.预防组10只,Con A腹腔注射、β-胡萝卜素灌胃.第9周处死所有小鼠,测血清ALT、AST,肝组织病理检查.结果: 未预防组有典型肝纤维化;对照组与预防组未出现肝纤维化. 结论: β-胡萝卜素对肝纤维化有预防作用.
作者：张炜；朱丽群 刊期： 2006年第05期
目的: 探讨微循环障碍在急性坏死性胰腺炎大鼠中的作用,同时观察川芎嗪对急性坏死性胰腺炎肠黏膜损害的干预效应.方法: SD大鼠192只,随机分为对照组(C组)、胰腺炎组(P组)、川芎嗪治疗组(T组),每组64只.采用放射性生物微球技术在制模后0.5,2,6 h及12 h分别测定肠血流量;对胰腺、肠组织进行病理评分并观察肠组织的MPO活性、白细胞浸润情况.结果: P组与C组相比: P组各时相肠的血流量均明显降低( P＜0.01 );病理改变及白细胞浸润明显加重;肠组织MPO活性明显增加(P＜0.01 ).T组与P组相比:T组2 h起肠血流量较P组均明显增加(P＜0.01 );各时相病理改变及白细胞浸润明显减轻;组织MPO活性明显下降( P＜0.05 或 P＜0.01 ).肠组织血流量与肠组织MPO活性间呈显著负相关,与肠组织损伤程度呈显著负相关.结论: 微循环障碍在急性坏死性胰腺炎时肠组织损伤中起着重要的作用.川芎嗪可以改善微循环,减轻胰腺及肠黏膜损害.
作者：瞿建国；党胜春；张建新 刊期： 2006年第05期
目的: 应用人U6启动子构建RNA干扰载体pUC19NU,具有新霉素抗性且能够在真核细胞中复制,成为基因功能和基因治疗研究等领域的RNAi技术的工具.方法: 通过PCR从人类基因组中得到人U6 snRNA启动子,并针对增强绿色荧光蛋白(EGFP)和p53蛋白的基因,分别设计了两段可以转录出短发夹环状RNA的DNA模板序列,连入pUC19中,构建出RNA干扰质粒pUC19NU,分别得到质粒载体pUC19NUE 和 pUC19NUP. 结果: 以EGFP 和p53为靶基因的干扰实验证明,两种质粒载体分别转染HeLa细胞和KMB-17细胞,两种蛋白的表达皆受到有效抑制.结论: 该质粒能够有效地干扰相应内源性和外源性靶基因的表达,可以用于RNAi技术的研究.
作者：夏春祥；解满霞；楚莉辉 刊期： 2006年第05期
目的: 通过冠状窦近端和远端起搏,比较阵发性房颤组和对照组冠状窦电图波形的改变、有效不应期的变化,探讨发生房颤的电学特征改变.方法: 39例因心律失常行导管射频消融的患者,其中17为阵发性房颤患者,对照组22例.置入10极电生理导管至冠状窦,在X线下使导管的9～10极位于冠状窦口.固定程序S1S2400/360 ms起搏冠状窦的近端和远端,2倍的起搏阈值,记录冠状窦电图.测定远端和近端起搏局部的有效不应期.结果: 在冠状窦电图上有双电位和碎裂电位房颤组占13/17,对照组占5/22(P＜0.05).房颤组CS1～2局部有效不应期(ERP)明显较对照组短(P＜0.05);房颤组CS9～10处ERP和对照组比较无明显差异.结论: 在房颤组冠状窦电图记录到双电位和碎裂电位,同时在冠状窦远端起搏时其ERP缩短,这些可能是房颤发生的基质.
作者：王卫明；孙建辉；许国锋；单其俊 刊期： 2006年第05期
目的: 探讨颅脑损伤患者的血清C反应蛋白(CRP)、前白蛋白(PA)水平和损伤严重程度及恢复情况的关系. 方法: 选取95例颅脑损伤患者,根据GCS评分分为轻、中、重型三组,以免疫速率散射比浊法检测患者伤后第1,3,7,14天上午8时血清CRP和PA值. 结果: 中、重型组在伤后当天血清CRP即升高,第3天达到大值,而轻型组除第3天CRP高于正常值外其他各天检测值在正常范围.CRP的检测值在不同组别有差异.第3天中、重型组的PA值和轻型组之间,第7天重、轻型组之间有差异,但均在正常值范围.以两周后的GCS评分评价患者的短期恢复情况,恢复良好组和恢复欠佳组之间各天CRP值均有显著差异,而PA值均在正常范围. 结论: CRP的检测对颅脑损伤患者的伤情﹑疗效和预后估计较PA更有指导意义.
作者：杨常春；王穗暖；张一；宣井岗；彭亚 刊期： 2006年第05期
目的: 通过检测急性心肌梗死(AMI)介入治疗患者体内晚期蛋白氧化产物(AOPP)的水平,观察氧化应激在体内的变化过程.方法: 入选74例AMI[28例急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)和46例择期经皮冠状动脉介入治疗]及21例非冠心病(均经造影证实)患者,分别采集外周静脉血标本入院即刻、24 h和48 h 3个时间点,在紫外荧光340 nm及酸性条件下测定血清标本的光密度.结果: AOPP浓度AMI择期PCI组(236.42±30.41)μmol/L与AMI急诊PCI组(97.58±23.41)μmol/L(P＜0.01)及非冠心病组(57.41±13.60 )μmol/L(P＜0.05)均有显著性差异(P＜0.01),AMI择期PCI组明显升高,而AMI急诊PCI组(97.58±23.41)μmol/L,与非冠心病组无显著差异.结论: 氧化应激是AMI发生发展过程中的重要环节,AMI择期PCI患者血清AOPP浓度显著升高,AMI发病早期(3～12 h)内的积极干预(介入及药物治疗)可抑制AOPP大量生成.
作者：邓新桃；何倩；赵建祥；马根山；冯毅；王积慧；胡善友 刊期： 2006年第05期
目的: 探讨异氟醚对体外循环期间脑氧代谢的影响.方法: 24例在体外循环(CPB)下行瓣膜置换术的患者随机分为对照组和异氟醚组.CPB期间异氟醚组经氧合器吸入0.5%～3%的异氟醚,对照组则不吸入异氟醚,于CPB开始前(T1),CPB开始降温至32 ℃(T2),低温稳定期(T3),复温至32 ℃(T4)以及CPB结束后10 min(T5)共5个时段取右颈内静脉血测定颈内静脉血氧饱和度(SjO2),测定动脉血气,计算脑氧摄取率(CEO2).结果: 异氟醚组SjO2值T3与T1时点相比差异有显著意义(P＜0.05),对照组T3时点及异氟醚组T2,T3及T4时点CEO2均比T1时点明显下降(P＜0.05);T3时段CEO2值异氟醚组与对照组相比差异有显著意义(P＜0.05).结论: 异氟醚能防止CPB氧供需失衡.
作者：邵东华；王洪；颜洁；杨映红 刊期： 2006年第05期
目的: 研究腺病毒介导的野生型p53基因(Ad-p53)对人肺腺癌细胞生长及放疗敏感性的影响.方法: 将重组的含野生型p53 基因的腺病毒导入A549 细胞,通过免疫细胞化学方法检测p53基因的表达.A549细胞分为4组:对照组、转染组、放疗组、转染联合放疗组.用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和流式细胞仪检测p53 基因以及联合放射治疗(2,4,6 Gy)对A549细胞生长抑制及凋亡的影响. 结果: 通过免疫细胞化学方法证实了p53基因在A549细胞中的表达.MTT法检测发现p53基因对A549细胞的生长抑制率为(50.60±5.69)%.当放射剂量为2,4,6 Gy 时, A549细胞的生长抑制率分别为(16.06±4.35)%、(16.39±1.67)%、(17.73±4.68)%.当p53基因与放疗(2,4,6 Gy)联合作用时,抑制率分别为(80. 60±5.35)%,(89.30±1.67)%、(90.30±2.01)% (P＜0.01).p53基因转染所产生的A549细胞凋亡率为(10.38±1.68)%.放疗(2,4,6 Gy)引起的细胞凋亡率分别为(3.98±0.72)%、(4.84±0.60)%、(5.40±0.70)%.当p53基因与放疗(2,4,6 Gy) 联合作用时,凋亡率分别为(17.80±1.30)%、(19.03±0.54)%、(21.34±2.51)% (P＜0.01).结论: 野生型p53基因与放疗对人肺腺癌细胞生长有协同抑制作用,增加了人肺腺癌细胞对放射治疗的敏感性
作者：王峰；束永前；王建华；许锡元 刊期： 2006年第05期
目的: 探讨原发性双侧乳腺癌的临床特征、治疗和预后. 方法: 回顾了我院2002年1月～2006年3月经病理组织学证实的12例原发性双侧乳腺癌患者的临床资料,结合文献复习对原发性双侧乳腺癌的诊断标准、发病率、病因及危险因素、治疗方式及预后进行讨论. 结果: 12例均符合原发性双侧乳腺癌的诊断标准,同时性2例,异时性10例, 4例(33.3%)有家族史,第一癌发病年龄较轻,绝经前9例(75%),病理类型以浸润性导管癌和特殊类型为主,有4例(33.3%)ER、HER2、p53基因表达水平有差异,首发侧病期亦较早,经综合治疗后目前生存情况良好. 结论: 应重视双侧乳腺癌的发生,单侧乳腺癌发生后应积极随访以早期发现对侧病变,并采取综合治疗措施.
作者：郑琳；王杰 刊期： 2006年第05期
目的: 探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)和单个核细胞(BMMNCs)经梗死相关冠状动脉(IRA)移植对冠心病心肌梗死患者近、中期心功能、心肌代谢的影响及其安全性.方法: 对14例冠心病伴心肌梗死史1～35个月的患者.细胞移植组8例,通过冠脉系统将BMSCs和BMMNCs植入心肌梗死区,余6例常规治疗.两组患者均于术前和术后3,8个月行SPECT双核素心肌显像、二维超声心动图、6 min步行试验及动态心电图检查.结果: 移植组患者在梗死相关冠脉开通后注入干细胞,8例心功能从Ⅱ～Ⅳ级提高至Ⅰ～Ⅱ级,6 min步行试验从(320.72±60.47)m提高至(406.88±68.31)m,6个月后又提高至(484.79±81.00)m.6例前壁心梗患者3,8月后LVEF由术前的42.5%提高至49.5%和54%;术后3,8月心肌双核素检查缺损区占整个心肌体积由术前的45.5%减少至39%和25%.6例对照组患者术后3月EF较术前提高,心肌双核素检查缺损区占心肌体积减少,术后8月与术后3月无明显改变.2例下壁心肌梗死患者经干细胞移植临床效果不明显.结论: 自体BMSCs和BMMNCs经冠脉移植治疗冠心病心肌梗死,可以显著改善前壁心肌梗死患者左室收缩功能和心肌代谢.
作者：张宇燕；丁志坚；张馥敏；杨志健；王新；陈解中；孙勇；徐龙保；徐宇红 刊期： 2006年第05期
目的: 观察榄香烯乳对胃癌细胞株SGC7901人端粒酶反转录酶(hTERT)表达及其启动子的影响,以深入了解榄香烯乳的抗癌机制.方法: 以榄香烯乳处理胃癌细胞,分别采用实时定量PCR和免疫荧光标记法检测癌细胞hTERT mRNA和蛋白水平的表达.采用脂质体转染法将携带hTERT启动子和报告基因的质粒转染至胃癌细胞株SGC7901细胞中,2 h后加入不同浓度的榄香烯乳,孵育48 h后,分别检测其报告基因萤虫素酶活性.结果: 榄香烯乳处理后,胃癌SGC7901细胞hTERT mRNA和蛋白水平呈浓度和时间依赖性下调.榄香烯乳处理组萤虫素酶活性下降,且呈浓度依赖性.结论: 榄香烯乳可能通过下调hTERT启动子活性,抑制hTERT表达,从而抑制胃癌细胞端粒酶活性.
作者：范钰；张尤历；李华 刊期： 2006年第05期
颅内动脉瘤是较常见的脑血管病变.椎-基底动脉瘤也称作后循环动脉瘤,指来自颅内Willis动脉环后部的动脉瘤,文献报道占颅内动脉瘤的3.8%～15%[1].
作者：宣井岗；彭亚；杨伊林；王穗暖 刊期： 2006年第05期
凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)是临床实验室常用的检验项目,其结果受到多种因素的影响.如试剂的来源及批号、仪器性能、测定环境等均可影响检验结果.质量控制是保证检验结果准确的重要措施.目前PT、APTT和TT试验的定值冻干质控血浆主要依赖进口,由于价格昂贵,限制了它的应用.我们对自制混合血浆在存放过程中的几项凝血参数进行了动态观察,以确定自制混合血浆作为阶段性室内质控品的可能性.
作者：刘玲；陈亚宝；叶勇 刊期： 2006年第05期
近年来,国内外文献报道子宫腺肌病的发病率有明显上升趋势[1].但子宫腺肌病在手术前不易诊断,漏诊率误诊率高,多被误为子宫肌瘤.我们对术后病理证实的子宫腺肌病86例临床资料进行回顾性分析,以提高子宫腺肌病的术前临床诊断准确率.
作者：王维佳；赵小苏；周红林 刊期： 2006年第05期
自1983年Barry Marshall和Robin Warren分离出幽门螺杆菌(Hp)以来,目前认为Hp与消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌及粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的发生密切相关[1,2].
作者：何亚龙；张尤历；魏金文 刊期： 2006年第05期
帕金森病(Parkinson's disease,PD)是老年人神经系统常见病,其症状前期较长且隐蔽.从多巴胺神经元的丢失到症状出现,潜伏期大约是5年[1].
作者：徐南飞；浦忠才；叶万忠 刊期： 2006年第05期
迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,简称 ET)是肠杆菌科爱德华菌属中惟一感染人致泻和其他疾病的细菌,也引起贝类、鱼类、鸟类、两栖类和哺乳类等多种动物的感染[1,2].溶血素是ET菌的重要致病因子[3,4],而溶血素合成、激活及分泌到胞外,常常需要多个基因及其编码蛋白的协同作用,需要活化基因的作用[4] ,但目前其致病机理仍不清楚.
作者：成静；高大庆 刊期： 2006年第05期
目的: 通过分析尿中有形成分的数目和形态的变化,了解健康女性月经周期对尿有形成分的影响.方法: 使用UF-100尿沉渣分析仪对处于不同月经周期(月经期、增殖期、分泌期)的健康女性的尿液进行检测,用SPSS11.5进行分析.结果: 月经期尿红细胞计数(ERY)显著高于其他二期,月经期红细胞形态(ERY-M)以均一性红细胞为主(11/12),其他二期均为非均一性红细胞;白细胞计数(LEU)增殖期较其他二期高,白细胞大小(LEU-S)以月经期大,增殖期次之,分泌期小;上皮细胞计数(EC)分泌期较其他二期高,细菌、管型无显著性差异.结论: 健康女性月经周期对尿有形成分的数目和形态有一定影响.
作者：陈晓婷；张炳峰；颜群；徐生梅 刊期： 2006年第05期
目的: 利用基因测序技术,根据HBV S基因序列和HBV P基因区YMDD基因序列的特征,建立一种既可以诊断HBV基因型,又能检测拉米呋啶耐药突变的简便、可靠的方法.方法: 采用特异的引物对待检标本进行PCR扩增后作基因序列检测,利用Chromas2.23软件对测序结果进行分析有无突变产生,测序结果用软件DNASIS进行基因分型分析.结果: 61例经拉米呋啶治疗的慢性乙肝患者B型11例(18%),C型50例(82%).发生YMDD变异47例,变异检出率为77.0%.结论: 该方法能同时检测HBV基因型和YMDD变异,可以通过准确的P基因序列测定区分YMDD变异的类型,并可根据需要监测其他的伴随突变,进一步进行核苷酸多态性分析,对临床治疗和病情监控均有指导意义.
作者：刁仁联；苏琴；施长根 刊期： 2006年第05期
原发性延髓出血(Primary medullary hemorrhage,PMH) 极为少见, 传统上一直认为 PMH 临床表现凶险, 预后极差.自CT及MRI 问世以来, 一些过去在临床上常被误诊的轻症患者得到了早期明确诊断,但人们对该病的认识还不十分清楚.现将我们收治的1例PMH病例结合国内外文献进行分析报道,以期提高对PMH 的临床特征、诊断、治疗及预后等方面的认识.
作者：靳彪；张渭芳；赵康仁；赵晶 刊期： 2006年第05期
