目的:研究人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外培养过程中的增殖和成软骨分化现象和规律.方法:以密度梯度离心法分离健康成人髂骨MSCs,观察体外培养过程中细胞形态、生长和增殖现象.取第三代细胞给予地塞米松,维生素C和不同剂量转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)行成软骨细胞诱导.3周后行阿利新蓝及甲苯胺蓝染色蛋白多糖,免疫荧光检测II型胶原,阿利新蓝比色法检测葡萄糖氨基聚糖.结果:体外培养条件下MSCs生长旺盛.在TGF-β1作用下MSCs向软骨骨细胞分化,TGF-β1 10 μg/L组软骨细胞标志物表达强.结论:MSCs有旺盛的增殖能力.MSCs在一定诱导条件下可以向软骨细胞分化,转化生长因子β1(TGF-β1)是诱导MSCs向软骨分化的关键性因素,10 μg/L是其佳诱导剂量.
作者：尹其翔；沈铁城；黄永辉 刊期： 2008年第02期
目的:建立糖尿病大鼠模型,探讨糖尿病大鼠尿中nephrin 的检测、动态变化及意义.方法:SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制成糖尿病模型,正常对照组注射等量枸橼酸缓冲液,动态检测各组大鼠24 h尿微量白蛋白及肾功能,以Western-Blot 方法动态检测尿中nephrin.结果:正常大鼠尿中无nephrin排泄,而糖尿病大鼠尿中可检测出nephrin,诱模早期(2周)即可出现,随着病程的延长,nephrin逐渐增多,8周达高峰后,nephrin的排泄又逐渐减少.结论:糖尿病肾病早期nephrin即可从尿中排泄,尿nephrin可作为糖尿病肾病的早期诊断指标之一,还将有助于监测、判断糖尿病肾病的病程进展.
作者：柳迎昭；吴晨光；宋丽敏；沈莉敏；姚翡 刊期： 2008年第02期
目的:分离培养人骨髓来源间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行慢病毒载体介导的基因转染研究.方法:采取全骨髓贴壁培养法分离培养人骨髓MSCs.利用脂质体法进行慢病毒感染人骨髓MSCs.结果:分离培养出人骨髓来源的MSCs,并用携带绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的慢病毒成功感染人骨髓MSCs.结论:获得人骨髓MSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为间质干细胞基因工程和组织工程研究奠定了基础.
作者：张徐；钱晖；朱伟；曹慧玲；徐学静；司煜安；王梅；许文荣 刊期： 2008年第02期
目的:构建含小鼠GITRL基因的真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,体外转染小鼠肺癌细胞株Lewis细胞.方法:利用PCR方法扩增mGITRL基因,克隆至pIRES2-eGFP载体,选择阳性克隆并进行序列测定.以电穿孔法转染Lewis细胞,通过G418筛选,获得稳定表达细胞株.结果:构建了真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,基因测序与GenBank中发表的序列完全一致,体外转染Lewis细胞,经G418筛选,体外传代30代以上,RT-PCR及流式细胞仪检测该细胞株稳定表达mGITRL.结论:成功构建了真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,并在小鼠Lewis细胞中稳定表达,为进一步研究GITRL的生物学功能提供研究基础.
作者：胡正军；王胜军；朱燕萍；鲍俊峰；仝佳；马洁；成军；孙长贵；许化溪 刊期： 2008年第02期
目的:研究并比较南、北五味子不同溶剂提取物对小鼠镇静、催眠作用的影响.方法:采用系统溶剂分离法,对南、北五味子进行系统提取,观察各组分对小鼠自主活动的影响及协同戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用.结果:南、北五味子的醚提物和醇提物能显著减少小鼠自主活动次数,增加阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数,延长阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间.结论:南、北五味子镇静、催眠有效成分主要分布于醚提物和醇提物中;南、北五味子相比,北五味子的镇静作用稍好,而催眠作用相当.
作者：王雯雯；仰榴青；李永金；吴向阳；邹艳敏；赵江丽 刊期： 2008年第02期
目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在缺血再灌注损伤肝组织中的表达及意义.方法:利用雄性SD大鼠建立部分肝血流阻断动物模型,肝血流阻断90 min后恢复血流灌注,再灌注后1,6 h处死大鼠收集标本.分别采用全自动生化分析仪、HE 染色,比色法、ELISA法测定血清转氨酶(ALT,AST),肝组织病理改变,肝组织髓过氧化物酶(MPO)的活性以及VEGF蛋白的含量.结果:与假手术组相比,缺血再灌注组(I/R组)缺血肝脏MPO活性,肝组织内VEGF蛋白的含量以及ALT,AST在再灌注1 h即升高,且缺血再灌注6 h时较1 h明显升高;缺血肝脏病理切片可见大量炎症细胞浸润,6 h炎症反应更为剧烈,部分肝细胞呈点状坏死.结论:VEGF蛋白表达的上调可能参与了大鼠肝脏缺血再灌注过程中肝脏的损伤.
作者：朱秋伟；徐三荣 刊期： 2008年第02期
目的:观察白藜芦醇对人外周血单核/巨噬细胞CC型趋化因子受体5(CCR5) 表达的调节作用.方法:采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,再经贴壁法纯化单核/巨噬细胞.采用IFN-γ(1×105U/L)诱导单核/巨噬细胞表达CCR5,再分别加入不同浓度的白藜芦醇(0.5,5,25,50和100 μmol/L)进行干预.培养24 h后收集细胞,RT-PCR法检测外周血单核/巨噬细胞CCR5 mRNA表达水平;流式检测单核/巨噬细胞CCR5表达阳性率.同时将CCR5荧光素酶报告基因(pGL3-Basic-CCR5)转染各组细胞,检测各转染组的荧光素酶相对活性.结果:中、高浓度白藜芦醇处理组(25,50和100 μmol/L)的CCR5 mRNA表达水平、CCR5阳性细胞率和CCR5-luc报告基因的荧光素酶相对活性比对照组均有所降低,低浓度白藜芦醇处理(0.5和5 μmol/L)对单核/巨噬细胞CCR5的表达无明显影响.结论:中、高浓度白藜芦醇可抑制外周血单核/巨噬细胞CCR5的表达.
作者：郭继强；孙爱萍 刊期： 2008年第02期
目的:为研究伤寒沙门菌z66鞭毛抗原编码基因fljB的表达调节机制,建立该fljB 基因的β-半乳糖苷酶基因(lacZ)插入变异株.方法:采用自杀质粒介导的同源重组方法进行制备.设计加接KpnⅠ和SalⅠ的特异性引物,用PCR扩增获得fljB基因的上、下游同源性DNA片段,并与用KpnⅠ和SalⅠ酶切pSV-β-半乳糖苷酶载体(pSV-β-galactosidase vector)的片段定向连接,将连接片段克隆至自杀质粒pGMB151,再通过电击法将重组质粒转入伤寒沙门菌,在含X-Gal的蔗糖平板上筛选获得同源重组的变异株.结果:经筛选获得阳性克隆,经PCR及序列分析证实,fljB基因中的763 bp被3 550 bp的lacZ片段替代.结论:成功构建伤寒沙门菌flj::lacZ突变株,为进一步研究fljB基因表达调节机制奠定了基础.
作者：朱超望；茅凌翔；徐顺高；黄新祥 刊期： 2008年第02期
目的:探讨糖尿病大鼠肾组织nephrin的表达以及罗格列酮干预后对其表达的影响.方法:链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为糖尿病非干预组(DM组)和罗格列酮干预组(DR组),并以正常组(NC组)作对照.干预8周后,观察各组大鼠尿蛋白、血糖、血脂、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)变化;用免疫组化及实时荧光定量PCR检测肾组织nephrin蛋白及mRNA的表达.结果:①DM组大鼠尿蛋白、血BUN,Cr较NC组明显升高,肾组织nephrin蛋白及mRNA表达降低;与DM组相比,DR组大鼠尿蛋白、血BUN,Cr降低,nephrin蛋白及mRNA表达上调.②DM组血糖、血脂与NC组相比,差异有统计学意义,与DR组比较差异无统计学意义.结论:罗格列酮可能通过上调糖尿病大鼠肾组织nephrin表达,发挥不依赖糖脂代谢的直接肾保护作用.
作者：姚翡；吴晨光；柳迎昭；沈莉敏；阚春婷 刊期： 2008年第02期
目的:构建表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori) NCTC 11637 IV型分泌系统cagX(HP0528)全长编码基因的原核表达载体.方法:用PCR方法从H. pylori基因组DNA中扩增cagX编码基因片段,将cagX克隆至pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,再将其定向插入pET32a(+)载体中,经IPTG诱导表达.SDS-PAGE分析表达结果,并进行序列测定和生物信息学预测.结果:克隆幽门螺杆菌NCTC 11637 cagX 基因全长1 569 bp(基因库登录号为EF608160),编码522个氨基酸,融合蛋白的相对分子质量约为80.5 kD.与基因库公布的其他H. pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为96%～99%.预测结果显示H. pylori 11637,26695,J99间二级结构有一定差异,但抗原性相同.结论:成功克隆并表达了H. pylori NCTC 11637 cagX 基因,并对其生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
作者：董苏荣；邵世和；殷秀杰；王华 刊期： 2008年第02期
目的:探讨非小细胞用免疫组化法测定60例NSCLC标本及27例正常肺组织中PTTG,c-myc和p53的表达.结果:NSCLC组织细胞中PTTG,伟?NSCLC)中PTTG,c-myc和p53的表达及其与NSCLC发生发展之间的关系.方法:c-myc和p53的阳性表达率明显高于正常肺组织(P<0.01).在不同组织学类型间阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),PTTG和c-myc在不同分化程度肺癌间的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),淋巴结是否转移PTTG和c-myc的阳性表达率差异也有统计学意义(P<0.05).PTTG与c-myc,PTTG与p53阳性表达率呈显著正相关(P<0.01),c-myc与p53阳性表达率也呈显著正相关(P<0.05). 结论:PTTG,c-myc和p53在NSCLC中有较高表达,有可能作为评估预后、指导治疗的指标.
作者：方娜；绍睿；陈德玉 刊期： 2008年第02期
目的:探讨阿托伐他汀强化治疗对非ST段抬高急性心肌梗死(NSTEMI)患者的抗炎、抗心肌缺血作用.方法:选择93例NSTEMI患者,随机分为两组,治疗组47例,给予阿托伐他汀钙30～40 mg/d口服;对照组46例,给予阿托伐他汀钙10 mg/d口服,疗程均为9个月.观察两组患者治疗前、后的临床疗效、心电图(EKG)心肌缺血、C反应蛋白(CRP)及血脂改变情况.结果:两组患者治疗前后低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组治疗后CRP,LDL-C,TG,TC较对照组下降明显(P<0.01),临床症状改善组间差异有统计学意义(P<0.01),EKG示心肌缺血明显改善、缺血事件明显减少,差异亦有统计学意义(P<0.01).结论:阿托伐他汀强化治疗效果良好,具有抗炎、抗心肌缺血作用.他汀类药物强化治疗对防治NSTEMI有重要意义.
作者：季清；陈阳；孙彩琴 刊期： 2008年第02期
目的:检测细胞骨架连接蛋白(membrane cytoskeleton cross linker protein,Ezrin)、焦点黏附激酶(focal adhesion kinase,FAK)在肝癌组织中的表达及其临床意义.方法:手术切除肝癌标本79例(其中62例附癌旁正常组织),应用免疫组化检测Ezrin,FAK的表达.结果:免疫组化染色显示,Ezrin和FAK的表达与肝癌的浸润、转移呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05).结论:Ezrin,FAK的高表达与肝细胞癌的侵袭转移关系密切,它们可能是影响肝癌患者预后以及癌细胞转移的重要因素.
作者：李杰；朱秋伟 刊期： 2008年第02期
目的:研究食管癌患者转录因子T-bet,GATA-3的基因表达及其对患者免疫状态的影响.方法:根据其CT分期将40例食管癌患者分为两组:一组为第Ⅰ,Ⅱ期患者,另一组为第Ⅲ,Ⅳ期患者;荧光定量PCR技术检测40例食管癌患者及20例健康对照者外周血单核细胞T-bet,GATA-3 mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中辅助性T细胞1型(Th1)细胞因子IFN-γ及辅助性T细胞2型(Th2)细胞因子IL-4.结果:食管癌组较对照组T-bet mRNA表达明显降低,GATA-3 mRNA表达明显升高,IFN-γ表达明显降低,IL-4表达明显升高,不同期别食管癌组间差异不显著.T-bet,GATA-3分别与IFN-γ,IL-4呈正相关.结论:食管癌患者Th1型细胞因子表达降低,Th2型细胞因子表达升高,即Th1/Th2平衡被打破,发生了向Th2方向的漂移,免疫功能受损;这种改变受到转录因子T-bet,GATA-3的调控,T-bet表达的减少在这种调控中可能起着关键的作用.
作者：时亚伟；陈德玉；刘俊；汪毅 刊期： 2008年第02期
目的:探讨斜视患者与正常人睫状前动脉(anterior ciliary artery,ACA)血管的血流动力学状态是否存在差异及应用彩色多普勒超声检查睫状前动脉的可行性.方法:搜集我院22例斜视患儿,用彩色多普勒超声观察其眼外直肌睫状前动脉血管的收缩期血流速度峰值(maximum systolic velocity,Vs) 、舒张末期血流速度(diastolic velocity,Vd) 及阻力指数(resistance index,RI),并与30例正常儿童作对照.结果:斜视患儿ACA的Vs,Vd,RI值较正常对照组减低,且均有统计学意义(P<0.05).结论:在临床上未出现眼前节缺血症状的斜视患者眼前节的血流灌注量已经有所降低,但尚在机体代偿范围内;应用10 MHz以上的彩色多普勒超声探头检查睫状前动脉是一种简便可靠的方法.
作者：李杰；彭卫斌；薛玉 刊期： 2008年第02期
目的:探讨脊髓型多发性硬化(spinal cord of multiple sclerosis,SMS)的磁共振(MRI)特征及其诊断价值.方法:对13例SMS的临床特点和MRI结果进行回顾分析.结果:SMS以青壮年女性多见,呈急性或亚急性起病,表现为复发-缓解或慢性进展病程,病灶分布上以颈髓受累多,MRI特点为髓内散在的长T1、长T2斑块状病灶,其长度一般小于2个椎体的长度,位于脊髓的后外侧,面积小于脊髓横截面的1/2.应用糖皮质激素试验性治疗对脊髓出现的可疑脱髓鞘病灶者有一定的帮助.结论:诊断SMS主要依据其临床表现,MRI有助于发现病灶位置,是目前诊断SMS敏感的影像学方法.
作者：任乃勇；赵康仁；张渭芳 刊期： 2008年第02期
目的:筛选食管癌中特异表达的基因,进一步了解食管癌发生的分子机制.方法:利用荧光差异显示技术(DD-PCR)获得差异表达的片段,对这些片段进行克隆和序列分析.通过在基因库中同源性检索,查找差异片段相对应的同源基因.利用实时荧光定量PCR技术在食管癌临床标本中进行验证.结果:通过DD-PCR获得的差异片段中有一个片段对应于信号传导与激活因子2(stat2)基因,该基因的读码框长2 556 bp,编码852个氨基酸,编码蛋白分子量约97.9 kD.应用实时荧光定量PCR方法进一步验证发现该基因在食管癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织(P<0.05,n=16).结论:stat2基因在食管癌组织中呈高表达,推测其可能在食管癌的发生发展中起一定的作用.
作者：高广；乌慧玲；闻燕；王文兵 刊期： 2008年第02期
目的:研究中药治疗花粉症的作用机理.方法:选择50例花粉症患者,口服敏康片,治疗6个月后观察疗效及FcεRIβ,IL-4Rα,IL-5Rα,HLA-A基因表达情况,并以20例变应性皮炎和19例正常人为对照,用Northern blot检测FcεRIβ,IL-4Rα,IL-5Rα的变化.用RT-PCR 法检测HLA-A,计算相对光密度值.结果:花粉症组患者症状有明显改善(P<0.05),治疗前后血清总IgE比较差异有统计学意义(P<0.01),花粉症组4个基因的表达治疗前与正常人比较,差异均具有统计学意义(P<0.01),治疗后与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01).变应性皮炎组治疗前FcεRIβ,IL-4Rα与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗前后FcεRIβ比较,差异有统计学意义(P<0.05).鼻炎组、皮炎组HLA-A相对光密度值均较正常组高,两组治疗前后也有不同程度的改善(P<0.05).结论:中药可以调整花粉症患者相关基因表达,改善患者过敏体质,缓解临床症状.
作者：贯剑；郑湘瑞；何裕民；周飞 刊期： 2008年第02期
肝脓肿可由细菌、寄生虫或真菌引起,在发展中国家以化脓性感染为病因的肝脓肿就占3/4[1].细菌性肝脓肿为肝组织局限性化脓性炎症.自从螺旋CT广泛应用于临床以后,细菌性肝脓肿的诊断准确率已明显提高.
作者：蒋志军；谈瑞生；滑炎卿 刊期： 2008年第02期
膝关节以下骨和肌腱外露、踝关节周围及足的软组织皮肤缺损修复一直是临床上棘手的问题,以往一般采用植皮、局部皮瓣、交腿皮瓣、胫前或胫后动脉岛状皮瓣以及游离皮瓣等手术方法修复.我们自2005年7月～2007年6月采用腓肠神经营养血管蒂岛状皮瓣转移术修复8例此类患者,效果良好.现报告如下.
作者：严志新；王兵；王金龙；夏云；Navin Rambaran 刊期： 2008年第02期
心脏移植是目前终末期难治性心脏病有效的治疗手段.随着超声诊断技术的不断发展,运用超声动态监测心脏移植情况的研究越来越多,并已广泛应用于临床.超声心动图检查减少了心内膜活检的次数,为临床医生提供了可靠信息.2001年1月～2007年3月我院成功开展了6例同种异体原位心脏移植手术,术后应用彩色多普勒超声心动图对移植心脏进行了连续动态监测,现报告如下.
作者：汪健飞；白洁；陈锁成 刊期： 2008年第02期
原代培养作为获取细胞的主要途径已成为科学研究的重要组成部分.过去人们通常采用酶消化法、差速离心法和贴壁法等方法,但结果都不大理想.例如酶消化法步骤繁多,且受多种因素影响,条件不易控制,所以统一推广比较困难.
作者：王艳；浦颖艳；方琳；孙丽君；胡晓翠；邱红；苏长青；曹祥荣；江淑芳 刊期： 2008年第02期
食物不耐受是一种复杂的超敏反应性疾病,是免疫系统把进入人体内的某种或多种食物当成有害物质,从而针对这些物质,产生食物特异性IgG抗体,IgG抗体与食物颗粒形成免疫复合物,可能引起所有组织发生炎症反应,并表现为全身各系统的症状与疾病[1-3].
作者：谈笑 刊期： 2008年第02期
目的:了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及其遗传学特征.方法:对35株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测 aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ,aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb等7种氨基糖苷类修饰酶基因,TEM,SHV,LEN,OKP,CTXM-1,CTXM-2,CTXM-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,OXA-2,DHA,ACT-1等15种β-内酰胺酶基因,intI1,intI2,intI3等3种整合子基因,tnpA(TnA转座子标记),merA(Tn21/Tn501转座子标记),qacEΔ1-sul1消毒剂耐药基因,qnr喹诺酮类耐药基因,共检测29种耐药基因并对部分产物进行测序.结果:35株肺炎克雷伯菌中检出β-内酰胺酶基因22株,阳性率62.9%.整合子基因阳性22株,阳性率62.9%.氨基糖苷类修饰酶基因阳性26株,阳性率74.3%.tnpA全部阴性.merA 阳性2株,阳性率5.7%.qacEΔ1-sul1阳性13株,阳性率37.1%.qnr全部阴性.在测序中发现一种新的基因型,并以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,登录于美国NCBI(登录号:EF375621).结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐消毒剂基因的携带率非常高,耐药基因谱及其遗传学特征非常复杂.
作者：徐卫东；徐红星；糜祖煌；陈昭华；吴元健 刊期： 2008年第02期
目的:动态监测体外循环(CPB)下心脏手术围术期患者血清心肌肌钙蛋白T(cTnT) 及炎症相关细胞因子的变化,探究其临床价值.方法:18例行CPB心脏手术患者(CPB组)和15例非CPB心脏手术患者(对照组),分别采集其术前,术后即刻,24 h,48 h和72 h 5个时间点的外周血标本,测定血清cTnT、促炎细胞因子(TNF-α,IL-6,IL-8)和抗炎细胞因子(IL-2,IL-10)的水平,对结果比较、分析.结果:CPB组术后即刻,24 h,48 h的cTnT与术前比较显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),之后趋于术前正常水平;血清TNF-α于术后即刻、术后24 h显著增加,且在术后即刻达到峰值,于术后48 h恢复至术前水平;IL-6水平于术后24 h出现高峰,之后逐渐下降;血清IL-8水平升高趋势持续到术后72 h,在术后24 h达到峰值;血清IL-2水平在术后即刻显著增加,之后基本恢复至术前水平;血清IL-10水平在术后即刻,24 h,48 h均显著升高,且术后24 h达到峰值,至术后72 h恢复到术前水平.结论:CPB围术期动态监测cTnT、促炎及抗炎细胞因子的水平变化,对CPB术后患者的监护与临床预后有指导意义.
作者：刘玲；孙雅馨；陈亚宝 刊期： 2008年第02期
近年来,分子生物学的迅猛发展使得肿瘤的免疫治疗成为继手术、放疗及化疗之后的第4种治疗模式.卡介苗成功治疗膀胱癌的经验,使得卡介苗成为肿瘤免疫治疗的热点,本文就卡介苗的抗肿瘤机制与研究进展作一综述.
作者：刘刚；庞利群 刊期： 2008年第02期
烧伤已成为危害人类健康的重要创伤之一,损伤在体表,反应在全身,且烧伤程度与全身反应程度成正比,目前烧伤后感染仍是烧伤首位的死亡原因.在严重烧伤早期,表现为全身炎症反应综合征的典型病理生理过程,并贯穿烧伤的整个病程中,与烧伤休克、感染及死亡率密切相关,对整个病程的发展、治疗和预后均有重要的影响.
作者：金勤；孙炳伟 刊期： 2008年第02期
