目的:研究整合蛋白β1亚基过表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响及机制.方法:采用MTT及细胞流式测定观察整合蛋白β1亚基过表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖及细胞周期的影响.蛋白质印迹及RT-PCR检测细胞中p27的蛋白及mRNA的表达,并构建p27的RNA干扰质粒,转染整合蛋白β1亚基过表达细胞,再观察p27的表达变化对细胞增殖的影响.结果:整合蛋白β1亚基过表达可以抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并将细胞阻滞在细胞周期的G1期.整合蛋白β1亚基过表达可以在蛋白水平上调p27的表达,但并不影响p27的mRNA水平.p27的RNA干扰质粒可明显抑制p27的表达,而且p27表达的下调可以阻止整合蛋白β1亚基过表达所引起的细胞增殖抑制.结论:整合蛋白β1亚基过表达通过上调p27抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖.
作者：傅奕；梁玉龙 刊期： 2008年第04期
目的:观察壳聚糖对白血病细胞(K562,SHI-1)的作用.方法:以不同浓度的壳聚糖处理白血病细胞K562后,运用RT-PCR方法检测实验组K562细胞中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2(ppGalNAc-T2)mRNA表达差异.另用不同浓度的壳聚糖分别作用于白血病K562细胞和SHI-1细胞,MTT法检测壳聚糖对两种细胞的相对抑制率.结果:与阴性对照组比较,实验组K562细胞的ppGalNAc-T2表达降低,且随壳聚糖浓度升高,表达量进一步减少;MTT实验显示不同浓度的壳聚糖对K562细胞和SHI-1细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性.结论:壳聚糖对肿瘤细胞有一定的抑制作用,同时还可以减少ppGalNAc-T2在mRNA水平的表达.
作者：杨玲焰；秦芳；吴士良 刊期： 2008年第04期
目的:构建含有人GITR胞外段的真核表达质粒pDisplay-hGITRaa1-165,并检测其在真核细胞内的表达.方法:将带有信号肽的GITR基因片段克隆至真核表达载体pDisplay,经酶切鉴定及测序分析,脂质体介导法转染COS-7细胞,通过蛋白质印迹法检测其在COS-7细胞内的表达水平. 结果:所构建的真核表达质粒pDisplay-hGITRaa1-165转染COS-7细胞后,在其培养上清中检测到目的蛋白的表达.结论:成功表达pDisplay-hGITRaa1-165蛋白,为GITR的生物学功能研究奠定了基础.
作者：陈君；王胜军；仝佳；王海生；马斌；唐莉；胡正军；鲍俊峰；史烨；许化溪 刊期： 2008年第04期
目的:观察糜酶抑制剂(Chy-I)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型的干预作用和对血管紧张肽Ⅱ及其受体的影响,探讨糜酶参与肺纤维化的机制.方法:健康SD大鼠60只随机分3组:正常对照组(生理盐水),模型组(博莱霉素),干预组(博莱霉素+糜酶抑制剂).分别在第7,14,21,28天,每组HE染色5只大鼠,观察支气管肺组织病理改变,免疫组化观察肺组织中血管紧张肽Ⅱ及其受体的表达.结果:(1)肺泡炎程度评价:干预组和模型组与对照组间比较,差异有统计学意义,但干预组和模型组间差异无统计学意义.(2)肺纤维化程度评价:干预组和模型组与对照组间差异有统计学意义,且干预组和模型组之间比较,差异亦有统计学意义.(3)血管紧张肽Ⅱ及其受体的表达分析:模型组肺间质中血管紧张肽Ⅱ及其受体表达均持续增强,干预组均明显减少.结论:糜酶抑制剂能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过下调血管紧张肽Ⅱ及其1型受体(AT1)的表达而起作用.
作者：顾燕兰；郑金旭；万兵；管淑红 刊期： 2008年第04期
目的:体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体.方法:从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3 全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32a,转化E.coli BL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,Ni2+-NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性.结果:成功构建了Foxp3-pET-32a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶ 20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体特异性与小鼠Foxp3蛋白结合.结论:成功表达小鼠Foxp3蛋白并制备了多克隆抗体.
作者：鲍俊峰；王胜军；马洁；崔大伟；杨先知；毛朝明；仝佳；邵启祥；许化溪 刊期： 2008年第04期
目的:研究虾青素对乙醇所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用.方法:雄性小鼠60只,随机分为正常对照组、急性乙醇肝损伤模型组、联苯双酯阳性对照组(15 mg/kg)以及虾青素低、中、高剂量组(10,15,20 mg/kg)共6组.测定并比较各组小鼠肝脏系数,血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性与丙二醛(MDA)含量;测定肝组织中SOD,GSH-px活性,MDA含量以及组织病理系数.结果:各剂量虾青素均能升高急性乙醇肝损伤小鼠血清与肝组织中SOD,GSH-px活性(P<0.01),降低血清ALT,AST活性(P<0.01),降低血清与肝组织MDA含量(P<0.01),并能不同程度地改善肝脏病理组织损伤.结论:虾青素对乙醇所致急性肝损伤具有预防性保护作用.
作者：裴凌鹏；惠伯棣 刊期： 2008年第04期
目的:包装携载神经营养素(NT4)与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9) 融合基因的重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9,并观察该重组病毒对体外培养的耳蜗组织的转染.方法:使用pSSHG-CMV-NT4-ADNF-9,pGF140和pAAV/Ad 3种质粒共转染293包装细胞,制备ADNF-9重组腺相关病毒(recombinate adeno-associated virus, rAAV),应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度;体外分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞;将重组病毒感染体外培养的新生SD大鼠耳蜗毛细胞,于24 h后提取组织行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以检测rAAV-NT4-ADNF-9对耳蜗的转染.结果:应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度为2×1013 cfu/ml,表明成功地构建了重组AAV载体.成功分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞后,经RT-PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果显示NT4-ADNF-9在耳蜗组织得到了表达.结论:构建的重组病毒rAAV-NT4-ADNF-9,在体外可成功转染耳蜗组织,用于基因治疗的研究.
作者：祝康；郑国玺；韦俊荣；许珉；杨广笑；王全颖 刊期： 2008年第04期
目的:探索纤维蛋白(fibrin,FB)修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)支架材料上成骨诱导的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)黏附、增殖及分化的情况.方法:实验分为两组:实验组,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);对照组,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC).将SD大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导为成骨细胞,种植于支架材料上,体外复合培养.通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3,7,10,14 d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶表达量以及扫描电镜观察细胞在支架材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异.结果:大鼠MSCs经诱导培养14 d后,I型胶原免疫荧光染色为阳性;实验组支架材料的细胞黏附率显著高于对照组(P<0.05);且相同时间点实验组支架材料中的细胞数及碱性磷酸酶表达量也明显高于对照组(P<0.05);电镜观察发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组.结论:表面修饰纤维蛋白后的nHAC支架材料具有更好的细胞黏附、增殖及促成骨分化能力.
作者：马鹏；徐成振；徐晓峰；陈静；龚爱华；张志坚 刊期： 2008年第04期
目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大肠癌肝转移的影响.方法:根据VEGF基因mRNA设计合成小干扰RNA,采用荧光实时定量PCR检测VEGF mRNA水平,分别以软琼脂集落培养试验和Boyden模型观察癌细胞锚着不依赖性增殖和癌细胞侵袭能力.以脾切除法建立大肠癌肝转移模型,以不同方法处理的癌细胞接种模型,观察对大肠癌细胞肝转移的影响.结果:转染组VEGF基因mRNA水平明显降低,且呈浓度和时间依赖性.经VEGF siRNA转染处理的癌细胞软琼脂集落形成数和穿膜细胞数明显减少,且呈浓度依赖性(P<0.05,P<0.05).体内试验发现,对照组10只全部出现大肠癌肝转移灶,而siRNA组仅仅1只出现肝转移,差异具有显著统计学意义(P<0.01).结论:VEGF基因在大肠癌肝转移中起着重要的作用;以RNAi技术沉默VEGF基因表达,可抑制大肠癌细胞肝转移.
作者：王崇强；范钰；徐永中；庞利群 刊期： 2008年第04期
目的:研究反义caveolin-1对实质肿瘤细胞中β3-半乳糖基转移酶7(β3GalT7)表达的调节,以期阐明caveolin-1与β3GalT7的相关性.方法:运用脂质体介导转染人工合成的caveolin-1反义核苷酸(ASODN)至人类4种实质肿瘤细胞中,通过荧光显微镜、RT-PCR及蛋白质印迹检测β3GalT7表达的变化.结果:转染反义caveolin-1后的4种实质肿瘤细胞中β3GalT7均有明显的增强.结论:表明caveolin-1调节肿瘤细胞中β3GalT7的表达,且与β3GalT7的表达呈负相关.
作者：秦芳；杨玲焰；姜智；吴祁生；徐岚；闫石；杨世蕊；吴士良 刊期： 2008年第04期
目的:探讨卡维地洛(carvedilol, CVD)对多柔比星(adriamycin, ADR)致心肌病大鼠氧化应激水平的影响及其可能机制.方法:采用腹腔注射多柔比星建立心肌病大鼠模型,随机分为卡维地洛组和多柔比星组,每组10只.另取正常大鼠10只为正常对照组.卡维地洛组每日给予卡维地洛60 mg/kg;多柔比星组、正常对照组每日给予相同体积生理盐水,观察8周.第9周行心脏超声和血流动力学检测,测定心室胶原含量,总抗氧化能力和丙二醛浓度.结果:卡维地洛组与多柔比星组相比,可显著提高左室射血分数(P<0.01);降低心肌胶原容积分数(P<0.01).与正常对照组相比,多柔比星组总抗氧化能力显著降低(P<0.01),丙二醛浓度显著升高(P<0.01);而与多柔比星组相比,卡维地洛组可显著提升总抗氧化能力(P<0.01),明显降低丙二醛浓度(P<0.05).结论:卡维地洛能显著改善多柔比星引起的血流动力异常,改善心脏收缩与舒张功能,逆转心肌重塑,可能与其提高心肌抗氧化应激能力有关.
作者：俞捷；王成华；陶艾彬；尹春阳；汪建飞；张国辉 刊期： 2008年第04期
目的:探讨血糖波动对2型糖尿病患者肾病并发症的影响.方法:采用动态血糖监测系统(CGMS)对68例2型糖尿病患者进行连续24 h血糖监测,以24 h内平均血糖标准差(SDBG)反映血糖波动;通过测定24 h尿蛋白定量(24 h-UAE)描述肾病并发症的程度,并行平均动脉压、血脂、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、体质量指数(body mass index)测量.结果:(1)2型糖尿病无肾病并发症、合并早期肾病并发症、合并临床肾病并发症的患者SDBG分别为(1.64±0.45),(1.87±0.43),(2.82±0.81)mmol/L.(2)相关分析显示,相同条件下,经对数变换后的24 h-UAE与SDBG的相关系数为0.612,与平均动脉压的相关系数为0.558(P<0.01).(3)线性回归分析显示, 经对数变换后的24h-UAE与SDBG、平均动脉压的β值分别为0.519,0.451. 结论:初步认为血糖波动与2型糖尿病肾病并发症的发生发展有相关性.
作者：薄亚文；成金罗 刊期： 2008年第04期
目的:探讨KLOTHO基因C-1818T多态性与中国苏皖地区汉族人群不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris, UAP)的可能关系.方法:应用聚合酶链反应(PCR)及基因芯片(gene microarray)方法,检测146例UAP患者和235例非冠心病者的KLOTHO基因C-1818T多态性.结果:与对照组相比:(1)UAP患者CC,CT和TT基因型以及T等位基因型频率分布差异无统计学意义(P值均＞0.05);(2)年龄<60岁的UAP组TT基因型频率和女性UAP组TT基因型,T等位基因频率均明显升高(P值分别为0.017,0.049,0.026).在调整相关危险因素并经多元Logistic回归分析后,TT基因型与女性UAP的发生存在相关性(P=0.041),而T等位基因与女性UAP的发生无明显关联(P=0.472).结论:在中国苏皖地区汉族人群中,KLOTHO基因C-1818T多态性TT基因型与女性UAP的发病存在相关性.
作者：金鸣锋；何国平；高磊；张寄南 刊期： 2008年第04期
目的:观察低中心静脉压(LCVP)对肝叶切除手术失血量和肝肾功能的影响.方法:36例择期肝叶切除患者随机分为两组:LCVP组(n=17)和正常中心静脉压组(NCVP,n=19).LCVP组在肝实质完全离断过程中控制中心静脉压(CVP)在0～5 cmH2O,NCVP组CVP维持在6～12 cmH2O.观察两组患者术中总失血量、围术期输血例数,比较术后肝肾功能变化.结果:LCVP组和NCVP组术中失血量分别为(515±212) ml和(714±267) ml(P<0.05),围术期分别有2例和8例输库血200～800 ml(P<0.05);NCVP组1例患者术后第3天出现急性肾衰竭,但两组间血浆尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)比较差异无统计学意义(P>0.05);术后1周两组患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)均明显升高(P<0.01, P<0.05),但第7天时LCVP组AST低于NCVP组(P<0.05).结论:低中心静脉压可减少肝叶切除术中的出血和输血量,对肝肾功能的影响小.
作者：余健；印红梅；张军；郑浩；陈益君；高文灿 刊期： 2008年第04期
目的:探讨应用前列地尔联合利多卡因治疗突发性聋的临床疗效.方法:将58例突发性聋患者随机分成两组,治疗组给予前列地尔和利多卡因,传统方法组给予低分子右旋糖酐、丹参等,比较两组的有效率.结果:治疗组的总有效率明显高于传统方法组,经χ2检验两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:前列地尔联合利多卡因应用是治疗突发性聋的有效安全药物.
作者：丁俊杰；冯云海 刊期： 2008年第04期
目的:探讨肺耐药蛋白(LRP)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义.方法:应用RT-PCR半定量法检测60例NSCLC患者癌组织及癌旁组织中LRP mRNA的表达.用t检验、方差分析,Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank 检验进行统计分析.结果:NSCLC患者的癌组织中LRP mRNA表达量显著高于癌旁组织(P=0.000),LRP mRNA表达量在肺腺癌中高于鳞癌(P=0.02),中高分化组高于低分化组(P=0.033),但LRP mRNA的表达量与其他临床病理相关因素及生存期无相关性.结论:LRP在NSCLC的原发性多药耐药(MDR)中可能起重要作用,检测LRP对于预测NSCLC患者化疗效果、协助临床选择化疗方案可能具有一定的意义.
作者：李小琴；李坚；陈萍；包泉磊；杜永杰 刊期： 2008年第04期
目的:观察重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对人肺上皮细胞株(A549)的转化作用.方法:将体外培养的A549用不同浓度的rhTGF-β1干预后,倒置显微镜观察细胞形态学的变化,用MTT法检测rhTGF-β1对A549增殖的影响.48 h收集蛋白用蛋白质印迹和间接免疫化学方法检测间充质细胞表型Fibronectin-EDA(Fn-EDA)表达变化.结果:rhTGF-β1诱导A549向间充质细胞形态转化,在体外对A549增殖无明显影响,上调间充质细胞表型Fn-EDA 表达.结论:rhTGF-β1可诱导A549发生上皮细胞-间质转化(ephethlial-mesenchymal transition,EMT),支持肺上皮细胞发生EMT的观点.
作者：郑金旭；张小燕；端礼荣；陈炜；管淑红 刊期： 2008年第04期
植入起搏器是目前治疗缓慢性心律失常为有效和彻底的手段,在我国每年有上万例患者接受心脏起搏器植入手术,挽救了很多患者的生命,但在起搏器植入术中及术后仍有可能发生一些急、慢性并发症.
作者：刘培晶；严金川；任国庆；侯建民；杜荣增；梁仪；吕凤珍；钱骏 刊期： 2008年第04期
良好的术后镇痛可抑制机体应激反应, 有利于减少术后并发症, 促进伤口愈合, 加快患者恢复,是保证手术治疗成功和患者安全康复的重要因素.用于患者术后镇痛的方法和药物有很多,丁丙诺啡逐渐被应用于临床,但目前丁丙诺啡术后镇痛的给药途径多采用硬膜外给药或肌肉注射[1,2].本研究静脉输注丁丙诺啡用于乳腺癌术后镇痛,探讨其临床应用的可行性及效果,现报告如下.
作者：刘忠玉；李刚 刊期： 2008年第04期
目的:从正常人混合血浆中纯化获得β2糖蛋白Ⅰ(β2GPI),并对提纯蛋白的纯度及稳定性进行分析.方法:采用HClO4沉淀、Heparin Sepharose CL-6B亲和层析柱等纯化β2GPI;利用SDS-PAGE、蛋白质印迹分析提纯蛋白的纯度;观察不同温度、NaCl浓度及防腐剂等条件下的β2GPI稳定性.结果:本法获得了高纯度目的蛋白β2GPI(＞95%). β2GPI在浓度低于0.8 mol/L 的NaCl溶液中,置室温及4℃保存易降解变性,但在1.6 mol/L NaCl溶液中于室温及4℃保存60天均未见蛋白明显降解.结论:利用本法能够得到高纯度的β2GPI,在使用和保存β2GPI时要考虑到其降解的可能性,注意保存条件,必要时冻干保存.
作者：黄宏亮；周红；王婷；石文霞；李娜；王海波 刊期： 2008年第04期
目的:比较血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)、肌酐(Scr)、肌酐清除率(Ccr)在慢性肾病(CKD)患者各期与估算的肾小球滤过率(eGFR)的符合率.方法:血清Cystatin C采用免疫透射比浊法测定,Scr和尿肌酐采用酶法测定,基于Scr估算的eGFR采用MDRD方程进行计算,CKD患者根据1999年美国肾病基金会(NKF)公布的K/DOQI指南按eGFR分为5期.结果:168例CKD患者各期Cystatin C,Scr随eGFR的降低而逐渐升高,Ccr随eGFR的降低而逐渐降低,三者在各期间水平的差异均有统计学意义(P<0.05).当eGFR≤29 ml/min时,Cystatin C,Scr,Ccr的异常率均为100%,Cystatin C,Scr平均水平是正常参考上限的3～5倍和4～6倍,Ccr下降4～7倍,三者呈平行性改变;在eGFR 30～59 ml/min组,Cystatin C,Scr,Ccr的平均水平分别为2.06 mg/L,131.2 μmol/L和45.6 ml/min,异常率分别为97%,80%和89%,三者之间异常率的差异无统计学意义(P＞0.05);在eGFR 60～89 ml/min组,CystatinC,Ccr 异常率为87%和69%,Scr异常率为6.5%,三者之间异常率的差异具有统计学意义(P<0.05);在eGFR≥90 ml/min组,Cystatin C,Ccr 异常率为60%和42%,Scr异常率为0.结论:eGFR＜60 ml/min时,其与Cystatin C,Scr,Ccr的总符合率高,基本可以诊断肾小球滤过功能中度下降;60 ml/min≤eGFR≤89 ml/min时,Cystatin C,Ccr可以检出2/3患者肾小球滤过率的异常,Cystatin C比Ccr更敏感,而Scr不能反应肾小球滤过功能的下降;当eGFR≥90 ml/min时,MDRD方程高估了实际GFR,对于老年CKD患者,MDRD方程不适用,需检测Cystatin C和Ccr以及时发现GFR的下降.
作者：周剑波；张廷；胡宏 刊期： 2008年第04期
目的:观察茶多酚对人γδT细胞杀伤肿瘤细胞活性的影响和诱导人结肠癌细胞株(SW-480)凋亡和死亡的作用.方法:在体外用不同浓度的茶多酚诱导人γδT细胞和SW-480细胞株,然后测定人γδT细胞杀瘤活性和对肿瘤细胞的作用.用不同浓度的茶多酚分别诱导SW-480细胞4 h后,弃含有茶多酚的培养液再继续培养24 h,然后测定其死亡和凋亡数,用γδT细胞作对照组.结果:茶多酚浓度350 mg/L,作用γδT细胞4 h后能明显增强γδT细胞的杀伤肿瘤细胞活性,与未诱导组和其他浓度组相比,P<0.01;γδT细胞对经茶多酚处理后的SW-480细胞杀伤活性也明显高于对照组(P<0.01).各种浓度的茶多酚分别与γδT和SW-480细胞作用4 h,弃诱导液再继续培养24 h后,均能诱导其死亡和凋亡,在茶多酚浓度350 mg/L、诱导时间4 h时明显;同一浓度的茶多酚诱导SW-480细胞死亡和凋亡率明显高于γδT细胞组.结论:茶多酚在一定浓度时能明显提高γδT细胞对肿瘤的杀伤活性;经茶多酚处理的SW-480细胞更易被γδT细胞杀伤.茶多酚浓度在350 mg/L时能诱导SW-480细胞凋亡而对人γδT细胞无影响.
作者：朱月蓉；邱红；刘军权；陈复兴 刊期： 2008年第04期
调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)是一类具有较低的增殖能力,能够抑制免疫反应的细胞群,在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面发挥重要的作用.近年来,调节性T细胞已成为免疫学领域的研究热点,现已证实除了CD4+Treg外,一部分CD8+T细胞,CD4-CD8-T细胞、NKT细胞也具有类似免疫调节功能.
作者：陈蕾；焦志军 刊期： 2008年第04期
原癌基因和抑癌基因所编码的蛋白存在于细胞的各个组成部分中,包括细胞核、细胞质、线粒体和细胞膜.通过对原癌和抑癌基因蛋白结构和功能的分析,发现许多原癌基因和抑癌基因位于信号通路中的不同部位,参与许多重要的细胞活动过程,如细胞生长和分化、DNA复制和损伤修复、基因转录和表达、细胞周期调控等,在细胞凋亡、衰老过程中起重要作用,也在肿瘤的发生发展和转移中扮演重要角色.
作者：严丽荣；李坚 刊期： 2008年第04期
