目的:在大肠杆菌中克隆表达thanatin突变体(Th-T)蛋白并纯化. 方法:PCR合成Th-T基因并克隆到pET32a载体的BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,构建Th-T原核表达载体(pET32a-Th-T)并转化到大肠杆菌BL21融合表达,通过正交实验优化表达条件,His-Bind介质纯化.考察经酶切纯化后的重组Th-T对4种供试菌的低抑制浓度.结果:菌体在LB培养基(pH 6.5)培养4.5 h,IPTG 0.4 mmol·L-1诱导7 h,Th-T融合蛋白大量可溶性表达,经药敏试验证明纯化的重组Th-T具有预期的抗菌活性.结论:本研究为通过大肠杆菌体系表达重组Th-T抗菌药物奠定了基础.
作者：顾林；文良柱；吴国球；徐寒梅；沈子龙 刊期： 2007年第03期
目的:探讨靶基因中期因子(MK)在食管鳞癌患者外周血中的表达及其与食管鳞癌生物学行为的关系.方法:采用巢式RT-PCR方法检测54例食管鳞癌患者外周血的MK mRNA.10例正常健康志愿者外周血为阴性对照,11例食管鳞癌肿瘤组织为阳性对照.结果:54例食管鳞癌患者外周血MK mRNA阳性率为61.11%(33/54),并与食管鳞癌患者淋巴结转移有显著相关性(P＜0.05),而健康成人外周血则无一例出现阳性.结论:应用巢式RT-PCR方法检测食管癌患者外周血中的MK mRNA具有较高的敏感性和特异性,它有望成为判断食管鳞癌恶性程度、转移、复发和监测疗效的客观指标.
作者：胡俊；田小强；商延芳；刘飞；刘全俊；黄培林 刊期： 2007年第03期
目的:探讨神经激肽-1受体(NK-1R) 拮抗剂对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺损伤的作用,了解ANP时阻断该受体对肺损害是否具有保护作用.方法:90只健康成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP组和拮抗剂组各30只.正常对照组开腹后只翻动胰腺,ANP组和拮抗剂组胆胰管恒速逆行注射5%牛磺胆酸钠,制成ANP大鼠模型.拮抗剂组在制模成功后经尾静脉注射NK-1R拮抗剂spantide(0.001 25%) 0.5 ml.检测不同时间点肺髓过氧化物酶(MPO)活性和肺毛细血管通透性(LCP)的变化.应用免疫组织化学方法进行NK-1R的组织学定位.结果:ANP组6h后肺组织MPO活性和LCP即明显高于正常对照组,并且持续升高(P＜0.01).与正常对照组的各个时间点相比,拮抗剂组肺组织MPO活性和LCP没有明显变化(P＞0.05).免疫组化检查显示,NK-1R的表达主要位于肺泡隔血管内皮细胞表面及部分肺泡Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞表面等处.结论:ANP 时,P物质通过与NK-1R结合发挥作用,NK-1R拮抗剂阻断了P物质的作用路径,对ANP肺损伤起到一定的治疗作用.
作者：胡浩霖；石欣；霍明东；高乃荣；范健 刊期： 2007年第03期
目的:探讨甲状腺原发性乳头状癌(PC)合并鳞状细胞癌(SCC)的病理形态特点、组织发生、病因、诊断、鉴别诊断、治疗及预后.方法:标本采用常规石蜡切片,行HE染色和EnVision免疫组化二步法染色,并应用EBER-1-Dig探针原位杂交检测EB病毒.结果:光镜下见甲状腺肿块内同时存在乳头状癌和鳞状细胞癌两种成分.免疫组化染色示乳头状癌表达AE3( + ),AE1( + + ),TTF-1( + + + ),TG( + + + ),CK19( + + + ),Ki-67( + ),p53( - );鳞状细胞癌表达AE3( + + + ),AE1( + ),TTF-1( + ),TG( - ),CK19( + + + ),Ki-67( + + + ),p53( - ).原位杂交见乳头状癌及鳞状细胞癌表达EB病毒( + ),均定位于癌细胞核.结论:甲状腺内存在乳头状癌和鳞状细胞癌两种成分,鳞状细胞癌可能由胚胎发育期残留于甲状腺的鳞状上皮或甲状腺滤泡上皮鳞状化生恶变而来.EB病毒感染可能与癌的发生有关.
作者：徐新运；章宜芬；吴鸿雁；孟奎；吕翔 刊期： 2007年第03期
目的:剖析在校大学生存在的心理问题,并提出相应对策.方法:采用随机方法对某重点综合大学400名在校大学生进行问卷调查.结果:被调查者的主要心理压力来自未来就业、学业及毕业后方向等方面,分别占被调查者的47.1%、30.3%及20.7%;学习状态中对所学课程没兴趣、学习效率低所占比例分别为31.1%、25.3%;77.9%的人感觉自己偶尔或经常有心理问题.结论:大学生心理问题日趋复杂化,其主要原因与就业压力过大及学习动力不足有关,应通过重视大学生职业生涯辅导、增强大学生学习动力等有效对策,提高大学生心理素质.
作者：郭晋林；邓旭阳；杨晓波；朱正球；张晓飞；樊根淘；秦阳 刊期： 2007年第03期
目的:了解葛根素对体外培养的人腹膜间皮细胞增殖活性、氧化应激和转移生长因子-β1(TGF-β1)分泌的影响.方法:体外培养人腹膜间皮细胞,分对照组,腹膜透析液(PDS)组及葛根素1、2、3组(葛根素终浓度依次为50、100、200μg·ml-1)5组观察.检测各组间皮细胞的增殖活性,上清MDA、SOD、GSH水平以及TGF-β1的含量并进行比较.结果:在PDS干预下腹膜间皮细胞MTT还原能力明显下降,上清液MDA水平较对照组显著升高,SOD、GSH水平较对照组显著降低.葛根素组MDA水平显著低于PDS组,SOD、GSH水平显著高于PDS组.腹膜间皮细胞在PDS干预下分泌TGF-β1较对照组显著增加,葛根素组TGF-β1分泌与PDS组比较有显著下降.结论:葛根素可以拮抗商业性PDS对腹膜间皮细胞增殖活性的抑制作用,可以抑制氧化应激和TGF-β1分泌.
作者：蒋春明；张苗；孙(王争) 刊期： 2007年第03期
目的:观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马区细胞增殖的情况,探讨脑组织内源性修复的可能机制.方法:建立新生大鼠HIBD模型,分假手术组、单纯缺氧组、缺氧缺血组.于脑损伤后不同时间点取脑,分别行HE染色和BrdU免疫组化检测.结果:缺氧缺血组于缺氧缺血后3d BrdU阳性细胞有表达,7～14d达到高峰,21d时减少,在各时间点均高于其他组(P＜0.05).结论:HIBD后海马区存在细胞增殖,推论新生大鼠在出生后早期能显著抵抗HIBD,可能产生对海马的保护作用.
作者：朱欢；蒋犁；乔立兴；黄莉；朱丽华；张志华 刊期： 2007年第03期
目的:建立131I标记热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)的方法,探讨其标记条件.方法:采用放射性碘标记氯胺-T法标记17-AAG,并研究其在ICR正常小鼠体内的生物分布.结果:131I氯胺-T法标记17-AAG 的佳条件为:17-AAG乙醇溶液40μl(含17-AAG 5μg),0.5mol·L-1磷酸盐缓冲液50μl(pH 7.5),Na 131I溶液20μl,氯胺-T 30μg·(15μl)-1(用pH 7.5的0.05mol·L-1 PB溶解),25℃反应50s,偏重亚硫酸钠40μg·(20μl)-1(用pH 7.5的0.05mol·L-1 PB溶解)中止反应.标记率约为53.1%,经乙酸乙酯纯化后所得标记物的放射化学纯度>90%;其生理盐水溶液4℃放置5d,放射化学纯度大于90%.小鼠尾静脉注射131I-17-AAG后0.5h 131I-17-AAG在胆囊达到高峰(369.44±147.81) %ID·g-1,肝脏中仅有(2.23±0.50)%ID·g-1,说明对肝脏毒性小.结论:热休克蛋白90抑制剂17-AAG的标记方法操作简便,反应时间短.
作者：姜新宇；刘璐；陈道桢；黄鹰 刊期： 2007年第03期
目的:研究重组人生长激素(rhGH)在体外对胃癌细胞生长的影响.方法:设对照组、rhGH组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组和rhGH加5-FU 组共4组,依rhGH浓度不同,rhGH和rhGH加5-FU组又各分4个亚组.利用体外细胞培养、MTT比色、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法,测定不同浓度的rhGH对人胃癌细胞株MGC803肿瘤抑制率、细胞周期、细胞增殖指数(PI)及核增殖抗原Ki-67表达的影响.结果:rhGH在体外无明显促进MGC803细胞分裂增殖作用;对照组与各rhGH组比较,肿瘤抑制率、PI、Ki-67表达强度差异均无显著性(P＞0.05);rhGH各亚组间比较差异亦无显著性;5-FU组与rhGH组及对照组比较,各rhGH加5-FU组与rhGH组及对照组比较细胞抑制率增加,阻滞于G0～G1期的细胞数增加,S期细胞明显减少,PI明显降低(P＜0.05),Ki-67表达强度明显下降.结论:重组人生长激素在体外不会促进胃癌细胞的增殖.
作者：郭爱平；李苏宜 刊期： 2007年第03期
目的:观察5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结直肠癌细胞株SW480的作用与Musashi-1基因表达变化的关系.方法:用MTT法检测不同时间5-FU对SW480细胞增殖的影响,流式细胞术检测侧群(SP)细胞和CD34+CD44+细胞比例,RT-PCR半定量检测Musashi-1基因表达.结果:5-FU作用于SW480细胞24、48、72 h的半数抑制率依次为32.12、16.2和6.8 mg·L-1,SP细胞比例、CD34+CD44+细胞以及Musashi-1 mRNA表达在5-FU作用后均增加.结论:正常肠道干细胞标记物Musashi-1有可能成为结直肠癌干细胞样肿瘤细胞特异性标记,CD34、CD44可能具有类似的潜力.
作者：苏沐；姜藻 刊期： 2007年第03期
目的:原核表达野生型p53与PTD的融合蛋白,检测 PTD介导p53进入肝癌细胞的效率.方法:利用RT-PCR方法从A549细胞系中分离野生型p53基因,将该基因分别克隆入pTATHA和pET 32a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS内诱导表达并进行纯化.以纯化的p53蛋白经腹腔免疫BALB/c小鼠,制备高效价的抗血清.将PTD-p53融合蛋白加入HepG2 细胞培养上清,利用间接免疫荧光法检测PTD-p53融合蛋白导入HepG2 细胞的效率.结果:成功地构建了含有野生型p53基因的原核表达载体,表达纯化了p53 融合蛋白及p53蛋白,证实PTD-p53可以高效地转入HepG2细胞.结论:PTD-p53融合蛋白的表达纯化及活性分析,为应用PTD-p53蛋白治疗肝癌的实验研究奠定了理论基础.
作者：丁忠阳；蔡兵；穆会君；孙力；俞悦；高云 刊期： 2007年第03期
目的:探讨经口服受鼠脾淋巴细胞诱导耐受的供鼠淋巴细胞输注是否能减轻移植物抗宿主病(GVHD).方法:以雄性DBA-2小鼠(H-2d)为供者,分别用BALB/C鼠脾淋巴细胞、DBA-2鼠脾淋巴细胞、牛血清蛋白、普通饲料隔天喂养,单向混合淋巴细胞反应(MLR)评估诱导耐受状态.以雌性BALB/C小鼠(H-2d)为受者,给予6.0 Gy 60Coγ射线全身照射,尾静脉输注来自于DBA-2小鼠的2×107脾淋巴细胞.结果:耐受供鼠cpm值低于非耐受组,接受已耐受供鼠脾淋巴细胞输注的受鼠,发生GVHD较其他组轻.结论:经口服耐受的过继转输动物模型的实验方法有效可行.
作者：邓晓静；陈宝安；丁家华；孙雪梅；董伟民；毕延智；张琰；赵刚；高冲；孙耘玉；王骏；程坚；马燕；宋慧慧；鲍文；SCHMITT A；SCHMITT M 刊期： 2007年第03期
目的:观察慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样肾炎模型小鼠肾组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达及其意义.方法:12只B6D2F1代杂交鼠随机分为模型组和对照组,每组6只.双缩脲法测定24 h尿蛋白量,免疫组织化学染色法及RT-PCR法观察肾组织中MMP-9、TIMP-1表达,明胶酶谱法检测MMP-9活性.比较两组的检测结果.结果:与对照组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白量、MMP-9、TIMP-1蛋白及mRNA表达均明显升高(P＜0.01),MMP-9/TIMP-1之值增加(P＜0.01),MMP-9活性增强且其表达与增生的细胞数呈正相关(r=0.635,P=0.005).结论:MMP-9/TIMP-1失衡是引起cGVHD狼疮样肾炎小鼠发病的机制之一.
作者：刘莉；王美美 刊期： 2007年第03期
目的:检测心肌肌钙蛋白I(cTn I)异常病人血清中结缔组织生长因子(CTGF)水平的变化,探讨CTGF在心肌损伤病人血清中表达的意义.方法:化学发光法检测血清中cTn I水平,并根据cTn I水平分组;利用生物素亲和素EIA分析法检测各组病人血清中CTGF水平.结果:80例病人血清标本按cTn I水平分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3组,CTGF平均水平依次为(13.04±6.85)、(21.67±8.35)及(35.06±24.12)ng·ml-1.其中,Ⅱ、Ⅲ组血清CTGF水平明显高于正常对照组(均P＜0.05),Ⅰ组与正常对照组比较差异不显著(P＞0.05),Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组比较差异显著(均P＜0.05),Ⅱ组与Ⅲ组比较差异显著(P＜0.05).结论:CTGF在心肌损伤以及心肌梗死后表达上调,可能与心肌纤维化关系密切.
作者：赵桂琴；吴国球；刘乃丰 刊期： 2007年第03期
目的:比较Cortisomol糊剂和传统的氧化锌丁香油糊剂(ZOE)根充后的效果.方法:选择112例病人双侧均有牙髓病变的牙齿224颗,且两侧病牙为相对应的牙齿或为相对应牙齿的邻牙,采用自身对照的方法,在根管充填时,一侧牙齿用Cortisomol糊剂加牙胶尖充填,另一侧用ZOE加牙胶尖以侧压法充填根管,通过观察根充术后牙齿疼痛情况来比较两组的根充效果.结果:Cortisomol糊剂组术后轻、中和重度疼痛的牙齿分别为97、13、2颗,而ZOE组分别为39、52、21颗,两组经χ2检验,P＜0.05;术后疼痛时间3、7、10d以内的Cortisomol糊剂组牙齿分别为105、7、0颗,而ZOE组分别为52、38、22颗,两组比较,亦为P＜0.05.结论:Cortisomol糊剂根充的效果要明显优于ZOE.
作者：张军；葛久禹；孙玉凤；李俊亮 刊期： 2007年第03期
目的:研究高频超声多参数鉴别乳腺良、恶性肿块的价值.方法:记录145个乳腺肿块二维灰阶声像图参数和彩色多普勒血流参数,获取各肿块病理确诊结果,Logistic回归统计分析多参数综合鉴别诊断乳腺肿块良恶性的价值.结果:单独二维灰阶声像图参数的Logistic回归模型综合鉴别乳腺肿块性质的准确率为82.1%,二维灰阶声像图结合彩色多普勒多参数的Logistic回归模型综合鉴别诊断乳腺良恶性肿块的准确率为93.3%.结论:应用二维灰阶声像图结合彩色多普勒多参数的Logistic回归分析能提高乳腺良、恶性肿块鉴别的准确性.
作者：倪卫星；张炽敏；庞晓东；李嘉；李岭；苏俊 刊期： 2007年第03期
目的:探讨蛋白酶体抑制剂3,4-二氯异香豆素(DCI )对人胃癌细胞系BGC823体外增殖和凋亡的影响.方法:将DCI加入BGC823胃癌细胞,采用MTT法检测细胞的生长抑制效应,Annexin Ⅴ/PI法及电镜观察DCI对细胞凋亡的诱导作用.结果:DCI可明显抑制BGC823细胞体外增殖,随着DIC浓度的增加和处理时间的延长,细胞凋亡率增加; 流式细胞术显示DCI可诱导胃癌细胞早期凋亡,细胞被阻滞在G1期;电镜观察发现,经DCI处理后的部分细胞具有凋亡细胞的典型形态特征.结论:DCI可抑制人胃癌BGC823细胞增殖并促进其凋亡.
作者：费正华；姜藻 刊期： 2007年第03期
目的:研究磁性纳米四氧化三铁(Nano-Fe3O4)及纳米金(Nano-Au)是否具有逆转K562/A02细胞耐药的作用.方法:用MTT法测定盐酸柔红霉素(DNR)对K562/A02和K562细胞的毒性,并观察DNR与Nano-Fe3O4或Nano-Au的联合作用.结果:体积分数为25%的Nano-Fe3O4及Nano-Au能有效增强DNR的细胞毒作用,提高细胞的凋亡率,差异具有显著性.结论:Nano-Fe3O4及Nano-Au结合DNR后均能有效逆转K562/A02细胞的耐药性.
作者：戴永援；陈宝安；王雪梅；张仁云；高峰；丁家华；高冲；孙耘玉；程坚；赵刚；王骏 刊期： 2007年第03期
急性白血病(acute leukaemia,AL)的治疗始终不能取得满意效果,15%～30%的AL对化疗原发耐药,60%～80%的患者可以取得完全缓解(CR)但有可能复发而死于该疾病,多药耐药的发生是白血病患者复发的主要原因.
作者：程坚；陈宝安 刊期： 2007年第03期
导致肝脏损伤的疾病很多,如病毒性肝炎、肝硬化等疾病都会导致肝细胞的病变甚至坏死.因此,如何对损伤后的肝脏进行修复已成为人们关注的内容.
作者：黄絮；叶波平；王大勇 刊期： 2007年第03期
椎-基底动脉供血不足(vertebrobasilar insufficiency,VBI)是椎-基底动脉系统循环不全引起脑干、小脑、大脑半球后部等灌流区机能障碍所致的症状,是中老年人常见的缺血性脑血管病之一.
作者：朱丹丹；张炽敏 刊期： 2007年第03期
食管癌为常见、难治性恶性肿瘤,病死率高达90%.医学界对早、中期食管癌患者普遍采用以手术或放疗为主、化疗为辅的综合治疗模式；对晚期食管癌患者则采用以化疗、放疗为主,结合手术的综合治疗.
作者：葛乃建；李苏宜 刊期： 2007年第03期
尿路内翻性乳头状瘤(urinary inverted papillary,UIP)是一种少见的肿瘤,该肿瘤多单发,局限于黏膜层,肿瘤细胞罕见核异型和有丝分裂像,目前尚未有远处转移的报道,故多数学者认为它属良性肿瘤.它与尿路上皮癌(urothelial carcinoma,UC)有质的区别,治疗大多采取黏膜下切除术即可达到根治目的,一般不复发,癌变罕见.组织学上,UIP除了表面被覆了数层较正常的尿路上皮外,其余组织结构与UCⅡ级相似.
作者：樊祥山；张丽华；张东生 刊期： 2007年第03期
