树突状细胞(DC)的生物学特征及其在免疫应答中的重要作用,使之成为当前肿瘤免疫治疗研究的热点.本文就其特性及在肾癌免疫治疗中的作用作一综述.
作者:肖永双 刊期: 2011年第05期
目的 探讨双嵌段磷酸胆碱基聚合物MPC30-DEA70 作为反义寡核苷酸(AS-ODN)运输载体的安全性和有效性.方法 将载体MPC30-DEA70(N)与c-myc AS-ODN(P)在不同N/P比值的条件下复合,应用DNA凝胶电泳法、荧光显微镜、流式细胞术和四甲基偶氮唑盐(MTT)法对复合物溶液进行检测,观察复合物在HeLa细胞中的转染情况.结果 c-myc AS-ODN能与载体MPC30-DEA70电性中和,N/P比值越大复合物正电性越强;MPC30-DEA70/AS-ODN复合物能够进入细胞,转染效率随着N/P比值增大而增大;同时随着N/P比值增大复合物对细胞的增殖抑制作用显著增强.结论 MPC30-DEA70可以有效负载和运输c-myc AS-ODN,抑制HeLa细胞增殖,是一种新型的、安全有效的非病毒类转基因载体.
作者:孙甜甜;鲁永织;张琪;陈敏敏;赵侠;张敏;王志荣;杨煜;刘加立;张卓琦;曹希传 刊期: 2011年第05期
目的 探讨植物雌激素白藜三醇(RV)对大鼠血管平滑肌细胞增殖的调控及可能机制.方法 用植块贴壁法体外培养大鼠血管平滑肌细胞,使用Western blotting检测各组雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、P38、P-P38、C-myc蛋白的表达水平.实验分为6组(每组n=6):正常对照组(NC组),含10% 胎牛血清(FBS)的DMEM; RV干预组(RV组),50 μmol/L RV干预24 h; 血管紧张素Ⅱ组(AngⅡ组),1 μmol/L AngⅡ干预12 h;RV+ AngⅡ组,1 μmol/L AngⅡ干预12 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV+ICI182780组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV+ICI182780+AngⅡ组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入1 μmol/L AngⅡ干预12 h,后加入50 μmol/L RV干预24 h.结果 各组P38蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);ERα、ERβ蛋白的表达:RV组ERα、ERβ蛋白的表达水平较正常对照组增高(P<0.01),而RV+ICI182780组与RV组比较表达降低(P<0.01);C-myc蛋白的表达:RV组与NC组比较表达降低(P<0.01),AngⅡ组与NC组比较表达增高(P<0.01),AngⅡ组与RV组比较表达增高(P<0.01),RV+AngⅡ组与RV组比较表达增高(P<0.01),RV+ICI182780+AngⅡ组与RV+AngⅡ组比较表达降低(P<0.05);P-P38蛋白的表达:RV组与NC组比较表达降低(P<0.01),AngⅡ组与NC组比较表达增高(P<0.01),AngⅡ组与RV组比较表达增高(P<0.01),RV+AngⅡ组与RV组比较表达增高(P<0.01),RV+ICI182780+AngⅡ组与RV+AngⅡ组比较表达降低(P<0.01).结论 白藜三醇可以抑制C-myc的表达,抑制P38的磷酸化,此作用可被ICI182780阻断,说明白藜三醇可能是通过ER进而抑制C-myc的表达和P38的磷酸化发挥抗平滑肌细胞增殖的作用.
作者:刘晓潇;张卓琦;何秀华;王志荣 刊期: 2011年第05期
目的 研究白藜三醇对心房纤颤(简称房颤)猪心房组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响,探讨白藜三醇抗心肌纤维化作用及可能机制.方法 18只小家猪通过起搏器植入法建立猪房颤模型,随机分为3组(每组6只):对照组、房颤组、白藜三醇干预组(2.5 mg·kg-1·d-1).苏木精-伊红染色、Masson染色法观察心房组织形态学和间质纤维化,Western blotting法检测心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平.结果 与对照组相比,房颤组MMP-1、MMP-9显著增加(P<0.05),而TIMP-1则显著降低(P<0.05);与房颤组相比,白藜三醇干预组MMP-1、MMP-9显著降低(P<0.05),而TIMP-1则显著增加(P<0.05).结论 白藜三醇可能通过调节心肌组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达而发挥抗心肌纤维化的作用.
作者:王燕;张超群;徐晤;张卓琦;王志荣 刊期: 2011年第05期
目的 克隆肠道病毒71型(EV71)BrCr株外壳蛋白1(VP1)基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白(IgY).方法 培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,利用RT-PCR扩增出VP1目的基因,目的基因插入克隆载体pGEM-T,提取重组质粒,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切获得目的基因,插入原核表达载体pET-28a,重组子同时BamHⅠ,EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,转化入感受态工程菌E.coli BL21(DE3),获得阳性重组工程菌,经IPTG诱导获得表达融合蛋白,试剂盒纯化蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,用VP1蛋白免疫开产母鸡,收集鸡蛋,利用EGG stractTM IgY Purification System试剂盒提取卵黄抗体IgY,间接ELISA测滴度,SDS-PAGE和Western blotting验证其表达量和免疫活性.结果 本实验成功扩增出肠道病毒EV71 BrCr株VP1基因,获得了含重组表达质粒pET28a/VP1的阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1蛋白,VP1经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,利用纯化后VP1蛋白免疫产蛋母鸡,提取的IgY经ELISA 鉴定后其滴度为1:104,SDS-PAGE和Western blotting证实为抗VP1的特异性IgY.结论 成功的从EV71 BrCr株扩增出VP1基因,构建了PET28a/VP1表达载体,获得高效表达融合蛋白,免疫产蛋母鸡后制备高效价抗VP1蛋白的特异性IgY.
作者:汪六庆;胡元生;沈继龙;刘宜升 刊期: 2011年第05期
目的 探讨脑内感染小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)后脑干听觉诱发电位(auditory brainstem response,ABR)的变化,以明确经脑内感染MCMV后小鼠ABR是否出现异常改变,从而验证经脑内感染MCMV能否建立巨细胞病毒(CMV)感染致听力损伤的动物模型,并在此基础上观察更昔洛韦对CMV感染致听力损伤的干预效果.方法 将24只新生小鼠按窝随机分成正常对照组、模型组、干预组3组,对照组经脑内注射无菌生理盐水10 μl,模型组与干预组经脑内接种TCID50为1×105 U/ml的MCMV病毒悬液10 μl,同时干预组在接种MCMV后第2天开始腹腔注射更昔洛韦60 mg/(kg·d),连用2周.2周后在小鼠麻醉状态下应用脑干听觉诱发电位仪在电屏蔽装置中检测小鼠的ABR,并记录ABR的波形以及Ⅰ波的潜伏期、波幅.结果 模型组与正常对照组相比潜伏期延长、波幅降低(F=9.151,P=0.011;F=5.095,P=0.043),更昔洛韦干预组与模型组相比潜伏期缩短、波幅升高(F=13.797,P=0.003;F=14.587,P=0.002),差异有统计学意义.结论 经脑内感染MCMV可以引起小鼠ABR的异常改变,脑内感染MCMV可建立CMV感染致听力损伤的动物模型,婴幼儿CMV感染后早期应用更昔洛韦对CMV感染致听力损伤的进行性发展有一定的抑制作用.
作者:薛杨;乔月华;孟令建;王军;孟红 刊期: 2011年第05期
目的 以中等剂量的MK-801腹腔注射制作小鼠精神分裂症样模型,检测小鼠脑内钙结合蛋白Parvalbumin(小白蛋白,PV)的异常表达部位,探讨与已知精神分裂症相关脑区的关系,为深入研究精神分裂症的发病机制提供形态学和神经化学依据.方法 雄性成年昆明小鼠,随机分为生理盐水组和MK-801组.用Sams-Dodd刻板行为评分和一次性被动回避反应(OPAR)检测小鼠的行为学改变;用免疫组织化学染色法检测各组小鼠脑内PV蛋白的表达情况.结果 ① MK-801组小鼠刻板行为评分明显增高(P<0.01),记忆能力显著下降(P<0.01),符合精神分裂症样模型小鼠的表现.②MK-801组小鼠在前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区PV蛋白的表达明显减少.结论 隶属边缘系统的前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区内的PV阳性神经元数量的减少可能与精神分裂症的病理生理学机制密切相关.
作者:马传响;张静;郑殿杰;刘芳;刘均涛;宋亮;陈幽婷 刊期: 2011年第05期
目的 探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是否参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.方法 原代皮质神经元培养14天,予caspase抑制剂Z-VAD-FMK(20 μmol/L)预保护30 min,缺糖缺氧2 h,再灌注0、2、6、12、24、48 h,进行LDH测定;RT-PCR测HIF-1α RNA表达;Western blot检测总HIF-1α蛋白表达情况;分别提取细胞质和细胞核蛋白,Western blot分别检测胞质、胞核内HIF-1α蛋白表达情况.结果 caspase抑制剂Z-VAD-FMK预作用30 min、缺糖缺氧2 h、再灌注2 h后培养基中LDH增加(P<0.05),再灌注12 h达高峰;缺糖缺氧后HIF-1α RNA表达无变化(P>0.05);HIF-1α总蛋白表达增加(P<0.05),再灌注12 h达高峰;再灌注6 h时细胞质HIF-1α蛋白表达达高峰(P<0.05),随后降低;再灌注12 h时,细胞核HIF-1α蛋白表达达高峰(P<0.05),随后降低.结论 HIF-1α参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.
作者:张翠翠;陈巍巍;徐兴顺;耿德勤 刊期: 2011年第05期
目的 建立慢性氟中毒后认知功能障碍大鼠模型,探讨慢性氟中毒所致认知功能障碍的发生机制.方法 用含不同浓度氟化钠(0、50、100、150 mg/L)的蒸馏水喂养Wister大鼠6个月,建立慢性氟中毒大鼠模型;采用Y型迷宫和旷场分析实验检测模型大鼠的认知行为功能改变;H-E染色观察大鼠海马形态的变化.结果 氟中毒组大鼠学习记忆成绩低于正常对照组,中、高氟中毒组表现更为明显(P<0.05或P<0.01);与正常对照组相比,高氟中毒组的海马区细胞形态出现了明显的改变.结论 大鼠慢性氟中毒所导致的认知功能障碍与高氟地区人群认知功能障碍有相似之处,可作为研究慢性氟中毒认知障碍的动物模型.
作者:陈浩;耿德勤 刊期: 2011年第05期
目的 研究necroptosis信号通路中受体相互作用蛋白3(RIP3)的胞内定位.方法 SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天,zVAD 20 μmol/L预处理30 min,TNFα 30 ng/ml处理不同时间,Western blot检测胞质、胞核中RIP3蛋白水平,结合免疫荧光观察RIP3的胞内定位.结果 随着TNFα作用时间的延长,胞质、胞核中RIP3蛋白水平均呈上升趋势,胞质中RIP3蛋白水平在8 h达高峰,随后下降,胞核中RIP3蛋白水平在12 h达高峰,即在12 h出现核转位的高峰(P<0.05).结论 正常细胞中RIP3存在于胞质,necroptosis时发生核转位.
作者:陈巍巍;张翠翠;徐兴顺;耿德勤 刊期: 2011年第05期
目的 探讨颈动脉超声在诊断急性脑梗死患者颈动脉病变中的应用价值.方法 245例急性脑梗死患者行颈动脉超声检查,其中77例患者行颈动脉数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA) 检查,比较2种方法的检查结果.结果 245例患者中,颈动脉超声检出颈动脉硬化者208例(84.90%),斑块193例(78.78%);斑块的主要分布部位依次为颈动脉分叉处(BIF)、颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)起始段及颈外动脉(ECA).颈动脉超声与DSA对轻度颈动脉狭窄的检出率有统计学差异(P<0.05),而对于中重度狭窄及闭塞的检出率无统计学差异(P>0.05).结论 与DSA相比,颈动脉超声诊断轻度颈动脉狭窄的准确率较低,而对诊断颈动脉斑块形成有重要意义.
作者:胡朋;崔桂云;陈静;沈霞 刊期: 2011年第05期
目的 探讨事件相关电位(ERP)在脑卒中患者认知功能评估中的价值.方法 据简易精神状况检查(MMSE)量表诊断标准,选取脑卒中认知障碍患者30例为病例组,分别在治疗前和治疗后2个月进行ERP检测,并以相匹配的30例健康者作为对照.结果 治疗前病例组MMSE评分为(16.43±4.78)分,分值显著低于正常对照组[(29.70±0.47)分](P<0.01);ERP表现为靶刺激N100、P200、N200、P300潜伏期延长,P300波幅降低(P<0.01).治疗后病例组患者MMSE评分为(24.37±4.02)分,与治疗前比较有显著性差异(P<0.01),其ERP主要表现为P300潜伏期较治疗前缩短,P300波幅增高(P<0.01).结论 P300可反映脑卒中认知障碍的存在与改善情况,具有一定的临床应用价值.
作者:王世雁;巩尊科;陈伟;张明 刊期: 2011年第05期
目的 观察小剂量芬太尼-罗哌卡因鞍麻在肛肠手术中的临床应用.方法 24例肛肠手术患者随机分为小剂量芬太尼-罗哌卡因鞍麻组(观察组)和罗哌卡因局部麻醉组(对照组),观察麻醉起效时间、镇痛持续时间、血流动力学、应激指标等,同时用改良的Bromage分级评估下肢运动神经阻滞程度,及指诊肛门括约肌阻滞程度.结果 2组感觉阻滞起效时间、运动阻滞起效时间、术后运动阻滞程度、术中镇痛效果均无统计学差义;观察组术中血压(BR)、心率(HR)及心率与收缩压的乘积(RPP)低于对照组(P<0.01);观察组术中肌松情况及镇痛效果优于对照组(P<0.05或P<0.01);2组患者血浆皮质醇、血糖和C反应蛋白浓度术后2 h时均明显高于麻醉前(P<0.01),而观察组又低于对照组(P<0.01).结论 小剂量芬太尼-罗哌卡因鞍麻可减弱患者的应激反应,具有血流动力学影响小、术中肌松满意、术后镇痛时间长的特点,是适用于肛肠手术的一种简单、安全、有效的麻醉方法.
作者:曹永;戴体俊;刘静;穆作镇 刊期: 2011年第05期
目的 探讨严重眼外伤玻璃体切除术后Ⅱ期植入虹膜隔人工晶状体的治疗效果及操作技巧.方法 对10例(10眼)眼外伤晶状体联合玻璃体切除术后无晶状体伴大部分虹膜缺损或无虹膜患者,在眼部伤情稳定且视力可矫正情况下行Ⅱ期缝线悬吊式虹膜隔人工晶状体植入术,术后随访观察视力及并发症情况.结果 术后裸眼视力均有不同程度提高,矫正视力0.1~0.3者6眼,0.4~0.6者4眼,全部患者畏光症状明显减轻或消失.结论 对严重眼外伤伴大部分虹膜缺失或无虹膜无晶状体眼患者进行虹膜隔人工晶状体植入术可有效改善患者畏光及视觉不适,提高视力.
作者:牟宁;李明新;马欣欣 刊期: 2011年第05期
目的 探讨肌电触发电刺激联合减重步行训练(BWSTT)对脑卒中偏瘫患者下肢肌张力的影响.方法 72例脑卒中患者采用析因设计方法随机分为4组(每组n=18).常规治疗组(常规组)采用常规治疗;BWSTT组、肌电触发电刺激组(触发组)、肌电触发电刺激联合BWSTT组(联合组)在常规治疗基础上给予相应治疗.并于治疗前后分别进行Fugl-Meyer评分、临床痉挛指数(CSI)评分及积分肌电值(iEMG)评定.统计学处理采用析因设计的多因素方差分析.结果 治疗前各组Fugl-Meyer评分、CSI评分及iEMG差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,BWSTT组和触发组脑卒中患者下肢Fugl-Meyer评分均提高(P<0.01),CSI评分及腓肠肌iEMG数值均降低(P<0.05);使用肌电触发电刺激、BWSTT对Fugl-Meyer评分、CSI评分及iEMG数值存在交互作用(P<0.05),提示肌电触发电刺激与BWSTT联合干预对促进脑卒中患者的康复效果更佳.各组iEMG结果与Fugl-Meyer评分和CSI评分一致.结论 肌电触发电刺激和BWSTT均可减低脑卒中患者肌张力,缓解肌痉挛,二者联合可以发挥协同作用,提高疗效.iEMG在脑卒中肌张力评价中有潜在的应用价值.
作者:张梅莹;张见平;陈伟;高晓盟;巩尊科 刊期: 2011年第05期
目的 观察异丙托溴铵联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗小儿喘息性疾病急性发作的疗效.方法 104例小儿喘息性疾病(包括毛细支气管炎、喘息性支气管炎及支气管哮喘)患儿随机分为对照组和治疗组,均采用综合治疗,治疗组在此基础上加用异丙托溴铵联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗,对照组加用沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗,观察2组患儿用药后症状缓解及肺部哮鸣音减少或消失时间,并比较2组疗效.结果 治疗后2组患儿临床症状及体征均有不同程度改善;治疗组在咳嗽、喘息、呼吸困难缓解时间,肺部哮鸣音消失时间及住院天数方面短于对照组(P<0.05),总有效率高于对照组(P<0.05);2组患儿采用吸入治疗依从性好,未出现不良反应.结论 异丙托溴铵联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入能迅速改善患者症状,减少或消除肺部哮鸣音,缩短疗程,提高疗效.
作者:唐海俊;赵慧梅;何启明;沈莉 刊期: 2011年第05期
目的 探讨成年人先天性胆总管囊肿(CCC)的特点及诊断和治疗要点.方法 对我院普外科1996年1月-2011年1月收治的14例成年人先天性胆总管囊肿患者的临床资料进行回顾性分析.患者术前B超确诊率为92.9%,CT确诊率为75.0%,内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)、磁共振胰胆管成像(MRCP)的确诊率为100%.14例患者中有13例行手术治疗,其中行胆总管囊肿完整或部分切除+肝总管空肠Roux-en-Y吻合术12例.结果 随访10例(71.4%),平均随访36个月,未发现有恶变病例.结论 B超为先天性胆总管囊肿首选检查,CT、ERCP、MRCP各有其诊断价值.手术为成年人先天性胆总管囊肿的治疗方式,早期手术为关键,胆总管囊肿完整或部分切除+肝总管空肠Roux-en-Y吻合术为其首选手术方法.
作者:丁志龙;李文美;宋军;李向农;刘斌 刊期: 2011年第05期
目的 探讨社区实行糖尿病规范化管理对血糖达标率的影响.方法 选取2009年到我院门诊确诊的2型糖尿病患者120例为研究对象(均居住于本社区),对其进行规范化管理,比较实施规范化管理前后糖尿病控制指标的变化及血糖达标率.结果 经过为期1年的规范化管理,管理后的血糖达标率显著提高,空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)较管理前显著降低(P<0.05).结论 对糖尿病患者实行社区规范化管理有利于糖尿病控制的全面达标.
作者:赵锦;谢昌辉;梁成竹;吴伟琼;沈柳艳 刊期: 2011年第05期
目的 探讨超声乳化白内障摘除联合人工晶状体(intraocular lens,IOL)植入术后发生囊袋阻滞综合征(capsular block syndrome,CBS)的临床表现、发病机制、预防及Nd:YAG激光后囊膜切开术的治疗效果.方法 回顾性分析我院近5年来行超声乳化白内障摘除联合IOL植入后发生CBS,然后采用Nd:YAG激光行后囊膜切开术解除囊袋阻滞的3例患者的临床资料.结果 经Nd:YAG激光后囊膜切开术后患者囊袋阻滞综合征消失,前房有所加深,视力明显提高.结论 黏弹剂残存、环形撕囊直径小于晶状体光学部分以及皮质残存是发生CBS的主要原因.发生CBS后行Nd:YAG激光后囊膜切开术治疗安全有效.
作者:马欣欣;牟莉;牟宁 刊期: 2011年第05期
目的 将连续环形撕囊术应用于小切口白内障手术,探讨其临床应用价值.方法 局麻下对242例白内障患者(264眼)行小切口非超声乳化白内障摘除术,术中应用连续环形撕囊术,术后随访1个月,观察疗效.结果 264眼中231眼(87.5%)顺利完成连续环形撕囊,均成功地将晶状体核自囊袋旋至前房,并顺利植入折叠式人工晶状体,未见严重并发症.术后1个月随访时,187眼矫正视力≥0.5,占随访眼的80.9%(187/231).结论 连续环形撕囊术的应用可提高小切口非超声乳化白内障摘除术的成功率,减少并发症,获得与超声乳化白内障摘除术相近的临床效果.
作者:陈琳;Stacy Sigh 刊期: 2011年第05期
目的 探讨超声造影及超声灰阶弹性成像技术对肾透明细胞癌的诊断价值.方法 回顾性分析20例经手术病理证实的肾透明细胞癌常规超声、超声造影及灰阶弹性成像检查结果,对以上3种检查结果比较分析.结果 20例肾透明细胞癌超声造影及灰阶弹性成像能清晰显示肿瘤边界,且显示的肿瘤大径大于常规超声检测值;彩色多普勒超声显示3例肿瘤血流信号丰富,超声造影则显示19例肿瘤为富血供.超声造影增强模式12例为快进慢退高增强,余增强方式不一;超声造影显示瘤内坏死区及假包膜效果优于常规超声(P=0.004,P=0.039).灰阶弹性成像显示肿瘤内部回声不均匀,18例白色为主,2例黑色为主.结论 超声造影及灰阶弹性成像可为临床提供更多信息,从而对肾透明细胞癌的诊断提供更多帮助.
作者:董秀娟;崔建华 刊期: 2011年第05期