目的 克隆和构建带人骨桥蛋白(OPN)启动子区基因的载体pGL3-OPN.方法 一步法提取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总DNA,PCR扩增 OPN全长基因,克隆入T载体,测序,双酶切连入真核表达载体pGL3-vector,酶切鉴定.将构建好的pGL3-OPN瞬时转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-435中,利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测,通过计算两种质粒荧光素酶活性的比值来筛选药物.结果 扩增出人OPN基因全长,测序结果和GenBank记载一致,成功克隆入真核表达载体.p47可一定程度激活OPN启动子活性.结论 成功构建带有人OPN基因的真核表达载体pGL3-OPN.
作者:刘阳;朱静;孙立;林森森;袁胜涛 刊期: 2012年第02期
透射电镜生物样品制备常用的是超薄切片法,超薄切片技术的制片过程很复杂,要求很细致,稍有不慎便会造成污染,影响图片质量.本文就如何减少样品制备污染问题,总结了本实验室长期以来的制样经验,供广大电镜工作者,特别是初学者借鉴.
作者:于红丽;董富兴;戚大石;熊晔;董红燕 刊期: 2012年第02期
目的 研究替米沙坦对猪心动过速性心肌病(tachycardiomyopathy,TCM)心肌细胞Fas/FasL、Fas相关死亡结构域(Fas-associated death domain,FADD)、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白的影响,探讨替米沙坦对心肌细胞的保护作用及其作用机制.方法 18头家猪随机分为3组(每组n=6):快速右心房起搏组(TCM组),实验猪植入永久起搏器,起搏频率500次/min;快速右心房起搏加替米沙坦组(TCM+TS组),起搏器植入前3天至起搏2周后,每日给予替米沙坦(1.5 mg·kg-1·d-1)混于饲料中喂服;对照组,实验猪未植入起搏器也未服药.每周记录1次心电图,实验前后经胸心脏超声观测猪左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室射血分数(LVEF).2周后处死动物,取左心室组织,Western blot技术检测Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测fas、caspase-3 mRNA转录水平.结果 TCM组较对照组左心室心肌细胞Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白表达量均明显增高(P<0.05),TCM+TS组较TCM组Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白表达量均明显降低(P<0.05).TCM组较对照组左心室心肌细胞fas及caspase-3 mRNA表达明显增高(P<0.05),TCM+TS组较TCM组fas及caspase-3 mRNA表达明显降低(P<0.05).Fas与caspase-3蛋白表达呈明显正相关(r=0.987,P<0.01);fas与caspase-3 mRNA表达呈明显正相关(r=0.950,P<0.01).结论 替米沙坦通过抑制Fas/FasL通路相关蛋白的表达,进而减少细胞凋亡,延缓TCM病情进展.
作者:郑俊晨;陆远;张卓琦;徐晤;郝湛军;张辉;王志荣 刊期: 2012年第02期
目的 评价经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合微波凝固治疗(PMCT)小肝癌的疗效.方法 32例小肝癌患者(38个病灶,直径≤5 cm)接受肝动脉化疗栓塞术,1~2周后在超声引导下行微波凝固治疗.结果 通过活检、彩色多普勒及CT增强扫描,显示38个病灶完全性坏死.26例AFP升高,治疗后10~14天内降至正常水平.随访9~18个月,2例出现复发病灶.随访期内患者均存活.结论 肝动脉化疗栓塞术联合微波凝固治疗小肝癌,疗效好、安全、无严重并发症.
作者:徐永茂;张南征;徐冬云;江兴松;史跃;栾智勇;王加中 刊期: 2012年第02期
目的 观察戊四氮(PTZ)点燃后发育期癫(疒间)大鼠海马神经元海马突触素(P38)和突触后致密物质(PSD95)及电镜超微结构的变化.方法 21日龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS)和实验组(PTZ),用戊四氮建立点燃模型,免疫组化检测大鼠P38及 PSD95阳性细胞的数量及分布,电镜观察海马CA3区超微结构的变化.结果 PTZ组大鼠海马区P38及PSD95免疫反应产物表达量较NS组明显减少(P<0.05);电镜下NS组海马CA3区神经元形态及突触结构未见明显异常,PTZ组大鼠神经元细胞及突触结构均有改变.结论 戊四氮点燃所致癫(疒间)对发育期大鼠海马神经元的突触结构有明显损害.
作者:耿丽娟;李慧;王娟;董洪洋;王增芹;袁宝强 刊期: 2012年第02期
目的 比较序贯疗法与7天、10天三联疗法根治幽门螺杆菌(HP)的疗效.方法 将入选的180例HP感染患者随机分为3组,每组60例.序贯治疗组:前5天予奥美拉唑20 mg+阿莫西林1.0 g,bid,口服;后5天予奥美拉唑20 mg+克拉霉素0.5 g+呋喃唑酮0.1 g,bid,口服.7天三联组:予奥美拉唑20 mg+克拉霉素0.5 g+阿莫西林1.0 g,bid,口服,共7天.10天三联组:予奥美拉唑20 mg+克拉霉素0.5 g+阿莫西林1.0 g,bid,口服,共10天.意向处理分析(ITT)及试验方案分析(PP)方法计算HP根除率,并观察药物的不良反应.结果 3组患者的服药率均大于95%,差异无统计学意义(P>0.05);序贯治疗组ITT分析及PP分析计算HP根除率分别为88.3%、91.4%,优于7天三联组(80.0%、81.4%)和10天三联组(81.7%、84.5%)(P<0.05);3组患者的药物不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论 序贯疗法根治HP的疗效佳、顺应性好,不良反应无明显增加.
作者:赵凯;张炜 刊期: 2012年第02期
目的 制备萘普生-聚乙二醇6000(PEG6000)固体分散体,分析萘普生药物溶出速率和溶解度.方法 萘普生与PEG6000按照不同的的质量比例,采用熔融法制备固体分散体;通过紫外光谱、红外光谱、体外溶出及溶解度检测对固体分散体进行分析.结果 紫外光谱和红外光谱均验证固体分散体的形成.与萘普生原料药相比,萘普生固体分散体的溶出速率和溶解度均提高.结论 萘普生-PEG6000固体分散体能显著提高萘普生溶出速率和溶解度,且随着载体比例的增大,溶出速率和溶解度也增大.
作者:杨宜华;廉淑芹;邵云云 刊期: 2012年第02期
目的 观察盐酸戊乙奎醚于麻醉前用药对于妊娠高血压综合征(PIHS) 剖宫产患者的安全性和有效性.方法 50例PIHS患者随机分为盐酸戊乙奎醚组(Ⅰ组)和东莨菪碱组(Ⅱ组),分别肌内注射盐酸戊乙奎醚0.5 mg和东莨菪碱0.3 mg,观察并记录给药前及给药后10、20、30 min时患者心率、血压、脉搏氧饱和度(SpO2)、呼吸频率、口干程度(VAS评分)、唾液分泌量变化情况.结果 与用药前比较:Ⅰ组心率、血压有轻微的改变,但差异无统计学意义(P>0.05);Ⅱ组心率、血压升高,差异有统计学意义(P<0.05).2组呼吸频率、SpO2比较无明显差异(P>0.05).口干程度VAS评分均高于给药前(P<0.05),但组间差异无统计学意义(P>0.05).2组唾液量均少于给药前(P<0.05).结论 术前使用盐酸戊乙奎醚对PIHS患者的心率、血压、SpO2、呼吸频率影响小,较东莨菪碱效果好,更适用于PIHS患者.
作者:郑翠芳;王厚清;杜淑华;董兆鹏 刊期: 2012年第02期
目的 评价PET-CT定位调强放射治疗(IMRT)对非小细胞肺癌(NSCLC)靶区勾画、近期疗效及急性毒副反应的影响.方法 ⅢA、ⅢB期NSCLC患者46例,其中行PET-CT定位IMRT 23例(A组)、行CT定位三维适形放疗(3D-CRT)23例(B组).2组均采用6 MV-X线:A组,临床靶区(CTV)50 Gy/28次/38~40天(1.8 Gy/次),肿瘤区(GTV) 64.4 Gy/28次/38~40天(2.3 Gy/次); B组,CTV 50 Gy/25次/35~37天(2.0 Gy/次),后缩野至GTV 14 Gy/7次/9~11天(2.0 Gy/次).2组均同步TP方案化疗.放化疗2个月后复查CT,比较2组近期疗效及急性毒副反应的差异.结果 ①A组PET-CT融合图像下GTV平均体积为103.69 cm3,CT图像下GTV平均体积为132.64 cm3,差异有统计学意义(P<0.05).②A组近期有效率为78.3%,B组近期有效率为65.2%,2组间差异无统计学意义 (P>0.05).③2组均未出现Ⅳ度急性毒副反应.A组急性放射性肺炎、放射性食管炎发生率分别为13.0%、21.7%,明显低于B组的39.0%、56.5%(P<0.05).结论 PET-CT定位IMRT治疗NSCLC能精确指导靶区勾画,减少GTV体积,降低急性毒副反应.
作者:温翠侠;于大海;任洪荣;朱峰;管峦;章龙珍 刊期: 2012年第02期
目的 了解医学与非医学专业在校大学生对保健品的认知及态度.方法 对3所大学的在校大学生随机抽样进行自填问卷调查.结果 有56%的医学生和63%的非医学生自认为了解保健品的相关知识,但保健品认证标识的知晓率很低(医学生17.7%,非医学生30.2%,P<0.01);对保健品功效的认同率方面,除减肥功效外,医学生均高于非医学生(P<0.05).对保健品的态度:医学生不想尝试新的保健产品的比例(60.1%)高于非医学生(43.9%,P<0.05);医学生认为保健品宣传可信的比例(6.6%)低于非医学生(26.1%,P<0.05);在选择保健品时,医学生看重安全性(28.1%),而非医学生更看重保健功能(24.6%,P<0.05).结论 大学生对于保健品认证标识的知晓率低.医学生对保健品功效的认可率高于非医学生,对保健品的态度也比非医学生更谨慎,不愿贸然尝试新保健品,尤其注重保健品的安全性.
作者:李茜;顾燕华;朱静芬;孙桂香 刊期: 2012年第02期
目的 了解呼吸系统疾病住院患者治疗期间用药不良反应发生情况,为实施临床安全用药提供参考.方法 通过临床药师参与临床查房、实施全程化药学监护等措施,对2010年6月至2011年4月间呼吸系统疾病住院患者用药情况进行监测,对不良反应特征进行统计分析.结果 呼吸系统疾病住院患者药品不良反应(ADR)发生率为13.28%,占同期医院ADR总例数的43.05%;发生ADR的患者年龄明显高于未发生ADR者;ADR发生率较高的药物为抗感染药物、抗肿瘤药物、抗结核药物;ADR临床表现主要有皮肤损害、神经肌肉反应、消化道反应、肝功能损害等.结论 ADR的发生与呼吸系统疾病患者的年龄、用药特点及既往药物过敏史密切相关;临床药师应加强与医护人员的协作,明确ADR发生的相关危险因素,提高临床合理用药水平.
作者:马淑贞;徐媛;韩枫 刊期: 2012年第02期
目的 观察2型糖尿病(T2DM)合并代谢综合征(MS)的心电图运动试验反应,比较心脏变时指标、代谢当量及发生心肌缺血的心电图改变.方法 随机抽取门诊T2DM患者120例,按是否合并MS分为2组:合并MS组和非MS组.所有受试者完成症状限制性运动平板试验,并求心脏变时功能不全(CI)指标:运动高心率与预测大心率值之比(rHR)和心率储备率(HRR),以及运动能力中的大代谢当量(maxMETs).以ST-T改变作为心肌缺血的心电图改变标准.结果 T2DM 合并MS患者其心脏变时功能、代谢当量指标均低于不合并MS的T2DM患者,差异有统计学意义(P<0.05).T2DM合并MS患者发生心肌缺血的心电图改变者占35.9%,非MS组为19.6%(P<0.05).心肌缺血患者心脏变时功能指标及maxMETs 较无心肌缺血者为低(P<0.05).结论 T2DM合并MS者其潜在的心肌缺血与心电图运动试验结果相关,发生心肌缺血者其心脏变时功能指标及maxMETs较无心肌缺血者为低.T2DM合并MS者心肌缺血的发生率较不合并MS者为高.MS及CI作为心血管高危因素,对合并MS及CI的T2DM患者进行预防和康复有临床意义.
作者:高民;陈伟;韩良;张丽 刊期: 2012年第02期
目的 观察石杉碱甲(Hup)对急性重复缺氧小鼠耐受力和记忆力的影响.方法 将30只小鼠随机分成3组(n=10):正常组(C组),缺氧组(NS+A组),石杉碱甲组(Hup+A组).在小鼠急性重复缺氧实验中,分别记录NS+A组和Hup+A组小鼠3次标准缺氧耐受时间;在避暗实验中,观察上述3组小鼠的步入潜伏期(STL)和错误次数(ETs).结果 在小鼠急性重复缺氧实验中:与NS+A组相比,Hup+A组3次标准缺氧耐受时间均延长(P均<0.01).在避暗实验中:与C组相比,NS+A组STL缩短(P<0.05)、ETs增加(P<0.05);与NS+A组相比,Hup+A组ETs减少(P<0.05).结论 Hup可提高小鼠对急性重复缺氧的耐受力,改善急性重复缺氧所致的小鼠记忆损害.
作者:包素红;吴薇;唐媛;沈苏宁;徐嫒娜;沈春敏;吴磊;刘玉玺;王丹 刊期: 2012年第02期
目的 观察天麻素单用及其与地西泮合用对利多卡因所致惊厥作用的影响.方法 腹腔注射不同剂量天麻素或天麻素和地西泮合用,10 min后,腹腔注射致惊厥剂量的利多卡因,观察小鼠惊厥潜伏期、持续时间和惊厥只数.结果 天麻素100 mg·kg-1、200 mg·kg-1、400 mg·kg-1能延长惊厥潜伏期(P<0.05,P<0.05,P<0.01);单独使用天麻素50 mg·kg-1可延长惊厥潜伏期(P<0.05),对惊厥持续时间和惊厥只数则无明显影响,单独使用地西泮1.5 mg·kg-1对惊厥潜伏期、持续时间和惊厥只数均无明显影响,二者合用则能明显延长惊厥潜伏期(P<0.01),缩短惊厥持续时间(P<0.01),减少惊厥只数(P<0.01).结论 单用天麻素可拮抗利多卡因的致惊厥作用,小剂量天麻素与地西泮合用能协同拮抗利多卡因所致惊厥作用.
作者:张素玲;胡秋梅;周新巧;孙白云;樊虹;董娟娟;李丽娜;王丹 刊期: 2012年第02期
WWOX基因是一个跨越了常染色体脆性位点FRA16D的基因,近年来大量研究表明其参与信号转导、细胞周期和细胞凋亡等多个环节的调控,在乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌等多种恶性肿瘤的发生、发展中发挥重要作用,被认为是一个新的抑癌基因.本文对WWOX基因与妇科肿瘤的研究进展作一综述,以期为妇科肿瘤的基因治疗提供一种新思路.
作者:孙洁芸 刊期: 2012年第02期
表观遗传包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑和RNA干扰等多种途径,它们在基因转录调控过程中互相协调,对妇科肿瘤的发生发展、早期诊断及判断预后起到了重要作用.本文对表观遗传学在妇科肿瘤中的研究进展进行综述,为妇科肿瘤的分子靶向治疗提供一种新思路.
作者:张杰 刊期: 2012年第02期
目的 评估重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)联合顺铂(DDP)对宫颈癌HeLa细胞的增殖及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定不同浓度rAd-p53、DDP、rAd-p53联合DDP对HeLa细胞增殖的影响;采用Western blot法测定rAd-p53、DDP、以及两药联合应用对HeLa细胞中VEGF表达情况的影响.结果 rAd-p53、DDP、rAd-p53联合DDP作用于HeLa 细胞时,细胞增殖均被抑制,两药联合组细胞增殖抑制率明显高于两药单用组.rAd-p53、DDP单药作用及两药联合作用48h后HeLa细胞中VEGF表达均下调,且联合用药组较单药组抑制明显.结论 rAd-p53和DDP均能抑制HeLa细胞的生长,rAd-p53联合DDP比两药单用对HeLa细胞的生长抑制作用更显著;rAd-p53可能通过下调VEGF活性抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,抑制肿瘤血管生长,增强DDP的作用效果.
作者:王婷婷;韩春侠;郑小莉;李晓博;刘福民;付敏;周健 刊期: 2012年第02期
目的 研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的影响,并探讨其作用机制.方法 应用0、10、20、40、80 μmol/L Res处理SKOV-3细胞24、48、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞生长抑制率;Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达.结果 Res对SKOV-3细胞的生长抑制作用存在浓度和时间依赖性(P<0.05),Res作用SKOV-3细胞后,VEGF蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 Res能明显抑制SKOV-3细胞的增殖,其机制可能与下调VEGF表达有关.
作者:李攀;陆晓媛 刊期: 2012年第02期
目的 探讨水通道蛋白(aquporin,AQP)1、3在上皮性卵巢癌腹膜及网膜中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学方法对上皮性卵巢良、恶性肿瘤患者腹膜、网膜组织中AQP1、AQP3的表达进行检测,同时检测血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1ɑ(HIF-1ɑ)的表达,以CD105标记各组织微血管内皮细胞测定微血管密度(MVD).结果 腹膜中AQP1、AQP3、VEGF、HIF-lɑ的表达与肿瘤性质有关(P<0.05);有腹水者其表达高于无腹水者,腹水量≥1 000 ml者明显高于腹水量<1 000 ml者(P<0.05);与淋巴结转移、腹膜转移、病理分期有关.网膜中AQP1、AQP3、VEGF、HIF-1α的表达与肿瘤性质、有无腹水及淋巴结转移有关(P<0.05);腹膜、网膜组织中AQP1、AQP3的表达分别与VEGF、HIF-1α、MVD呈正相关.结论 腹膜、网膜中表达的AQP1、AQP3在卵巢癌发展、盆腔转移和腹水形成中发挥作用,其表达与VEGF、HIF-1α相关.
作者:毛春蓉;仲建新;黄华 刊期: 2012年第02期
目的 通过观察槲皮素对宫颈癌 HeLa 细胞中midkine(MK)、caspase-3 基因和蛋白表达水平,探讨槲皮素体外诱导 HeLa 细胞凋亡的机制.方法 宫颈癌细胞株 HeLa 细胞经培养、传代后分为实验组(分别加入浓度为10、20、40、80及160 μmol/L的槲皮素)和空白对照组.采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)方法检测细胞内的MK和caspase-3基因mRNA和蛋白表达水平.结果 随槲皮素浓度的增高HeLa细胞中MK mRNA和蛋白表达依次下降,其中80 μmol/L、160 μmol/L组下降较明显,而caspase-3的mRNA和蛋白表达随药物浓度增高表达增强(P<0.01).结论 槲皮素可能通过下调MK、上调caspase-3的表达水平而发挥抗宫颈癌作用.
作者:朱锦明;张荣荣;陆晓媛;宋红娟;薛华;彭凤云;拾莉 刊期: 2012年第02期