目的探讨生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌细胞株MHCC97-L中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达及VEGF合成与分泌的影响.方法利用酶联免疫吸附法、流式细胞仪、逆转录-聚合酶链反应检测不同剂量的奥曲肽对人肝癌细胞株MHCC97-L的VEGF合成与分泌及VEGF mRNA表达的影响.结果奥曲肽(10-5～10-10 mol/L)可以抑制人肝癌细胞株 MHCC97-L中VEGF mRNA表达及VEGF合成与分泌,呈剂量依赖性,可见饱和现象.结论奥曲肽能够抑制人肝癌细胞株MHCC97-L中VEGF的表达、合成和分泌,可能是奥曲肽抗血管新生的作用机制之一.
作者：傅斌生；许戈良；余继海；任学雷 刊期： 2004年第02期
目的克隆人脂联素(ADPN)基因cDNA,为进一步研究ADPN的功能提供实验基础.方法应用RT-PCR方法从中国人大网膜脂肪垫总RNA中扩增出ADPN cDNA全长基因,克隆入载体pMD18-T中,形成重组载体pMD18-T/人 ADPN.筛选出阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后对其进行测序.结果从脂肪组织总RNA中扩增得到745bp片段ADPN基因,其cDNA序列与GenBank人ADPN基因序列相同.结论成功地克隆ADPN基因全长cDNA.
作者：时照明；王长江；王佑民；章秋；周剑；胡红琳 刊期： 2004年第02期
目的探讨天泉通胶囊的抗炎和镇痛作用.方法应用小鼠耳肿胀、大鼠棉球肉芽肿模型观察天泉通胶囊的抗炎作用;采用小鼠热水缩尾法、小鼠热板法、小鼠扭体法观察天泉通胶囊的镇痛作用. 结果天泉通胶囊对小鼠耳肿胀、大鼠棉球肉芽肿模型均有抑制作用;抑制小鼠扭体反应、可延长小鼠热水缩尾时间和热板舔足反应潜伏期. 结论天泉通胶囊具有一定的抗炎、镇痛作用.
作者：尹艳艳；明亮；李前进；王绍斌；何婷 刊期： 2004年第02期
目的利用基因工程方法表达重组胸腺素α1 (Tα1),并进行纯化、鉴定. 方法使用大肠杆菌偏爱密码子,人工合成Ref蛋白(T7噬菌体蛋白)和Tα1的融合基因,并克隆在表达载体pBV220中,转化E.coliDH5α,温度诱导表达,表达的重组蛋白Ref- Tα1经CM-Sepharose FF阳离子柱进行纯化,Western-blot进行鉴定. 结果获得了纯化的重组蛋白Ref-Tα1,相对分子质量约为15 000. 结论用融合基因的方法表达小分子多肽是一种可行的方法,Ref- Tα1的成功表达为进一步研究其生物学活性奠定了基础.
作者：宫照龙；蒋作君；徐义辉；沈继龙；董炜；段招军 刊期： 2004年第02期
目的体外分离培养人骨髓间充质干细胞(MSCs)并研究其一般的生物学特性.方法通过密度梯度离心法分离MSCs、体外培养传代细胞计数、流式细胞仪检测细胞增殖周期、表面分子测定以及细胞化学染色了解人MSCs一般的特点.结果人MSCs经过体外培养均一地表达CD29、CD44、CD166,而CD34、CD45阴性.细胞化学结果显示,细胞糖原(PAS)强阳性,脂肪(SB)为阴性,5%～10%细胞碱性磷酸酶(ALP)阳性.细胞周期分析表明:G0/G1、S和G2/M所占比例分别为83.11%、5.17%和11.72%.分离细胞在成骨诱导体系下进一步向成骨细胞分化.结论密度梯度离心法能够分离纯化MSCs有其特殊的生物学特点,能够向成骨细胞分化.
作者：赵宇；陆应麟；乔群；杜芝燕；徐元基；戚可名 刊期： 2004年第02期
目的构建人内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)真核表达载体,转染人脐静脉内皮细胞系ECV304,并在ECV 304中获得表达. 方法将ESM-1 cDNA插入真核载体pIRES的多克隆位点中,转染人脐静脉内皮细胞.原位杂交,免疫组化检测ESM-1基因的表达.结果构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列分析证实,转染后发现ESM-1的表达在转录和蛋白水平都明显的增加. 结论成功构建了人 ESM-1真核表达载体和转染了人脐静脉内皮细胞系ECV304, 并获得高水平的表达,为进一步研究作好准备.
作者：陈厚早；卜丽佳；张素梅；吴强；周青；桂淑玉；汪渊 刊期： 2004年第02期
目的研究山茶花总黄酮(TFC)对血小板聚集和实验性血栓形成的影响.方法采用体外血小板聚集实验法观察TFC对血小板聚集的影响;采用大鼠动静脉血栓旁路法观察TFC对实验性血栓形成的影响.结果 TFC 1.0、0.5、0.25 g/L能明显对抗胶原诱导的血小板聚集;TFC 60、 30 mg/kg能明显减轻大鼠血栓的湿重.结论 TFC具有明显的抗血小板聚集、抑制血栓形成的作用.
作者：袁丽萍；范丽；董六一；郭岩；赵维中；陈志武 刊期： 2004年第02期
目的研究乳腺良性、恶性病变中抑癌基因PTEN及细胞周期调控因子cyclinD1的蛋白表达及临床病理特征的关系.方法应用免疫组织化学S-P法检测23例癌旁正常乳腺组织、28例乳腺增生组织(其中20普通型增生,8例非典型增生)、8例导管原位癌、98例浸润性乳腺癌组织PTEN和cyclinD1蛋白的表达,并进行微血管密度计数.结果非典型增生上皮和导管原位癌的PTEN蛋白水平高于正常乳腺腺上皮(P<0.01);浸润性癌组织中PTEN高表达率为49.0%,与正常乳腺组织比较差异有显著性(P<0.05),与增生的乳腺组织和导管原位癌组间差异无显著性.浸润性乳腺癌中PTEN的表达与分级、腋淋巴结转移、TNM分期、微血管密度计数均呈负相关,与cyclinD1蛋白表达呈负相关,PTEN表达低下时乳腺癌中cyclinD1蛋白的高表达率与腋淋巴结受累、组织学分级呈正相关,PTEN高表达时cyclinD1蛋白的高表达率与腋淋巴结受累、组织学分级无关.结论 PTEN与细胞周期调控因子cyclinD1表达的改变是乳腺癌发生的早期事件,共同参与乳腺癌的发生.PTEN的表达水平低下可作为乳腺癌分化和转移的一个潜在的生物学标志.CyclinD1对乳腺癌分化和腋淋巴结转移的影响可能部分受到PTEN的调控.
作者：周隽；吴强；吴正升；杨枫 刊期： 2004年第02期
目的进一步改造噬菌体展示载体,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库.方法以pCANTAB5X-IFN-α2b重组质粒为模板,在上游引物中引入Xba Ⅰ、Sac Ⅰ酶切位点,在下游引物中引入Sac Ⅰ、Stu Ⅰ、Sal Ⅰ酶切位点,将用该引物扩增的IFN-α2b衔接片段PCR产物克隆到pMD18-T中,再将该片段用Xba Ⅰ和Sal Ⅰ酶切并将之插入pCANTAB5L的Xba Ⅰ和Sal Ⅰ位点中,经Sac Ⅰ酶切,线性载体片段自连,构成新型噬菌体展示载体pCANTAB5S.结果限制酶切位点SacⅠ被引入到噬菌体展示载体,并校正了pCANTAB5L载体Stu Ⅰ、Sal Ⅰ等位点的读框.结论成功构建了含读框正确的SacⅠ等多个克隆位点的新型噬菌体展示载体pCANTAB5S,可用于各种外源随机多肽文库的有效展示.
作者：徐容；潘卫；沈毅珺；陈秋莉；潘欣；冯春芝；戚中田；刘彦君；邓松华 刊期： 2004年第02期
目的观察胎儿腮腺内瘦素和瘦素受体的表达、分布及发育规律.方法 HE染色法和免疫组化SABC法.结果胎儿腮腺纹状管、小叶间导管上皮细胞呈瘦素及瘦素受体免疫反应阳性,免疫反应产物分布于导管上皮细胞胞质内,细胞核呈阴性反应.在胚胎发育的不同阶段,免疫反应强度亦不等.结论胎儿腮腺内有瘦素和瘦素受体表达,可能参与调节胎儿腮腺和胃肠的发育及功能活动.
作者：伍雪芳；彭彦霄；柯红林；王惠珠；贾雪梅 刊期： 2004年第02期
目的研究NK-92细胞对人卵巢癌细胞的体外杀伤活性以及放射线照射后对其杀伤活性的影响. 方法以体外培养人卵巢癌细胞系HO-8910为靶细胞,以NK-92的敏感细胞株K562作为对照,应用4 h 51Cr释放法检测不同效靶比情况下体外培养NK-92细胞的杀伤活性,并应用医用电子直线加速器对NK-92细胞进行照射处理(0、400 cGy)后再检测其杀伤活性变化. 结果 NK-92细胞未照射组,效靶比较低时(1∶1、5∶1)对于HO-8910细胞杀伤率为39%～45%,随效靶比升高,杀伤率随之上升,10∶1时杀伤率显著上升为59%,20∶1时杀伤率仅上升了6%;对于K562细胞,杀伤率为58%～71%.照射后2 d,400 cGy组NK-92细胞对HO-8910细胞不同效靶比的杀伤率与0 cGy组相比有所降低,其总体杀伤率为42%～62%,对K562细胞杀伤范围在44%～61%之间. 结论 NK-92细胞对人卵巢癌细胞系HO-8910具有较高的杀伤活性,经放射线照射后仍保留一定的杀伤活性.
作者：陈纲；凌斌；祝怀平；赵卫东；张红雁；吴爱东；魏海明；田志刚 刊期： 2004年第02期
目的构建含有大鼠β-NGF基因的重组腺病毒载体并观察其在星形胶质细胞的表达,为下一步在动物体内进行中枢损伤的基因治疗提供基础.方法设计一对含有HindⅢ及Sal Ⅰ酶切位点的β-NGF基因上下游引物,PCR法扩增含有大鼠β-NGF cDNA的质粒pUC19-β-NGF,产物经HindⅢ及Sal Ⅰ双酶切,插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,获得重组质粒pAdTrack-β-NGF,经Pme Ⅰ酶线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同转入BJ5183中进行同源重组,重组子经卡那霉素抗性筛选及酶切分析,阳性克隆经293细胞包装,扩增,空斑法测定病毒滴度,转化体外培养的星形胶质细胞.通过RT-PCR、ELISA、Western blot法检测其在星形胶质细胞中的表达. 结果 PCR及酶切鉴定确认获得重组腺病毒载体pAd-β-NGF,重组腺病毒在293细胞中包装成功,病毒滴度达2×1011 PFU/ml.病毒上清液经ELISA 检测,β-NGF表达的量为(94.50±4.58) ng/L.结论该重组腺病毒载体的构建为下一步在动物体内的表达及中枢神经系统损伤的转基因治疗提供了一定的基础.
作者：刘宁；朱风仪；戴如飞；王东；赵春生；周明卫 刊期： 2004年第02期
目的研究黄芪多糖(APS)对细菌脂多糖(LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素-1(IL-1)及一氧化氮(NO)的影响.方法 10 mg/L LPS体外诱导大鼠腹腔巨噬细胞,小鼠成纤维细胞瘤株(L929)杀伤法检测TNFα的含量、小鼠胸腺细胞增殖法检测IL-1的活性、Griess法检测NO的水平.结果 APS能不同程度地抑制激活巨噬细胞对TNFα、NO与IL-1的分泌.结论 APS抑制巨噬细胞的分泌功能可能是其保肝作用的机制之一.
作者：路景涛；杨雁；陈敏珠 刊期： 2004年第02期
目的对大鼠下颌下腺内神经型一氧化氮合酶(ncNOS)及神经营养因子(NT-3)进行定性和定位研究.方法取10只SD大鼠下颌下腺,进行HE染色和免疫组织化学染色.结果大鼠下颌下腺颗粒曲管、纹状管及小叶间导管上皮细胞呈ncNOS及NT-3免疫反应阳性,而腺泡细胞则为阴性.结论大鼠下颌下腺导管上皮中有ncNOS及NT-3的表达,提示下颌下腺具有复杂的分泌功能.
作者：彭彦霄；柯红林；伍雪芳；王惠珠；贾雪梅 刊期： 2004年第02期
目的探讨银杏叶提取物(EGb)对豚鼠离体结肠运动的影响及其机制.方法制备豚鼠离体结肠肠段标本,通过灌流给药的方法观察不同浓度EGb、银杏黄酮等对离体结肠收缩活动的影响.结果 EGb (0.5～50.0 mg/L)可对结肠自主活动产生抑制和兴奋两种不同的影响,其中以抑制作用为主.EGb也可部分拮抗由ACh、5-HT引起的结肠运动的增强效应;并协同血管活性肠肽(VIP)、无钙Kreb液灌流引起的抑制作用;对γ-氨基丁酸、肾上腺素引起的结肠运动抑制效应无显著影响;用M受体阻断剂阿托品预处理可部分阻断EGb对结肠自主活动的影响.银杏黄酮(0.01～0.1 mg/L)可使豚鼠离体结肠运动抑制,且表现一定的剂量依赖性.结论 EGb对豚鼠结肠运动的影响可能是通过影响5-HT、ACh、VIP等肠神经系统递质的释放,经M受体介导以及对平滑肌的直接作用等多种途径实现的.银杏黄酮可能是EGb发挥抑制作用的有效部位.
作者：杜鹃；柯道平；王刚；胡金兰；唐影；孔德虎 刊期： 2004年第02期
目的构建人CEA信号肽-EK激酶-HBD2抗菌肽融合基因.方法 PCR方法将CEA信号肽、EK激酶识别位点序列、上下游酶切位点及保护性碱基克隆在一个片段上,酶切后,T4 DNA连接酶将此片段定向连接在含HBD2基因片段的pBluescript SK质粒上,构建成人CEA信号肽-EK激酶-HBD2抗菌肽融合基因pBluescript SK载体.结果融合基因经琼脂糖电泳、测序正确.结论成功构建了人CEA信号肽-EK激酶-HBD2抗菌肽融合基因pBluescript SK克隆载体.
作者：杜剑平；张青；陈正堂 刊期： 2004年第02期
目的利用重组的脊椎骨骨骺蛋白(Sedlin)的过表达来了解该蛋白质在细胞中的定位.方法用间接免疫荧光的方法观察Sedlin在细胞中的定位. 结果荧光显微镜观察表明Sedlin分布于细胞核和细胞质中,极可能是以膜泡的形式存在.-结论实验结果为进一步了解Sedlin的功能提供了细胞学基础.
作者：范礼斌 刊期： 2004年第02期
目的研究腺病毒(Ad)介导mIFN-β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性.方法用Ad为载体将mIFN-β基因导入B16细胞,观察mIFN-β基因转染的B16细胞的体外增殖能力及免疫原性的改变.结果当MOI为50～100,即可获得较高的转染效率,达90%±1%,转染细胞能表达分泌mIFN-β并具有生物学活性;AdmIFN-β感染对B16细胞的增殖能力无影响,但能显著提高细胞表面MHC-Ⅰ类抗原的表达.结论 Ad载体具有较高的转移效率,并能使其携带的mIFN-β基因有效表达;AdmIFN-β转染的B16细胞的免疫原性显著增强.提示利用Ad载体携带有效的目的基因来治疗肿瘤甚至开发瘤苗是可行的.
作者：吴云；徐容；曹广文；潘卫；陈秋莉；沈毅珺；蔡春晓；邓松华 刊期： 2004年第02期
目的克隆人抵抗素基因(hRETN)cDNA,为进一步研究RETN的结构和功能提供实验基础.方法应用RT-PCR方法从中国人网膜脂肪垫总RNA中扩增出RETN 基因cDNA,克隆入载体pMD18-T中,形成重组载体pMD18-T/hRETN.通过蓝白斑筛选出阳性克隆,限制性内切酶酶切鉴定后对其进行测序.结果从脂肪组织总RNA中扩增得到363 bp片段hRETN基因,其cDNA序列与Genbank hRETN基因序列基本相同.结论成功地克隆中国人hRETN cDNA.
作者：周剑；王佑民；王长江；章秋；胡红琳；时照明 刊期： 2004年第02期
目的探讨玻璃体视网膜手术(VR术)联合硅油填充治疗复杂性玻璃体视网膜病变的临床效果.方法对采用VR术联合硅油填充治疗102例(102只眼)复杂性玻璃体视网膜病变患者进行临床分析.结果术后近期视网膜复位97眼(95.1%);91眼随访3～23月,平均13.3月,终视网膜复位81眼(88.9%).术后终视力提高78眼(85.7%);0.05以上视力43眼(47.3%).术中主要并发症是医源性裂孔(8眼,7.8%);术后主要并发症分别是白内障(41眼,45.1%)、继发性青光眼(13眼,14.3%)和视网膜脱离(10眼,11%).结论 VR术联合硅油填充是治疗复杂性玻璃体视网膜病变的有效方法.
作者：柯根杰；郑志；孙思勤；温耀春；李春霞；朱美玲；袁华音；张国梅 刊期： 2004年第02期
目的使用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法诊断梅毒螺旋体感染的可行性.方法用目前国内常用的诊断梅毒螺旋体感染的TRUST试剂及ELISA试剂检测63例梅毒患者和22例自身免疫性疾病患者的血清样本,同时与梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)的检测结果进行比较,从而得到各试剂的假阴性率和假阳性率.结果对63份阳性和22份阴性样本的检测中,所用TRUST试剂的假阴性率和假阳性率分别为28.57%、18.18%;TP-ELISA试剂的假阴性率和假阳性率分别为0%和0%.结论使用灵敏特异的ELISA方法诊断梅毒螺旋体感染是可行的.
作者：刘贵育；王明丽 刊期： 2004年第02期
目的分析冠状动脉搭桥术(CABG)治疗冠心病的早期效果和经验. 方法 18例冠心病患者中16例为多支冠状动脉病变,17例心绞痛(CCS)Ⅲ～Ⅳ级.15例为常规体外循环下CABG ,1例为体外循环心脏不停跳下CABG,2例为非体外循环心脏不停跳下冠状动脉搭桥术(OPCAB).15例采用左乳内动脉(LIMA)与左前降支(LAD)搭桥,余均为大隐静脉桥.同期行二尖瓣置换(MVR)2例,主动脉瓣置换(AVR)1例.人均搭桥3.45支. 结果 18例CABG 临床效果满意,无手术死亡.1例术后出血,低血压时间较长,出现脑功能不全.1例术后呼吸功能不全,经气管造口、机械通气改善.患者心绞痛症状完全消失. 结论 CABG是治疗冠心病的一种安全和有效的方法,OPCAB 创伤轻、并发症少.
作者：周汝元；葛建军；葛圣林；林敏；石开虎；高晴云；郑小燕；张士兵 刊期： 2004年第02期
目的探讨微创小切口去脂重睑术的术式及优缺点.方法对53例17～38岁要求做重睑术者106侧单睑实施多个小切口去脂术,按黄金分割率定点设计,术中无创操作保留切口内睑较粗静脉血管网,缝合固定成形.结果 53例术后随访3～12月.患者均在1～2周内消肿,重睑外形自然、优美、稳定,无严重并发症.结论小切口去脂重睑术操作简便、组织损伤小、术后反应轻,重睑线自然优美、持久,效果满意,更适宜年轻无上睑皮肤松弛者.
作者：李虎；李小静；张林；朱飞 刊期： 2004年第02期
目的探讨金瓷联冠修复因牙周病松动伴深覆盖的上前牙临床应用价值.方法患牙截冠、核桩改向,将患牙和相邻1～2颗健康牙构成一个联合式修复体.结果松动伴深覆盖的上前牙得以稳固,改向、延长患牙使用时间,并有利于美观.结论利用金瓷联冠治疗因牙周病导致松动伴深覆盖的上前牙有明显的疗效和临床实用价值.
作者：袁萍 刊期： 2004年第02期
目的研究糖耐量减低者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)与胰岛素敏感性的关系.方法采用减少样本数的频繁采血静脉葡萄糖耐量试验,通过Bergman小模型法分别检测10例正常对照组(NGT)、8例单纯肥胖组(FAT)、10例糖耐量减低组(IGT)的胰岛素敏感指数(SI),并测定3组的血清TNF-α水平(放免法)及其它临床指标.结果 IGT组SI较NGT组降低(P<0.01),IGT组与FAT组比较SI无统计学意义.而IGT组血清TNF-α较FAT组、NGT组升高(分别为P<0.05, P<0.01).FAT组与NGT组比较血清TNF-α差异无统计学意义.血清TNF-α与SI呈负相关(r=-0.061, P=0.001).结论糖耐量正常的单纯肥胖者和IGT者中均存在胰岛素抵抗;血清TNF-α与SI负相关;TNF-α、腰臀比是影响SI的独立危险预测因子.
作者：张静漪；刘树琴；洪洁 刊期： 2004年第02期
目的评价肝叶切除术患者术前凝血试验的价值.方法复习79例行肝叶切除术患者的术前血小板计数,凝血酶原时间和活性部分凝血活酶时间,有任一项异常者归入病例组,正常者归入对照组,比较病例组和对照组之间的术中失血量、输血量和手术时间. 结果统计分析表明两组病例之间的术中失血量、输血量和手术时间无差异.结论术前凝血试验常不能预计术中失血量,术前常规凝血试验的预约应结合病史、临床体检和患者的具体情况来综合评估加以指导.
作者：许伦兵；耿小平 刊期： 2004年第02期
RNA的制备是基因表达在转录水平上的调节和cDNA的合成等研究过程中必不可少的方法之一.通常一个典型的哺乳动物细胞约含有10 pg RNA, 其中80%～85%为rRNA (主要是28 S、18 S和5 S 3种类型);10%～15%为tRNA 和核内小分子RNA;1%～5%为mRNA[1].mRNA 虽然大小和核苷酸序列各不相同,从数百至数千碱基不等,但大多数真核细胞mRNA在其3′端均有一寡聚腺苷酸(poly A)组成的尾,其长度一般足以吸附于寡聚脱氧胸苷酸-纤维素[oligo(dT)],使得mRNA可以有亲和层析法分离.这个群体编码了所有由该细胞合成的多肽.
作者：汪渊；储兵；陈厚早；张素梅；卜丽佳；朱华庆；周青；桂淑玉 刊期： 2004年第02期
