目的用室内多年选育的抗DDVP淡色库蚊抗性株在室内和现场进行试验,以比较WHO标准法和微板测定法在检测蚊虫对DDVP抗药性的差别.方法微板测定法、生物测定法.结果用两种方法在温度为23～32℃范围内分别对淡色库蚊进行DDVP抗药性检测,WHO法结果与温度无关,而NSE法结果与温度有关.为消除温度对检测的影响,在缩短孵育时间后,在27～31℃对野外淡色库蚊对DDVP抗性测定,NSE法测定与WHO法结果相同.结论 NSE法检测蚊虫的DDVP抗药性可随外界温度升高而增加,实际应用时应缩短孵育时间加以纠正.
作者：赵玉强；甄天民；谭文彬；徐秀来；刘仑华；刘玉冰 刊期： 2003年第01期
目的探讨金葡菌L型感染后小鼠肿瘤及癌前病变中是否有金葡菌L型及其抗原或DNA.方法应用革兰氏染色、免疫组化及原位核酸杂交方法.结果小鼠肿瘤及癌前病变组织切片中,革兰氏染色金葡菌L型检出率分别为70.0%(7/10)和53.5%(7/13);免疫组化染色(S-P法)抗原阳性率分别为70.0%(7/10)和61.5%(8/13),两者结果相似,无显著性差异.金葡菌L型主要分布于肿瘤间质、癌巢或癌前病变的上皮细胞浆内.用金葡菌L型DNA探针原位核酸杂交,结果显示50.0%(5/10)肿瘤细胞核内和30.1%(4/13)癌前病变细胞核内有DNA阳性信号.结论小鼠肿瘤及癌前病变中有较高的金葡菌L型感染率,且金葡菌L型DNA已进入小鼠肿瘤细胞核内和癌前病变的体细胞核内.提示金葡菌L型感染小鼠可能诱发肿瘤的发生.
作者：汪万英；何杰；姚敏；唐素兰 刊期： 2003年第01期
目的比较弓形虫不同免疫原所制备抗体检测CAg的效果,优选高效价的抗体诊断试剂.方法制备弓形虫的细胞质抗原(C)、代谢抗原(S).用抗原C、C+S、S及活虫各免疫2只家兔,收集抗血清经纯化而获得IgG抗体(多抗)并制备酶标记抗体;用上述4种多抗与多抗-HRP组合成16种双抗体夹心型ELISA,检测人血清CAg和C、S抗原,评价试剂的敏感性;抗血清与疟原虫、隐孢子虫等抗原进行交叉反应性试验,评价试剂的特异性.结果各种ELISA夹心法同步检测CAg阳性样本7例,阴性样本8例,均未出现假阴性和假阳性反应,其OD均值的P/N比值依次为C+C组33.5、S+S组27.8、CS+CS组21.2、P+P组13.2;C和S抗原的低检出量均为0.5 μg/ml;与其它寄生虫未出现交叉反应.结论 (1)4种抗体用于检测人血清CAg、C和S抗原以及其它抗原的结果表明,各种抗体试剂均具有良好的敏感性和特异性,其中以抗C抗体试剂为满意.(2)16种组合形式的夹心ELISA,检测弓形虫抗原的差异无统计学意义,表明弓形虫C和S抗原间存在着共同抗原成分.
作者：傅翠娥；林爱芬；楼涤；陈睿；张乐；陆绍红；卓敏敏；郑志国 刊期： 2003年第01期
目的了解耶尔森菌强毒力岛在中国肠产毒性大肠杆菌中的分布及插入位点.方法使用PCR 扩增、DNA打点杂交和DNA测序及分析方法.结果在94株分离自中国的肠产毒性大肠杆菌中,14株耶尔森菌强毒力岛核心区的8个基因PCR扩增阳性,除3株菌的整合酶基因外,PCR扩增产物长度均与预期一致,但天冬酰胺转运RNA(asnT tRNA)位点扩增阴性;上述14株菌进行全菌DNA打点杂交试验,均与irp2和fyuA探针杂交;选择上述3株菌中的1株,对其整合酶基因的PCR产物测序,并与鼠疫耶尔森菌强毒力岛的整合酶基因序列比较,发现该整合酶基因于5'端缺失了347bp的片段.结论 14%肠产毒性大肠杆菌携带的耶尔森菌强毒力岛,且均插入在天冬酰胺转运RNA位点处;部分菌株所携带的耶尔森菌强毒力岛的整合酶基因发生了缺失.
作者：张冬梅；俞守义；唐根富 刊期： 2003年第01期
目的研究成年感受态CB17小鼠对卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii,Pc)的敏感性,探讨其在Pc传播中的作用.方法使用免疫机能正常的健康成年CB17小鼠,使其中一部分小鼠与Pc(+)-SCID小鼠接触1周,另一部分持续接触至被处死时为止,分别在第3、5、6周检查肺内Pc包囊或PcDNA.观察病原体和Pc DNA出现和持续时间.结果接触传染源的动物,不论是接触1周,还是持续接触至被处死,肺内均查到Pc包囊或PcDNA.其中,3周时,PCR法查到PcDNA,第5周时,PCR法和病原学染色法均查到Pc,第6周时,虫体减少到可检出阈值以下.结论免疫感受态宿主可通过接触方式感染Pc,接触传染源1周即可被感染,感染状态可持续5周以上.期间,这种病原携带状态的小鼠在Pc传播中存在潜在的危险.此状态宿主在流行病学中的意义有待于进一步研究证明.
作者：王雪莲；安春丽 刊期： 2003年第01期
目的研究猪囊尾蚴发育过程中猪囊尾蚴细胞是否存在凋亡.方法仔猪感染猪带绦虫卵后,定期剖杀,剥离囊尾蚴,作组织切片,采用TUNEL法检测囊尾蚴头节和囊壁细胞的凋亡率(S-AI和W-AI).结果头节细胞和囊壁细胞均存在凋亡现象,尤以囊壁细胞凋亡明显.感染后19d时头节细胞和囊壁细胞凋亡率较高,分别为7%和15%左右.以后随感染时间的延长而降低,至80d时稍有回升,并分别稳定保持在4%和8%左右.结论猪囊尾蚴发育过程中猪囊尾蚴细胞存在凋亡,且囊壁细胞凋亡明显.
作者：刘永杰；李庆章；郝艳红 刊期： 2003年第01期
目的评价国内公司研制的5种弓形虫抗体检测试剂盒.方法以敏感性、特异性、符合率和Youden指数作分析指标,比较5种试剂盒对国外进口的2种弓形虫抗体试剂盒筛选出的弓形虫IgG或IgM阳性血清和正常人血清的检测结果.结果 A、B、C 3种IgM试剂盒的检测敏感性和特异性分别为0和92.1%、6.7%和100%、以及13.3%和85.7%,Youden指数分别为-0.08、0.07和-0.01,基本无诊断价值.A'、B' 2种IgG试剂盒的检测敏感性分别为96.4%和32.1%,特异性为98.4%和96.8%,Youden指数为0.95和0.29.A'试剂盒与进口IgG试剂盒的符合率达到97.8%,诊断价值较大,而B'试剂盒与进口试剂盒的符合率仅为76.9%,A'、B' 2种试剂盒之间的符合率也只有76.9%.结论国内研制的市售弓形虫试剂盒的检测效果与质量存在一定的问题,尤以IgM试剂盒为甚.
作者：蒋守富；张述义；潘彩娥；何艳燕；魏梅雄 刊期： 2003年第01期
目的为确定吡喹酮驱虫棒在包虫病现场控制家犬细粒棘球绦虫感染的效果.方法以吡喹酮1.6～2.5g/犬剂量,给家犬皮下埋植.植前测定犬粪抗原.植后测定实验组和对照组犬粪抗原并同时做槟榔碱导泻的方法进行预防效果评价.结果Ⅰ号药棒埋植后8个月,粪抗原阳性率从埋药前的19.5%下降至4.6%.槟榔碱导泻结果,实验组的成虫感染率比对照组低5倍以上,差异显著.Ⅱ号药棒埋植前犬群粪抗原阳性率为41.3%,埋植1年后实验组粪抗原阳性率为0.9%,对照组为36.4%.结论Ⅰ号药棒可以保护未感染犬不发生感染,但不能完全驱除已感染并寄生的成虫.Ⅱ号药棒实际上可以完全控制家犬细粒棘球绦虫的感染.这种药棒可以做为包虫病预防措施的主要手段,在流行地区推广使用.
作者：焦伟；柴君杰；付承；韩玲玲；徐世东；瞿群；伊斯拉音；奴尔别克；余如来；张可久；何春红；孙立峰；木汗 刊期： 2003年第01期
目的 PCR方法和培养法调查食品和水中空肠弯曲杆菌的比较研究.方法用空肠弯曲杆菌VS1基因的序列为模板设计一对引物,建立一种快速从食品和水中检测空肠弯曲杆菌的PCR方法;同时对南京地区的屠宰场、超市和牛奶场等地采取100份鸡肉、100份生牛奶及100份井水及自来水进行空肠弯曲杆菌PCR法和培养法双向检查.结果研究表明该PCR方法只对空肠弯曲杆菌能特异的扩增出358bp片段,而其它结肠弯曲杆菌、胎儿弯曲杆菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、沙门氏菌、大肠杆菌等均不能扩增出,检测灵敏度达8CFU/ml,特异性与常规生化检查是一致的,发现30 %(30/100)的鸡肉为阳性、30%(30/100)的生牛奶为阳性、14%(14/100)的水为阳性.结论调查结果表明在市场上销售的鸡肉、牛奶、牛奶制品及井水存在不同程度空肠弯曲杆菌污染,如果加工不当或饮食习惯不卫生,会对消费者的健康构成潜在威胁.
作者：阳成波；蒋原；黄克和；祝长青 刊期： 2003年第01期
目的运用逆转录-半套式-聚合酶链反应技术(RT-semi-nested-PCR),建立一种新的早期快速检测乙型脑炎病毒的方法.方法收集临床诊断的37例乙脑和15例非乙脑病人标本(包括血清、脑脊液)分别为63份和30份,同时用RT-semi-nested-PCR、IgM捕获法ELISA(Mac ELISA)进行检测.结果血清和脑脊液中可成功检测出JEV RNA,经1.5%凝胶电泳,出现特异性条带,符合预计值400bp.结论 RT-semi-nested-PCR对检测JEV感染,从实验设计到实验条件,都是合理的,有较高的敏感性和特异性.可用于乙脑的早期诊断.
作者：丁淑军；余光开；张建军；彭建一 刊期： 2003年第01期
目的为寻求简便、可靠的方法,用于诊断肺吸虫感染.方法采用肺吸虫成虫可溶性抗原,金标记兔抗人IgG显色,建立检测肺吸虫抗体的DIGFA.用该法检测痰检肺吸虫虫卵阳性血清82份,其他各类血清201份,并与ELISA平行对照.结果两法检测肺吸虫抗体的敏感性分别达98.8%(81/82)和97.6%(80/82);特异性92%(185/201)和93%(187/201);youden's 指数为0.908和0.906.两法差异无显著性(P＞0.05).结论实验提示DIGFA的各项检测指标与ELISA相近,而且无需特殊设备,且快速、简便,适合临床查病和血清流行病学调查.
作者：丁建祖；王越；陈军虎；干小仙；沈慧英；沈丽英；闻礼永 刊期： 2003年第01期
观察了旋毛虫肌幼虫在实验感染兔横纹肌内的分布,在舌肌中荷虫密度高,顺次是咬肌、膈肌、肱三头肌、肩胛肌、肱二头肌、腓肠肌、胸大肌、肋间肌、腰肌,心肌中未发现幼虫,提示检查兔的舌肌、咬肌或膈肌发现肌幼虫的阳性率高.
作者：李立宏；唐宏伟；赵旭辉；陈立峰；范凌 刊期： 2003年第01期
利用DNA重组技术将轮状病毒(Rotavirus RV)VP4蛋白主要抗原编码区基因与产肠毒素大肠杆菌(Enteotoxigenic Escherichia coli ETEC)热稳定肠毒素(Heat-stable enterotoxin Escherichia coli ST)基因融合,插入原核表达质粒pET-28a(+)中,经PCR 、酶切、测序分析表明已将vp4-st 片段克隆入PET-28a(+),而且具有正确的读码框和方向性,正确构建了VP4-ST的融合表达载体pET28a-VP4-ST.表达质粒转化受体菌BL21(DE3 )plysS,取经IPTG诱导后表达的目的蛋白进行SDS-PAGE、凝胶薄层扫描分析.结果表明:表达的目的蛋白以包涵体的形式存在,大小约40.2kDa,表达的蛋白量占菌体总蛋白的13.048%.
作者：王鹏雁；陈创夫；余兴龙；徐兴然；涂长春；张高轩 刊期： 2003年第01期
目的探讨我国幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的基因多态性及其与相关疾病之间的关系.方法应用PCR掺入法制备16S rRNA基因探针,建立16S rDNA指纹图技术和尿素酶C(ureC)基因的PCR-RFLP法,并结合统计学软件进行聚类分析,对临床分离的14株Hp进行基因分型.结果 14株Hp的16S rDNA指纹图谱显示10个HaeⅢ杂交带型和12个HindⅢ杂交带型;ureC基因的变异度较小,14株Hp中有12株PCR-RFLP图谱完全一致.通过杂交结果示意图和SPSS10.0软件进行聚类分析,HaeⅢ、HindⅢ及两种酶杂交结果的综合,均将14株Hp分为两型.两种方法结果综合进行聚类分析,14株Hp在基因水平上分为三型.结论差异显著的DNA指纹图谱说明了不同Hp菌株间基因组结构的高度变异性.16S rDNA指纹图谱较ureC基因的PCR-RFLP谱型更敏感地表达Hp各菌株的变异,可准确有效地对Hp作出基因分型.未发现Hp菌株间有特异的疾病图谱存在.
作者：李倩；代敏；段广才；郗园林；范清堂 刊期： 2003年第01期
目的探讨日本血吸虫疫苗候选分子-钙离子激活的中性蛋白激酶(Calpain)在抗日本血吸虫感染的保护性作用及其保护性免疫机制.方法从日本血吸虫成虫中提取RNA,用RT-PCR扩增Calpain含多个B,T细胞表位的片段,引物中包含BamHI和EcoRI的酶切位点,PCR扩增产物经纯化后TA克隆,转化的阳性TA克隆经PCR筛选后,液体培养大肠杆菌并回收质粒DNA,质粒DNA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,目的基因亚克隆到真核表达质粒pVAC载体,构建pVAC-Calpain真核表达体系,转化的阳性亚克隆经PCR筛选,液体培养大肠杆菌并回收pVAC-Calpain质粒DNA,质粒DNA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切和DNA序列分析鉴定被亚克隆的Calpain基因.结果 RT-PCR从日本血吸虫RNA中扩增了453bp的Calpain基因,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切和DNA序列分析鉴定Calpain基因被克隆到真核表达质粒pVAC载体.结论日本血吸虫疫苗候选分子Calpain的DNA疫苗体系的建立将有助于解析这个疫苗候选分子抗日本血吸虫感染的保护性免疫作用及保护性免疫机制.
作者：周爱琴；张仁利；石淑华；龙彩虹；高世同；林敏；吴少庭 刊期： 2003年第01期
目的对青海省称多县境内和四川省石渠县境内青海田鼠体内分离的32株鼠疫耶尔森氏菌的基因进行分析,明确两地鼠疫耶尔森氏菌间的亲缘关系.方法用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术.结果扩增产物在凝胶电泳上显示的条带,除7株菌略有不同外,其余25株均相同.TreeView[Win32]统计软件分析的结果也显示两地鼠疫耶尔森氏菌之间具有很近的亲缘关系.结论青海省称多县和四川省石渠县青海田鼠体内分离到的鼠疫耶尔森氏菌在遗传学上属同一来源.
作者：崔百忠；金丽霞；李敏；戴瑞霞；赵海红；祁芝珍；马英；席亚芳；冯建萍；金星 刊期： 2003年第01期
目的探讨长角血蜱、嗜群血蜱经期传播莱病螺旋体的可能性.方法通过皮下注射KM鼠建立实验感染动物模型,以此阳性感染鼠感染试蜱非感染种群,观察试蜱的感染能力以及以莱姆病螺旋体的保持能力.结果通过剌叮阳性KM鼠,长角血蜱、嗜群血蜱幼蜱饱血后分别获得61.3%、75.0%的阳性感染,但所感染的螺旋体在感染后2d即死亡消解,不能重新获得分离,PCR扩增阳性也只能持续到饱血后8d,幼蜱蜕化为若蜱后,所有检测结果均为阴性;这两种蜱的若蜱也都可通过吸血获得70.0%的检测阳性率,感染后长角血蜱、嗜群血蜱可分别在在饱血后5、10d内保持螺旋体的活性,PCR检测阳性率可延迟至饱血后15d.此后直至蜕化成为成蜱,所有血、蜱检测结果均呈阴性;长角血蜱、嗜群血蜱的不同种群在感染和保持螺旋体能力上表现一致.结论长角血蜱、嗜群血蜱的幼蜱和若蜱虽可以感染莱姆病螺旋体但不能经期传播到下一发育阶段,不具备经期传播能力,作为莱姆病主要媒介的可能性不大.
作者：孙毅；许荣满；张泮河；郭天宇；曹务春 刊期： 2003年第01期
目的将恶性疟原虫FCC1/HN株(CQS)Pfmdr1和Cg1全基因编码区克隆入测序载体,测定其序列,为以后研究其与疟原虫耐药性的关系奠定基础.方法利用PCR扩增技术,分3个片段从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中,特异扩增Pfmdr1全基因编码序列;分2个片段特异扩增Cg1全基因编码序列.扩增产物经纯化回收后,T-A克隆入测序载体pMD18-T,转化大肠杆菌(E.coli)JM109,筛选阳性克隆,并进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒,用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测定.结果 CQS FCC1/HN株Pfmdr1基因序列与CQS Fc27株同源性高,全长4248bp,编码1415个氨基酸;测得Cg1基因全长为2820bp,编码939个氨基酸,存在串联α重复序列.结论恶性疟原虫FCC1/HN(CQS)株Pfmdr1和Cg1全基因编码序列的测定,为以后研究耐药性虫株的上述基因以及它们与疟原虫耐药性的关系奠定基础.
作者：马长玲；余新炳；单志新；卞国武；吴忠道；徐劲 刊期： 2003年第01期
目的克隆Eg95抗原基因,构建携带目的基因的真核表达载体,为细粒棘球蚴DNA疫苗的研究提供材料.方法应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因,将其克隆至pUCm-T载体,测序确定其正确性.利用定向克隆技术将Eg95抗原基因片段克隆至真核表达质粒pcDNA3上,根据选择标记的氨苄抗性基因筛选到阳性克隆,通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序确定序列.结果测序表明所选pcDNA3-Eg95阳性克隆均为正确连接Eg95抗原基因的重组质粒,可以作为DNA疫苗作进一步的研究.结论成功构建真核细胞表达载体pcDNA3-Eg95.
作者：丁剑冰；林仁勇；温浩；王国荃；王笑峰；魏晓丽；傅玉才 刊期： 2003年第01期
目的表达恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)47kDa保护性抗原蛋白.方法采用PCR方法,从Ot Karp株基因组DNA中扩增出47kDa蛋白基因片段,鉴定后将该片段克隆于原核表达载体pBV220,构建成重组质粒pBV-47.用该重组质粒转化E.coli,转化子在42℃诱导表达并对其鉴定.结果 (1)获得长约1430bp的PCR片段,序列分析结果与已知47kDa基因序列相同;(2)SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量40×103处有表达带;(3)经薄层扫描分析,目的蛋白占全菌蛋白的19%;(4)免疫印迹实验证明其具有免疫反应性.结论获得了47kDa基因片段,并在大肠杆菌中实现了表达,表达产物具有免疫反应性.
作者：牛东升；陈香蕊；张雪颖；陈唯军；陈梅玲；崔红；魏文进；温博海 刊期： 2003年第01期
目的用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体(3-47-O)作为分子探针,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础.方法与结果经过三轮的亲和筛选,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm62和gm68,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS.竞争ELISA实验表明,1010转导单位噬菌体gm68对肠炎沙门氏菌与3-47-O结合的抑制率达到65%,而噬菌体gm62的抑制率仅为20%,且gm68可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体,而gm62则不能.结论实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位.
作者：张扬；焦新安；刘文博；潘志明；高崧；张如宽；刘秀梵 刊期： 2003年第01期
目的为探讨胞浆Ca2+是否为一氧化氮(Nitric Oxide,NO)诱导弓形虫速殖子凋亡的重要信号分子.方法采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的缺口末端标记法(TUNEL)、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡以及应用Fura-2荧光负载技术测定胞浆游离钙浓度[Ca2+]i.结果 NO供体亚硝基铁氰化钠(Na2Fe(CN)5NO,SNP)诱导弓形虫速殖子凋亡过程中胞浆[Ca2+]i明显升高.NO清除剂,N-乙酰半胱氨酸能明显抑制SNP诱导的速殖子凋亡及SNP诱导的速殖子胞浆[Ca2+]i升高,而不含NO的SNP类似物,铁氰化钾[K3Fe(CN)6]不能诱导速殖子凋亡及其胞浆[Ca2+]i升高.胞外钙螯合剂EGTA,和L型电压依赖性钙通道阻滞剂异搏定,完全或部分抑制SNP引起的速殖子胞浆[Ca2+]i升高,胞内钙螯合剂BAPTA/AM及胞外钙螯合剂EGTA明显抑制SNP诱导的速殖子凋亡.结论证明NO的供体SNP诱导弓形虫速殖子凋亡主要通过促进胞外钙内流,胞浆[Ca2+]i升高所致.
作者：林京；林建银；彭碧文；胡建石 刊期： 2003年第01期
目的测定日本血吸虫组织蛋白酶L1(SjCL1)基因的5'端序列.方法从日本血吸虫成虫中提取总RNA,以该RNA为模板,进行巢式RT-PCR,扩增SjCL1基因5'端序列.将其与pMD18-T载体连接得到含SjCL1基因5'端序列的重组质粒,并测定上述DNA插入片段的序列.结果通过巢式RT-PCR扩增出332bp SjCL1基因5'端序列,测序后,与报道的SjCL1基因部分序列拼接后,可得到一个编码317个氨基酸的完整开放阅读框.结论使用巢式RT-PCR技术,扩增得到SjCL1基因的5'端序列.为进一步对其进行功能研究奠定了基础.
作者：雷智刚；李卓雅；何蔼；孟锦绣；易冰；詹希美 刊期： 2003年第01期
目的探讨斯氏按蚊血细胞及血细胞PPO 对疟原虫卵囊黑化的影响.方法利用电镜观察蚊血细胞在卵囊黑化中的作用、RT-PCR检测蚊血细胞、蚊胃中PPO mRNA的表达、原位杂交检测血细胞中PPO mRNA的表达.结果通过RT-PCR和原位杂交,发现斯氏按蚊PPO mRNA在血细胞中有表达,颗粒细胞可能是其主要的表达细胞;硝喹可使约氏疟原虫卵囊发生退行性变,卵囊黑化比率明显增加.结论说明血细胞能够合成PPO,进一步证实了蚊血细胞,特别是硝喹对卵囊的发育有抑制和阻断作用时,颗粒细胞在疟原虫卵囊黑化中起重要作用.
作者：时超美；黄复生；段建华；况明书 刊期： 2003年第01期
目的筛选和分析日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)新基因,为血吸虫疫苗研究提供新的候选分子.方法以日本血吸虫雄性成虫抗原免疫兔血清为探针,筛选Sj成虫cDNA文库,对阳性克隆的插入片段进行PCR鉴定及测序分析.通过互联网对测序获得的核苷酸序列进行同源性分析,并预测新基因编码蛋白的结构与功能.结果筛选获11个阳性克隆,其插入Sj cDNA片段大小在0.7～2.3kb之间.对部分阳性克隆进行测序分析,获两个Sj新基因,即Sj-MA及Sj-Cp8(登录号分别为AF519808和AF524896),分别编码249和71个氨基酸的核内蛋白和胞浆蛋白.Sj-MA蛋白含有9个蛋白激酶C磷酸化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2 个酪氨酸激酶磷酸化位点和1个N-肉豆蔻酸化位点.Sj-Cp8蛋白含一个跨膜区、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个N-肉豆蔻酸化位点.结论筛选Sj成虫cDNA文库所获得两个新基因,其编码的蛋白可能为存在于胞浆和胞核内的日本血吸虫的重要信息传递分子,有望成为新的血吸虫病疫苗候选分子.
作者：陈欲晓；易新元；曾宪芳；袁仕善；Larry McReynolds 刊期： 2003年第01期
目的将汉滩病毒核蛋白(NP)主要抗原位点活性片段与囊膜糖蛋白G2进行融合原核表达及鉴定,为该融合蛋白的真核表达及汉滩病毒基因工程疫苗研究打基础.方法构建了汉滩病毒76-118株M基因G2片段与S基因5'端700bp片段的嵌合片段原核表达载体pGEX-4T1-G2S0.7,诱导表达相应的融合蛋白,用Western blotting和ELISA方法进行鉴定.结果酶切结果显示成功构建了原核表达载体pGEX-4T1-G2S0.7.IPTG诱导表达4h后,Western blotting显示诱导出分子量约100kD的含GST的融合蛋白(GST-G2N0.7).ELISA结果表明该融合蛋白与抗汉坦病毒NP特异性McAb有较高的结合活性(P/N值为0.71/0.07),与抗汉滩病毒糖蛋白特异性McAb也有较弱的结合活性(P/N值为0.21/0.08).结论 S、M基因拼接方式是成功的,能够表达出有活性的汉滩病毒G2糖蛋白与NP片段的融合蛋白.
作者：张芳琳；徐志凯；闫岩；薛小平；吴兴安；罗雯；刘勇；白文涛；赵茜；王海涛 刊期： 2003年第01期
目的用pcDNA3-MOMP真核表达质粒直接免疫小鼠,观察小鼠对沙眼衣原体MOMP基因疫苗的免疫应答.方法大量制备重组质粒pcDNA3-MOMP,给小鼠肌肉注射,每3周免疫1次,共免疫3次.用微量免疫荧光及MTT法检测小鼠血清抗体及脾细胞对沙眼衣原体的特异性增殖反应.结果初次免疫接种后小鼠血清中检测出特异性抗体,加强免疫后抗体水平明显上升,免疫荧光滴度高达1∶256.脾细胞对沙眼衣原体的刺激指数明显高于对照组(P＜0.01).结论 pcDNA3-MOMP在小鼠体内既可诱导体液免疫应答,又可诱导特异性细胞免疫应答.
作者：彭辉；宁波；袁广卿；徐霖 刊期： 2003年第01期
目的研究随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,用于蜚蠊分子分类.方法提取3种蜚蠊的基因组DNA,鉴定及定量分析.确定RAPD反应总体积、反应条件.选取3条不同的随机排列碱基顺序的多聚核苷酸单链为引物,进行RAPD-PCR扩增反应.将扩增产物制备成DNA图谱,通过对DNA图谱和遗传距离的分析,研究这三种蜚蠊基因组DNA的多态性.结果分别扩增出不同数量和分子大小的DNA片段.3种蜚蠊基因组DNA扩增产物中具有相同的DNA条带,这反映了各蜚蠊基因组DNA具有同源性 ;3种蜚蠊基因组DNA扩增产物又具有各自独特的DNA条带,DNA条带亮度也有差别.结论 RAPD技术可以精确地区别这三种蜚蠊.
作者：姚湧；汪学龙；夏立照 刊期： 2003年第01期
目的为了探讨鼠伤寒沙门氏菌对人类的致病机理以及机体对鼠伤寒沙门氏菌的防御机制.方法采用体外培养的人单核吞噬细胞,测定鼠伤寒沙门氏菌在PMA分化的THP-1细胞中的存活率以及诱导该细胞产生TNF-α和IL-12的量.结果鼠伤寒沙门氏菌在人类单核吞噬细胞中的存活数量远远低于伤寒沙门氏菌的存活数量.鼠伤寒沙门氏菌和伤寒沙门氏菌同样可以诱导人类单核吞噬细胞产生TNF-α和 IL-12,然而,随着时间延长,鼠伤寒沙门氏菌诱导产生TNF-α和IL-12的量明显低于伤寒沙门氏菌的诱导产生量.结论鼠伤寒沙门氏菌的致病性可能部分与它诱导人类单核吞噬细胞释放前炎症细胞因子有关.
作者：李铁民；徐浩 刊期： 2003年第01期
目的观察白果内酯对卡氏肺孢子虫超微结构的影响.方法地塞米松连续皮下注射Wistar大鼠6周,建立大鼠卡氏肺孢子虫肺炎动物模型,腹腔内注射白果内酯30mg/(kg*d)×8d.停药1周后取大鼠肺组织作超薄切片,透射电镜观察.结果白果内酯作用后的卡氏肺孢子虫虫体有大量空泡形成,细胞器肿胀破坏,髓样结构形成,胞膜破坏,胞质内出现电子密度较高颗粒.结论白果内酯可破坏卡氏肺孢子虫的超微结构,从而引起虫体死亡.
作者：倪小毅；唐小葵；陈雅棠；王健；廖晓刚 刊期： 2003年第01期
近年来,分子生物学技术应用到流行病学之中,形成了一门新的分支学科--分子流行病学.分子流行病学中重要的一点是利用合适的分型方法对分离到的病原进行分析.所以分型方法便显得十分重要.
作者：逄波；徐建国 刊期： 2003年第01期
克罗伊茨费尔特-雅各布病,即克雅病(Creutzfeldt-Jakob,CJD),又称痉挛性假性硬化、皮质-纹状体-脊髓变性,可能系由朊蛋白(Prion)引起的以海绵样变性为病理特征的亚急性或慢性海绵样脑病.由于其发病机理尚未清楚、预后凶险和医源性传播,而备受人们的关注;特别是疯牛病的发现与蔓延,可能为人兽共患的CJD,而成为新的研究热点.CJD的诊断主要依据脑组织活检及尸检的病理证据,但国内外许多学者报告脑电图周期波对CJD的诊断具有可靠价值,是除病理学以外诊断CJD的重要指标,现作一综述.
作者：张雄伟；王丽英；牛俊英 刊期： 2003年第01期
内源性反转录病毒(Endogenous Retrovirus,ERV)是指存在于动物体内或体外培养细胞基因组内的反转录病毒.已经分离或观察到这类病毒的哺乳动物有人、猴、狨、长臂猿、猩猩、狒狒、猫、犬、牛、鹿、猪、马、绵羊、兔、大鼠、小鼠、地鼠等,鸟类有鸡、鸭、鹅、火鸡、雉鸡、鹌鹑等.在鱼类和爬行类动物也有报道.可以认为,这类病毒的存在具有普遍性和广泛性[1,2].
作者：章金刚 刊期： 2003年第01期
1 前言自从叠氮胸苷作为有效的抗艾滋病病毒(HIV-1)问世以来[1],抗病毒治疗已经广泛地应用于发达国家艾滋病病毒感染者的临床管理中.临床实践表明:抗反转录(RT)酶和抗蛋白酶抑制剂(PI)的联合使用,有效地降低了感染者血浆中HIV的水平、推迟HIV感染的临床进程,大大地降低了与HIV/AIDS相关的发病率和死亡率[2].但是由于对抗病毒药物耐受而导致治疗失败已经引起药品开发、临床管理和公共卫生等部门的关注.不少文献报道:近年来,HIV耐药性的传播呈上升趋势,多重耐药明显增加[3～5].现将HIV耐药性研究进展及其临床应用前景综述如下.
作者：颜苹苹；严延生 刊期： 2003年第01期
炭疽杆菌及其芽孢感染人兽,引起高热、皮肤溃疡及焦痂,亦可因不同侵入途径而引起肺炎、肠炎或全身性败血症,是一类重要的烈性人畜共患病病原.本菌存在于感染动物及人的各个组织及排泄物中,其芽孢存在于受污染的土壤、水草、皮毛及其制品中.本菌及其芽孢常从破损皮肤及伤口处或从呼吸道、消化道侵入草食兽及人,迅速繁殖而产生各种毒力因子,使局部组织出血、坏死及周围组织水肿甚至导致全身性症状,使动物及人休克及死亡.本菌致病作用主要依赖于其分泌的外毒素,即使在感染的某一时期使用抗生素消灭了体内所有的炭疽杆菌,亦很难保证患畜及人免于死亡,而且抗药性的存在令其危害更大.由于这一特点,炭疽杆菌及其芽孢成为一种生物武器的材料,并被应用于恐怖活动,也正是由于这一公共卫生意义,对炭疽杆菌毒力因子及其作用机制的研究较为深入,在美国炭疽热事件之后进展更快,即将推出抑制毒素作用的新药.本文对炭疽杆菌的毒力因子研究进展作一综述.
作者：冀德君；高崧；吴艳涛；彭大新；杨玲；焦新安 刊期： 2003年第01期
我所已对云南省16个地、州市的92个县市进行了钩端螺旋体病血清地理流行病学调查,对我省钩体病水平分布差异不明显,立体分布差别很大的地理分布规律进行了阐述[1].作为对以往研究的补充,2002年笔者对云南省屏边、凤庆、绿春县部分健康人群血清做了钩体显凝试验,报告如下:
作者：董毅；杨慧；冯锡光 刊期： 2003年第01期
肺炎支原体是人类原发性非典型肺炎的病原体.近年来,肺炎支原体(Mp)已成为小儿肺炎常见的病原[1],由其引起的呼吸道感染日趋增多[2].为协助临床快速诊断Mp感染,我们应用微量颗粒凝集法和冷凝集试验对285例患者血清进行检测,现报告如下
作者：石峰；黄心宏；潘玉红；吴志辉 刊期： 2003年第01期
1976年,Nime和Meisel等人首次报道了人类的隐孢子虫病(CSS),目前普遍认为隐孢子虫感染是一种世界性的人兽共患病,20世纪80年代后期以来,相继创建了许多隐孢子虫卵囊(CCO)的检测技术,病原学诊断多以粪便中检出卵囊为根据,检出率4%～13%[1].国内自1987年发现人体病例以来,已有多篇隐孢子虫致腹泻的报道.但未见颅内感染报道,现将我院2001年3月收治的1例报告如下:
作者：李超；李向阳；方周溪 刊期： 2003年第01期
TORCH是一类具有致畸作用的病原微生物的缩写,T指弓形虫(Toxoplasma),O指其它微生物(Other,如柯萨奇病毒,梅毒螺旋体等),R指风疹病毒(Rubella virus),C指巨细胞病毒(Cytomegalovirus),H指疱疹病毒(Herpes virus).由这一组病原体所引起的感染,称为TORCH感染.妊娠期间发生TORCH感染,病原体可能通过胎盘传染给胎儿,导致流产、死胎或胎儿先天缺陷;病原体亦可能通过产道或母乳导致新生儿感染,以上感染如累及神经系统可造成不同程度的智力障碍及各种瘫痪、失明、失聪等严重后遗症,从而影响人口素质.在引起妊娠妇女TORCH感染的几大因素中,宠物豢养不可忽视.为此,本实验室采用ELISA法对豢养猫、狗或与猫、狗有密切接触史的实验组孕妇及无上述经历的对照组孕妇进行抗TORCH-IgM抗体检测,以期阐明孕妇宠物豢养与TORCH感染间的关系.
作者：罗兰；郭知；冯玉昆；张兰 刊期： 2003年第01期
目的为探讨囊虫病的危害性及对社会经济的影响.方法随机调查了150例囊虫病住院患者,对其造成的机体损害作了评价并对患者的直接和间接经济损失进行了量化研究,并评价全省因囊虫病猪所造成的经济损失.结果住院患者中,脑囊虫病占97.33%,造成严重损害,如癫痫发作、高颅压等,给病人及家属精神和心理上造成伤害.患者年人均经济损失为6 805元,高者达37 597元.人均直接损失5 770元(84.8%);间接损失1 035元(15.2%).直接经济损失占家庭年均纯收入的82.2%,多为32 912元,占家庭年纯收入的比例高者达601%.误诊、误治率为34%,高费用20 000元.全省囊虫病患者年经济损失为23 817.5万元,其中直接经济损失为20 195万元,间接经济损失3622.5万元.全省猪囊虫病平均感染率为0.74%,平均每年检出囊虫病猪174 420头,年直接经济损失为11 564万元.全省因囊虫病而造成的总的经济损失为35 381.5万元.结论囊虫病不但对人体造成严重的危害,而且引起巨大的经济损失.
作者：公茂庆；陈延平；甄天民 刊期： 2003年第01期
狂犬病是一种自然疫源性疾病,病原体为狂犬病病毒,可引起人和多种动物致死性的中枢神经系统感染,病死率几乎为100%,对人类健康危害较大.我省从1956年开始有本病疫情记载,20世纪80年代出现了较大范围的流行,因此,分析全省本病疫情及流行特征,是防制措施的基础.
作者：张海林；何建华 刊期： 2003年第01期
目的探讨血吸虫病易感地带围栏放牧对降低血吸虫感染性的效果.方法建立围栏放牧试点并设对照区纵向观察血吸虫病疫情变化.结果实验区(A)2000年与1998年比较,居民血吸虫病感染率下降65.83%;而对照区(B),居民血吸虫病感染率仅下降20.00%(u=11.04,P＜0.01).A区牛血吸虫病感染率下降了67.21%,B区仅下降0.8%(u=12.37,P＜0.01).3年中A区阳性螺密度分别下降了71.19%,77.14%,100%.且草场仅第一年发现野粪阳性率为11.36%,而B区则年均野粪阳性率均在10%以上.结论实施围栏放牧不仅可大大的降低牛血吸虫病感染,消除传染源,降低湖洲易感地带的感染性,同时也使当地的居民血吸虫病感染率有所降低.
作者：陈焱；曹伏秋；蔡凯平；何永康；彭国忠 刊期： 2003年第01期
弓形虫病是由弓形虫引起的人兽共患病,新疆自1989年[1]发现弓形虫病以来,已陆续开展了一些研究,我们于1996年起对新疆各地的不同人群进行弓形虫抗体水平检测,现将结果报告如下.
作者：黄星；庞秀惠；颉海霞；王小燕；李睿；赵华竹；高如昌；李定一；王勇 刊期： 2003年第01期
1 回顾20世纪里,我国在寄生虫学与寄生虫病领域,无论学术理论、实验技术以及防治实践等方面均取得了重大成就和进展.尤其是近20多年,所发生的变化更为显著,现择要述之:
作者：沈一平 刊期： 2003年第01期
作者：欧剑鸣 刊期： 2003年第01期
华东地区肺吸虫病防治研究协作组(简称华东协作组)第5次协作会议暨第4次学术研讨会于2002年8月18～20日在江苏省扬州市召开.参加会议的有上海、江苏、浙江、福建、江西等省、市的高等医药院校、科研院所及有关医院、防疫部门的专家、学者及专业工作者共30人.台湾阳明大学医学院、哈尔滨医大、汕头大学医学院、南通医学院等也提交了交流论文.代表中既有德高望重的我国寄生虫学界的老前辈,也有当前享有盛名的中青年学者与近年来成长起来的后起之秀.
作者：邵向云；刘明达 刊期： 2003年第01期
