目的探讨L2期和L3/4人蛔虫幼虫分离制备的方法.方法运用肠液消化法、25%NaClO(次氯酸钠)处理法分离感染期(第二期:L2)人蛔虫幼虫,对其结果进行了动态观察;并运用网筛悬挂法分离第三/四期(L3/4)人蛔虫幼虫,对分离结果进行了观察.结果 4h为肠液消化法分离L2期人蛔虫幼虫的佳分离时间,分离率为90.97±0.08%.3h是NaClO处理法的佳分离时间,分离率为49.22±0.12%,肠液消化法的分离效率明显高于后者(P＜0.01).5h是网筛悬挂法分离L3/4期蛔虫幼虫的合适时间.结论肠液消化法是分离L2期人蛔虫幼虫的一种较为理想的方法;网筛悬挂法是分离L3/4期人蛔虫幼虫的一种有效方法.
作者：刘志刚；罗佛全；严涛；刘玉琳 刊期： 2004年第01期
目的研究解脲支原体(Ureaplasma urealyticum, Uu)感染对雄性大鼠生殖系统的影响,探究Uu感染引起雄性不育的途径与机制.方法采用模拟性交的自然方式使雄性SD大鼠感染Uu,反复感染.8周末处理大鼠,解剖泌尿生殖系统,观察有无异常;取附睾精液,涂片,瑞氏染色,显微镜下观察;取睾丸、前列腺、输精管等组织进行石腊切片,H*E染色,光镜观察; 取血,检测血清中细胞因子(IL-6,TNF-α, IFN-α,IL-8)水平.结果 Uu感染后大鼠的精子头尾卷曲,尾部断裂明显、肿胀;血清中细胞因子IL-6、IL-8水平明显升高,TNF-α、IFN-α无明显变化;而睾丸、输精管、前列腺等组织的结构没有明显改变.结论 Uu感染使精子头尾卷曲,尾部断裂、肿胀;影响细胞因子的分泌,使血清中细胞因子IL-6、IL-8含量有明显升高,但不能使TNF-α、IFN-α明显变化;Uu感染对睾丸、输精管、前列腺的形态组织结构未有明显的影响.
作者：韩晓冬；王勇；姚根宏；沈苏南；侯亚义；陈建秀 刊期： 2004年第01期
目的用双抗原夹心法ELISA (DS-ELISA)和逆转录巢式PCR法(RT-nPCR)研究与人类生活关系密切的猪、犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等7种动物对戊型肝炎病毒(HEV)的易感性.方法用多基因型HEV重组蛋白建立检测HEV抗体的DS-ELISA,并用于591份猪、警犬、家犬、宠物犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等多种动物血清标本的HEV抗体检测;用HEV多基因型通用性引物RT-nPCR扩增143份犬血清标本HEV RNA.结果在猪、家犬和宠物犬血清标本中检测到HEV抗体,阳性率分别为43.93%、15.19%和4.65%,但在警犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔血清标本中未检测到HEV抗体;143份犬血清标本用RT-nPCR未扩增出HEV RNA.结论用多基因型HEV重组蛋白建立的双抗原夹心法ELISA适用于多种动物血清标本HEV抗体的检测;猪和犬对HEV易感,在HEV传播中可能起重要作用.
作者：丁福；孟继鸿；张兰芳；程险峰；张汇东；贺星亮；杨志国；许家璋 刊期： 2004年第01期
目的探讨广西1997～2001年霍乱流行菌株的分子生物学特征以及他们之间的内在联系及其流行特点.方法采用打点杂交方法检测霍乱弧菌毒力相关基因ctxAB、zot,运用16s rRNA探针进行核糖体基因分型.结果 O139群霍乱弧菌ctxAB、zot基因携带率为100%,埃尔托霍乱弧菌ctxAB基因携带率为97.67%,zot基因携带率为95.35%;用16s rRNA探针分型可分为6个核糖体基因型(RT1～RT6),以RT1和RT4为主要型别.结论普遍携带ctxAB、zot基因,具有较强的致病性.1997～2000年与2001年分离的菌株在核糖体杂交图谱上有明显的差异,同一核糖体型可以来源于不同的血清型和噬菌体-生物型的菌株.分析认为2001年的稻叶型菌株不是2000年稻叶型菌株的延续,而是一个新的克隆群.
作者：李翠云；王鸣柳；董柏青；唐振柱；谭冬梅；权怡；秦卫文；林玫；曾竣 刊期： 2004年第01期
目的克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础.方法根据乙型脑炎病毒株SA14-14-2E基因的序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增其E基因全长cDNA,将扩增产物克隆到pBlusecriptIISK(+)载体中,然后亚克隆到原核表达载体PGEX-KG中,筛选重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白.结果与结论获得了含全长乙型脑炎病毒E基因的重组质粒,经酶切和测序证实构建正确.表达的目的蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析证实确为乙型脑炎病毒E蛋白且有生物学活性.
作者：徐高原；陈焕春；徐晓娟；李自力；孙圣福；何启盖；吴斌 刊期： 2004年第01期
目的从日本血吸虫中国大陆株成虫cDNA文库中克隆28kDa 谷胱甘肽-S-转移酶(Sj28GST)基因,获得用于疫苗和T细胞表位研究的高纯度重组融合蛋白28GST-TRX.方法应用引物特异性PCR技术,从日本血吸虫中国大陆株成虫cDNA文库中扩增Sj28GST基因,经琼脂糖凝胶电泳结合碱基序列分析鉴定后,采用定向克隆技术构建Sj28GST-TRX融合蛋白重组表达载体并诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)的表达,用Western-blotting测定以融合蛋白方式表达的Sj28GST的免疫原性,通过包涵体纯化结合Ni+柱亲和层析获得高纯度重组融合蛋白.结果 Sj28GST PCR产物为约640bp,其碱基序列(633bp)和推导的氨基酸序列(211aa)与GenBank报道一致;获得了Sj28GST-TRX重组质粒;28GST-TRX融合蛋白在大肠杆菌以包涵体形式高效表达;在分子量为约43kDa处有一能与羊抗Sj28GST抗体产生特异性反应的含28GST融合蛋白条带;包涵体纯化法结合Ni+亲和层析可获得高纯度的重组融合蛋白.结论获得到了日本血吸虫中国大陆株28GST分子的全长基因和高纯度重组28GST-TRX融合蛋白,该融合蛋白具有天然Sj28GST免疫原性.
作者：李光富；张兆松；王新军；李春玲；王勇；季旻；刘丰；蔡晓萍；朱翔 刊期： 2004年第01期
目的研究结核分枝杆菌L型的垂直感染及其对子代小鼠的影响.方法将C57BL/6N小鼠(雌∶雄3∶2)随机分成4组,分别用自肺癌患者血中分离的结核分枝杆菌L型(B组),牛型分枝杆菌(A组)及其L型(C组)经尾静脉进行感染,并用生理盐水注射组作为对照,观察感染鼠子代新生鼠和子代成年鼠的病理学改变,同时采用培养法、IK抗酸染色和免疫组织化学技术检查组织内的抗酸杆菌及其L型.结果感染鼠的肺、肝、肾、脑、心等主要脏器组织均发生间质性炎症,并有多只小鼠伴有肝脏和卵巢的瘤样增生.新生子鼠中,A和B组有间质性炎症表现,B组有一例肝瘤样增生,C组有一例畸胎,组织内有多种形态的分枝杆菌L型;成年子鼠中A组有两只良性畸胎瘤.结论血源性结核分枝杆菌L型和牛型分枝杆菌L型仍有一定的致病性并可能诱导肿瘤发生.通过垂直感染,结核分枝杆菌L型可导致子代小鼠的病变.
作者：朱明利；王朝夫；张世馥；张元和；夏佩莹；姚敏；娄国强 刊期： 2004年第01期
目的预测问号钩体黄疸出血型赖株脂多糖(LPS)合成、装配途径,并对其中几个关键基因的特征进行深入分析.方法使用NCBI/BlastX,ProDom/Blast,Jpred2,TMHMM对问号钩体黄疸出血型赖株全基因组ORF基因所编码蛋白进行在线分析,并使用Bioedit,Pep Tool软件进行蛋白质一、二级结构分析.结果确定了脂质A和核心多糖生物合成基因lpxA、lpxB、lpxC、lpxD、lpxK、kdsA、kdsB、kdtA、lnt、htrB和O-抗原生物合成基因簇rfb locus 等以及装配、跨膜转运中的基因rfbP、rfbX、rfc、rfaL、rfe绘制了LPS合成及装配途径示意图.并对合成和装配途径中几个关键的基因编码蛋白(LpxA、 Rfc、 RfbX、 RfaL)的二级结构、跨膜区域、结构域等进行了分析.结论问号钩体黄疸出血型赖株LPS合成、装配途径与典型的革兰阴性菌,如大肠埃希菌K-12相似,主要差异在于钩体特殊的脂肪酸代谢途径和O-抗原多糖结构.该研究为进一步探讨钩体LPS基因功能及其与致病性关系奠定基础.
作者：耿燕；郭晓奎；张怡轩；缪有刚；何建勇；赵国屏 刊期： 2004年第01期
目的观察重组质粒 VR1012-Pf12 DNA直接免疫接种诱导BALB/c小鼠所产生的免疫应答,分析Pf12基因的抗原性和作为疫苗抗原候选分子的可能性.方法构建重组质粒VR1012-Pf12,直接免疫BALB/c小鼠,通过NK细胞杀伤活性、脾T淋巴细胞增殖水平、ELISA、体外抑虫试验测定,观察其诱导的细胞和体液应答以及体外抑虫效果.结果重组质粒VR1012-Pf12免疫BALB/c小鼠,NK细胞杀伤活性、脾T淋巴细胞增殖水平明显高于对照组(P＜0.01),诱导小鼠产生的抗体水平明显增高(P＜0.01),免疫血清在体外能抑制恶性疟原虫的生长、发育.结论重组质粒 VR1012-Pf12 DNA直接免疫接种诱导BALB/c小鼠产生一定水平的体液和细胞免疫应答,其免疫血清在体外对恶性疟原虫的生长、发育有明显的抑制作用.
作者：马长玲；余新炳；单志新；吴忠道；徐劲；卞国武；胡旭初 刊期： 2004年第01期
目的克隆查菲埃立克体120kDa膜表面抗原蛋白基因,获得纯化的重组蛋白.方法根据查菲埃立克体(91HE17)120kDa抗原蛋白基因序列设计特异性引物,PCR扩增查菲埃立克体120kDa抗原蛋白的基因片段;用限制性内切酶酶切PCR扩增产物后与pUC18载体相连接,经酶切和序列分析证实后,将目标片段定向插入原核表达载体pProEX HTB中构建pProEX HTB/p120重组质粒;将重组质粒转化E.coli DH5α,并使转化子在IPTG的诱导下进行蛋白质表达;运用亲和层析和电洗脱法对重组蛋白进行纯化.结果克隆到一大小为1080bp的查菲埃立克体120kDa抗原蛋白的基因片段,用该基因与表达质粒连接,成功构建了重组表达质粒;SDS-PAGE分析显示:在IPTG诱导下,重组表达质粒转化的大肠杆菌产生一分子量为47kDa的目标蛋白,免疫印迹证明该重组蛋白能与查菲埃立克体免疫血清发生反应.用纯化的重组蛋白作免疫斑点分析,76份被检血清中有2份为可疑阳性,但经IFA复核为阴性.结论查菲埃立克体120kDa重组抗原蛋白具有免疫反应活性,为以重组蛋白为基础的人单核细胞埃立克体病的血清学诊断试剂盒制备和疫苗的研制奠定了基础.
作者：严延生；陈亮；Xuejie Yu；陈前进 刊期： 2004年第01期
目的了解我国不同疟疾流行区间日疟原虫裂殖子表面蛋白-1基因多态性及其分布.方法用套式PCR扩增间日疟原虫现场分离株MSP-1第五多态区(ICB5-ICB6)基因片段,部分样本进行序列测定、分析和比对.结果 82份间日疟原虫现场分离株扩增出470 bp片段50份,400 bp 片段39份,其中7份为两种片段的混合型. 海南分离株混合型为20%(6/30),平均克隆数为1.20(36/30),安徽分离株混合型仅为2.3%,平均克隆数1.02.对33份样本进行序列测定,Sal-1型17份,Belem 型2份,12份重组型(Ⅲ型)和朝鲜型2份为我国新发现基因型.结论我国间日疟原虫PvMSP-1存在4种不同的等位基因型,以Sal-1型和重组型(Ⅲ型)占优势,南部疟区基因型比北部复杂.
作者：张山鹰；陆惠民；许龙善；高琪；沈毓祖；黄伟达 刊期： 2004年第01期
目的获取旋毛虫具有抗原性的新基因.方法应用旋毛虫免疫血清和人工感染血清对旋毛虫成虫cDNA文库约3×105重组噬菌斑进行筛选.基因克隆、DNA测序及5′-RACE获cDNA全长;采用ESEE、DNAstar软件及核苷酸序列数据库(GenBank)进行cDNA序列分析.结果与结论免疫筛选成虫cDNA文库,获得3个阳性克隆.其中的Ts88 克隆cDNA全长为1 966bp,编码484个氨基酸,含有一个PWWP功能结构域及多个抗原表位.Ts88 cDNA是一个尚未见报道的旋毛虫抗原新基因.
作者：诸欣平；杨雅平；杨静；雷丽萍；Pascal Boireau 刊期： 2004年第01期
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种参与多种胃、十二指肠疾病的重要人类病原体,可引起慢性胃炎和消化性溃疡,并与胃癌密切相关,对人类健康构成严重危害.Hp在全世界人群中的慢性感染率达到50%以上,中国人群约有6亿人口受累于Hp感染,大大超过乙肝病毒携带者人数.Hp感染基本的条件之一是粘附定居,其定居因素包括动力、尿素酶和粘附素等.
作者：洪愉；邹全明 刊期： 2004年第01期
近年来国外报道了吸血昆虫的多种抗凝血新蛋白,部分已经纯化、测序并进行了克隆,其潜在的药用价值正在评估中.我们相信吸血昆虫抗凝血活性物质在不久的将来必将成为具潜力的抗凝血试剂和有潜力的新的溶血栓药物,用于治疗心脑血管疾病.本文对近年来吸血昆虫抗凝血活性物质的研究进展作一介绍,期望能起到抛砖引玉的作用,借此引起我国科研工作者的兴趣,开展具有我国自有知识产权的研究工作,同时对吸血昆虫唾液腺抗凝活性物质作用途径和作用机理的研究有助于了解吸血昆虫的吸血消化机理,对于寄生虫学研究也具有重要的理论和医学价值,不仅可以填补我国寄生虫研究领域的空白,开辟新研究方向,而且其继续研究具有深远和巨大的经济效益,可为潜在的抗凝血试剂来源及临床使用的抗血栓治疗药物研制和开发提供基础和依据.
作者：杨玉荣；王彦海 刊期： 2004年第01期
血吸虫为扁形动物门、裂体科的雌雄异体寄生虫.由血吸虫感染引起的血吸虫病是一种严重危害人畜健康的寄生虫病,为仅次于疟疾的第二重要热带病.该病在全球76个国家和地区流行,共约2亿患者,6亿人群受威胁.目前,在我国尚在108个县和57个县级农场流行,共有患者82万[1].每年为防治此病支出巨大,药物治疗不能控制再感染.种种因素表明迫切需要利用现代分子生物学技术开发高效的血吸虫病免疫预防苗.
作者：程国锋；林矫矫；蔡幼民 刊期： 2004年第01期
蚊虫吸食人血、传播疾病,疟疾、丝虫病、黄热病、登革热和流行性乙型脑炎等都由蚊虫传播,严重危害人类健康.长期以来,人们使用各种方法控制蚊虫,其中化学杀虫剂对蚊虫效果好、持续时间长,一直占主要地位,但长期使用后蚊虫可产生抗性,并造成环境污染.近年来,国内外研究者投入大量人力、物力从天然产物特别是从植物源的生物活性物质中寻找替代化学杀虫剂的物质,已发现有些植物体产生的次生代谢物在蚊虫防制中具有明显效果,并有对人畜安全、不易产生抗药性、在自然环境中易于降解等特点.研究防制蚊虫的植物源生物活性物质,并阐明其有效成分的化学结构、作用机理,是制造新型植物性蚊虫控制剂及仿生模拟合成新型杀虫剂的基础.本文系对用于防制害虫的植物源生物活性物质的种类以及对蚊虫的作用方式作一概述.
作者：杨频；马雅军；杜昱光；廉振民 刊期： 2004年第01期
霍乱毒素(CT)是霍乱弧菌产生的一种不耐热肠毒素,是霍乱弧菌引起腹泻的致病因子,CT具有很好的免疫原性,也是霍乱弧菌疫苗开发中考虑的一个重要候选抗原.另外,CT是很好的粘膜佐剂,在粘膜免疫研究中具有很重要的作用.本文将对CT的粘膜免疫诱导作用作一综述.
作者：史云；胡小华 刊期： 2004年第01期
单核细胞增生性李斯特氏菌(Lm)是人畜共患病病原体,致病性强,在世界范围内引发了多起严重的食物中毒.因而越来越引起重视.为了解食品Lm污染状况,于2001年5月对武汉市各集贸市场抽取了三类卤制品共80份作Lm污染调查.并对阳性株作药敏试验,发现食品污染严重且抗药性普遍,报告如下.
作者：熊燕；龙一兵；陈智；徐晓菊；齐小保；朱焰 刊期： 2004年第01期
炭疽是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患的传染病,同时,也是一种自然疫源性疾病,具有明显的地方性特点.自1956年将炭疽列入疫情报告以来,广西炭疽每年均有发生,从未间断,发病居全国第三、四位[1].本文就广西近12年来人间炭疽流行情况进行分析,仅供同行们参考.
作者：梁江明；林新勤；韦锦平；黄德蕙；王学燕；吴秀玲 刊期： 2004年第01期
2003年2月末,WHO将传染性非典型肺炎命名为严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS),4月16日WHO又确认新的冠状病毒是引起SARS流行的病原[1,2],从而加快了人们对SARS的认知.由于SARS病毒为新型变异病毒,实验室诊断较为困难,SARS的认证只能凭流行病学接触史,临床表现及疗效等综合判断[3].但是,在短时间内我国科技工作者建立起酶联免疫吸附试验(ELISA)等血清学检测方法,为病例诊断、流行病学调查、以及相关领域研究增添了手段.
作者：曹占良；陈礼明；靳颍；王世鑫；张之伦 刊期： 2004年第01期
肠出血性大肠杆菌O157∶H7是引起人类出血性肠炎的主要菌型,自1982年在美国首次被分离并确认为食物中毒新型致病菌以来,在世界范围内发生过多次暴发,并造成严重危害.尤其是1996年5～8月日本发生了由E.coli O157∶H7引起的人类历史上大规模的暴发流行,引起世界普遍关注.我们自1999年开始开展了大肠杆菌O157∶H7的监测,从猪、牛等动物中检出了O157∶H7及 O157∶NM两种类型的E.coli[1、2],2002年我们在监测过程中发现了5株产硫化氢的O157大肠杆菌.现将分离鉴定结果报告如下.
作者：陈前进；郭维植；曹春远；金建潮；张月花 刊期： 2004年第01期
2001年8月20日至10月26日,百色市某乡2个村5个自然屯出现原因不明的死牛7头,死马4匹,病死的牛马均被剥食或出售.自8月23日起,在其中4个自然屯中,参与剥牛马或接触病死畜肉的人群中出现散发性皮肤型炭疽病例,至11月2日止共16例.后经市、县、乡防疫、医疗部门及畜牧兽医部门共同处理,疫情很快被控制,病人全部治愈.该疫情影响较大,现将疫情发生后的临床处理报告如下:
作者：涂燕云 刊期： 2004年第01期
棘阿米巴角膜炎(Acanthamoeba keratitis,Ak)是由棘阿米巴属原虫感染引起的人体角膜炎症、溃疡,甚至导致失明的一种严重眼部疾患.1974年Nagingtong等[1]第一次报道了人类感染本虫的病例报告,以后有关本病感染人数在世界各国逐渐增多.目前,全球已证实的病例数超过1350例,我国陆续有30余例人体感染的病例报告[2-5],2001年9月和2002年7月我室收诊了2例角膜炎患者,经病原学检查,确诊为棘阿米巴感染,现将2例感染的临床资料及其流行病学分析报告如下.
作者：崔昱；郑莉莉；陶琳；陈红 刊期： 2004年第01期
疯鹿病在医学上称为慢性消耗病(chronic wasting disease,CWD),60年代美国北部首先发现以来,在鹿中间迅速蔓延,大约3000个农场的175000头鹿感染,是鹿的一种致命性疾病.美国有3人在小孩时曾吃过鹿肉和麋鹿肉,到30岁时患上了克雅氏病.食品和药品专家认为此例虽非确诊病例,但不能排除慢性消耗病害人的可能性.因为本病无特异临床症状,潜伏期很长,又不认识,故对本病流行真实情况尚不清楚.
作者：于恩庶；徐国英；林春芳 刊期： 2004年第01期
