目的 以SSR-PCR和常规PCR对浙江省和福建省5个不同地区并殖吸虫进行遗传变异检测,比较两者对并殖吸虫的基因水平分类的差异.方法 采用微卫星锚定PCR (SSR-PCR)对基因组DNA进行PCR扩增,扩增产物按Nei的方法计算遗传距离,并应用SPSS软件构建系统进化树；采用常规PCR扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚单位(C()I)及核糖体DNA第二间区(ITS2)的基因序列,测序后用BoiEdit软件分析同源性,用MEGA软件构建种系发生树.结果 不同地区并殖吸虫标本的SSR-PCR产物呈多态性,浙江金华、浙江永嘉、福建周宁与福建平和、福建政和的标本存在明显的差异.前两者的遗传距离近,为0.3333,浙江金华与福建平和的标本遗传距离远,为0.8667.常规PCR基因序列分析显示浙江金华、浙江永嘉、福建周宁的标本之间在种系发生树上比较接近,浙江金华和浙江永嘉的标本为接近.结论 利用SSR-PCR和常规PCR进行并殖吸虫的遗传变异分析结果基本一致.SSR-PCR是一种比常规PCR更方便的并殖吸虫遗传变异研究方法.
作者：单小云；楼宏强；胡野；楼景；屠平光；方萍 刊期： 2011年第11期
目的 制备并鉴定鼠源抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb).方法 重组Der fⅡ蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠免疫脾细胞与NS-1细胞融合.间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞.用筛选获得的单克隆细胞株诱生小鼠腹水,蛋白G亲和层析法纯化腹水抗体.利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型；通过间接ELISA、Western Blotting方法鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.结果 获得5株IgG2a型鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,效价良好.ELISA和Western Blotting分析表明该5株单抗均可识别重组Der fⅡ蛋白和天然粉尘螨提取物.结论 成功制备了5株鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der fⅡ的检测及纯化方法奠定了基础.
作者：刘晓宇；吉坤美；李荔；邹菊；刘志刚 刊期： 2011年第11期
目的 分析广东地区结核分枝杆菌利福布丁耐药株rpoB全基因序列突变特征.方法 常规比例法检出100株结核分枝杆菌利福布丁(rifabutin,RBU)耐药株,30株敏感株,扩增rpoB全基因序列并进行序列测定,Clustal×软件比对所测序列突变情况.结果 利福布丁敏感株rpoB基因无突变；利福布丁耐药株有24种突变类型,121个突变位点,其中106个在利福平耐药决定区(rifampin resistance determining region,RRDR)之内,15个在RRDR之外,包括3个是单点突变(V176F,P206R,H323Y)和12个联合突变；常见突变位点分别是531(70％)和526(20％)；两位点联合突变率21％,单点突变率79％.结论 广东结核分枝杆菌敏感株rpoB基因不发生突变,利福布丁耐药株rpoB基因突变率100％,常见突变位点分别是531和526.516、526和531之间不发生联合突变.RRDR之内鉴定出9种突变位点,RRDR之外鉴定出15个新突变位点,包括3个单点突变V176F,P206R和H323Y,位于rpoB基因起始端.
作者：胡族琼；谭耀驹；罗春明；蔡杏珊；赵雁林 刊期： 2011年第11期
目的 构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性.方法 以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(GST),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染Hela细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况.结果 重组质粒pEGFP-GST在Hela细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应.结论 肝片吸虫GST真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有生物学活性,可做为分子疫苗的候选进行进一步的研究.
作者：冉旭华；闻晓波；王春仁；刘娣；孙中武；李晓娟；王密 刊期： 2011年第11期
目的 建立快速检测棘球绦虫感染犬粪便的DNA检测方法一环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification.LAMP).方法 针对细粒棘球绦虫线粒体DNA Cox1基因6个位点特异性的设计4条LAMP引物,利用LAMP法和普通PCR方法同时检测棘球绦虫、肥胖带绦虫以及犬肠道内包括犬蛔虫和泡状带绦虫的DNA来验证LAMP方法的特异性；将转入Cox1基因片段的质粒作为标准阳性对照,并做系列10倍稀释同时用LAMP和PCR方法进行检测来比较两者的敏感性.此外,运用LAMP法检测13份犬粪DNA样本.LAMP扩增结果通过肉眼、电泳和酶切来鉴定.结果 以棘球绦虫DNA为模板的反应体系出现LAMP扩增反应产物,其它寄生虫和肥胖带绦虫没有出现LAMP扩增反应产物.LAMP检测Cox1基因的敏感性比普通PCR高出10倍,用于8只人工感染的犬检测结果均为阳性,而5只健康犬为阴性.结论 初步建立一种特异、敏感检测棘球绦虫感染犬的快速检测方法,不需要PCR仪、凝胶成像仪等昂贵的设备和电泳观察步骤,适于包虫病流行区和基层动物医院棘球绦虫感染犬的检测.
作者：陈璐；吾拉木·马木提；陈洁；古力帕丽·麦曼提依明 刊期： 2011年第11期
目的 对历年从江苏省不同地区分离的肠出血性大肠埃希菌O157(以下简称:O157)进行分型分析.方法 采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法对108株O157分子分型,比较不同地区、不同年份菌型差异.结果 根据EcoRV限制性酶切图谱可将菌株分成JS01-JS10十个不同的型别.主要菌型JS01占64.9％,JS02型与JS01型菌株酶切图谱相似度很高,JS03和JS04型菌株数目较少(12株),但近一半属于人源菌株.从时间方面看,1999年分离的菌型多；从地区方面看,铜山县分离到的菌株型别为多样化.结论 不同菌型之间的致病性存在差异,菌株与地理来源的关系密切.PCR-RFLP方法操作简便、重复性好,为O157的流行病学研究提供了一条全新途径.
作者：钱慧敏；朱叶飞；董晨；张平平；朱凤才 刊期： 2011年第11期
目的 运用实时定量PCR(Real-time PCR)检测结核分枝杆菌耐异烟肼菌株和敏感株Ag85B、38kDa及MPT64编码基因(fbpB、psts1、mpt64)的mRNA表达水平,探讨结核分枝杆菌耐异烟肼株和敏感株的蛋白抗原在转录水平的差异性.方法 根据GenBank提供的序列,设计目的基因fbpB、psts1、mpt64及内参基因Siga的特异引物,将fbpB、psts1、mpt64及Siga扩增片段克隆入载体pMD18-T simple,重组质粒经纯化及倍比稀释,应用SYBR GreenⅠ荧光染料建立检测fbpB、psts1、mpt64的实时定量PCR方法,并应用此方法检测22株耐异烟肼菌株及25株敏感菌株(含H37Rv标准株)中fbpB、psts1、mpt64的mRNA表达水平.结果耐异烟肼菌株的fbpB表达水平为0.65±0.22,敏感菌株的表达水平为0.36±0.13,两者有显著性差异(t=5.683,P＜0.01).耐异烟肼菌株的psts表达水平为13.63±4.16,敏感菌株的表达水平为9.86±2.79,两者差异有统计学意义(t=3.869,P＜0.01).耐异烟肼菌株的mpt64表达水平为5.89±3.22,敏感菌株的表达水平为7.67±4.52,差异无统计学意义(t=1.552,P＞0.05).结论 成功建立了fbpB、psts1、mpt64基因的实时定量检测方法,检测显示耐异烟肼菌株的fbpB、psts1基因的mRNA表达水平显著高于敏感菌株,可能为耐异烟肼MTB的实验室诊断提供分子标识.
作者：陈伟；李永祥；王远志；米利古；张辉；张娟；魏克娜；袁俐 刊期： 2011年第11期
目的 筛选与弓形虫微线体蛋白6羧基端(MIC6C)相互作用的蛋白.方法 以GST-MIC6C蛋白作为探针蛋白,利用GST pull-down技术,从弓形虫裂解液中筛选与其相互作用的蛋白,SDS-PAGE分析实验产物；将目标蛋白条带转印至PVDF膜,测蛋白序列,BLAST2在线对比搜索相似蛋白序列,初步确定目标蛋白.制备目标蛋白的抗体,Western blot分析GST pull-down实验产物.结果 GST pull-down实验筛选到的目标蛋白的序列与弓形虫醛缩酶的序列一致；制备了醛缩酶的多克隆抗体,目标蛋白条带能被该抗体特异地识别.结论 采用GST pull-down技术,初步筛选出与弓形虫MIC6C相互作用的蛋白为醛缩酶.
作者：郑斌；尹志奎；何蔼；詹希美 刊期： 2011年第11期
目的 利用新一代TaqMan MGB探针技术,建立特异敏感的实时荧光定量PCR方法,用于布鲁氏菌的快速检测.方法 针对布鲁氏菌基因组中16S rRNA序列设计特异性引物和探针,建立一套基于TaqMan MGB探针技术的实时荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、敏感性和稳定性,对2008- 2010年期间采集的773份动物样本中的布鲁氏菌进行检测,并与普通PCR方法进行比较分析.结果 建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法对布鲁氏菌的检测具有高度的特异性,对小肠结肠耶尔森菌、假结核耶尔森菌、肠炎沙门氏菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲菌、泰泽氏菌均无交叉反应.生成的标准曲线的相关系数为0.999,斜率为-3.301,TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR效率为100.872％.TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR能够准确地从布鲁氏菌阳性样本中检测到布鲁氏菌DNA,低能够检测到的布鲁氏菌数量为9.3拷贝,比常规PCR方法的灵敏度高100倍.对773份动物样本进行检测,结果TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR能检出53份布鲁氏菌阳性样本,而常规PCR只检出37份阳性.结果显示,TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法比常规PCR方法更敏感,能够直接从动物样本中检出布鲁氏菌DNA,检测时间仅为2h.结论 本研究首次建立了直接用于检测动物样本中布鲁氏菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,该技术适用于传染性病原体的快速检测与鉴定.
作者：高正琴；邢进；冯育芳；岳秉飞；贺争鸣 刊期： 2011年第11期
目的 本文主要探讨脂多糖(LPS)在致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17×L,Py17×L)感染早期的调节作用.方法 6～8 w、雌性DBA/2小鼠,随机分为实验组和对照组,经腹腔接种1×106 Py17XL寄生的红细胞.实验组于感染后d2静脉给予LPS(25 μg/只).动态观察两组小鼠的原虫血症水平,小鼠脾脏树突亚群及其表面TLR4和活化T细胞的表达水平.结果 (1)两组小鼠于感染后约d15均自愈,LPS处理组小鼠的原虫血症水平在感染后d5-8显著低于对照组；(2)与对照组相比,在感染后d3和d5,LPS处理组小鼠脾脏DCs亚群表达水平显著升高,在感染后d3,TLR4表达水平显著升高.在感染后d5,LPS处理组小鼠脾脏细胞培养初始活化T表达水平显著升高.结论在Py17×L感染早期,LPS可通过激活TLR4强化DC成熟进一步强化Th1免疫应答反应,降低原虫血症,这将为疫苗的开发提供新的靶点.
作者：李莹；刘军；潘艳艳；王各各；延娟；郑丽；冯辉；曹雅明 刊期： 2011年第11期
目的 构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum,Sj)童虫细胞后的表达情况.方法 采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stbl2感受态菌,获得重组腺病毒质粒后,经Pac Ⅰ酶切线性化后转染293A细胞,获得出重组腺病毒(AdHu5-SV40LT).将重组腺病毒感染Sj童虫细胞,采用RT-PCR和免疫组织化学检测SV40LT基因的表达情况.结果 重组腺病毒载体质粒可转染293A细胞并可在293A细胞内进行有效的复制；提取病毒DNA进行PCR检测证实含有SV40LT目的基因.以重组腺病毒能感染Sj童虫细胞,经RT-PCR和免疫组化检测有SV40LT基因在细胞中的表达.结论 成功包装了具有感染能力的含SV40LT基因的重组腺病毒,感染Sj童虫细胞后目的基因有表达,为进一步探索日本血吸虫细胞永生化提供了实验依据.
作者：刘碧源；曾庆仁；余平；杨胜辉；蔡力汀；周军；张顺科 刊期： 2011年第11期
目的 建立可靠的中华按蚊拟除虫菊酯击倒抗性的PCR检测方法.方法 基于课题组前期研究发现的拟除虫菊酯抗性中华按蚊钠离子通道蛋白(VGSC) L1014位点的突变机制,即TTG突变为TTT和TGT,设计特异AS-PCR引物,进行中华按蚊拟除虫菊酯杀虫剂抗性突变检测.结果 设计的AS-PCR引物和建立的反应体系可以分别扩增出现已发现的中华按蚊击倒抗性的TTG(T)杂合、TTT纯合、TG(T)G(T)杂合、TG(T)T杂合,PCR电泳图结果与测序图结果一致.结论成功建立中华按蚊击倒抗性突变的PCR检测方法,可用于现场中华按蚊的击倒抗性检测.
作者：武松；马尔健；刘茜；陆群；仰凤桃；洪结凤；叶苗青；俞俊峰 刊期： 2011年第11期
目的 构建速殖子期特异表达绿色荧光和缓殖子期特异表达红色荧光的转基因弓形虫.方法 利用速殖子期特异性表达的SAG1基因启动子启动绿色荧光蛋白(EGFP)基因,利用缓殖子期特异性表达的BAG1基因启动子启动红色荧光蛋白( RFP)基因,构建期特异性表达双荧光的质粒,通过电转化将质粒转化进弓形虫体内进行表达.结果 经过息疟定抗性筛选得到阳性重组子,经荧光观察观察到了在速殖子时期表达的绿色荧光虫体和经缓殖子诱导后表达红色荧光的缓殖子虫体；通过PCR检测也检测到了EGFP和RFP基因.结论 本试验成功构建表达期特异性双荧光蛋白的转基因弓形虫.
作者：张彦雷；张厚双；蔺智兵；周勇志；曹杰；周金林 刊期： 2011年第11期
目的 构建表达肝素结合血凝素与人IL12融合基因的重组耻垢分枝杆菌并对其进行鉴定.方法 通过RT-PCR从人淋巴细胞获得hIL12基因模板,采用PCR技术克隆hIL12的P40和P35两个亚基及结核分枝杆菌的HBHA基因,通过酶切鉴定及DNA测序证实连接的基因片段均正确后,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pSMT3-HBHA-hIL12,并用电穿孔法将重组质粒转到耻垢分枝杆菌中.分别用HBHA单克隆抗体和hIL12多克隆抗体检测HBHA和hIL12蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达,并测定重组耻垢分枝杆菌生长状态的改变.结果 重组耻垢分枝杆菌构建成功,通过HBHA单抗和hIL12多抗进行免疫荧光法检测证实HBHA和hIL12均有表达,并且重组的耻垢分枝杆菌的生长速度比正常组有较大的提高.结论 成功构建了表达结核分枝杆菌HBHA基因和人IL12的重组耻垢分枝杆菌,为构建一种结核病的候选疫苗提供了实验基础.
作者：赵勇；张海；赵善民；伍静；毛峰峰；郭晓雅；张彩勤；师长宏 刊期： 2011年第11期
目的 通过分析旋毛虫线粒体基因分子标记,研究我国旋毛虫地理株间的遗传变异与系统发生关系.方法 应用旋毛虫线粒体核糖体小亚基DNA(mitochondrial small subunit ribosomal DNA,mtSSU)和线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因(mitochondria cytochrome coxidase,COI)为分子标记,分别对我国7个旋毛虫地理株扩增后进行双向测序,利用DNAMAN软件将测序结果和GenBank中相应序列进行比对研究,并使用MEGA4.0程序包构建系统进化树.结果 PCR对7个旋毛虫地理株分别扩增出了649bp(mtSSU)和419bp(COI)的DNA片段,7个地理株的DNA片段与GenBank中T.spiralis的相应片段相比存在一定差异,其中mtSSU基因有4个变异位点(248、293、537和539位),而COI基因仅存在2个变异(273和382位),所有变异均为T-C或C-T的转换；进化树显示南阳株和云南株位于比较近的分枝,而西安株、广西株及西藏株亲缘关系较近.结论 我国7个旋毛虫地理株的遗传变异较小,亲缘关系较近.
作者：刘莉娜；崔晶；姜鹏；王蕾；李灵招；张玺；王中全 刊期： 2011年第11期
目的 探讨汉防己甲素( tetrandrine,TET)对氟康唑(fluconazole,FLC)抗白念珠菌生物膜是否有增效活性.方法 构建白念珠菌生物膜,参照微量稀释法,测定FLC单独及其联合TET对生物膜不同时期的小抑菌浓度( minimum inhibitory concentration,MIC)；生物膜重新悬浮后,测定FLC单独及其联合TET对不同浓度菌液的MIC.结果 FLC单独及其联合TET对白念珠菌生物膜初期(0 h)的MIC50值范围分别为0.25～64μg/mL和0.125～16 μg/mL(P=0.002)；早期(4 h)的MIC50值范围分别为8～256μg/mL和1～64 μg/mL(P=0.000)；中期(24 h)、成熟期(48 h)的MIC50值均＞1024 μg/mL.生物膜重新悬浮后,FLC单独及其联合TET对低浓度菌液(终浓度为1×103 CFU/mL)的MIC值范围分别为0.25～64μg/mL和0.125～16 μg/mL(P=0.003),高浓度菌液(终浓度为1×106 CFU/mL)的MIC值均＞64 μg/mL.结论 汉防已甲素在体外对氟康唑抗白念珠菌生物膜初期(0 h)、早期(4 h)有增效活性,对中期(24 h)、成熟期(48 h)无增效活性；汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌生物膜重新悬浮后的低浓度菌液(终浓度为1×103 CFU/mL)有增效活性,高浓度菌液(终浓度为1×106 CFU/mL)无增效活性.
作者：李水秀；刘朝红；张宏；张晓利；宋延君 刊期： 2011年第11期
目的 评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值.方法 从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,IPTG诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法评价其诊断价值并与本课题组制备的重组AgB8/1和AgB8/2进行比较.结果 酶切鉴定及测序分析表明,成功构建细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒,并在原核细胞用IPTG成功诱导目的蛋白表达.rAgB8/3检测囊型包虫病患者血清的敏感度为55.9％(66/118)；检测泡型包虫病患者血清阳性率为44.12％(15/34)；59份其它寄生虫病患者血清中除3份囊尾蚴病人血清阳性外,其他均为阴性；50份健康者血清全部为阴性,总特异度为87.4％(125/143).rAgB8/3检测的敏感度与rAgB8/1相当(P＞0.05)而低于rAgB8/2 (P＜0.05)；rAgB8/3检测的特异度与rAgB8/1和rAgB8/2均无统计学差异(P＞0.05).结论 成功构建新疆源细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒并在原核细胞表达,rAgB8/3检测囊型包虫病结果与rAgB8/1无统计学差异.
作者：高春花；崔刚；汪俊云；杨明涛；石锋；朱慧慧 刊期： 2011年第11期
弓形虫是世界范围分布的专性细胞内寄生原虫,可感染人类和所有温血动物的有核细胞.由于宿主的广泛性,弓形虫病已经成为一个全球性的、严重的公共卫生问题,不但危害人类健康,而且成为影响畜牧业发展的重要机会性病原体[1].钙离子(Ca2+)是细胞内重要的第二信使之一,在弓形虫入侵宿主细胞的信号转导中起着关键作用[2].
作者：陶青；赵俊龙 刊期： 2011年第11期
副结核病是由禽分枝杆菌副结核亚种(Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis,MAP)弓起的多种动物共患的慢性、肠道肉芽肿性传染病,也称John's病,呈世界性分布,在我国被列入二类动物疫病.调查表明,美国大约20％～40％的奶牛群感染MAP,常导致产奶量下降及体重减轻,每头感染牛每年的损失约$227[1].由于目前针对该病的疫苗存在干扰检疫等缺点,所以根除的好办法是尽早检出、隔离或淘汰病畜.
作者：徐凤宇；萎秀云；么乃全；钱爱东 刊期： 2011年第11期
弓形虫(Toxoplasma gondii)为专性细胞内寄生原虫,全球分布,能引起人兽共患寄生虫病,全世界的感染率为34％,大多数为隐性感染,孕妇感染常引起流产、畸胎、死胎,对于肿瘤患者或AIDS病人等免疫功能受损者,弓形虫是引起死亡的主要原因之一.此外,弓形虫病也给畜牧业生产造成严重的经济损失.迄今尚无治疗弓形虫病的特效药,因此研制安全有效的疫苗极为迫切.
作者：刘秀华；李英豪；苑文英；藏爱民；田因诗；余瑞欣；周雅静 刊期： 2011年第11期
弓形虫(Toxoplasma gondii)的微线体(microneme)散布于虫体前端棒状体周围,是一种具有分泌功能的细胞器,其分泌的微线体蛋白( microneme proteins MICs)与虫体对宿主细胞的识别和结合密切相关,在虫体入侵宿主细胞早期发挥重要作用[1].目前发现的微线体蛋白有15种以上,包括MIC1-MIC12、AMA1、SUB1、SUB2等[2],MIC3是其中重要的一种微线体蛋白.
作者：江涛 刊期： 2011年第11期
结核病(tuberculosis,TB)这种古老的慢性人兽共患病,4千多年前就已流行于全球,而且至今仍危胁着全球近1/3人口的健康[1].自1921年诞生且是当前唯一可行的卡介苗( Bacillus CalmetteGuérin,BCG),是至今接种人数多、使用范围广的疫苗之一,但该疫苗的免疫保护效果并不理想,对成年人保护率在0％～80％之间波动,临床主要采用的结核菌素皮试(tuberculin skin test,TST)检测方法敏感性为60％～84％也不尽人意,因此发展可替代的新型TB疫苗和有效的诊断方法一直是一项世界范围的课题.
作者：欧珍；陈祥；孟闯；焦新安 刊期： 2011年第11期
埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever,EHF)1976年首次发生于刚果民主共和国(前扎伊尔)埃博拉河流域,因其引起感染者全身出血症状,故命名为埃博拉出血热.EHF的病原是埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV),属于丝状病毒科(Filoviridae)丝状病毒属(Filovirus)成员,是非节段的单股负链RNA病毒.
作者：刘阳；马志永；史子学；王水明；王志亮；马玉堃 刊期： 2011年第11期
钩端螺旋体(Leptospira,简称钩体),属于螺旋体目螺旋体科钩端螺旋体属,分为两个种:双曲钩端螺旋体(Leptospira biflexa)和问号钩端螺旋体(Leptospira interrogans);前者为腐生性钩端螺旋体,通常对人和动物不致病;后者为寄生性、致病性钩端螺旋体,是引起人和动物钩端螺旋体病的病原体.钩端螺旋体病(Leptospirosis,简称钩体病),是由问号钩端螺旋体引起的一种人兽共患疾病,在世界范围广泛分布,尤其流行于热带及亚热带地区.
作者：杨会棉；蒋秀高 刊期： 2011年第11期
目的 分析重庆地区流行性乙型脑炎的临床特征.方法 运用回顾性调查研究的方法,收集2007-2010年重庆医科大学附属儿童医院住院的流行性乙型脑炎患儿资料,分析其临床特征.结果 303例患儿,男女比例2.03∶1,1～4岁115例,4～7岁103例,7～10岁43例,发病季节7-9月分别为77、207和19例.未接种疫苗与接种疫苗比为8.7∶1,发病地区分布35个区县.普通型180例,占59.4％；重型100例,占33.0％；极重型23例,占7.6％.临床表现发热303例(100％)、意识障碍252例(83.2％)、抽搐214例(70.6％)、呕吐137例(45.2％)及头痛112例(37.0％).血清与脑脊液乙脑抗体lgM阳性率分别为44.61％和79.21％,异常脑电图、头颅CT及头颅MRI分别占98.1％、53.0％和68.3％.47.2％病例在住院过程中出现并发症,出院时好转98.3％,5例死亡.结论 重庆市流行性乙型脑炎常见于7月、8月,均为农村地区且大多数无疫苗接种史,以普通型为主.临床表现主要有发热、抽搐及意识障碍,多伴有脑电图、头颅CT及头颅MRI异常,脑脊液乙脑抗体lgM阳性率高于血清,大多数病例预后良好.
作者：许丽娟；朱朝敏 刊期： 2011年第11期
目的 建立检测家畜戊型肝炎病毒(HEV)反转录套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)方法,并应用于广西地区家畜戊型肝炎感染调查.方法 参考GenBank上4种基因型HEV核苷酸序列,应用生物软件Oligo6.0在()RF2保守区设计两对简并引物,扩增目的片段为436bp,进行了特异性、敏感性和重复性试验,并对采自广西地区猪、牛和羊的肝粪样本进行HEV检测.结果 检测家畜粪便样本阳性率31.49％(285/905)；家畜肝脏样本阳性率18.01％ (49/272).结论 所建立的RT-nPCR方法适用于家畜肝粪样本HEV检测,临床检测应用表明广西家畜存在HEV感染.
作者：苏乾莲；李斌；赵武；秦毅斌；梁家幸；肖爱欢；段群棚；何颖；黄伟坚 刊期： 2011年第11期
目的 建立福建省戊型肝炎(戊肝)分月发病数预测预警的ARIMA时间序列模型.方法 利用SAS 9.0软件的PROC ARIMA综合软件包对《疾病监测信息报告管理系统》收集的福建省2004-2010年戊肝分月发病数序列进行ARI-MA模型的建模与分析.结果 福建省2004-2010年戊肝分月发病数序列含有以年为周期的季节效应,经12步差分后为平稳非白噪声序列,拟合的相对优模型为ARIMA(0,0,0)×(0,1,1)12.结论 拟合戊肝的相对优ARIMA模型进行预测和预警,具有实际应用价值.
作者：谢忠杭；欧剑鸣；张莹珍；黄文龙；王灵岚 刊期： 2011年第11期
目的 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompW的原核表达系统,确定其重组表达产物rOmpW免疫原性,了解甲型副伤寒杆菌临床菌株ompW基因携带率.方法 采用PCR和T-A克隆法从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中获得ompW基因克隆并构建其原核表达系统,重组蛋白纯化后用SDS-PAGE及Western-Blotting分析.采用PCR检测95株甲型副伤寒杆菌临床菌株ompW基因携带率.结果 与报道的相关序列比较,所克隆的ompW基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％.rOmpW免疫家兔可产生抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号.所有甲型副伤寒杆菌菌株均携带ompW基因.结论 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompW的原核表达系统,证明了ompW是存在于甲型副伤寒杆菌的序列保守、分布广泛的外膜蛋白基因,为进一步研究该蛋白作为多价甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原奠定基础.
作者：林飞飞；冯康乐；雷银蕉；戎春浩；盛思；阮萍 刊期： 2011年第11期
目的 分析河南省急性出血性结膜炎(AHC)的季节性分布规律,为制定防控策略和措施提供依据.方法 应用集中度和圆形分布法对河南省2010年AHC的季节性分布进行分析.结果 河南省2010年AHC季节性分布的M值为0.895,圆形分布平均角-α所对应的日期即斑疹伤寒集中发病高峰期为9月19日,发病高峰期的95％可信区间为9月17-21日,经平均角的Rayleigh' test,Z=1191.274,P＜0.001.结论 河南省AHC发病有很强的季节性,9月为流行高峰期.
作者：尤爱国；康锴；王海峰；陈豪敏；许汴利 刊期： 2011年第11期
目的 探讨布病病人血清IgG、IgM的水平及对诊断的临床意义.方法 对2 394例门诊就诊者,以RBPT和SAT (WS269-2007)结合临床症状诊断布病病人918例和非布病病人1 476例,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测IgG、IgM水平并比较分析其在诊断中的意义.结果 布病病人血清IgG、IgM高于非布病病人,对判断布病感染有一定意义.结论 血清IgM、IgG检测对布病早期(急性期)和亚急性期及慢性病人诊断有一定的参考价值.
作者：米景川；王丽；尉瑞平；塔娜；范蒙光；马志东 刊期： 2011年第11期
